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姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠aβ42及其降解酶NEP表达的影响

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中国中药杂志 2011年第8期36卷 1079-1082页

作者：王蓬文王虹李瑞晟李勇任映朱志慧孙海芸杨金铎孙建宁北京中医药大学中药学院中药药理学实验室北京100102 北京中医药大学东直门医院中药药理学实验室北京100700

目的:观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠aβ42及其降解酶NEP表达的影响。方法:将3月龄的APP-swe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组、姜黄素高、中、低剂量组。灌胃3个月后,应用Morris水迷宫、免疫组织化学、Western b... 详细信息

目的:观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠aβ42及其降解酶NEP表达的影响。方法:将3月龄的APP-swe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组、姜黄素高、中、低剂量组。灌胃3个月后,应用Morris水迷宫、免疫组织化学、Western blot等方法进行检测。结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(Paβ42及其降解酶NEP表达,模型组小鼠大脑海马CA1区较正常对照组aβ42阳性细胞明显增加(Paβ42降解酶NEP表达、降低aβ42蛋白,进而改善APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的学习记忆能力。

关键词：姜黄素 APPswe/PS1dE9双转基因小鼠 aβ42 NEP Morris水迷宫

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牛膝醇提物对Aβ_(42)聚集的抑制作用

中药材 2003年第6期26卷 412-415页

作者：罗焕敏谷峰李晓光暨南大学药学院广州510632

目的 :观察牛膝醇提物 (Nx E)对aβ42 聚集的抑制作用。方法 :aβ42 单独或和Nx E在 37℃ ,5 %CO2 培养箱中孵育后 ,采用硫磺素T(Th T)荧光分析以及透射电镜观察aβ42 的聚集程度。结果 :1μg·μl 1aβ42 孵育 7d后荧光强度明显升高 ,... 详细信息

目的 :观察牛膝醇提物 (Nx E)对aβ42 聚集的抑制作用。方法 :aβ42 单独或和Nx E在 37℃ ,5 %CO2 培养箱中孵育后 ,采用硫磺素T(Th T)荧光分析以及透射电镜观察aβ42 的聚集程度。结果 :1μg·μl 1aβ42 孵育 7d后荧光强度明显升高 ,电镜观察发现aβ42 以淀粉样纤维结构为主 ,呈针状聚集 ;低、中、高三个剂量 (7 5、15、30 μg·μl 1)的Nx E与aβ42 共同孵育 7d后 ,中、高剂量Nx E与aβ42 的共同孵育产物荧光强度比aβ42 单独孵育明显减弱 ;形态学观察纤维样结构减少 ,无定形结构增加 ,存在大量散在的颗粒。结论 :1μg·μl 1aβ42 孵育 7d已“老化” ;15和 30 μg·μl 1的Nx E能在一定程度上抑制aβ42 聚集。

关键词：牛膝醇提物 aβ42 抑制作用硫磺素T荧光分析透射电镜阿尔茨海默病

Aβ_(42)及其C端亚单位疫苗接种正常SD大鼠后产生高滴度的抗Aβ_(42)抗体

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解剖学报 2003年第3期34卷 231-235页

作者：林贤汪华侨徐杰姚志彬中山大学中山医学院脑研究室广州510089

目的　探讨Aβ4 2 及其C端亚单位肽疫苗接种正常成年SD大鼠后能否产生高滴度的抗Aβ4 2 抗体。　方法　将Aβ36～ 4 2 与不同载体偶联制成的亚单位疫苗和Aβ4 2 全肽疫苗分别接种于SD大鼠。用Westernblotting方法和间接ELISA法检测其血... 详细信息

目的　探讨Aβ4 2 及其C端亚单位肽疫苗接种正常成年SD大鼠后能否产生高滴度的抗Aβ4 2 抗体。　方法　将Aβ36～ 4 2 与不同载体偶联制成的亚单位疫苗和Aβ4 2 全肽疫苗分别接种于SD大鼠。用Westernblotting方法和间接ELISA法检测其血清和脑匀浆上清液中的抗体的特异性以及滴度 ,并用HE染色对大鼠的脑、肝、脾和肾进行形态学观察。　结果　第 2次接种后各实验组的血清均开始有抗Aβ4 2 抗体产生 ,且抗体滴度随接种次数的增多而增高 ,第 4次接种后各实验组血清的抗Aβ4 2 抗体滴度均达到 1∶10 0 0 0以上 ,同时脑匀浆上清液也检测到低滴度的抗Aβ4 2 抗体 ;实验鼠的大脑、肝、脾和肾均未发现病理性变化。　结论　Aβ4 2 及其亚单位疫苗 (Aβ36～ 4 2 )接种于正常SD大鼠后 ,均能产生高滴度的抗Aβ4 2 抗体。

关键词： aβ42 C端亚单位疫苗预防接种 SD大鼠高滴度抗体老年性痴呆

黑果枸杞花青素对Aβ_(42)致痴呆模型大鼠记忆力及抗氧化活性研究

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现代食品科技 2017年第3期33卷 29-34页

作者：武雪玲李筱筱贾世亮高兆兰鲁政戴雪伶孙雅煊北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室北京100191 功能食品科学技术研究院北京100191

