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酸枣仁汤通过激活ampk/sirt1/pgc-1α信号通路改善阿尔茨海默病模型小鼠线粒体功能障碍

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中国药理学通报 2023年第7期39卷 1256-1262页

作者：龙清华朱麒行麦合丽娅·艾斯卡尔鞠馨慧雷仕东王号天王平湖北民族大学医学部湖北恩施445000 湖北中医药大学老年医学研究所湖北武汉430065

目的以APP/PS1小鼠为阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)模型,通过ampk/sirt1/pgc-1α信号通路研究酸枣仁汤(SZRD)对AD线粒体功能障碍的作用和作用机制。方法将30只APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组、SZRD低剂量组(L-SZRD)、SZRD高... 详细信息

目的以APP/PS1小鼠为阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)模型,通过ampk/sirt1/pgc-1α信号通路研究酸枣仁汤(SZRD)对AD线粒体功能障碍的作用和作用机制。方法将30只APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组、SZRD低剂量组(L-SZRD)、SZRD高剂量组(H-SZRD),10只C57BL/6JNju小鼠设为对照组(WT)。Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力;硫黄素染色观察小鼠海马区老年斑;免疫组化检测小鼠海马区Aβ的表达;透射电镜观察小鼠海马区线粒体形态;试剂盒检测小鼠海马中ATP和ROS的含量;Western blot实验检测小鼠海马中ampk、p-ampk-ThrK172、sirt1、pgc-1α、NRF1、NRF2、TFAM的表达。结果与APP/PS1组比较,L-SZRD和H-SZRD能有效提高小鼠学习记忆能力,减少海马区老年斑和Aβ沉积,改善线粒体结构损伤,增加海马中ATP含量,减少海马中ROS表达,增加海马中p-ampk-ThrK172、sirt1、pgc-1α、NRF1、NRF2、TFAM的表达。结论 SZRD可改善AD小鼠认知损伤、老年斑沉积和线粒体功能障碍,其机制可能与激活ampk/sirt1/pgc-1α信号通路有关。

关键词：酸枣仁汤阿尔茨海默病 APP/PS1痴呆小鼠线粒体功能障碍 ampk/sirt1/pgc-1α信号通路机制

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基于ampk/sirt1/pgc-1α信号通路探讨疏肝和胃汤抑制氧化应激治疗非酒精性脂肪性肝病的临床观察及机制研究

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基于AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路探讨疏肝和胃汤抑制氧化应激治疗...

作者：周琳广西中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过临床观察研究,客观评价中药疏肝和胃汤治疗非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的临床疗效及安全性,并开展动物实验探讨可能作用机制,为临床治疗NAFLD提供新的理论基础。方法:1临床观察:将符合N... 详细信息

目的:本研究通过临床观察研究,客观评价中药疏肝和胃汤治疗非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的临床疗效及安全性,并开展动物实验探讨可能作用机制,为临床治疗NAFLD提供新的理论基础。方法:1临床观察:将符合NAFLD纳入标准的62例患者随机数字表法分为两组,中药组和西药组,每组各31例。中药治疗组予疏肝和胃汤(疏肝和胃汤由本院制剂室严格按照比例要求制成疏肝和胃口服液),每日2次,每次2支,西药组予维生素E软胶囊,每次100mg,每日3次,两组治疗周期均为12周。通过对比中药组、西药组治疗前、后NAFLD患者中医证候积分、血脂、肝功能、肝脏硬度、脂肪衰减度变化情况,客观评价疏肝和胃汤治疗NAFLD的临床疗效。2动物实验:取34将SPF级SD雄性大鼠,体重220±20g,随机分出6只作为空白组,予普通饲料喂养;剩余大鼠按照NAFLD模型制备,予高脂肪饲料喂养8周,第8周末取4只验证造模是否成功;模型成功后,随机将剩余24只高脂肪饲料组大鼠随机分为模型组,疏肝和胃汤低、中、高剂量组,各6只。疏肝和胃组分别以疏肝和胃汤低剂量、中剂量、高剂量灌胃,连续时间4周,至12周末处死大鼠采集血清及肝脏标本收集,运用全自动生化仪检测各组大鼠血清肝功能、血脂水平;肝脏组织病理切片染色,光学显微镜观察病理学形态;ELISA法检测各组大鼠血清中UCP2、SOD、MDA水平,Western Bolt检测ampk、sirt1、PCG-1α蛋白表达水平。结果:(1)临床试验:临床观察共纳入有效病例数60例,分别予疏肝和胃汤、维生素E软胶囊干预12周后,经统计分析、比较,两组患者治疗后的临床疗效、中医证候积分、肝功能、血脂、肝脏硬度及肝细胞脂肪衰减度指标均较治疗前明显改善(Pampk、sirt1、pgc-1α蛋白表达情况,模型组大鼠ampk、sirt1、pgc-1α蛋白表达较空白组明显下调(Pampk、sirt1、pgc-1α蛋白表达较模型组均有不同程度上调,疏肝和胃高剂量组上调最明显(Pampk/sirt1/pgc-1α信号通路激活,进而抑制氧化应激损伤及脂肪囤积有关。

