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Suppression of aom/dss-induced colorectal cancer by scutellarin through downregulation of Wnt signaling pathway activity

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中国药理学与毒理学杂志 2021年第10期35卷 739-740页

作者： ZENG Sha ZHAO Hui CHEN Li SUN Qiang REN Shan LIU Mao-lun YANG Han TANG Shun LU Jin-jian XU Hai-bo State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources Department of PharmacologyChengdu University of Traditional Chinese MedicineChengdu 611137China Institute of Chinese Medical Sciences University of MacaoMacaoChina

OBJECTIVE To investigate the therapeutic effect of scutellarin on colitis-associated cancer(CAC)and its underlying mechanism based on Wnt/β-catenin signaling *** The mouse model of CAC was established by azomethane oxide(aom)and sodium dextran sulfate(dss),followed by scutellarin treatment,with recording the body weight,diarrhea and *** sacrificing the mice,the colorectal length and colorectal tumor were *** levels of pro-inflammatory factors TNF-αand IL-6 in mice′s sera were measured by the enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The colorectal lesions were appraised by hematoxylin and eosin(H&E)***β-catenin level in CAC tissues was probed by immunofluorescent *** apoptosis-related genes Bax and Bcl-2,and Wnt signaling pathway-related genesβ-catenin,GSK-3β,TCF4,c-Myc and cyclin D1 were detected by real-time quantitative RT-PCR(RT-qPCR).Finally,Western blotting analysis(WB)was employed to examine the expressions of the apoptosis and Wnt signaling pathway-related *** Scutellarin significantly improved aom/dss-caused weight loss,colorectal length shortening,and tumor growth in mice(P<0.01).Meanwhile,colorectal lesions could be substantially alleviated by *** results showed that the levels of pro-inflammatory factors TNF-αand IL-6 were drastically lessened(P<0.01).Scutellarin also sharply inhibited the nuclear translocation ofβ-catenin,as evidenced by the reduction in the nuclear level ofβ-catenin *** addition,scutellarin attenuated the mRNA expression of Wnt signaling pathway-relatedβ-catenin,TCF4,c-Myc and cyclin D1,whereas it heightened GSK-3βmRNA *** results were consolidated by WB analysis,which indicated that scutellarin could mitigate the protein levels of phospho-GSK-3β,β-catenin,TCF4,c-Myc and cyclin D1,with the increase in GSK-3βprotein in CAC ***,scutellarin could induce the apoptosis of CAC,demonstrated by enhanced expression of Bax and diminished ex

关键词： scutellarin colorectal cancer Wnt signaling pathway aom/dss

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丁酸钠对aom/dss炎症相关性结直肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响

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中华肿瘤防治杂志 2021年第18期28卷 1368-1377页

作者：刘华缓曹誉肖志鹏毛联智孙素霞南方医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系广东广州510515

目的探讨丁酸钠(NaB)对氧化偶氮甲烷(aom)/葡聚糖硫酸钠(dss)诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响。方法将40只6周龄C57BL/6J小鼠通过随机数字法分为对照组(Control)、造模组(Model)、低剂量(1.90 g/L)NaB干预造模组(L-... 详细信息

