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微小RNA-1243对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖和迁移的作用及其机制

中华实验外科杂志 2018年第12期35卷 2232-2234页

作者：底旺冀宏李清怀河北医科大学第二医院甲状腺外科石家庄050000

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-1243过表达对人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖和迁移的生物学影响。方法利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测甲状腺乳头状癌2×105个TPC-1细胞不同转染组miR-1243的表达,水溶性甲臢化合物(MTS)... 详细信息

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-1243过表达对人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖和迁移的生物学影响。方法利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测甲状腺乳头状癌2×105个TPC-1细胞不同转染组miR-1243的表达,水溶性甲臢化合物(MTS)法检测2×10^4个细胞的增殖能力及迁移小室(Transwell)检测1×10^5对数生长期的TPC-1细胞的迁移能力。利用生物信息学软件预测miR-1243的靶基因。采用双荧光素酶报告基因验证miR-1243对靶基因的直接调控。结果空白对照和阴性对照组中miR-1243的表达量分别为0.97±0.31,1.208±0.40,显著低于miR-1243模拟物转染组932.84±52.34,差异有统计学意义(P=0.000);细胞转染48h后,空白对照及阴性对照组细胞相对存活率分别为4.82±0.10和4.91±0.09,显著高于miR-1243模拟物转染组4.41±0.06,细胞转染miR-1243的增殖能力被显著抑制(P=0.032)。miR-1243模拟物转染组迁移细胞数为15.5±6.5,均少于空白对照组33.5±9.5和阴性对照组31.75±10.75,差异均有统计学意义(P=0.016)。经过生物信息学网站miRanda和RNAhybrid共同分析,可见akt丝氨酸/苏氨酸激酶1(akt1)mRNA是miR-1243的潜在靶基因。双荧光素酶报告基因结果显示,与空载体组(98.97±9.96),突变组(85.02±11.04)及阴性对照模拟物组(97.38±10.29)比较,共转染miR-1243模拟物的野生型组荧光素酶活性显著下降(45.92±10.91)(P=0.005),证实miR-1243直接调控制akt1表达。结论过表达miR-1243可以抑制TPC-1细胞的增殖和迁移能力。miR-1243可能通过直接靶向akt1参与调控甲状腺乳头状癌的进展。

关键词：甲状腺乳头状癌微小RNA-1243 细胞增殖细胞迁移 akt丝氨酸/苏氨酸激酶1

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