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用amos-pcr对布鲁氏菌种型鉴定的研究

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中国人兽共患病学报 2007年第7期23卷 683-686页

作者：钟旗范伟兴何倩倪黄瑛谷文喜吐尔洪新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐830000 中国动物卫生与流行病学中心新疆昌吉市动物防疫监督站

目的寻找一种快速诊断布鲁氏菌病的方法,并且用这种方法鉴别布鲁氏菌的种和部分型。方法根据布鲁氏菌IS711插入序列及相邻单染色体DNA种的不同,设计引物,建立amos-pcr方法,用于诊断布鲁氏菌病,并鉴定种。结果在检测的75份样品中,pcr检... 详细信息

目的寻找一种快速诊断布鲁氏菌病的方法,并且用这种方法鉴别布鲁氏菌的种和部分型。方法根据布鲁氏菌IS711插入序列及相邻单染色体DNA种的不同,设计引物,建立amos-pcr方法,用于诊断布鲁氏菌病,并鉴定种。结果在检测的75份样品中,pcr检出14份阳性;细菌分离与pcr诊断的符合率为50%;在SAT为阳性的情况下,pcr检出阳性率为41.18%;有1份样品分菌和SAT检测结果均为阴性,而pcr结果为阳性。结论amos-pcr是一种快速、简便、准确的布病诊断方法,并能鉴定布鲁氏菌的种,区分疫苗(S19)株和野毒株。

关键词：布鲁氏菌病 amos-pcr

amos-pcr在宁夏布鲁氏菌种型鉴定中的应用

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中国病原生物学杂志 2010年第9期5卷 652-654页

作者：马学平高建炜秦迎旭宋晓佳宁夏疾病预防控制中心宁夏银川750004

目的评价amos-pcr方法在布鲁氏菌种型鉴定中的实用性,为快速鉴定布鲁氏菌提供辅助方法。方法血培养法分离布鲁氏菌,用常规方法和amos-pcr对牛种104M疫苗株、羊种M5株和宁夏分离的5株布鲁氏菌进行种型鉴定。结果 5个分离菌株经amos-pcr... 详细信息

目的评价amos-pcr方法在布鲁氏菌种型鉴定中的实用性,为快速鉴定布鲁氏菌提供辅助方法。方法血培养法分离布鲁氏菌,用常规方法和amos-pcr对牛种104M疫苗株、羊种M5株和宁夏分离的5株布鲁氏菌进行种型鉴定。结果 5个分离菌株经amos-pcr均扩增出731和178 bp的特异性条带,鉴定为羊种布鲁氏菌。结论 amos-pcr在布鲁氏菌鉴定中具有特异、快速、准确等特点,适合作为一种辅助鉴定方法推广应用。

关键词： amos-pcr 布鲁氏菌种型鉴定宁夏,中国

2011—2019年重庆人间感染布鲁氏菌的amos-pcr检测的研究

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2022年第3期 237-239页

作者：赵波赵婷重庆市疾病预防控制中心微生物检测所重庆400042

鉴定2011-2019年重庆分离的布鲁氏菌,掌握重庆市感染人群的主要布鲁氏菌种型。方法:采用自2011-2019年重庆市分离的人间布鲁氏菌病的菌株,采用amos-pcr方法进行种型鉴定,并与传统生物特性鉴定方法进行比较。结果:从26株代表株中,有25... 详细信息

鉴定2011-2019年重庆分离的布鲁氏菌,掌握重庆市感染人群的主要布鲁氏菌种型。方法:采用自2011-2019年重庆市分离的人间布鲁氏菌病的菌株,采用amos-pcr方法进行种型鉴定,并与传统生物特性鉴定方法进行比较。结果:从26株代表株中,有25株菌amos -pcr 均扩增出178bp和731bp的特异性条带,鉴定为羊种布鲁氏菌。结论:2011-2019年重庆人群感染布鲁氏菌主要为羊种布鲁氏菌,amos-pcr可作为重庆市布鲁氏菌分离鉴定的方法推广使用。

