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胎儿胸腺内CD80和CEA的表达及定位

胎儿胸腺内CD80和CEA的表达及定位

作者：曹阳郑州大学

学位级别：硕士

背景胸腺是T细胞发育最适宜的微环境。T细胞在胸腺内发育成熟需要经历严格的阳性选择和阴性选择。胸腺细胞的阴性选择不仅需要胸腺细胞的TCR信号，还需要胸腺细胞与抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC)表面结合提供第二信号(... 详细信息

背景胸腺是T细胞发育最适宜的微环境。T细胞在胸腺内发育成熟需要经历严格的阳性选择和阴性选择。胸腺细胞的阴性选择不仅需要胸腺细胞的TCR信号，还需要胸腺细胞与抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC)表面结合提供第二信号(自身肽-MHC分子)的共刺激分子。共刺激信号在阴性选择中发挥必要的作用。共刺激信号可以增强也可以终止免疫应答，即也具有免疫调整作用。已证实B7-1(CD80)与CD28是最基本的共刺激分子。胸腺内B7-1主要表达于树突状细胞(dendritic cell，DC)、巨噬细胞和某些网状上皮细胞(epithelioreticlar cells，ERC)上。依据分布和功能广义的胸腺上皮细胞可分为6型，其中包含有狭义的网状上皮细胞和树突状细胞(又名为交错突细胞)，皆可表达CD80。现今认为DC是功能最强大的抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC)，它呈递抗原的能力是巨噬细胞的100-1000倍。癌胚抗原(carinoembryonic antigen，CEA)是一种分子量约为180 kDa的糖蛋白分子，胚胎时期的正常表达分泌，对胚胎的发育、组织形成具有重要的作用。临床上，CEA已用于相关肿瘤的检测和治疗。关于胸腺细胞发育成熟的规律和胸腺基质细胞对其调节作用及分子机制研究等，多是以动物胸腺为研究对象。目前关于CDSO及CEA分子在胎儿胸腺的表达定位的研究国内外尚未见报道。本研究应用胎儿胸腺组织冰冻切片的HE染色、ANAE(α-naphthyl acidic esterase，α-萘酚酸性酯酶)组化染色、CD80和CEA免疫组化染色，并用Trizol法提取胎儿胸腺蛋白质，以Western blotting和ELISA技术分别对早期、晚期胎儿胸腺观察了早期、晚期胎儿的CD80和CEA免疫反应性(immunoreactivity，IR)的表达和分布情况。材料与方法 1．取孕妇自愿提供的意外怀孕、水囊引产的胎儿12例，包含早期胎儿胸腺3-4个月的4例(Ⅰ组)和晚期胎儿胸腺的5-8个月的8例(Ⅱ组)。 2．将标本等分为两份，一份制备冰冻组织切片，进行常规HE染色、ANAE组织化学染色、CDSO和CEA免疫组织化学染色，油镜下各观察其信号定位。 3．另一份标本以Trizol提取蛋白质进行Western blotting和CEA-ELISA检测，用Shimadu薄层层析扫描仪扫描CD80及β-actin条带的OD值，计算早期胎儿胸腺和晚期胎儿胸腺的CD80／β-actin的比值;用酶标仪检测两组胎儿胸腺CEA含量的OD值。 3．应用SPSS 10.0软件，进行ANOVA统计学分析，以α=0.05检测两组间差异显著性。结果 1 HE染色早期胎儿胸腺体积较小，皮质和髓质发育差，髓质网孔空隙较小。晚期胎儿胸腺体积较大，皮质和髓质逐渐发育，髓质的网孔空隙较大。晚期标本胸腺髓质内可见典型的哈氏小体(Hassall’s corpuscle)。 2 CD80免疫组化染色CDSO免疫反应性(immunoreactivity，IR)CD80-IR呈棕色细颗粒，广义的网状上皮细胞(epithelioreticfar cells，ERC)均呈CD80阳性反应。早期胎儿胸腺CD80-IR细胞不显著;晚期胎儿胸腺CD80-IR细胞明显增多，且髓质内显著多于皮质。ERC可分为6型：①Ⅰ型ERC：定位于皮质，网状上皮细胞呈扁平状，位于被膜和小梁的内面;②Ⅱ型ERC：分布于皮质内，细胞呈小星形，突起也很少;③Ⅲ型及Ⅳ型ERC：呈扁平状，定位于皮质髓质交界处;④Ⅴ型ERC：分布于髓质内，细胞呈大星形状，突起多且细长;⑤Ⅵ型ERC：位于髓质内哈氏小体。 3 ANAE染色已知ANAE组化染色可标记T淋巴细胞及其亚型。胸腺成熟T细胞可分为点样型(代表CD4)和散粒型(代表CD8)。点样型细胞内可见1-3个边界清楚的深红色小点。散粒型细胞内呈多数弥散小颗粒。早期胎儿胸腺标本ANAE标记细胞不明显;晚期胎儿胸腺髓质内ANAE染色的CD4或CD8细胞各呈丛状分布。胎儿胸腺髓质内哈氏小体及巨噬细胞ANAE染色呈强阳性的火焰型。 4．CEA免疫组化染色早期胎儿胸腺内CEA免疫反应阳性定位于髓质网状上皮细胞和哈氏小体。晚期胎儿胸腺髓质内CEA免疫反应阳性更强，多集中于哈氏小体。 5 Western Blotting早期胎儿胸腺CD80与β-actin的OD比值为0.66±0.09。晚期胎儿胸腺CD80与β-actin的OD比值为0.89±0.11。两组相比较，差异具有显者性，p＜0.05。 6．ELISA法检测CEA早期胎儿胸腺蛋白提取液中CEA含量的OD值为0.181±0.03，晚期胎儿胸腺蛋白提取液中CEA含量的OD值为0.302±0.04，两组相比较，差异具有显著性，p＜0.05。结论 1．晚期胎儿胸腺标本

