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在顺铂耐药的a549/ddp人肺腺癌细胞中乙醛脱氢酶表达增加

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第5期31卷 625-629页

作者：何进喜宋旭梅于亮李靖乔志雄氿睿余博刘晓明宁夏医科大学普胸外科宁夏银川750004 宁夏医科普胸外科宁夏银川750004 宁夏医科干细胞研究所宁夏银川750004

目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在a549/ddp人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在a549... 详细信息

目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在a549/ddp人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在a549细胞和a549/ddp细胞表达的阳性率;MTT法检测100μmol/L二乙氨基苯甲醛(DEAB)处理前后a549/ddp细胞的增殖能力和对顺铂的敏感性;实时定量PCR检测ALDH各亚型在a549细胞与a549/ddp细胞中的mRNA水平的表达;Western blot法检测实时定量PCR有明显差异结果的ALDH的亚型ALDH1A3和ALDH1B1在a549细胞与a549/ddp细胞中的蛋白水平的表达。结果与a549细胞相比,ABCG2和ALDH在a549/ddp细胞的阳性率增加,ALDH阳性率达97.7%,在a549细胞中仅仅为4.3%;CD44、CD90、CD73、CD105在二者间阳性率无明显差异,而Ep CAM在a549/ddp细胞阳性率降低;经100μmol/L DEAB处理后,a549/ddp细胞对顺铂的耐药性显著低于未处理前;与a549细胞相比,ALDH1A3和ALDH1B1的mRNA在a549/ddp细胞中表达水平增高;ALDH1B1蛋白表达升高,ALDH1A3表达降低。结论 ALDH可作为顺铂耐药人肺腺癌细胞的标志分子之一,其中ALDH1B1在顺铂耐药性中可能发挥一定作用,为临床上治疗肺腺癌耐药患者提供新的治疗靶点和策略。

关键词： a549/ddp 顺铂耐药乙醛脱氢酶

芦荟大黄素脂质体逆转人肺腺癌细胞a549／ddp对顺铂多药耐药的作用研究

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中国中药杂志 2008年第12期33卷 1443-1445页

作者：曾嵘周知午吴翠芳周于禄湖南中医药大学药理教研室湖南长沙410208 中南大学湘雅三医院药剂科湖南长沙410013

目的:研究芦荟大黄素脂质体(aloe emodin liposomes,AE-L)在体外对耐药人肺腺癌细胞系a549/ ddp对顺铂(ddp)的耐药性。方法:采用MTT检测方法得出AE-L的无毒细胞浓度、低毒细胞浓度以及空脂质体(empty liposomes,E-L)的无毒浓度;再以E-L... 详细信息

目的:研究芦荟大黄素脂质体(aloe emodin liposomes,AE-L)在体外对耐药人肺腺癌细胞系a549/ ddp对顺铂(ddp)的耐药性。方法:采用MTT检测方法得出AE-L的无毒细胞浓度、低毒细胞浓度以及空脂质体(empty liposomes,E-L)的无毒浓度;再以E-L无毒浓度做对照组,分别测出AE-L无毒细胞浓度组、低毒细胞浓度组耐药细胞逆转倍数;电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定各组细胞内顺铂浓度。结果:AE-L无细胞毒浓度组(2.0 mg·L^(-1))使a549/ddp细胞对ddp的IC_(50)由16.81 mg·L^(-1)降至5.86 mg·L^(-1);低细胞毒浓度(7.0 mg·L^(-1))组的IC_(50)降至4.34 mg·L^(-1);2组均明显提高ddp在a549/ddp细胞内的浓度。结论:AE-L能部分逆转a549/ddp细胞的多药耐药(MDR),其机制与增加细胞内药物浓度有关。

关键词：芦荟大黄素脂质体逆转多药耐药 a549/ddp

5-氮-2＇-脱氧胞苷逆转人非小细胞肺癌a549/ddp细胞对顺铂的耐药性

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中华肿瘤杂志 2011年第5期33卷 349-353页

作者：吴芳胡春宏中南大学湘雅二医院肿瘤科长沙410011

目的探讨5-氮-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-dc）逆转耐顺铂（ddp）的a549/ddp细胞对ddp的耐药性及其可能的机制.方法以耐ddp的人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系a549/ddp为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测5-Aza-de对a549/ddp细胞的毒... 详细信息