关键词：布鲁氏菌 amos-pcr 聚合酶链反应

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一株中等毒力牛种布鲁氏菌的鉴定和毒力测定

中国农业科学 2014年第13期47卷 2652-2658页

作者：丁家波王芳杨宏军王楠朱良全顾进华张广川王海光赵鹏程君生毛开荣冯宇中国兽医药品监察所山东省农业科学院奶牛研究中心山东农业大学动物科技学院

【目的】对初步鉴定的牛种布鲁氏菌分离株(*** 343)进行全面的生物学特性检定,为深入研究布鲁氏菌病提供参考菌株。【方法】将*** 343划线培养及梯度稀释,使其形成单个菌落,观察菌落形态。挑取单个菌落进行革兰氏染色和柯氏染色,观察其... 详细信息

【目的】对初步鉴定的牛种布鲁氏菌分离株(*** 343)进行全面的生物学特性检定,为深入研究布鲁氏菌病提供参考菌株。【方法】将*** 343划线培养及梯度稀释,使其形成单个菌落,观察菌落形态。挑取单个菌落进行革兰氏染色和柯氏染色,观察其染色特点;分别接种1.5×106 CFU到含硫瑾(1﹕25 000)或含碱性复红(1﹕25 000)的TSA平板上,观察其生长状态;将接种有*** 343的TSA平板分别置于普通培养箱和CO2培养箱37℃培养72 h,观察其对CO2的依赖性;通过醋酸铅试纸条测定*** 343代谢过程中是否释放H2S。通过平板凝集试验测定布鲁氏菌单相特异性血清(牛种布鲁氏菌单因子血清A、羊种布鲁氏菌单因子血清M和布鲁氏菌粗糙型血清R)与*** 343抗原的反应性;利用布鲁氏菌amos-pcr种属分型等方法对*** 343进行了pcr种属特性鉴定;将*** 343免疫小鼠,分别测定其抗血清与光滑型和粗糙型抗原的反应性;通过小鼠和豚鼠感染试验,全面评价该分离株的毒力;分别以1×105 CFU感染6周龄Balb/c小鼠,测定*** 343在小鼠体内存活时间;以1×109 CFU感染Hartley豚鼠,2周后测定试验豚鼠每克脾脏含菌量;分别以10 000、1 000、100、25 CFU/只4种不同剂量感染豚鼠,初步测定分离株对豚鼠的最小感染量(MID),在此基础上,进一步以40、60和90 CFU/只测定MID。【结果】分离株*** 343为光滑型牛种布鲁氏菌,菌落逆光观察微带蓝绿色乳光;革兰氏染色为阴性,柯氏染色为红色,H2S试验阳性。该菌能在含硫瑾和碱性复红的培养基上生长,不依赖于CO2。*** 343抗原能与A因子血清呈明显凝集反应,免疫小鼠后能产生特异性抗体。以1×105 CFU感染6周龄Balb/c小鼠,可在小鼠体内存活29周;以1×109 CFU感染350—400 g雌性豚鼠,14 d后豚鼠每克脾脏含菌量2.4×105—1.2×106;以1×105 CFU感染豚鼠1个月后,所有试验豚鼠均能产生特异性光滑型抗体,试管凝集效价为320—1 280;*** 343对豚鼠的最小感染量约为40 CFU。【结论】鉴定了一株中等毒力牛种布鲁氏菌(*** 343),为深入研究布鲁氏菌病提供了参考菌株,丰富了布鲁氏菌菌种资源。

关键词：布鲁氏菌 amos-pcr 最小感染量毒力

2018年江苏省人感染布鲁氏菌分离株分子特征分析

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中国人兽共患病学报 2020年第7期36卷 555-560页

作者：谈忠鸣汪秀斌周伟忠董晨周璐洪捷钱慧敏胡建利鲍倡俊国家卫生健康委员会肠道病原微生物重点实验室/江苏省疾病预防控制中心南京210009 杭州市萧山区益农镇社区卫生服务中心杭州311200

目的掌握江苏省2018年人感染布鲁氏菌主要流行株的种型和基因型。方法运用普通pcr及amos多重pcr确认分离株的生物种型;采用多位点序列分型(Multilocus sequence analysis,MLSA)和多位点串联重复序列分析(Multiple-locus variable number... 详细信息

