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中国心血管病研究 2020年第8期18卷 719-723页

作者：王宇超刘岳恒谷天祥中国医科大学附属第一医院心脏外科辽宁省沈阳市110001

目的探讨心房颤动(房颤)患者心房肌组织中ampk/pgc-1α信号通路表达是否改变,探究该通路在房颤过程中的作用.方法选择2018年12月至2019年11月在我科行心脏手术的患者76例,根据术前24 h动态心电图及病史分为房颤组(41例)和窦性组(35例),... 详细信息

目的探讨心房颤动(房颤)患者心房肌组织中ampk/pgc-1α信号通路表达是否改变,探究该通路在房颤过程中的作用.方法选择2018年12月至2019年11月在我科行心脏手术的患者76例,根据术前24 h动态心电图及病史分为房颤组(41例)和窦性组(35例),术中切除左心耳组织留存.使用蛋白质印迹法(western blot,WB)检测心耳组织中ampk、pgc-1α、NRF1、TFAM的表达量水平.免疫组织化学染色定量左心耳组织TFAM水平.Logistic回归分析ampk、pgc-1α、NRF1、TFAM的表达水平与术后早期房颤之间的关系.结果WB结果显示,与窦性组相比,房颤组左心耳组织内的ampk、pgc-1α、NRF1、TFAM的表达明显降低(ampk:0.75±0.27比0.47±0.43;pgc-1α:0.55±0.10比0.35±0.10;NRF1:0.67±0.11比0.46±0.15;TFAM:0.88±0.19比0.58±0.30;P均ampk/pgc-1α信号通路参与了房颤过程,其表达在房颤心患者房内降低.TFAM为术后早期房颤的相关因素,低水平TFAM会增加术后发生房颤的风险.

关键词：心房颤动 ampk/pgc-1α通路线粒体生物合成生物标记物线粒体转录因子A

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基于ampk/pgc-1α信号通路探讨乌萸汤对初老小鼠卵母细胞的作用机制

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现代中西医结合杂志 2022年第12期31卷 1624-1629页

作者：付寒雪赵嘉静黄文玲北京中医药大学北京100029 北京中医药大学东方医院北京100078

目的基于磷酸腺苷活化蛋白激酶(ampk)/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(pgc-1α)信号通路探讨乌萸汤对初老小鼠卵母细胞的作用机制。方法采用雄性6周龄SD大鼠制备乌萸汤含药血清;采用未成熟卵体外培养技术,原代细胞培养6周龄... 详细信息

目的基于磷酸腺苷活化蛋白激酶(ampk)/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(pgc-1α)信号通路探讨乌萸汤对初老小鼠卵母细胞的作用机制。方法采用雄性6周龄SD大鼠制备乌萸汤含药血清;采用未成熟卵体外培养技术,原代细胞培养6周龄、24周龄小鼠卵母细胞后提取卵丘卵母细胞复合体(COC)。实验分为8组:对照组(6周龄小鼠COC培养于基础培养基)、初老组(24周龄小鼠COC培养于基础培养基)、初老+AICAR组(ampk激动剂AICAR预处理24周龄小鼠COC 2 h)、初老+Compound C组(ampk抑制剂Compound C预处理24周龄小鼠COC 2 h)、初老+乌萸汤含药血清组(24周龄小鼠COC培养于乌萸汤含药血清培养基)、初老+乌萸汤含药血清组+AICAR组(ampk激动剂AICAR预处理24周龄小鼠COC 2 h后培养于乌萸汤含药血清培养基)、初老+乌萸汤含药血清组+Compound C组(ampk抑制剂Compound C预处理24周龄小鼠COC 2 h后培养于乌萸汤含药血清培养基)、初老+山茱萸环烯醚萜苷类提取物组(24周龄小鼠COC培养于山茱萸环烯醚萜苷类提取物培养基)。采用PCR法及Western blot法检测各组卵母细胞中ampk/PCG-1α通路相关因子基因及蛋白表达情况。结果初老+AICAR组、初老+乌萸汤含药血清组卵母细胞中ampkα、pgc-1α、Nrf1基因相对表达量及ampkα、p-ampkα(Thr172)、pgc-1α、Nrf1蛋白相对表达量和初老+乌萸汤含药血清+AICAR组卵母细胞中ampkα、pgc-1α、Nrf1基因相对表达量及ampkα、p-ampkα(Thr172)、pgc-1α蛋白相对表达量均明显高于初老组(P均ampkα、pgc-1α、Nrf1、Nrf2基因相对表达量均明显低于初老组(P均ampkα、pgc-1α、Nrf1、Nrf2基因相对表达量及p-ampkα(Thr172)、pgc-1α、Nrf1蛋白相对表达量均明显低于初老+乌萸汤含药血清组(P均ampk/pgc-1α通路可通过线粒体能量代谢从而影响卵母细胞质量;乌萸汤可通过ampk/pgc-1α通路增强线粒体能量代谢及氧化应激状态,促进卵母细胞成熟,从而改善卵母细胞功能。

关键词： ampk/pgc-1α通路乌萸汤卵母细胞线粒体

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复方多维辅酶Q10泡腾片对力竭运动训练小鼠的抗疲劳作用及机制研究

