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中国汉族冠心病人群abcg5/abcg8基因rs4299376多态性及脂质水平分析

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第二军医大学学报 2014年第5期35卷 509-514页

作者：胡鸣颖许丽敏王春明刘艳红关艳丽徐耕段世伟浙江大学医学院附属第二医院心血管科杭州310009 鄞州人民医院心血管科宁波315040 宁波大学医学院浙江省病理生理学技术研究重点实验室宁波315211

目的探究中国人群abcg5/abcg8基因rs4299376多态性与冠心病的相关性,并对一些相关脂质和脂蛋白水平进行研究,探究其与冠心病的关系。方法收集290例冠心病、198例非冠心病及331例健康正常人的血样,采用核酸自动提取仪提取基因组DNA,MassA... 详细信息

目的探究中国人群abcg5/abcg8基因rs4299376多态性与冠心病的相关性,并对一些相关脂质和脂蛋白水平进行研究,探究其与冠心病的关系。方法收集290例冠心病、198例非冠心病及331例健康正常人的血样,采用核酸自动提取仪提取基因组DNA,MassARRAY时间飞行质谱技术分析rs4299376基因型,并测定所有研究对象血脂水平,对比分析各组人群基因多态性及血脂水平差异。结果中国人群abcg5/abcg8基因rs4299376多态性在冠心病组与非冠心病组以及健康对照组之间的分布差异无统计学意义。在总体和男性患者中,脂质水平与冠心病没有相关性;但在女性患者中,冠心病患者三酰甘油(TG)及总胆固醇(TC)水平比非冠心病患者高,差异有统计学意义(TG:2.23±1.05 vs 1.84±1.03,P=0.01;TC:4.79±1.17 vs 4.36±1.03,P=0.01)。根据年龄进行分层分析,≥60岁人群中,冠心病患者高密度脂蛋白(HDL)水平比非冠心病患者低(1.09±0.23 vs 1.16±0.25,P=0.03)。结论中国人群abcg5/abcg8基因rs4299376多态性与冠心病可能关系不大;女性冠心病患者较非冠心病患者具有更高的TC和TG水平,60岁及以上的冠心病患者较非冠心病患者具有更低的HDL水平。

关键词：冠心病 ATP结合匣式转运子 abcg5 abcg8 植物固醇脂类 rs4299376

abcg5/G8基因缺失对高脂诱导SD大鼠肝脂肪变性的保护作用及其机制研究

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ABCG5/G8基因缺失对高脂诱导SD大鼠肝脂肪变性的保护作用及其机制...