目的探讨5-氮-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-dc）逆转耐顺铂（ddp）的a549/ddp细胞对ddp的耐药性及其可能的机制.方法以耐ddp的人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系a549/ddp为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测5-Aza-de对a549/ddp细胞的毒性作用和对a549/ddp细胞的耐药逆转指数（RI）;采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测5-Aza-de干预前后的a549/ddp细胞hMLH1基因启动子甲基化状态和基因表达情况.结果 20 μmol/L 5-Aza-dc（无毒剂量组）和40 μmol/L5-Aza-dc（低毒剂量组）干预a549/ddp细胞48 h后,其R1分别为1.82和***结果显示,a549/ddp细胞中,hMLH1基因启动子区呈部分甲基化状态;经无毒和低毒剂量5-Aza-dc处理a549/ddp细胞48 h后,hMLH1基因启动子区发生DNA去甲基化.无毒剂量组和低毒剂量组的hMLH1 mRNA相对表达量分别为2.05±0.08和2.00±0.03,hMLHl蛋白相对表达鼍分别为1.74±0.14和1.65±0.11.结论 5-Aza-dc能部分逆转a549/ddp细胞的ddp耐药,其机制可能与去除hMLH1基因启动子甲基化、上调其基因表达有关.

关键词：癌非小细胞肺细胞系 a549/ddp 5-Aza-dc 顺铂抗药性肿瘤 hMLH1 DNA甲基化

Upregulation of Id3 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in a549/ddp human lung cancer cells in vitro

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Upregulation of Id3 inhibits cell proliferation and induces ...

姜黄素通过下调miR-186~＊促进人肺腺癌细胞a549/ddp凋亡

第十届全国免疫学学术大会

作者： fangfang Chen qin-fei Zhao shu-xia Wang hai-yong Wang xiao-jun Li Center of Clinical Laboratory Science Jingling Hospital School of Medicine Nanjing University State Key Laboratory of Analytical Chemistry for Life Science Department of Chemistry Nanjing University

Objectives:Lung cancer is the leading cause of cancer-related mortality ***3 is a member of the Id multigenefamily of dominant negative helix–loop–helix transcription factors,which functions as oncogenes or tumor suppressors in human ***,little is known about the roles of Id3 in the development of chemoresistance in Lung Adenocarcinoma a549/ddp ***,we investigated the involvement of Id3 in the resistance of a549/ddp cell to *** and Methods:Cells were transiently transfected with p EGFP or Id3/p EGFP,and EGFP-expressing cells was monitored by confocal fluorescence ***-PCR and Western blot analysis were performed to assess Id3 m RNA transcription and protein *** effect of Id3 on the growth of a549/ddp cells in vitro were determined by MTT *** was assessed by fluorescence microscopy with Hoechst 33258 staining and flow cytometry with Annexin V-FITC/PI double ***:24h after transfection,Id3 m RNA transcription and protein expression were significantly higher in Id3/p EGFP transfected cells than in p EGFP transfected and control *** of Id3 could significantly inhibit a549/ddp cells growth,and the inhibition ratio was markedly increased in a time-dependent *** V/7-AAD and Hoechst 33258 staining revealed significantly higher rates of apoptosis in Id3/p EGFP-transfected ***:Overexpression of Id3 triggered the apoptosis in the cisplatin(ddp)-resistant human lung adenocarcinoma cell line a549/ddp,implicating Id3 in negative control of tumour *** study revealed that Id3 may serve as a novel biomarker and therapeutic target for a549/ddp cells.

关键词： Id3 a549/ddp proliferation apoptosis

来源： cnki会议评论

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中国肺癌杂志 2010年第4期13卷 301-306页

作者：唐妮张艰杜永平第四军医大学第一附属医院中医科西安710032 第四军医大学第一附属医院呼吸科西安710032

背景与目的姜黄素是从姜黄科植物的根茎中提取的一种天然化合物。体内外的临床前研究表明,其具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种作用。miR-186*是通过microarray芯片技术发现的在人肺腺癌细胞a549/ddp细胞中高表达的基因。本研究旨在阐明... 详细信息

背景与目的姜黄素是从姜黄科植物的根茎中提取的一种天然化合物。体内外的临床前研究表明,其具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种作用。miR-186*是通过microarray芯片技术发现的在人肺腺癌细胞a549/ddp细胞中高表达的基因。本研究旨在阐明姜黄素是否可通过调控miR-186*的表达而促进a549/ddp细胞的凋亡。方法mi-croarray芯片技术检测经姜黄素、DMSO分别处理后a549/ddp细胞中microRNAs(miRNAs)表达量的变化;实时定量PCR验证从microarray芯片中筛选出来的明显差异表达的miRNAs;最后,流式细胞仪法检测明显差异表达的miR-NAs调控的细胞凋亡,MTT法检测细胞存活率。结果microarray芯片技术结果显示:与DMSO对照组比较,姜黄素处理后miR-186*的表达明显下调。实时定量PCR验证了microarray芯片技术检测的结果。流式细胞仪法检测miR-186*调控的细胞凋亡,MTT法检测细胞存活率:姜黄素处理后,与对照组比较,miR-186*的表达明显下调,从而加速a549/ddp细胞的凋亡,细胞存活率下降;转染miR-186*的mimetics和其对照后,与对照组比较,miR-186*的表达上调,从而减少a549/ddp细胞的凋亡,细胞存活率增加。结论姜黄素调控miRNAs的表达可能是其促肺癌细胞凋亡的重要机制之一。