关键词：疏肝和胃汤非酒精性脂肪性肝病 ampk/sirt1/pgc-1α信号通路氧化应激

田蓟苷通过激活ampk/sirt1/pgc-1α信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞铁死亡

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国际检验医学杂志 2023年第19期44卷 2349-2353页

作者：陈云胡立杰王婷婷郝明明衡水市第四人民医院综合儿科河北衡水053000 衡水市第四人民医院药剂科河北衡水053000 衡水市人民医院小儿内科河北衡水053000

目的探讨田蓟苷对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞铁死亡的影响及潜在机制。方法将培养的人肺泡上皮细胞BEAS-2B分为对照组(正常培养)、LPS组、田蓟苷低剂量组(20μmol/L)、田蓟苷中剂量组(50μmol/L)、田蓟苷高剂量组(100μmol/L)、Comp... 详细信息

目的探讨田蓟苷对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞铁死亡的影响及潜在机制。方法将培养的人肺泡上皮细胞BEAS-2B分为对照组(正常培养)、LPS组、田蓟苷低剂量组(20μmol/L)、田蓟苷中剂量组(50μmol/L)、田蓟苷高剂量组(100μmol/L)、Compound C(ComC)抑制剂组[100μmol/L田蓟苷+10μmol/L腺苷酸活化蛋白激酶(ampk)的抑制剂ComC]。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测BEAS-2B细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,分光光度法检测细胞内丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、Fe^(2+)水平;Western blotting法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、转铁蛋白(Tf)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及ampk/沉默信息调节因子2相关酶1(sirt1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(pgc-1α)信号通路蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组BEAS-2B细胞的A 490值、还原型GSH、GPX4、PCNA、磷酸化ampk(p-ampk)/ampk、sirt1、pgc-1α蛋白表达显著降低(Pampk/ampk、sirt1、pgc-1α蛋白表达显著升高(Pampk/ampk、sirt1、pgc-1α蛋白表达显著降低(Pampk/sirt1/pgc-1α信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞铁死亡。

关键词：田蓟苷急性肺损伤肺泡上皮细胞脂多糖铁死亡 ampk/sirt1/pgc-1α信号通路

白藜芦醇对肌纤维类型转化的影响及调控机制研究进展

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肉类研究 2024年第5期38卷 52-60页

作者：陈倩张静月刘昀阁左惠心梁荣蓉毛衍伟张一敏杨啸吟罗欣朱立贤山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018

白藜芦醇作为一种来自于葡萄和其他植物的天然多酚化合物,具有抗氧化、抗癌抗肿瘤、保护心血管等作用,一直是多领域的研究热点。骨骼肌主要由肌纤维构成,肌纤维类型和组成是影响肉品质的关键因素。近年来,越来越多研究开始关注白藜芦醇... 详细信息