目的探讨丁酸钠(NaB)对氧化偶氮甲烷(aom)/葡聚糖硫酸钠(dss)诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响。方法将40只6周龄C57BL/6J小鼠通过随机数字法分为对照组(Control)、造模组(Model)、低剂量(1.90 g/L)NaB干预造模组(L-NaB)和高剂量(2.85 g/L)NaB干预造模组(H-NaB)。Model、L-NaB和H-NaB组一次性腹腔注射aom 10 mg/kg,饮用3%dss水溶液5 d,自由饮水16 d为1个周期,循环3个周期。Model组自由饮水期间,L-NaB和H-NaB组分别饮用不同浓度的NaB水溶液;112 d实验结束。收集小鼠粪便进行DNA提取及高通量菌群测序,收集小鼠结直肠并观察其长度和出血情况,记录肿瘤大小和数目,并对结直肠进行Ki-67染色。结果Control、Model、L-NaB和H-NaB组小鼠结直肠长度分别为(7.53±0.95)、(6.39±0.94)、(7.08±0.61)和(7.45±0.77)cm,F=3.227,P=0.037。与Control组相比,Model组小鼠结直肠长度下降,P=0.008;与Model组相比,H-NaB组小鼠结直肠长度增加,P=0.025。Model、L-NaB和H-NaB组肿瘤体积分别为(7.44±7.00)、3.29和(2.07±0.68)mm;。Ki-67染色结果表明,aom/dss促进结直肠组织增殖,NaB干预可以抑制结直肠组织增殖;Model组小鼠α多样性有下降趋势,NaB干预可一定程度恢复α多样性。主成分分析(PCA)结果表明,Model与Control组菌群组成相差最多,NaB干预与Control组接近。线性判别分析(LEfSe)结果显示,Control组显著差异物种为f;uribaculaceae和s;cateroides;ulgatus,L-NaB组为g;ordonibacter、g;achnoclostridium,H-NaB组为g;doribacter。在门水平,H-NaB改善aom/dss干预造成的拟杆菌门丰度降低,P=0.046;在属水平,H-NaB拟普雷沃菌属丰度相对Model组上调,P=0.007;并且aom/dss上调帕拉普氏菌属丰度,P=0.001;与Model组比,L-NaB和H-NaB降低帕拉普氏菌属丰度,P值分别为0.001和0.004。结论在aom/dss诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠模型中,NaB可改善aom/dss引起的肠道炎症,对结直肠细胞增殖有一定抑制作用,并影响肠道菌群多样性以及生物标志物和菌群构成。

关键词：丁酸钠炎症相关性结直肠癌肠道菌群短链脂肪酸 aom/dss

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薏苡附子败酱散联合电针治疗对aom/dss小鼠炎症相关性结直肠癌的防治作用及机制

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现代肿瘤医学 2023年第13期31卷 2405-2411页

作者：阎旻宇李冰融蒋君涛刘鹏袁龙耿子翔凌乐乐李赞隋华张必萌上海中医药大学上海201203 上海交通大学医学院附属第一人民医院针灸科上海200080 上海交通大学医学院附属第一人民医院泌尿外科上海200080 上海市第一人民医院嘉定分院医学实验中心上海201800

目的:探究薏苡附子败酱散(Yiyi Fuzi Baijiang San,YYFZBJS)联合电针(electroacupuncture,EA)对aom/dss模型小鼠炎症相关性结直肠癌(colitis-associated colorectal cancer,CAC)的防治作用及对结直肠癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达情况的影响。方法:建立aom/dss诱导的CAC小鼠模型,将40只小鼠随机分为模型组、针药结合组、薏苡附子败酱散组、电针组和阿司匹林组,于实验第2周开始干预治疗,治疗过程中记录各组小鼠一般情况,统计体质量变化、疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分及生存情况,于实验末比较各组小鼠结直肠长度、成瘤数量及肿瘤大小,通过HE染色观察结直肠组织及肿瘤组织的病理变化,免疫组织化学染色观察结直肠肿瘤Ki-67、PCNA、p-NF-κB、NF-κB、E-cadherin、ZO-1、Occludin、Vimentin和N-cadherin蛋白的表达。结果:与模型组相比,针药结合组小鼠体质量显著升高(Paom/dss模型小鼠的CAC发生发展有防治作用,其机制可能与下调NF-κB信号通路,减缓EMT进程有关。

关键词：炎症相关性结直肠癌上皮间质转化薏苡附子败酱散电针上巨虚穴天枢穴核转录因子-κB aom/dss

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桦褐孔菌多糖对aom/dss诱导的结肠炎相关结直肠癌模型小鼠的影响及其机制的初步探讨

桦褐孔菌多糖对AOM/DSS诱导的结肠炎相关结直肠癌模型小鼠的影响...

