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口腔医学 2023年第1期43卷 39-45页

作者：高震侯瑞凯宋索成阮建平西安交通大学口腔医院陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室陕西西安710004 西安交通大学口腔医院预防保健中心第一门诊部陕西西安710004 西安交通大学金属强度国家重点实验室陕西西安710049 国家增材制造创新中心陕西西安710117 陕西省牙颌面疾病临床研究中心西安交通大学口腔医院口腔预防保健科陕西西安710004

目的观察钙对成釉细胞系alc细胞增殖、凋亡及细胞周期等生物学特性的影响。方法培养alc细胞系,在高糖DMEM培养基中配制0、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L CaCl2溶液,利用倒置显微镜检测在两种培养时间(24、48 h)下alc细胞形态是否改变。通过... 详细信息

目的观察钙对成釉细胞系alc细胞增殖、凋亡及细胞周期等生物学特性的影响。方法培养alc细胞系,在高糖DMEM培养基中配制0、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L CaCl2溶液,利用倒置显微镜检测在两种培养时间(24、48 h)下alc细胞形态是否改变。通过CCK-8法分析钙离子对alc细胞增殖的作用,运用Hoechst染色观察钙离子对alc细胞凋亡的影响;通过PI染色FCM法分析钙离子对alc细胞生长周期的干预。利用Western blot检测钙离子对alc细胞中周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D表达的调节。结果0 mmol/L CaCl2组,alc细胞形态呈卵圆或多边形,细胞间连接紧密呈铺路石样生长。其他不同浓度的钙干预24、48 h后,alc细胞形态未见明显变化;CCK-8法结果显示钙干预24、48 h后,随着钙浓度增加,alc细胞的存活率呈微弱降低趋势,但此趋势无统计学意义;Hoechst染色结果显示不同浓度的钙干预24、48 h后,alc细胞的凋亡数目随时间延长可见增加,但不同钙离子浓度组间差异并不显著;PI染色FCM检测显示随着钙离子浓度的升高,alc细胞的细胞周期中S期逐渐增加,G1期、G2期呈下降趋势;Western blot结果表明钙干预24、48 h后,alc细胞中的周期蛋白Cyclin A、Cyclin B表达呈下降趋势,Cyclin D表达呈上升趋势。结论在本研究条件下,钙对alc细胞增殖、凋亡未见明显影响,但改变了细胞周期。通过实验研究结果发现本实验中的钙离子浓度对成釉细胞无明显毒副作用,可用于进一步探讨钙对氟牙症治疗的可能机制及作用。

关键词： alc细胞钙增殖凋亡

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钙离子调控KLK4表达对成釉细胞生长的影响

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口腔疾病防治 2024年第10期32卷 746-755页

作者：刘晓静高美丽阮建平榆林市第一医院口腔科陕西榆林719000 西安交通大学生命科学与技术学院生物医学信息工程教育部重点实验室陕西西安710049 陕西省牙颌面疾病临床研究中心西安交通大学口腔医院口腔预防保健科陕西西安710004

目的探讨钙离子对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达及细胞生长的影响,为钙离子促进牙釉质正常矿化提供实验依据。方法采用不同浓度CaCl_(2)(0、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L)处理成釉细胞株alc(ameloblast-lineage cell)24 h... 详细信息

目的探讨钙离子对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达及细胞生长的影响,为钙离子促进牙釉质正常矿化提供实验依据。方法采用不同浓度CaCl_(2)(0、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L)处理成釉细胞株alc(ameloblast-lineage cell)24 h、48 h,q RT-PCR和Western blot检测KLK4 mRNA和蛋白表达水平;CCK-8检测细胞相对活力;流式细胞术、Hoechst 33342染色检测钙离子对细胞周期和细胞凋亡的影响;Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)的蛋白表达水平。结果与对照组(0 mmol/L CaCl_(2))相比,2.5、3.0、3.5 mmol/L CaCl_(2)处理细胞24 h后,KLK4 mRNA表达上升(P细胞24 h后,KLK4蛋白表达上升(P细胞48 h后,KLK4 mRNA和蛋白表达上升(Palc细胞24 h、48 h后,细胞活力增加(P细胞活力最高。Hoechst 33342染色结果显示,3.0、3.5 mmol/L CaCl_(2)促使alc细胞发生凋亡。流式细胞仪检测结果显示,与0、2.0、2.5、3.0 mmol/L CaCl_(2)组相比,3.5 mmol/L CaCl_(2)处理alc细胞24 h后,G2/M期细胞比例增加,细胞凋亡率上升(P细胞24 h后,与对照组相比,GRP78蛋白表达下降(P细胞48 h后,与对照组相比,GRP78蛋白表达下降(Palc细胞中KLK4表达上升、细胞活力增加,但较高浓度的钙离子可使alc细胞的G2/M期阻滞,诱发alc细胞凋亡,降低凋亡相关蛋白GRP78的表达。

关键词：成釉细胞 alc细胞钙离子激肽释放酶4 细胞生长细胞活力细胞周期细胞凋亡葡萄糖调节蛋白78

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