关键词：姜黄素 miR-186* a549/ddp 凋亡

人肺腺癌a549/ddp耐药细胞减弱顺铂诱导的细胞凋亡

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癌症 2000年第4期19卷 325-327页

作者：刘文哲胡义德李金瀚许楚宏陈娜娜广州赤岗一七七中心医院肿瘤科广东广州510317 第三军医大学新桥医院全军呼吸研究所重庆400037 第一军医大学南方医院肿瘤科广东广州510515 第一军医大学药物研究所广东广州510515

目的 :探讨人肺腺癌A5 49/ddp耐药细胞的多药抗药机理。方法 :应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、原位DNA断裂点的末端标记法观察细胞凋亡的状况 ,用免疫组化法检测bcl 2基因的表达。结果 :癌细胞在顺铂作用下产生了典型的凋亡形态学改变... 详细信息

目的 :探讨人肺腺癌A5 49/ddp耐药细胞的多药抗药机理。方法 :应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、原位DNA断裂点的末端标记法观察细胞凋亡的状况 ,用免疫组化法检测bcl 2基因的表达。结果 :癌细胞在顺铂作用下产生了典型的凋亡形态学改变。 3μg/ml、5 μg/ml、7μg/ml顺铂作用 48小时 ,A5 49细胞DNA裂解片断呈现典型的阶梯状排列条带 ;而在 5 μg/ml、7μg/ml顺铂作用 48小时 ,A5 49/ddp细胞才呈现相似的DNA条带。在 3μg/ml顺铂作用 12小时、18小时、2 4小时 ,A5 49/ddp的凋亡指数分别小于A5 49的凋亡指数。A5 49/ddpbcl 2基因的表达高于A5 49细胞。结论 :A5 49/ddp可抵抗顺铂诱导的细胞凋亡 ,这可能与其细胞bcl 2基因过度表达有关。bcl 2基因过度表达可能是A5 49/ddp细胞抗凋亡及抗药机理之一。

关键词：多药抗药性顺铂细胞凋亡肺腺癌 a549/ddp

野黄芩苷通过下调c-met逆转肺癌a549/ddp细胞顺铂耐药

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中国现代应用药学 2021年第4期38卷 415-419页

作者：邵中一罗敏崔明超彭敏胡天穹宁波大学附属人民医院浙江宁波315040 浙江医药高等专科学校浙江宁波315100 宁波市奉化区中医医院医共体浙江宁波315500

目的探讨野黄芩苷对肺癌a549/顺铂(cisplatin,ddp)细胞ddp耐药的逆转作用及机制。方法MTT法检测肺癌ddp耐药细胞a549/ddp的耐药倍数、野黄芩苷对其细胞毒性及逆转倍数;平板克隆形成试验检测野黄芩苷对a549/ddp细胞克隆形成的影响;Wester... 详细信息

目的探讨野黄芩苷对肺癌a549/顺铂(cisplatin,ddp)细胞ddp耐药的逆转作用及机制。方法MTT法检测肺癌ddp耐药细胞a549/ddp的耐药倍数、野黄芩苷对其细胞毒性及逆转倍数;平板克隆形成试验检测野黄芩苷对a549/ddp细胞克隆形成的影响;Western blotting检测野黄芩苷对a549/ddp细胞内c-met蛋白表达的影响。结果MTT法检测结果显示,肺癌ddp耐药细胞a549/ddp的耐药性是其亲本细胞a549的5.77倍,差异有统计学意义(Pa549细胞相比,ddp耐药细胞a549/ddp中c-met的蛋白表达显著增高(Pa549/ddp细胞的抑制率分别为2.38%,4.01%,7.43%和26.43%,而且随着野黄芩苷药物浓度的增加,克隆形成数目显著减少。选择抑制率ddp作用可显著降低a549/ddp细胞的耐药性;Western blotting结果显示,野黄芩苷联合ddp作用能显著抑制a549/ddp细胞中c-met蛋白的表达。结论野黄芩苷与ddp联用可提高肺癌a549/ddp细胞对ddp的敏感性,抑制克隆形成,其机制可能与下调c-met蛋白表达有关。