关键词：胎儿胸腺 CD80 CEA ANAE 定位

增免散对鸡CD4~+T淋巴细胞CD8~+T淋巴细胞亚群浓度的影响

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中国兽医杂志 2008年第5期44卷 47-49页

作者：周帮会姜国均黄军刘荣欣黄会岭河北农业大学中兽医学院河北农业大学动物科技学院

T-淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞,多能干细胞中的部分淋巴细胞进入胸腺后,在胸腺素的诱导下,经过10～30 d的分化、增殖,成为成熟的T-淋巴细胞.成熟的T-淋巴细胞经血流分布至外周免疫器官,并反复经血液-组织-淋巴-血液,再循环周游全身... 详细信息

T-淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞,多能干细胞中的部分淋巴细胞进入胸腺后,在胸腺素的诱导下,经过10～30 d的分化、增殖,成为成熟的T-淋巴细胞.成熟的T-淋巴细胞经血流分布至外周免疫器官,并反复经血液-组织-淋巴-血液,再循环周游全身,以发挥淋巴细胞的免疫功能和免疫调节作用[1].一般认为,T-淋巴细胞的功能主要有以下几方面:产生细胞免疫作用或迟发型变态反应;使宿主对移植物或肿瘤产生排斥作用;溶解细胞和毒细胞的作用;增强或扩大免疫反应;帮助B-淋巴细胞产生抗体;抑制由于免疫作用增强而对机体产生的损伤等.因此,T-淋巴细胞数量的多少反映了机体免疫力的高低.

关键词：淋巴细胞亚群中药制剂雏鸡增免散 CD8 日龄 ANAE 胸腺发育

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不同剂量钼对小白鼠免疫指标的影响

不同剂量钼对小白鼠免疫指标的影响

Ⅰ型、Ⅱ型精神分裂症患者舌象脉象与单核细胞ANAE活性关系的研究

河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学...

作者：杨自军王婷冉林武刘凤军邱妍河南科技大学动物科技学院

通过对小白鼠日常饮水中加入不同剂量的钼(钼含量:100mg/L—2500mg/L),研究钼对其免疫器官及免疫功能的影响。结果表明:低剂量钼(100mg/L)组小白鼠机体和脾脏的重量、生长指数及外周血T淋巴细胞ANAE阳性率升高;高剂量钼(500 mg/L)和超... 详细信息

通过对小白鼠日常饮水中加入不同剂量的钼(钼含量:100mg/L—2500mg/L),研究钼对其免疫器官及免疫功能的影响。结果表明:低剂量钼(100mg/L)组小白鼠机体和脾脏的重量、生长指数及外周血T淋巴细胞ANAE阳性率升高;高剂量钼(500 mg/L)和超高剂量铝(2500 mg/L)组小白鼠脾脏重量及生长指数,外周血T淋巴细胞的ANAE阳性率低于对照组,6周后差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01),免疫功能下降,甚至死亡。