白藜芦醇作为一种来自于葡萄和其他植物的天然多酚化合物,具有抗氧化、抗癌抗肿瘤、保护心血管等作用,一直是多领域的研究热点。骨骼肌主要由肌纤维构成,肌纤维类型和组成是影响肉品质的关键因素。近年来,越来越多研究开始关注白藜芦醇对于骨骼肌纤维类型的转化,同时其具体的调控机制和相关信号通路分子逐渐被确定。本文综合国内外的相关研究报道,总结白藜芦醇对骨骼肌肌纤维类型的影响,综述microRNA、ampk/sirt1/pgc-1α、脂联素及FoxO1信号通路在调控肌纤维类型转化方面的作用,以期为今后靶向调控肌纤维类型转化提供理论参考。

关键词：白藜芦醇肌纤维类型转化信号通路 ampk/sirt1/pgc-1α信号通路 FoxO1信号通路

两种荜茇生物碱对线粒体生物合成和胰岛素抵抗的影响

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两种荜茇生物碱对线粒体生物合成和胰岛素抵抗的影响

作者：王垣苹云南中医学院

学位级别：硕士

目的:本研究利用人肝癌细胞Hep G2和小鼠成肌细胞C2C12建立胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)细胞模型,观察荜茇生物碱成分胡椒碱(Piperine,PIP)和荜茇宁(Piperlonguminine,GBN)对IR的改善作用,同时研究了两种生物碱在不同IR细胞模型... 详细信息

目的:本研究利用人肝癌细胞Hep G2和小鼠成肌细胞C2C12建立胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)细胞模型,观察荜茇生物碱成分胡椒碱(Piperine,PIP)和荜茇宁(Piperlonguminine,GBN)对IR的改善作用,同时研究了两种生物碱在不同IR细胞模型上是否通过调节线粒体功能及线粒体生物合成信号通路发挥作用,以探索PIP、GBN改善糖脂代谢紊乱的作用及其可能的分子机制。方法:一、观察PIP、GBN对HepG2细胞IR模型糖、脂代谢紊乱的改善作用及对线粒体功能相关因子的调节作用。***模型制备:采用高糖培养液和10%脂肪乳建立HepG2细胞IR模型。2.药物分组:药物干预组分为PIP给药组(2.5μM、5μM、10μM)、GBN给药组(0.5μM、2μM、8μM),二甲双胍(Metformin,MET)为阳性对照组。3.检测指标:PIP、GBN分别作用6h、12h、24h、48h后,检测各组细胞的葡萄糖消耗量;收集药物作用24h的细胞,用甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Serum total cholesterol,TC)试剂盒检测各组细胞的TG、TC含量;荧光定量PCR方法检测线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数;Western Blotting法检测ampk、p-ampk、sirt1、pgc-1α的蛋白表达。二、观察PIP、GBN对C2C12细胞IR模型糖代谢紊乱的改善作用及对线粒体相关因子的调节作用。***模型制备:用棕榈酸建立C2C12细胞IR模型。2.药物分组:以MET为阳性对照组,PIP(5μM、10μM、20μM)、GBN(0.5μM、2μm、8μm)为给药组。3.检测指标:pip、gbn分别作用6h、12h、24h、48h,检测细胞的葡萄糖消耗量;荧光定量pcr方法检测线粒体dna拷贝数;westernblotting法检测ampk、p-ampk、sirt1、pgc-1α的蛋白表达。结果:***模型制备:hepg2细胞以高糖培养液与10%脂肪乳作用12h后及c2c12细胞以0.5μm棕榈酸作用16h后,两种细胞模型组的葡萄糖消耗量均低于正常组,ir模型制备成功。***2细胞检测指标:与模型组相比较,pip、gbn与met均能升高ir模型细胞的葡萄糖消耗量。随给药时间的延长,pip和gbn的降糖作用更加明显。但不同浓度药物作用相同的时间对糖消耗的改善效果差异较小,提示较低浓度的pip和gbn就可以发挥改善肝细胞糖代谢的作用。pip和gbn作用肝细胞24h可以剂量依赖性地降低细胞的tg、tc含量,呈现药物改善肝细胞的脂代谢紊乱作用。pip和gbn呈剂量依赖和时间依赖性升高肝细胞的mtdna拷贝数,提高了线粒体的功能。检测线粒体生物生成相关信号通路蛋白ampk、sirt1、pgc-1α的活性和表达,发现pip和gbn可以上调ampk活性蛋白和sirt1的蛋白表达,下调pgc-1α的蛋白表达。3.c2c12细胞检测指标:与模型组比较,pip、gbn与met均能升高ir细胞葡萄糖消耗量,表现出时间依赖性。不同浓度药物对糖消耗的改善效果差异较小,提示低浓度的pip、gbn就可以改善肌细胞的糖代谢紊乱。pip、gbn均可以剂量依赖和时间依赖性升高mtdna拷贝数,调节线粒体的功能。pip、gbn都可上调线粒体生物生成相关信号通路各因子ampk、sirt1、pgc-1α的活性或蛋白表达。结论:***、gbn和met一样,可以改善胰岛素抵抗肝细胞和肌细胞的糖脂代谢紊乱;增加mtdna拷贝数,改善线粒体功能。2.检测线粒体生物生成相关信号通路蛋白ampk、sirt1、pgc-1α的活性或表达,pip、gbn和met一样,均可以上调肝细胞ampk活性蛋白和sirt1的表达,因此我们认为pip和gbn通过调节ampk和sirt1改善了细胞的糖脂代谢和线粒体功能;但PIP和GBN下调了肝细胞pgc-1α的蛋白表达,我们认为pgc-1α在肝细胞中主要参与的是糖代谢,而线粒体的生物生成可能受到其他因子的调节,因此其表达受到PIP和GBN的下调。***、GBN和MET一样,在肌细胞上均可以上调ampk活性和sirt1、pgc-1α的蛋白表达,因此PIP和GBN在肌细胞上可能是通过调节线粒体的生物合成通路ampk/sirt1/pgc-1α而发挥改善胰岛素抵抗的作用。