关键词：肺癌 a549/ddp 野黄芩苷 c-met 耐药性

桔梗皂苷-D诱导肺腺癌a549和a549/ddp细胞凋亡和周期阻滞

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辽宁中医杂志 2015年第8期42卷 1484-1489,I0007页

作者：赵若琳周坤福张旭陈美娟南京中医药大学江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(a549)和a549顺铂耐药细胞(a549/ddp)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;... 详细信息

目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(a549)和a549顺铂耐药细胞(a549/ddp)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;流式细胞术检测细胞周期阻滞和凋亡作用;Hoechst-33258荧光染色观察细胞核形态的变化;Western-blot蛋白印迹法分析凋亡通路和细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:MTT检测结果显示,PD对a549和a549/ddp细胞的增殖抑制呈浓度和时间依赖性。Hoechst 33258荧光染色发现,随着PD浓度增加,两种细胞核形态都有明显的改变。进一步流式细胞术结果表明,PD诱导a549和a549/ddp细胞凋亡和周期阻滞。Westernblot检测结果表明,PD通过上调Bax、Caspase-9、cleaved-Caspase-3和PARP的表达,下调Bcl-2和Caspase-3的表达诱导a549和a549/ddp细胞凋亡。此外,PD通过下调Cyclin-D1、Cyclin-D3、CDK4、CDK6、E2F1和p-Rb及上调P18的蛋白水平诱导a549细胞周期G0/G1阻滞。同时,PD通过下调Cyclin-B1、p-Cdc2、E2F1和p-Rb及上调P27的蛋白表达诱导a549/ddp细胞周期G2/M阻滞。结论:PD通过线粒体途径诱导a549和a549/ddp细胞凋亡诱导,并且引发a549细胞G0/G1周期阻滞和a549/ddp细胞G2/M阻滞周期阻滞。

关键词：桔梗皂苷-D(PD) 非小细胞肺癌凋亡周期阻滞 a549 a549/ddp

去甲斑蝥素通过下调c-met基因逆转肺癌a549/ddp细胞顺铂耐药的研究

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药物评价研究 2020年第3期43卷 412-416页

作者：路京王小宁郑敏吴琼杜思迪徐乔冉文文熊山渭南市食品药品检验所陕西渭南714000 渭南市药品不良反应监测中心陕西渭南714000 山东省医学科学院药物研究所山东第一医科大学山东济南250062

目的本研究通过去甲斑蝥素(NCTD)作用于肺癌顺铂(ddp)耐药细胞a549/ddp,探讨其对ddp耐药的逆转作用及其相关机制。方法应用CCK-8法检测NCTD对a549和a549/ddp细胞活力的影响、ddp对a549细胞和a549/ddp的半数抑制浓度(IC50)、NCTD联合不... 详细信息

目的本研究通过去甲斑蝥素(NCTD)作用于肺癌顺铂(ddp)耐药细胞a549/ddp,探讨其对ddp耐药的逆转作用及其相关机制。方法应用CCK-8法检测NCTD对a549和a549/ddp细胞活力的影响、ddp对a549细胞和a549/ddp的半数抑制浓度(IC50)、NCTD联合不同浓度ddp对a549/ddp细胞ddp耐药性的影响;细胞克隆形成实验检测NCTD、ddp单给药及NCTD与ddp联合用药对a549/ddp细胞克隆形成率的影响;Western blotting法检测a549/ddp和a549细胞中c-met表达,以及NCTD、ddp单给药及NCTD与ddp联合用药对a549/ddp细胞内c-met蛋白表达的影响。结果NCTD剂量相关性地抑制a549和a549/ddp细胞的活力,选择抑制率小于10%的最大NCTD浓度即10μmol/L作为逆转浓度;ddp作用于a549/ddp和a549细胞的IC50分别为15.11和5.04μmol/L,差异有统计学意义(Pa549/ddp细胞中c-met表达明显高于a549细胞;用NCTD(10μmol/L)处理后,ddp对a549/ddp细胞的IC50从15.11μmol/L减少到8.06μmol/L,差异显著(Pddp单给药组比较,NCTD联合ddp作用明显降低a549/ddp细胞克隆形成率(Pddp作用明显抑制顺铂耐药细胞a549/ddp细胞中c-met蛋白的表达,单用ddp或NCTD与对照组比较差异不明显。结论NCTD与ddp联用可逆转a549/ddp细胞对ddp耐药,其机制可能与抑制c-met蛋白表达有关。

关键词：去甲斑蝥素肺癌 a549/ddp c-met 顺铂耐药