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作者：曲超延边大学

学位级别：硕士

背景:桦褐孔菌多糖(Inonotuas Obliquus Polysaccharide,IOP)是从桦褐孔菌中提取的具有多种生物学活性的多糖,目前研究报道,IOP具有抗多种肿瘤的生物学效应。结肠炎相关性结直肠癌(Colitis-associated colorectal cancer,CAC)属于结直... 详细信息

背景:桦褐孔菌多糖(Inonotuas Obliquus Polysaccharide,IOP)是从桦褐孔菌中提取的具有多种生物学活性的多糖,目前研究报道,IOP具有抗多种肿瘤的生物学效应。结肠炎相关性结直肠癌(Colitis-associated colorectal cancer,CAC)属于结直肠肿瘤中常见的一种,目前,已经从多学科、多方面得到了大量的支持证据证明结肠炎症是结直肠肿瘤发生的主要原因之一。NOD样蛋白受体3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)已经被证明与CAC发生发展有密切的关系,但是在CAC发展中的具体作用尚不明确。目的:明确IOP对CAC模型小鼠具有抗肿瘤的防治影响,并探究其作用机制是否与NLRP3炎症小体有关。方法:6-8周龄雄性Balb/C小鼠适应性饲养7天后,随机分为三组。采用aom和dss共同处理,构建CAC实验动物模型。第一组为正常对照组,提前10天,用0.9%无菌生理盐水0.3 mL/只隔天灌胃,10天后,单次腹腔注射与第二组aom平均体积相同的无菌生理盐水,提供新鲜饮用水直到实验结束。第二组为aom/dss+生理盐水模型组,简称模型组。提前10天,用0.9%无菌生理盐水0.3 mL灌胃,10天后,单次腹腔注射10 mg/kg的aom,7天后,将新鲜饮用水换成2.5%dss溶液饮用7天,继而换成新鲜饮用水饮用14天,此为一个循环。重复四个循环。第三组为aom/dss+IOP实验组,简称为IOP组。提前10天,用150mg/kg/0.3mL/只的IOP溶液隔天灌胃,直到实验结束。aom/dss建模方案同第二组。第102天处死将小鼠全部处死。实验期间,每隔7天为节点,计算分析体重变化率,并记录实验期间小鼠存活只数。解剖分离小鼠结肠组织,测量结肠长度,肿瘤个数、肿瘤较长径、肿瘤的负荷。采用HE染色法处理小鼠结肠组织,于显微镜下观察。采用IHC染色法处理小鼠结肠组织,检测NLRP3、Caspase-1蛋白、炎性细胞因子IL-18、IL-1β、COX-2的表达情况。采用RT-PCR法检测小鼠结肠组织NLRP3,Caspase-1、ASC、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA水平。采用WB方法检测小鼠结肠组织 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2 蛋白水平。数据采用GraphPad Prism7 软件进行统计学分析。结果:***影响aom/dss诱导的模型小鼠体重变化。在第45天,IOP组小鼠体重变化率均高于模型组(Paom/dss诱导的模型小鼠生存率。模型组生存率为41.67%,IOP组生存率为66.67%,明显高于模型组(Paom/dss诱导的模型小鼠的腺瘤的发生情况。模型组平均腺瘤数目为24±4个,平均体积在3.48±0.68 mm3,平均肿瘤负荷在59.09±4.13 mm;IOP组的平均腺瘤数目为14±3个(P<0.01),平均体积在1.50±0.46 mm3(P<0.01),平均肿瘤负荷在25.00±2.64 mm(P<0.01)。***病理结果显示,模型组切片中,结肠上皮细胞紊乱,黏液层消失,无隐窝结构,无杯状细胞,大量的炎性细胞浸润,腺体结构有筛状结构且腺体增厚,核浆比例增加,核染色深。IOP组中,肠黏膜结构较为完整,黏液层局部存在,隐窝结构局部消失,少量杯状细胞,有较少炎症细胞浸润。***染色结果显示,IOP组结肠组织与模型组相比,NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达均升高,炎症介质COX-2表达降低。***-PCR方法检测结肠组织中NLRP3炎症小体和相关细胞因子的表达,结果显示,与模型组的结肠组织相比,IOP组结肠组织的NLRP3(P<0.01)、ASC(P<0.05)、Caspase-1(P<0.01)、IL-18(P<0.01)、IL-1β(P<0.05)的 mRNA 表达均升高且具有统计学意义,炎症细胞因子IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.01)的mRNA表达均明显降低且具有统计学意义。***方法检测结肠组织中NLRP3炎症小体和相关炎症细胞因子的表达,结果显示,IOP 组的 NLRP3(P<0.01)、ASC(P<0.01)、Caspase-1(P<0.01)、IL-18(P<0.01)、IL-1β(P<0.05)等蛋白水平的表达明显高于模型组,炎性细胞因子IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.01)、COX-2(P<0.01