作者：赖小芳南昌大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver,NAFLD)是全球最常见的慢性肝病之一。NAFLD呈渐进性发展,包括至少三个不同阶段—单纯性脂肪肝(simple fatty liver,SFL),非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)以及肝硬化。脂肪变性是指除脂肪细胞外的实质细胞内出现脂滴或脂滴明显增多的现象,重度肝脂肪变性称为脂肪肝(fatty liver,FL),进一步可引起炎症改变,肝肿大和肝功能异常。随着人们生活习惯以及摄入过量高脂高胆固醇饮食,非酒精性肝脂肪变性的发生率显著升高。abcg5和abcg8属于ATP结合盒(ATP binding cassette,ABC)转运蛋白家族的成员,在非病理状态下对肝肠胆固醇分泌排泄至关重要,是机体维持胆固醇稳态的的主要手段之一。已有文献报道肝组织中胆固醇类代谢异常,游离胆固醇增加与NAFLD的发生发展密切相关,但abcg5和abcg8对大鼠肝脏胆固醇代谢、NAFLD形成的具体作用和机制仍不清楚。本研究旨在探讨abcg5、abcg8在高脂诱导SD大鼠肝脂肪变性中的作用及其机制。实验方法:1.利用CRISPR/Cas9打靶技术制备全身性敲除abcg5和abcg8大鼠,PCR鉴定是否构建成功。2.将8周的野生型(WT)大鼠和abcg5/abcg8敲除(KO)大鼠分别为两组:(1)正常饮食(ND)组;(2)高脂饮食(HFD)组,喂养14周,观察各组大鼠的体重变化,采用TSE小动物代谢笼检测食物摄取量的差异。3.收取每只大鼠肝脏进行固定、石蜡切片和HE染色来观察脂肪的积累,并检测肝脏和血清的脂质含量。通过血清中转氨酶的水平分析肝功能。4.采用RT-PCR技术分析基因abcg5、abcg8、CYP7A1、CYP27A1、NPC1L1、CD36在mRNA水平上的表达情况;Western blot检测大鼠肝脏中胆固醇和脂肪酸合成、代谢相关蛋白的表达情况,如HMGCR、NPC1L1、CD36、SREBP1、ACC、FASN。结果:***5、abcg8在SD大鼠肝脏和小肠组织中高表达,在心脏、脾、肺、肾组织几乎没有表达。2.基因型鉴定和RT-PCR测定显示abcg5/G8 KO大鼠在肝脏和小肠中未检测到abcg5/G8的表达。3.高脂喂养14周后,abcg5/G8敲除显著缓解高脂喂养引起的体重增加和肝脏脂肪、胆固醇堆积,血清胆固醇含量亦明显降低;但两组的糖耐量(IPGTT)和转氨酶在正常范围;未见明显的炎性细胞浸润;提示大鼠的NAFLD病理改变处于肝脂肪变性期。4.高脂饮食下调肝、肠组织基因abcg5、abcg8的表达,明显抑制肝组织SREBP1、ACC、FASN的表达。abcg5/G8缺失明显增加肝组织CYP27A1表达,显著抑制高脂介导的肝组织HMGCR、NPC1L1、CD36表达。同时,abcg5/G8缺失明显抑制小肠NPC1L1、CD36的表达。结论:abcg5/G8敲除显著缓解高脂喂养引起的体重增加,明显减少高脂喂养介导的肝脏胆固醇、脂肪堆积。abcg5/G8缺失增加肝组织CYP27A1表达,显著抑制高脂介导的肝组织HMGCR、NPC1L1、CD36表达,从而减少肝组织胆固醇的合成与摄取,减少脂肪酸摄取,促进胆固醇的胆汁排泄。

关键词： abcg5 abcg8 高脂喂养肝脂肪变性

双蓣调脂汤对高胆固醇血症模型大鼠肝组织中HMGCR、abcg5及abcg8表达的影响

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中华中医药学刊 2020年第1期38卷 110-114,I0025页

作者：石晶晶李若绮鲁海菲于露张风霞山东中医药大学山东济南250355 山东中医药大学附属医院山东济南250011

目的探讨双蓣调脂汤治疗高胆固醇血症的可能作用机制。方法32只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、双蓣调脂汤组和辛伐他汀组,每组8只。除正常组给予普通饲料外,其余各组大鼠均给予高脂饲料喂养4周建立高胆固醇血症模型。双蓣调脂汤组... 详细信息

目的探讨双蓣调脂汤治疗高胆固醇血症的可能作用机制。方法32只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、双蓣调脂汤组和辛伐他汀组,每组8只。除正常组给予普通饲料外,其余各组大鼠均给予高脂饲料喂养4周建立高胆固醇血症模型。双蓣调脂汤组给予双蓣调脂汤7.8 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬液4 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,每组均连续灌胃4周或8周,HE染色法观察大鼠肝组织病理变化,测定各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并采用荧光定量PCR、Western Blot、免疫组化法检测肝组织中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、三磷酸腺苷结合盒G5(abcg5)和三磷酸腺苷结合盒G8(abcg8)mRNA或蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肝组织出现明显的脂肪变性,TC、TG及LDL-C水平均显著升高(Pabcg5和abcg8表达升高;与模型组比较,双蓣调脂汤组肝脏脂肪变性明显减轻,TC、TG及LDL-C均明显降低(P5),肝组织中HMGCR mRNA及蛋白水平显著降低(Pabcg5 mRNA和abcg8 mRNA及蛋白水平显著升高(Pabcg5和abcg8表达有关。

关键词：双蓣调脂汤高胆固醇血症胆固醇合成和排泄低密度脂蛋白胆固醇 HMGCR abcg5 abcg8

从NPC1L1、abcg5/G8的表达差异探讨胆囊胆固醇结石湿热证的分子生物学基础

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从NPC1L1、ABCG5/G8的表达差异探讨胆囊胆固醇结石湿热证的分子生...