关键词：胡椒碱荜茇宁胰岛素抵抗线粒体 ampk/sirt1/pgc-1α信号通路

丹七片对缺血性心脏病大鼠模型能量代谢的调节作用

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世界中医药 2021年第15期16卷 2322-2327页

作者：刘慧刘静刘聪党晶艺王海燕解放军空军军医大学第二附属医院心内科西安710032

目的:探讨丹七片对缺血性心脏病大鼠模型能量代谢的调节作用。方法:通过结扎左前降支冠状动脉建立缺血性心脏大鼠模型,将48只大鼠分为假手术组、模型组、丹七片组和曲美他嗪组,每组12只。丹七片组大鼠以500.0 mg/kg的剂量灌胃丹七片溶液... 详细信息

目的:探讨丹七片对缺血性心脏病大鼠模型能量代谢的调节作用。方法:通过结扎左前降支冠状动脉建立缺血性心脏大鼠模型,将48只大鼠分为假手术组、模型组、丹七片组和曲美他嗪组,每组12只。丹七片组大鼠以500.0 mg/kg的剂量灌胃丹七片溶液,曲美他嗪组大鼠以6.0 mg/kg的剂量灌胃曲美他嗪溶液,其他组大鼠灌胃生理盐水。治疗1个月后评价各组大鼠的心脏功能、心肌组织和细胞病理改变、心肌ATP水平及ampk/sirt1/pgc-1α信号通路及其下游分子表达水平。结果:超声心动图显示,与模型组比较,丹七片组大鼠的LVIDs和LVIDd分别减少了26.35%和20.73%,而EF和FS分别增加了31.61%和42.82%,差异有统计学意义(Ppgc-1α的阳性染色评分显著升高(Pampk、sirt1、pgc-1α、MFN1、MFN2和SOD2蛋白表达均显著升高(Pampk/sirt1/pgc-1α信号通路及其下游分子,改善能量代谢并还调节线粒体的生物合成,从而改善大鼠心脏功能并防止心肌损伤。

关键词：丹七片缺血性心脏病能量代谢线粒体心肌损伤三磷酸腺苷 ampk/sirt1/pgc-1α信号通路