关键词：桦褐孔菌多糖 aom/dss 结肠炎相关性结直肠癌 NLRP3炎症小体炎性细胞因子

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黑根霉胞外多糖对aom/dss诱导的小鼠结肠癌的抑制作用

黑根霉胞外多糖对AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌的抑制作用

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作者：宋歌山东大学

学位级别：硕士

结肠炎相关结肠癌(Colitis Associated Cancer,CAC)是目前临床常见的结直肠癌的一种,手术结合化疗是治疗结肠癌的主要手段。然而,大多数化疗药物毒副作用大,肿瘤易产生耐受性。因此,寻找新型、疗效显著且毒副作用小的治疗结肠癌药物具... 详细信息

结肠炎相关结肠癌(Colitis Associated Cancer,CAC)是目前临床常见的结直肠癌的一种,手术结合化疗是治疗结肠癌的主要手段。然而,大多数化疗药物毒副作用大,肿瘤易产生耐受性。因此,寻找新型、疗效显著且毒副作用小的治疗结肠癌药物具有重要意义。黑根霉胞外多糖(Exopolysaccharides 1-1,EPS1-1)是从黑根霉发酵液中提取、纯化的一种多糖,分子量为9682Da,主要以→6)Glcp(1→方式连接。前期的研究表明,EPS1-1具有促进结肠癌HCT-116细胞的凋亡,抑制荷S180瘤和CT26瘤小鼠肿瘤生长,缓解慢性萎缩性胃炎的生物活性。本研究通过建立诱导性结肠癌小鼠模型,研究EPS1-1对结肠癌的作用。氧化偶氮甲烷(aom)与葡聚糖硫酸钠(dss)联用能够诱导结肠炎相关的结肠癌模型。模型组小鼠第3周时出现明显体重降低、竖毛、便血、反应迟缓等病理症状;小鼠成活率75.0%,于第13周成模后解剖发现模型组结肠缩短、胃组织膨大,结直肠得瘤率为100%,结肠瘤数为11.07±3.45,直径大于3mm的瘤占30.87%;结肠组织切片显示小鼠上皮腺体细胞增生,结构紊乱,隐窝和黏液层基本消失,核深染且核质比显著升高,炎性细胞浸润严重。与模型组相比,EPS1-1组小鼠推迟了 2周左右才出现较轻的病理症状,成活率提高了 35.7%,小鼠结肠长度和胃组织结构基本正常;结肠肿瘤数量降低55.4%,且肿瘤直径较小,大部分集中在2mm以下;结肠上皮细胞腺体结构较为完整,存有部分隐窝和黏液层,炎性细胞浸润明显减少。表明,EPS1-1显著抑制了 aom与dss诱导的结肠炎症相关性结肠癌的发生和发展。COX-2是一种合成前列腺素(PGs)的必需酶,常作为结肠癌早期指标。与空白组小鼠相比,COX-2在模型组结肠组织中呈弥漫性表达。Wnt信号通路在结肠癌发生发展过程中有举足轻重的作用。模型组Wnt信号通路关键蛋白β-catenin、CyclinD1和C-Myc的表达量显著上调,EPS1-1明显下调了 COX-2与Wnt信号通路三个关键蛋白的表达水平,达极显著差异。癌症的发生是一个复杂多变的过程,包括细胞恶性增殖和凋亡等生理过程的变化。Ki-67与PCNA常被用作结直肠癌细胞增殖的生物标志物,在模型组结肠组织中,Ki-67与PCNA的阳性细胞数量显著增加。TUNEL结果显示,模型组结肠癌凋亡细胞的数量较少,仅有2.03%;而EPS1-1组凋亡细胞数量为23.17%。EPS1-1显著上调了活化的Caspase-3蛋白(凋亡指标)的表达以及促凋亡基因P53与Bax的表达量,下调了抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平,表明EPS1-1可能是通过Wnt信号途径,抑制了结肠癌组织中细胞的增殖,并促进其凋亡。CD68与F4/80巨噬细胞在促炎细胞因子的刺激下激活,通过复杂的信号转导,促进结肠癌的发生。免疫组化检测发现,巨噬细胞表面标志物CD68与F4/80在模型组结肠肿瘤组织中大量浸润,但其阳性细胞数量在EPS1-1组小鼠结肠组织中明显下降。EPS1-1也抑制核转录因子NF-κB的表达,并降低小鼠血清中的炎性细胞因子的含量。此外,与模型组相比,EPS1-1组脾脏和胸腺指数显著提高,血液中白细胞和血小板的数目明显降低,红细胞与血红蛋白的数量增加。表明,EPS1-1降低了小鼠感染炎症的风险,提高小鼠免疫系统功能。综上所述,黑根霉胞外多糖EPS1-1可能通过抑制Wnt信号通路,减少结肠癌细胞增殖,促进结肠癌细胞凋亡,显著抑制结肠炎性结肠癌的发生和发展。