目的掌握江苏省2018年人感染布鲁氏菌主要流行株的种型和基因型。方法运用普通pcr及amos多重pcr确认分离株的生物种型;采用多位点序列分型(Multilocus sequence analysis,MLSA)和多位点串联重复序列分析(Multiple-locus variable number tandem repeat analysis,MLVA)鉴定基因型,并与国内外流行株进行聚类分析。结果2018年共分离到56株布鲁氏菌,MLSA分型显示一株菌为猪种布鲁氏菌ST(Sequence type)17型,其他均为羊种布鲁氏菌ST8型。MLVA将56株菌分为47个基因亚型(46个羊种,1个猪种),聚类显示羊种布鲁氏菌全部为“东地中海簇”。结论2018年江苏省人感染布病主要为“东地中海簇”的ST8型羊种布鲁氏菌,并首次发现一例人感染ST17型猪种布鲁氏菌。

关键词：布鲁氏菌病羊种布鲁氏菌猪种布鲁氏菌 amos-pcr 多位点序列分析多位点串联重复序列分析

Species and Biotype Analysis of Brucella Strains Isolated from Cattle and Sheep in Xinjiang

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Animal Husbandry and Feed Science 2016年第1期8卷 18-20,30页

作者： Yi Xinping Ma Xiaojing Ye Feng Li Hongbo Liu Liya Tuerhong Nuer Zhang Yang Ma Junjie Wang Lijian Zhong Qi Research Institute of Veterinary Medicine Xinjiang Academy of Animal SciencesUrumqi 830000China Research Institute of Animal Husbandry Xin-jiang Academy of Animal SciencesUrumqi 830000China

[ Objective] The paper aimed to understand the epidemiological characteristics of Brucella strains in Xinjiang and then provide an available integrated measure to prevent and control brucellosis. [ Method ] Eleven suspected Brucella strains were isolated by traditional methods, which were further identified by amos-pcr assay. Conventional biochemical tests were carried out to identify the biological subtype of sheep Brucella. [ Result] Nine strains were all B. meliten- s/s, and biological test indicated that all of them were B. melitensis biotype 3. [ Conclusion] B. melitensis biotype 3 was the predominant strain of Brucella in Xin- jiang, and amos-pcr assay could be applied safely and quickly as an assistant tool to detect Brucella. The results of molecular epidemiology laid a foundation for updating prevention and control strategy against brucellosis in Xinjiang.

关键词： Xinjiang Brucella amos-pcr Epidemiological characteristics Brucella melitensis biotype 3

2021年郴州市人间布鲁氏菌病流行特征及分离菌株种型鉴定

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中国感染控制杂志 2023年第4期22卷 463-467页

作者：谢群胡琳袁红霞刘卫曾汇文湘南学院公共卫生学院湖南郴州423000 郴州市第一人民医院检验医学中心湖南郴州423000 郴州市疾病预防控制中心急性传染病防治科湖南郴州423000

目的了解2021年湖南省郴州市布鲁氏菌病(简称布病)患者的流行病学特征及菌株种型,为科学防控布病提供依据。方法收集并分析2021年郴州市布病病例临床及流行病学资料,对分离菌株采用amos聚合酶链式反应(amos-pcr)方法进行种型鉴定。结果2... 详细信息

目的了解2021年湖南省郴州市布鲁氏菌病(简称布病)患者的流行病学特征及菌株种型,为科学防控布病提供依据。方法收集并分析2021年郴州市布病病例临床及流行病学资料,对分离菌株采用amos聚合酶链式反应(amos-pcr)方法进行种型鉴定。结果2021年郴州市共报告布病32例,发病率为0.68/10万,男性26例、女性6例,年龄为(51.13±13.33)岁。临武县(3.72/10万)、桂阳县(0.99/10万)、嘉禾县(0.87/10万)的发病率居前三位。病例报告主要集中在3—9月,共29例;发病年龄以中青年为主;布病患者临床表现以发热、多汗、乏力、腰腿痛为主。14例布病患者血培养分离布鲁氏菌,amos-pcr进行种型鉴定结果均为羊种。结论2021年郴州市人间布病发病时间集中在春夏季,男性多于女性,发病年龄以中青年为主,分离菌株主要为羊种,对与羊牛等接触后出现发热伴有腰腿关节痛的患者,应考虑布病的可能性。