作者：章小燕福建中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究采用高胆固醇致石饲料诱发CS(cholesterol stone,CS)小鼠模型,予龙胆泻肝汤进行干预,比较不同组别小鼠胆固醇、胆汁酸等浓度变化以及与胆固醇吸收密切相关的尼曼-匹克C1样蛋白1(Niemann-Pick type C1 Like 1,NPC1L1)、腺苷... 详细信息

目的:本研究采用高胆固醇致石饲料诱发CS(cholesterol stone,CS)小鼠模型,予龙胆泻肝汤进行干预,比较不同组别小鼠胆固醇、胆汁酸等浓度变化以及与胆固醇吸收密切相关的尼曼-匹克C1样蛋白1(Niemann-Pick type C1 Like 1,NPC1L1)、腺苷三磷酸结合盒转运蛋白G5/G8(ATP-binding cassette transportersG5/G8,abcg5/abcg8)的表达变化,从胆固醇代谢角度研究CS湿热证的分子生物学基础。方法:6周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠32只,随机分为空白组8只,造模组24只。采用高胆固醇致石饲料诱导法复制CS小鼠模型,在造模8周后,随机选取8只模型小鼠进行取材,观察胆囊结石模型是否成功。将成模小鼠随机分为模型组与龙胆泻肝汤组,龙胆泻肝汤组予龙胆泻肝汤干预,模型组与空白组予等体积生理盐水干预,分别干预4周。以空白组作为对照,观察各组小鼠的胆囊形态,用HE染色法观察各组小鼠的肝脏与小肠的组织形态;用ELISA法检测血清胆固醇(Total cholesterol,TC)与甘油三酯(Triglyceride,TG),胆汁胆固醇与胆汁酸(Total biliary acid,TBA)含量;分别用q-PCR法与Western blot法检测小鼠NPC1L1、abcg5/G8的mRNA与蛋白表达水平。结果:1.一般情况比较:造模期间模型组小鼠体质量增长速率较空白组快且体重显著性高于空白组(P0.05)。与模型组比较,龙胆泻肝汤组血清中TC与胆汁TC、TBA水平显著下降(P5)。4.胆固醇代谢相关基因mRNA表达:与空白组比较,肝组织中abcg5/G8与小肠组织中NPC1L1表达显著上升(Pabcg5/G8表达显著下降(Pabcg5与小肠组织中NPC1L1表达显著下降(Pabcg8下降明显(P5),而肝组织NPC1L1与小肠组织中abcg5/G8表达显著上升(P5.胆固醇代谢相关基因蛋白表达:与空白组比较,肝组织中abcg5表达显著上升(Pabcg8与小肠组织中NPC1L1表达明显上升(P5),而肝组织NPC1L1与小肠组织中abcg5/G8表达显著下降(Pabcg5下降显著(Pabcg8与小肠组织中NPC1L1表达下调,但下降不明显(P>0.05),而肝组织中NPC1L1与小肠组织中abcg5/G8表达上调,但上升不明显(P>0.05)。结论:1.胆囊胆固醇结石中肝组织的脂肪变与小肠粘膜结构的受损可能是湿热证发生的病理形态学改变。2.血脂水平紊乱、胆汁盐成分比例失调可能是湿热证发生的分子生物学基础之一。3.胆囊胆固醇结石中胆固醇代谢相关基因abcg5、abcg8、NPC1L1表达变化引起的胆固醇代谢异常是湿热证的分子生物学基础之一。

关键词：胆囊胆固醇结石 abcg5 abcg8 NPC1L1 湿热证

雌激素干预体外培养肝细胞对胆酸分泌及abcg5和abcg8表达的影响

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雌激素干预体外培养肝细胞对胆酸分泌及ABCG5和ABCG8表达的影响

作者：汤丽丽中南大学

学位级别：硕士

目的：研究雌二醇(E2)对体外培养人胎肝细胞株(L-02),胆汁酸分泌及三磷酸腺苷结合盒转运体G5(abcg5)和三磷酸腺苷结合盒转运体G8(abcg8)表达的影响。探讨雌激素对abcg5和(?)abcg8表达的影响在妊娠期肝内胆汁淤积症中的作用。方法：应用... 详细信息