关键词：黑根霉胞外多糖结肠炎性结肠癌 aom/dss 细胞凋亡炎性因子

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TRIM26在aom/dss诱导的小鼠炎症性肠癌中的功能研究

TRIM26在AOM/DSS诱导的小鼠炎症性肠癌中的功能研究

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作者：程卫鹏厦门大学

学位级别：硕士

炎症性肠癌作为结直肠癌的亚型之一,其发生与炎症性肠病相关。TRIM26蛋白作为TRIM蛋白家族成员之一,有报道指出TRIM26在非小细胞肺癌、肝癌、甲状腺乳头状癌等癌症的发生发展过程中发挥抑癌作用,在膀胱癌的发生发展中发挥促癌作用。而TR... 详细信息

炎症性肠癌作为结直肠癌的亚型之一,其发生与炎症性肠病相关。TRIM26蛋白作为TRIM蛋白家族成员之一,有报道指出TRIM26在非小细胞肺癌、肝癌、甲状腺乳头状癌等癌症的发生发展过程中发挥抑癌作用,在膀胱癌的发生发展中发挥促癌作用。而TRIM26在炎症性肠癌中的作用尚未见报道。本课题通过建立疾病模型,研究TRIM26在炎症性肠癌中发挥的功能。本课题利用野生型小鼠,通过aom/dss构建炎症性肠癌模型。研究表明:在炎症性肠癌模型晚期TRIM26表达下调,说明TRIM26在炎症性肠癌中可能发挥着抑癌作用,并且此时肿瘤内部形成纤维结缔组织将瘤体分割成若干部分,说明瘤体发生了纤维化。体外通过划痕实验和克隆形成实验我们发现敲低鼠源肠癌细胞CMT93中的TRIM26能够促进其迁移但对增殖无影响。为了进一步研究TRIM26在炎症性肠癌中的作用,我们通过TRIM26基因敲除鼠重新构建上述动物模型,我们发现在模型组(aom/dss)中TRIM26敲除鼠体重降低程度及肠道缩短程度较野生型小鼠更明显,在此次造模过程中模型组中的野生型小鼠无死亡,而TRIM26基因敲除鼠的死亡率近50%。通过小鼠肠镜发现,TRIM26基因敲除鼠的瘤体明显较野生型小鼠大,说明敲除TRIM26促进了炎性肠癌的发生发展。目前学术界认为Wnt/β-catenin信号通路与结直肠癌的发生发展高度相关,通过qPCR检测相关基因的表达,我们发现模型组中TRIM26基因敲除鼠的Wnt1以及Wnt/β-catenin信号通路下游的CyclinD1、MMP9等表达升高;通过检测炎症因子IL-6、COX-2、TNF-α、TGF-β在模型组小鼠中的表达,我们发现TRIM26基因敲除鼠中IL-6和COX-2的表达明显高于野生型小鼠,说明敲除TRIM26可能通过影响Wnt/β-catenin信号通路及促进IL-6和COX-2等促炎因子的表达从而促进炎症性肠癌的发生发展。综上所述,本课题首次发现TRIM26在炎症性肠癌的发生发展中起抑癌作用,且TRIM26抑制肠癌细胞在体外的迁移,同时我们发现TRIM26可能通过Wnt/β-catenin信号通路和炎症因子的表达来影响炎症性肠癌的发生发展。