关键词：钼 ANAE 小白鼠免疫

来源： cnki会议评论

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中华临床医学杂志 2006年第1期7卷 44-45页

作者：曾丽苹梅桂森徐涛解放军261医院北京100094

目的探讨Ⅰ型、Ⅱ型精神分裂症患者中医舌象、脉象与血单核细胞酸性醋酸酯酶（ANAE）活性间的关系。方法采用阳性症状量表（SAPS）和阴性症状量表（SAVS）对100例精神分裂症患者进行Ⅰ型、Ⅱ型症状群分型，采用ANAE化学染色法对100例... 详细信息

目的探讨Ⅰ型、Ⅱ型精神分裂症患者中医舌象、脉象与血单核细胞酸性醋酸酯酶（ANAE）活性间的关系。方法采用阳性症状量表（SAPS）和阴性症状量表（SAVS）对100例精神分裂症患者进行Ⅰ型、Ⅱ型症状群分型，采用ANAE化学染色法对100例患者和60例对照者的外周血单核细胞进行镜检并结合舌象、脉象分析。结果 100例患者ANAE活性均高于对照组。其中69例行为紊乱、亢奋，舌象、脉象表现为实证的Ⅰ型患者，单核细胞ANAE活性反应呈强阳性；31例行为减少、情感平淡及舌象、脉象表现为虚症的Ⅱ型患者，ANAE活性反应呈阳性。结论提示ANAE可能是精神分裂症细胞免疫异常又一因子。

关键词：精神分裂症患者外周血单核细胞舌象脉象 ANAE 活性关系 Ⅰ型 Ⅱ型阳性症状量表阴性症状量表细胞免疫异常

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紫河车口服液的功效学研究

中国实用医药 2010年第34期5卷 114-115页

作者：邹梅赵生友孙兰隋自洁吉林省卫生监测检验中心 130021 吉林省职业病防治院

目的研究紫河车口服液的保健作用。方法采用酸性α-醋酸萘酯酶(Acid α-naphthyl acetate esterse,ANAE)染色法[1]连续给小鼠灌胃20d,,对小鼠外周血T淋巴细胞进行测定,并且称取小鼠体重和前列腺-贮精囊的重量。结果紫河车口服液在10.54... 详细信息

目的研究紫河车口服液的保健作用。方法采用酸性α-醋酸萘酯酶(Acid α-naphthyl acetate esterse,ANAE)染色法[1]连续给小鼠灌胃20d,,对小鼠外周血T淋巴细胞进行测定,并且称取小鼠体重和前列腺-贮精囊的重量。结果紫河车口服液在10.54、21.08g/kgBW一定剂量范围内,能显著增加小鼠外周血阳性T淋巴细胞的数目,并能明显地促进小鼠生长发育,有一定的雄激素样作用[2]。结论紫河车口服液可促进小鼠生长发育及增加雄激素样作用。

关键词：紫河车 ANAE T淋巴细胞雄激素样作用

咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及其免疫功能的实验研究

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实验与检验医学 2007年第6期25卷 561-562,592页

作者：刘春花黄越燕周志愉肖纯江西中医学院南昌3300061 浙江嘉兴医学院

目的探讨咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及其对免疫功能的影响。方法采用小鼠U14瘤模型,以咖啡酸锗尾静脉注射给药,观察抑瘤率,并测定小鼠胸腺指数和脾脏指数及外周血淋巴细胞酸性a-醋酸奈酯酶(ANAE)的阳性率。结果咖啡酸锗对小鼠U14瘤... 详细信息

目的探讨咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及其对免疫功能的影响。方法采用小鼠U14瘤模型,以咖啡酸锗尾静脉注射给药,观察抑瘤率,并测定小鼠胸腺指数和脾脏指数及外周血淋巴细胞酸性a-醋酸奈酯酶(ANAE)的阳性率。结果咖啡酸锗对小鼠U14瘤具有明显抑制作用,高、中、低剂量组抑瘤率分别为45.47%、57.86%、55.83%(PANAE染色标记T淋巴细胞,环磷酰胺组显著低于正常组及咖啡酸锗各剂量组(P<0.01);咖啡酸锗各剂量组较生理盐水组比较无明显差异。结论咖啡酸锗对小鼠U14瘤有明显的抑制作用而对免疫功能无明显影响。