目的：研究雌二醇(E2)对体外培养人胎肝细胞株(L-02),胆汁酸分泌及三磷酸腺苷结合盒转运体G5(abcg5)和三磷酸腺苷结合盒转运体G8(abcg8)表达的影响。探讨雌激素对abcg5和(?)abcg8表达的影响在妊娠期肝内胆汁淤积症中的作用。方法：应用雌激素作用于体外培养的人胎肝细胞,用ELISA法检测不同浓度雌激素与肝细胞培养不同时间后培养基上清液中胆汁酸(TBA)的含量,并应用Real-Time PCR测定肝细胞abcg5mRNA和abcg8mRNA表达量。结果：1.对照组与体外肝细胞培养8h、24h后,TBA分泌水平分别为(5.92±0.65)、(6.25±0.21)umol/L;肝细胞abcg5mRNA表达量分别为(1.76±0.08)、(1.78±0.24);肝细胞abcg8mRNA表达量分别为(1.73±0.46)、(1.79±0.06)。TBA水平、肝细胞abcg5mRNA(?)口abcg8mRNA表达量,8h与24h比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2.雌激素浓度为10nmol/L与体外肝细胞培养8h、24h后,TBA分泌水平分别为(5.89±0.82)、(6.18±0.13) umol/L;abcg5mRNA表达量分别为(1.77±0.56)、(1.72±0.3);abcg8mRNA表达量分别为(1.73±0.32)、(1.76±0.21)。随着雌激素作用时间的延长,TBA水平、肝细胞abcg5mRNA和abcg8mRNA表达量,差异均无统计学意义(P>0.05)。3.雌激素浓度为100nmol/L与体外肝细胞培养8h、24h后TBA分泌水平分别为(5.72±0.58)、(5.78±0.45)umol/L;abcg5mRNA表达量分别为(1.69±0.27)、(1.58±0.32);abcg8mRNA表达量分别为(1.66±0.44)、(1.44±0.15)。随着雌激素作用时间的延长,TBA水平有升高趋势,而肝细胞abcg5mRNA和(?)abcg8mRNA表达量有降低趋势,差异均有统计学意义(P5)。4.雌激素浓度为500nmol/L与体外肝细胞培养8h、24h后TBA分泌水平分别为(5.32±0.39)、(5.49±0.09)umol/L;肝细胞abcg5mRNA表达量分别为(1.36±0.56)、(1.33±0.07);肝细胞abcg8mRNA表达量分别为(1.57±0.27)、(0.95±0.02)。随着雌激素作用时间的延长,TBA水平有升高趋势,而肝细胞abcg5mRNA和abcg8mRNA表达量有降低趋势,差异均有统计学意义(P5)。5.雌激素浓度分别为0、10、100、500nmol/L时与体外肝细胞培养8h及24h时后,肝细胞TBA分泌水平及肝细胞abcg5mRNA表达量和abcg8mRNA表达量,随着雌激素浓度的升高有逐渐降低趋势,差异均有统计学意义(P5)。但是,当雌激素浓度为10nmol/L时与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。雌激素浓度为100nmol/L和500nmol/L时分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P5)结论：1.低浓度雌激素不影响体外培养肝细胞TBA的分泌水平及abcg5m RNA和abcg8m RNA的表达。2.当雌激素浓度达到一定水平时,肝细胞TBA分泌水平随着雌激素浓度的增加有逐渐减少趋势,随着作用时间延长有逐渐增加趋势;而肝细胞abcg5m RNA和abcg8m RNA的表达量,随着雌激素浓度增加及作用时间的延长均逐渐减少。提示雌激素作用下,肝细胞abcg5和abcg8可下调TBA分泌,对ICP胆酸代谢起重要作用。

关键词：妊娠期肝内胆汁淤积症胆汁酸 abcg5 abcg8

abcg5和abcg8与胆囊结石关系的研究进展

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徐州医学院学报 2012年第3期32卷 208-210页

作者：李炯朱培庭上海中医药大学附属龙华医院普外科上海200032

腺苷三磷酸结合盒转运体超家族G亚家族成员abcg5和abcg8是腺苷三磷酸结合盒转运体家族成员,在内质网产生后定位于细胞膜上发挥作用,具有从肠内细胞分泌胆固醇到肠腔内以及从肝脏分泌胆固醇到胆汁中的功能,促成了胆汁内胆固醇的过饱和,... 详细信息

腺苷三磷酸结合盒转运体超家族G亚家族成员abcg5和abcg8是腺苷三磷酸结合盒转运体家族成员,在内质网产生后定位于细胞膜上发挥作用,具有从肠内细胞分泌胆固醇到肠腔内以及从肝脏分泌胆固醇到胆汁中的功能,促成了胆汁内胆固醇的过饱和,而胆固醇过饱和是形成胆囊结石的重要病理生理改变.本文就abcg5、abcg8的结构、功能等与胆囊结石形成原因作一综述.