关键词： TRIM26 炎症性肠癌 aom/dss 结直肠癌

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根皮素对aom/dss诱导的溃疡性结肠炎相关性结肠癌防治作用研究

根皮素对AOM/DSS诱导的溃疡性结肠炎相关性结肠癌防治作用研究

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作者：徐香琴广州中医药大学

学位级别：硕士

目的结肠癌是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一,尽管与炎性肠病相关的结直肠癌仅占全部结直肠癌的1%-2%,但却是造成炎性肠病患者死亡的主要原因。结肠炎相关性结肠癌的发生经历了“炎症-不典型增生-癌症”的病理过程,因此控制结肠炎症的... 详细信息

目的结肠癌是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一,尽管与炎性肠病相关的结直肠癌仅占全部结直肠癌的1%-2%,但却是造成炎性肠病患者死亡的主要原因。结肠炎相关性结肠癌的发生经历了“炎症-不典型增生-癌症”的病理过程,因此控制结肠炎症的发生发展对于结肠癌的防治无疑是有利的。根皮素是中药甜茶中的有效活性成分,具有抗炎、抗肿瘤的药理作用。为进一步深入探讨根皮素抗结肠炎相关性结肠癌的作用机理,本研究以dss模型与aom/dss模型为切入点,探究炎性癌变演进过程中根皮素对STAT3信号通路关键分子及其靶分子蛋白的表达情况的影响,为根皮素的抗结肠炎相关性结肠癌研究提供实验依据。方法与结果本研究将从细胞实验和动物实验两个方面来探究根皮素对结肠炎相关性结肠癌的防治作用。1.体外细胞实验选用从药用植物中分离、纯化所得的6种天然化合物作用于结肠癌caco-2细胞,MTT法检测结果显示大黄酸、根皮素、3-OH根皮苷体外抗结肠癌活性明显,并呈一定的剂量依赖性。结合文献研究发现,根皮素抗炎、抗肿瘤活性明显,毒性小,且目前研究较少。故本研究选择根皮素作为进一步的实验研究对象。流式细胞术考察根皮素对caco-2细胞增殖、周期及凋亡的影响,结果显示根皮素可通过将caco-2细胞阻滞在细胞周期的S期来抑制结肠癌细胞增殖,诱导caco-2细胞凋亡。不同浓度根皮素处理 caco-2 细胞,western blot 法测 STAT3 信号通路中 IL-6、p-STAT3、Bcl-xl、IFN-γ蛋白的表达,结果显示根皮素可抑制IL-6、p-STAT3、Bcl-xl、IFN-γ蛋白的表达,促进Bax蛋白的表达(与阴性对照组相比Pdss诱导的Balb/c小鼠急性溃疡性结肠炎模型,观察根皮素对小鼠一般情况、DAI评分及HE组织病理学改变的影响;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TNF-α、IL-10水平变化;WesternBlot法对结肠组织中IL-6、p-STAT3、Bcl-xl、IFN-γ、Bax蛋白表达情况进行检测。实验结果表明根皮素可减轻小鼠结肠炎症程度,改善肠质量,降低TNF-α含量,升高IL-10含量(与模型组相比Pdss结肠炎小鼠后,可通过下调其结肠组织中IL-6、p-STAT3、Bcl-xl、IFN-γ蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达来抑制STAT3信号通路的活化(与模型组相比Paom/dss联合诱导的小鼠结肠炎相关性结肠癌模型,观察根皮素对小鼠的一般行为、结肠组织的一般形态学、肠质量指数及HE组织病理学改变的影响;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-10水平变化;Western Blot法对结肠组织中IL-6、p-STAT3、Bcl-xl、IFN-γ、Bax蛋白表达情况进行检测。结果显示,根皮素给药组小鼠结肠赘生物较模型组明显变小,且数量减少;肠质量指数较模型组增大。根皮素可降低TNF-α含量、升高IL-10含量来抑制小鼠结肠肿瘤增生(Paom/dss结肠炎相关性结肠癌小鼠后,可通过下调其结肠组织中IL-6、p-STAT3、Bcl-xl、IFN-Y蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达来抑制STAT3信号通路的活化(P<0.05,P<0.01)。结论根皮素对结肠癌caco-2细胞增殖、结肠炎症以及结肠肿瘤组织均有明显的抑制作用,并促进caco-2细胞凋亡,阻止结肠炎症持续损伤导致的结肠癌变发生。其发挥抗结肠炎相关性结肠癌作用的有效途径很可能是通过抑制STAT3这一信号通路的活化,从而减轻小鼠结肠炎症损伤程度,抑制“炎症-不典型增生-癌症”的病理演变进程,促进肿瘤细胞的凋亡,进而发挥其对结肠炎相关性结肠癌的防治作用。