关键词：布鲁氏菌病布鲁氏菌流行病学特征种型鉴定 amos-pcr

贵州省一起布鲁氏菌病聚集性疫情的病原学调查与分子流行病学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第7期17卷 802-806页

作者：谭勤琴王月刘英陶忠发杨幸贵马青胡勇李世军贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州省疾病预防控制中心

目的对2021年贵州省一起疑似布鲁氏菌病聚集性疫情开展病原学调查和分子流行病学分析。方法采用血培养法从疑似感染布鲁氏菌病的患者和病羊的血液分离布鲁氏菌,分别运用BCSP31-pcr和amos-pcr对疑似菌株进行布鲁氏菌属及种/型的鉴定,应... 详细信息

目的对2021年贵州省一起疑似布鲁氏菌病聚集性疫情开展病原学调查和分子流行病学分析。方法采用血培养法从疑似感染布鲁氏菌病的患者和病羊的血液分离布鲁氏菌,分别运用BCSP31-pcr和amos-pcr对疑似菌株进行布鲁氏菌属及种/型的鉴定,应用多位点可变数目串联重复序列(MLVA-16)分析技术对其进行分子分型,将MLVA分型结果与近年来贵州省及国内各地布鲁氏菌代表株进行聚类分析,了解菌株间的聚类关系。结果从16份疑似患者全血标本分离出5株疑似布鲁氏菌,从19份疑似病羊全血标分离出1株疑似布鲁氏菌,BCSP31-pcr将6株疑似菌均鉴定为布鲁氏菌属细菌,amos-pcr其均鉴定为羊种布鲁氏菌。MLVA-16分析显示6株疫情菌株被分为3种MLVA型,其中来自患者的分离株GZ-QN 1、GZ-QN 4及GZ-QN 6共享MLVA型1(1-5-3-13-2-2-3-2-4-20-8-7-4-3-4-6),来自1患者分离株GZ-QN 8与来自1病羊分离株株GZ-QN A691共享MLVA型2(1-5-3-13-2-2-3-2-4-20-8-8-4-3-6-6),来自1患者分离株GZ-QN 14为独立的MLVA型3(1-5-3-13-2-2-3-2-4-20-8-8-4-3-7-6)。基于MLVA-16分型数据聚类显示,引起贵州省本起疫情的布鲁氏菌与羊种生物3型菌株聚类较近,且与来自福建、新疆的布鲁氏菌聚在同一小分支。结论引起本起疫情病原体为的羊种布鲁氏菌且具有MLVA型别多样性,可能为与福建、新疆等地的羊种布鲁氏菌菌株具有关联的输入性感染引起的聚集性疫情。

关键词：布鲁氏菌病布鲁氏菌 amos-pcr MLVA 贵州省

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福建省布鲁氏菌分离株的分子生物学鉴定

中国人兽共患病学报 2009年第7期25卷 636-639页

作者：邓艳琴王加熊林代华陈亮王灵岚福建省疾病预防控制中心福州350001

目的利用分子生物学方法鉴定福建省布鲁氏菌分离株。方法对布鲁氏菌分离株进行amos-pcr和MLVA分型。结果3株福建省分离株经amos-pcr鉴定为羊种,与传统生物学分型一致;MLVA分型将其分为3个基因型,聚类分析鉴定为羊种。结论amos-pcr、MLV... 详细信息

目的利用分子生物学方法鉴定福建省布鲁氏菌分离株。方法对布鲁氏菌分离株进行amos-pcr和MLVA分型。结果3株福建省分离株经amos-pcr鉴定为羊种,与传统生物学分型一致;MLVA分型将其分为3个基因型,聚类分析鉴定为羊种。结论amos-pcr、MLVA分型可以作为我省布鲁氏菌分离株鉴定的辅助手段。

关键词：布鲁氏菌鉴定 amos-pcr MLVA