关键词：咖啡酸锗 U14 抑瘤率 ANAE 免疫抑制

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不同强度微波辐射对小鼠免疫功能的影响

广西预防医学 2005年第3期11卷 129-132页

作者：张文辉孙侠韩长城牛玉杰张荣侯玉春河北医科大学公共卫生学院石家庄050017

目的探讨不同强度微波辐射对小鼠免疫功能的影响。方法取3周龄幼鼠,分别在微波频率2450MHz,功率密度1、5、15mW/cm2条件下,每天辐射1小时,连续全身辐射30天后,测定小鼠血清IgG浓度、T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)阳性率、腹腔巨噬... 详细信息

目的探讨不同强度微波辐射对小鼠免疫功能的影响。方法取3周龄幼鼠,分别在微波频率2450MHz,功率密度1、5、15mW/cm2条件下,每天辐射1小时,连续全身辐射30天后,测定小鼠血清IgG浓度、T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)阳性率、腹腔巨噬细胞吞噬能力、胸腺指数和脾脏指数。结果1、5mW/cm2组,IgG含量分别为29.45±0.30、31.66±1.49,显著高于对照组(27.16±1.78)(PANAE阳性率(44.81±1.44、39.91±0.15、30.54±1.52)比对照组(51.84±0.40)明显降低(P<0.01);1mW/cm2组巨噬细胞吞噬率(52.32±0.08)显著高于对照组(44.28±0.03)(P<0.05),而5、15mW/cm2(48.08±0.05、47.26±0.10)未见明显改变;除15mW/cm2组脾脏系数与对照组相比明显下降外,其余各组胸腺和脾脏指数均未见明显改变。结论微波辐射可以明显影响小鼠的特异性和非特异免疫功能,且这种影响可能呈现低强度刺激而高强度抑制的效应。

关键词：微波辐射不同强度小鼠酸性α-醋酸萘酯酶 2450MHz 非特异免疫功能腹腔巨噬细胞脾脏指数血清IgG T淋巴细胞 IgG含量对照组微波频率功率密度全身辐射吞噬能力胸腺指数 ANAE 0.05 脾脏系数阳性率吞噬率特异性

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高剂量钼对鸡免疫指标的作用

畜禽业 2007年第11期18卷 5-6页

作者：杨自军王婷温文彦冉林武白东英李玉发河南科技大学动物科技学院河南洛阳471003 河南省渑池县畜牧局

通过对鸡饲喂含钼饲料(钼含量:500mg/kg),研究高剂量对其免疫器官重量、生长指数、组织学变化及外周血T淋巴细胞的ANAE阳性率的影响。结果表明:试验组鸡脾脏充血、出血、萎缩;法氏囊肿胀、萎缩。3周后免疫器官的重量、生长指数、外周血... 详细信息

通过对鸡饲喂含钼饲料(钼含量:500mg/kg),研究高剂量对其免疫器官重量、生长指数、组织学变化及外周血T淋巴细胞的ANAE阳性率的影响。结果表明:试验组鸡脾脏充血、出血、萎缩;法氏囊肿胀、萎缩。3周后免疫器官的重量、生长指数、外周血T淋巴细胞的ANAE阳性率低于对照组,5周后差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。说明500mg/kg饲料的钼可以抑制鸡免疫器官的生长发育及外周血T淋巴细胞的活化,造成免疫器官的病理损伤,导致免疫功能下降。

关键词：钼 ANAE 鸡免疫

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格调生活

城色 2007年第2期 170-171页

哈利·波特中"赫敏"代言PRADA今年.小赫敏已经17岁了,哈利波特的小甜心已经长大成婷婷玉女。PRADA请这位乖女孩儿代言秋冬系列成衣,拍摄了一组大片。昔日小甜心,今日大明星,脱下霍格沃茨魔法学校的校服,换上了PRADA的高级时装,这个LOOK... 详细信息

哈利·波特中"赫敏"代言PRADA今年.小赫敏已经17岁了,哈利波特的小甜心已经长大成婷婷玉女。PRADA请这位乖女孩儿代言秋冬系列成衣,拍摄了一组大片。昔日小甜心,今日大明星,脱下霍格沃茨魔法学校的校服,换上了PRADA的高级时装,这个LOOK是不是让你惊艳昵?

关键词：魔法学校哈利·波特哈利波特沃茨森英惠 ARIS 绣法 ANAE 设计大赛贵州旅游