关键词：根皮素 aom/dss 凋亡结肠炎相关性结肠癌 STAT3

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亮菌多糖对aom/dss炎症相关性结肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响

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现代肿瘤医学 2024年第12期32卷 2161-2170页

作者：刘利叶映泉桂仲旋张爽爽张泉张梅安徽医科大学第一附属医院中西医结合肿瘤科安徽合肥230000 安徽医科大学中西医结合肿瘤中心安徽合肥230000 安徽中医药大学研究生院安徽合肥230000

目的:探讨亮菌多糖对氧化偶氮甲烷(aom)/葡聚糖硫酸钠(dss)诱导的炎症相关性结肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响。方法:将18只6~8周龄小鼠通过随机数字法分为对照组(Control)、模型组(Model),亮菌多糖干预组(ATPS60 mg/kg)。Model和ATPS... 详细信息

目的:探讨亮菌多糖对氧化偶氮甲烷(aom)/葡聚糖硫酸钠(dss)诱导的炎症相关性结肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响。方法:将18只6~8周龄小鼠通过随机数字法分为对照组(Control)、模型组(Model),亮菌多糖干预组(ATPS60 mg/kg)。Model和ATPS组一次性腹腔注射aom 10 mg/kg,对照组注射等量生理盐水,Model和ATPS组以饮用1.8%dss水溶液5 d,普通水14 d为个一周期,进行三个循环周期。对照组全程饮用普通饮用水。Model组饮用自由水期间ATPS组小鼠每天进行灌胃处理;71天实验结束。收集小鼠结肠并观察其长度和出血情况,记录肿瘤大小和数目,并对结直肠进行HE和Ki-67染色。Elisa检测Control、Model和ATPS组arrb1、IL-10和TNF-α的表达情况。蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测各组arrb1蛋白表达情况。同时,采集小鼠粪便,进行DNA提取和菌群测序。结果:aom/dss处理后小鼠体重明显下降,与Control组相比Model组小鼠结肠长度缩短明显,P=0.002。ATPS干预一定程度上可以抑制小鼠结肠长度的缩短,P=0.046,差别具有统计学意义。病理组织结果显示,对照组小鼠结肠隐窝形态结构正常,排列整齐,均匀分布。模型组小鼠结肠隐窝结构破坏明显,腺体结构扭曲变形,细胞核深染增大,结肠肿瘤形成。ATPS组可见结肠隐窝基本排列整齐,腺体扭曲变形有所改善,未见核大深染的异性细胞,提示ATPS存在抑制炎癌转化的药理作用。同时,Ki-67染色结果显示ATPS能够抑制结肠细胞异常增殖。Elisa和WB结果显示:Model组较Control组相比arrb1和TNF-α水平升高,IL-10水平降低。经过ATPS治疗后arrb1与TNF-α水平明显下降,IL-10水平表达升高。表明ATPS能够通过干预arrb1的表达治疗结肠炎相关性结肠癌。16S rDNA基因测序发现三组微生物区系丰富度和多样性存在显著差异。Control组、Model组和ATPS组共有的物种数量为69个,Model组特有的物种数量为11个,ATPS组特有的物种数量为6个。小鼠在经过aom/dss处理后普雷沃菌科_UCG-001菌属较对照组明显增多。ATPS组较Model组拟普雷沃菌属增加明显。结果发现普雷沃菌科_UCG-001是接受亮菌多糖的小鼠中最丰富的属,在小鼠炎癌转化发展过程中明显减少,表明该属的有益作用。结论:亮菌多糖能够通过调节arrb1和恢复aom/dss造成的Alpha多样性指数和群落构成变化,治疗慢性非可控性结肠炎,抑制慢性结肠炎炎癌转化。