复方多维辅酶Q10泡腾片对力竭运动训练小鼠的抗疲劳作用及机制研究

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作者：王泽星燕山大学

学位级别：硕士

目的:探究复方多维辅酶Q10泡腾片的急性毒性作用以及通过建立小鼠运动训练动物模型,阐述复方多维辅酶Q10泡腾片对小鼠的抗疲劳作用和分子机制,为复方多维辅酶Q10泡腾片用于防治运动性疲劳提供实验依据。方法:第一部分:复方多维辅酶Q10... 详细信息

目的:探究复方多维辅酶Q10泡腾片的急性毒性作用以及通过建立小鼠运动训练动物模型,阐述复方多维辅酶Q10泡腾片对小鼠的抗疲劳作用和分子机制,为复方多维辅酶Q10泡腾片用于防治运动性疲劳提供实验依据。方法:第一部分:复方多维辅酶Q10泡腾片急性毒性实验,10只KM小鼠,雌雄各半,用于预实验,随机分为三组,每组三只,采用10 mg/kg、100 mg/kg及1000mg/kg,按小鼠灌胃能允许的最大体积(0.4m L/10g),分别给小鼠灌胃,观察小鼠出现的症状并记录死亡数,连续观察14天。根据小鼠死亡的情况,改良简化剂量设计,选择正式试验剂量。选择体重为22±2g的KM小鼠10只/组,雌雄各半,经口灌胃给药,连续观察小鼠14天,记录小鼠的反应和死亡数,测定LD50,确定给药剂量。第二部分:复方多维辅酶Q10泡腾片抗运动疲劳实验,将60只KM小鼠随机分为5组,每组12只,即生理盐水空白(C组)、复方多维辅酶Q10泡腾片低剂量(L组)、复方多维辅酶Q10泡腾片中剂量(M组)、复方多维辅酶Q10泡腾片高剂量(H组)、肌酸对照组(P组),持续给药,每天给药一次,上午灌胃给药,下午负重游泳训练。负重游泳训练从第2周至第6周(第一周进行游泳适应性训练),每周训练6天,每次训练至小鼠力竭时停止负重由1%逐渐增加至体重的10%。每天测量体重,相应增减负荷。依次检测相关指标,观测负重游泳实验、爬杆实验、前肢握力实验以及转棒实验时间;在第40天处死并取材,通过化学比色法检测小鼠血清中LA、BUN、MDA、SOD,肝脏中的LG;采用HE染色法评价复方多维辅酶Q10泡腾片对小鼠腓肠肌组织的病理学影响;荧光定量PCR检测ampk、pgc-1α基因表达;Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白,ampk、P-ampk、pgc-1α蛋白表达水平。结果:(1)复方多维辅酶Q10泡腾片急性毒性实验后,通过小鼠死亡情况计算出LD50的值为137.824mg/kg,进而确定复方多维辅酶Q10泡腾片低、中、高给药剂量。(2)与C组相比,L组小鼠负重游泳时间显著提高,具有显著性差异(pampk m RNA、pgc-1αm RNA基因表达水平显著提高,具有显著性差异(pampk、p-ampk蛋白表达水平显著提高,具有显著性差异(pampk/pgc-1α以及Bcl-2/Bax通路相关蛋白、基因的表达而发挥抗疲劳作用。

关键词：复方多维辅酶Q10泡腾片运动性疲劳 ampk/pgc-1α通路

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人牙髓干细胞条件培养基通过ampk/pgc-1α途径改善氯化钴诱导的颏舌肌成肌细胞低氧损伤

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上海口腔医学 2020年第6期29卷 573-579页

作者：张维华於丽明韩欣欣潘杰邓佳佳朱露莹刘月华复旦大学附属口腔医院上海市口腔病防治院上海200001 复旦大学附属口腔医院口腔生物医学工程实验室上海200001 中南大学﹑湘雅口腔医学院中南大学湘雅口腔医院湖南长沙410000

目的:研究氯化钴(CoCl2)模拟的低氧对颏舌肌成肌细胞活性和氧化应激的影响,探讨人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)条件培养基(conditioned medium,CM)保护作用的机制与ampk/pgc-1α通路的关系。方法:分离、培养及鉴定h... 详细信息

目的:研究氯化钴(CoCl2)模拟的低氧对颏舌肌成肌细胞活性和氧化应激的影响,探讨人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)条件培养基(conditioned medium,CM)保护作用的机制与ampk/pgc-1α通路的关系。方法:分离、培养及鉴定hDPSCs,通过超滤浓缩法提取条件培养基;分离、培养小鼠颏舌肌成肌细胞,分为对照组、CM组、CoCl2组、CoCl2+CM组。采用CCK-8法检测颏舌肌成肌细胞的活性,分别使用DCFH-DA和MitoSOX Red评估细胞内和线粒体活性氧((reac)tive oxygen species,ROS)水平,实时定量PCR分析NRF-1、NRF-2线粒体相关基因的表达,Western印迹法检测pgc-1α、p-ampk、总ampk蛋白表达。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:颇舌肌成肌细胞经过200μmol/L CoCl2处理24 h后增殖显著下降(Pampk和pgc-1α蛋白的表达水平以及pgc-1α下游的线粒体效应物NRF-1、NRF-2的mRNA表达水平(Pampk/pgc-1α通路的调节有关。

关键词：人牙髓干细胞条件培养基颏舌肌低氧活性氧 ampk/pgc-1α通路

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