关键词： abcg5 abcg8 胆固醇结石

abcg5和abcg8与胆固醇代谢关系的研究进展

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国际外科学杂志 2006年第2期33卷 125-128页

作者：王勇韩天权张圣道上海交通大学附属瑞金医院外科上海上海消化外科研究所200025

abcg5和abcg8是三磷酸腺苷结合盒转运体家族成员,在内质网中形成异二聚体后并于细胞浆膜顶端表达,参与胆固醇和植物固醇的吸收及胆汁分泌,基因表达受到LXR/RXR、FXR、PXR、LHR1等的调控;与β谷固醇血症有关,并且是小鼠致石基因Lith9的... 详细信息

abcg5和abcg8是三磷酸腺苷结合盒转运体家族成员,在内质网中形成异二聚体后并于细胞浆膜顶端表达,参与胆固醇和植物固醇的吸收及胆汁分泌,基因表达受到LXR/RXR、FXR、PXR、LHR1等的调控;与β谷固醇血症有关,并且是小鼠致石基因Lith9的候选基因。

关键词： abcg5 abcg8 胆固醇代谢胆固醇结石

abcg5和abcg8在胆囊胆固醇结石形成中的作用

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生命的化学 2004年第4期24卷 340-341页

作者：沈振斌秦新裕复旦大学附属中山医院普外科上海200032

腺苷三磷酸结合盒转运体G5和G8(ATPbindingcassettetransportG5 ,abcg5和ATPbindingcassettetransportG8,abcg8)位于构成管腔的细胞膜一端 ,使进入细胞内的固醇泵出到细胞外 ,参与胆固醇逆向转运 (RCT) ,在减少小肠和促进肝脏排泄固醇... 详细信息

腺苷三磷酸结合盒转运体G5和G8(ATPbindingcassettetransportG5 ,abcg5和ATPbindingcassettetransportG8,abcg8)位于构成管腔的细胞膜一端 ,使进入细胞内的固醇泵出到细胞外 ,参与胆固醇逆向转运 (RCT) ,在减少小肠和促进肝脏排泄固醇过程中发挥重要作用。突变后导致机体固醇蓄积 ,血浆固醇水平升高。abcg5和abcg8是促进胆囊胆固醇结石形成的关键因素。激动核受体LXR、RXR和FXR的途径对abcg5和abcg8的表达具有调控作用。

关键词：胆固醇逆向转运胆囊结石 abcg5 abcg8

abcg5和abcg8与胆固醇结石形成的关系

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中华肝胆外科杂志 2005年第9期11卷 583-585页

作者：沈振斌秦新裕童赛雄锁涛复旦大学附属中山医院上海市200032

目的探讨abcg5和abcg8与结石形成的关系。方法测定结石组病人结石胆固醇含量,确定为胆固醇结石。比较禁食情况下胆固醇结石病人和胃癌病人中血脂、脂蛋白的差异,采用实时PCR方法比较胆固醇结石病人与胃癌病人abcg5和abcg8mRNA的差异。... 详细信息

目的探讨abcg5和abcg8与结石形成的关系。方法测定结石组病人结石胆固醇含量,确定为胆固醇结石。比较禁食情况下胆固醇结石病人和胃癌病人中血脂、脂蛋白的差异,采用实时PCR方法比较胆固醇结石病人与胃癌病人abcg5和abcg8mRNA的差异。结果两组病例血脂、脂蛋白比较无明显差异。胆固醇结石组abcg5/beta-actin和abcg8/beta-actin均高于胃癌组(为17.6%±9.8%vs13.5%±6.2%,P5%±4.2%,Pabcg5和abcg8有较高的转录水平。结论本研究提示胆固醇结石的形成与肝脏abcg5和abcg8高表达,向胆汁中转运较多的胆固醇有关。

关键词：胆结石结石成因 abcg5 abcg8 胆固醇结石形成胃癌病人胆固醇含量 PCR方法 actin mRNA