关键词：亮菌多糖炎症相关性结肠癌肠道菌群 aom/dss

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射干提取物对aom/dss小鼠炎性反应相关性肠癌的干预作用及机制

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实用中医内科杂志 2022年第6期36卷 116-118,I0011,I0015页

作者：陈贺董晓茜崔明昊葛兴森范英兰武晓琳慕杨娜秦文艳辽宁省中医药研究院辽宁沈阳110034 中华人民共和国沈阳海关辽宁沈阳110179 辽宁中医药大学辽宁沈阳110032 中国医科大学辽宁沈阳110122

目的探讨射干提取物对aom/dss小鼠炎性反应相关性肠癌的干预作用和可能机制。方法以aom/dss制备小鼠炎性反应相关性肠癌模型,观察射干提取物对小鼠的一般情况,进行疾病活动指数(DAI)评分;检测小鼠血清中IL6和STAT3含量变化;进行结直肠... 详细信息

目的探讨射干提取物对aom/dss小鼠炎性反应相关性肠癌的干预作用和可能机制。方法以aom/dss制备小鼠炎性反应相关性肠癌模型,观察射干提取物对小鼠的一般情况,进行疾病活动指数(DAI)评分;检测小鼠血清中IL6和STAT3含量变化;进行结直肠段病理组织学评分,考察射干提取物对该模型的干预作用。结果造模后各组小鼠分别出现了腹泻、便血、脱肛、消瘦等表现;各dss循环后模型组DAI评分均升高(P<0.01),第三循环后高剂量组能明显降低造模后小鼠的DAI评分(P<0.05);高剂量组肿瘤缩小;中、高剂量组小鼠腺体排列较模型组规则,炎性细胞浸润程度减轻;模型组与空白对照组比较,病理组织学评分分值明显增高(P<0.01),可见明显的炎性反应和肉芽组织;高剂量组评分值较模型组降低(P<0.05);低、中、高剂量组均可明显降低小鼠血清中IL6蛋白水平(P<0.05,P<0.01);中、高剂量组均可明显降低小鼠血清中STAT3蛋白水平(P<0.05,P<0.01)。结论高剂量组可抑制炎性反应相关性肠癌进展,其作用机制可能与抑制IL6/STAT3信号通路有关。

关键词： aom/dss 炎性反应相关性肠癌射干提取物 IL6 STAT3

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射干提取物对aom/dss诱导小鼠炎症相关性肠癌模型中MAPK及PI3K的影响

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实用中医内科杂志 2023年第1期37卷 29-31,157页

作者：葛兴森甘雨陈贺李国信张宏秦文艳辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属第二医院辽宁沈阳110034 中国医科大学辽宁沈阳110122

目的探讨射干提取物对aom/dss诱导小鼠炎症性相关肠癌模型中MAPK及PI3K的影响。方法选用SPF级6~8周龄雄性C57BL/6小鼠120只,通过氧化偶氮甲烷(aom,12.5 mg/kg)联合葡聚糖硫酸钠(dss,2.5%),化学诱导法建立炎症性相关肠癌模型,灌胃给予射... 详细信息

目的探讨射干提取物对aom/dss诱导小鼠炎症性相关肠癌模型中MAPK及PI3K的影响。方法选用SPF级6~8周龄雄性C57BL/6小鼠120只,通过氧化偶氮甲烷(aom,12.5 mg/kg)联合葡聚糖硫酸钠(dss,2.5%),化学诱导法建立炎症性相关肠癌模型,灌胃给予射干提取物4个月后,眼眶取血法获得血液样本,Elisa方法检测小鼠血清丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)的含量。结果Elisa结果显示,与空白组比较,模型组MAPK值与PI3K值明显升高(Paom/dss模型小鼠血清中MAPK值及PI3K值。结论射干提取物可能通过降低aom/dss模型小鼠血清中MAPK和PI3K的含量,来抑制炎转癌的发生。

关键词：射干提取物 aom/dss 结直肠癌丝裂原活化蛋白激酶磷酸肌醇3激酶

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