采用双侧海马CA1区注射aβ42构建阿尔茨海默症(Alzheimer′s disease,AD)动物模型,通过穿梭箱被动回避记录行为学数据;以大鼠血清和脑组织中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和蛋白... 详细信息

采用双侧海马CA1区注射aβ42构建阿尔茨海默症(Alzheimer′s disease,AD)动物模型,通过穿梭箱被动回避记录行为学数据;以大鼠血清和脑组织中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和蛋白质羰基(PC)含量作为评价指标,分析黑果枸杞花青素(OPC)样品对AD模型大鼠记忆力以及体内抗氧化活性的影响。结果表明,模型组动物的记忆能力显著下降,而黑果枸杞花青素组可改善AD模型大鼠的记忆损伤;同时,发现灌胃剂量为80 mg/kg的黑果枸杞花青素组能显著提高AD大鼠血清和脑组织中T-SOD、CAT活力和GSH含量,并降低MDA和蛋白质羰基含量水平。综合上述结果可知,本研究所述黑果枸杞花青素具有良好的增强体内抗氧化活性和提高AD大鼠记忆力的作用,并具有预防AD的潜在功效。

关键词：黑果枸杞花青素 aβ42 阿尔茨海默症抗氧化记忆力

非瑟酮对Aβ_(42)诱导AD痴呆模型大鼠的保护作用及其机制研究

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天然产物研究与开发 2016年第12期28卷 2011-2016,2005页

作者：武雪玲李筱筱贾世亮张静戴雪伶孙雅煊北京联合大学应用文理学院北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室北京100191

采用双侧海马CA1区注射Aβ_(42)构建AD动物模型,通过穿梭箱被动回避记录行为学数据;以大鼠脑组织中的GSH、MDA和PC含量作为评价指标,观察非瑟酮对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠记忆力以及体内抗氧化活性的影响;以脾脏、胸腺和肝脏指数以及G... 详细信息

采用双侧海马CA1区注射Aβ_(42)构建AD动物模型,通过穿梭箱被动回避记录行为学数据;以大鼠脑组织中的GSH、MDA和PC含量作为评价指标,观察非瑟酮对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠记忆力以及体内抗氧化活性的影响;以脾脏、胸腺和肝脏指数以及GFAP的表达初步评估非瑟酮对AD模型大鼠的抗炎、抗衰老作用。结果表明,模型组动物的记忆能力显著下降,而非瑟酮组可改善AD模型大鼠的记忆损伤;同时,发现非瑟酮组能显著提高AD大鼠脑组织中的GSH含量,降低MDA和PC含量水平;增加大鼠的脾脏、胸腺和肝脏指数,并降低GFAP的表达水平,且灌胃剂量为100 mg/kg的非瑟酮组效果最佳。综合上述结果可知,非瑟酮对Aβ_(42)诱导AD痴呆大鼠具有较好的保护作用,其机制可能是非瑟酮抑制脑组织氧化损伤并抑制星型胶质细胞的活化与增生进而减少神经炎症的发生。

关键词：非瑟酮 aβ42 阿尔茨海默病保护作用

Synergistic Effect of Watermelon Powder and Lactococcus lactis subsp lactis Supplemented Diet Partially Ameliorates aβ42-Dependent Lifespan Shorten and Flight Impairment in Transgenic Drosophila

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American Journal of Plant Sciences 2016年第6期7卷 991-1000页

作者： Dong Gyun Ko Young Bum Eun Jong Uk Na Sang-Tae Kim Korean Minjok Leadership Academy Hoengseong-gun Republic of Korea Biomedical Research Institute Department of Neuropsychiatry Bundang Hospital of Seoul National University College of Medicine Seongnam Republic of Korea

Oxidative stress has been strongly related with Alzheimer disease pathogenesis. We determined the effects of watermelon powder (WMP) and Lactococcus lactis subsp lactis (LAL) supplementation on the generated aβ42-induced phenotypes in a Drosophila melanogaster model of AD. Enhanced aβ42 expression in D. melanogaster neurons can diminish lifespan and flight ability. We have observed longevity methods to assay the effects of WMP and LAL on D. melanogaster survival. Furthermore, flies expressing aβ42 in their body fed WMP and LAL had up to 90 days, or 35% longer median lifespan than those fed a control diet. In addition, synergistic effect of WMP and LAL improved aβ42-induced flight impairments in the Drosophila wing tissues. Our microscope experiments revealed that individuals fed synergistic effect of WMP and LAL had ameliorated aβ42 expression as well as increment of flight ability than aβ42-induced flies. We propose that WMP is typically rich in L-citrulline and LAL, rich in naturally occurring probiotics and antioxidants, and that it promotes the survival of neurons in brain and wing muscle tissues with increased levels of aβ42 via a protective cell survival mechanism.

关键词： Drosophila melanogaster Lactococcus lactis Watermelon Lifespan Ommatidia aβ42

Dual PINK Mutant and A<i>β</i>42-Dependent Lifespan Shorten and Flight Impairment in Transgenic Drosophila Partially Alleviates by a <i>Lactococcus lactis</i>Supplemented Diet

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Journal of Behavioral and Brain Science 2015年第7期5卷 266-273页

作者： Dong Gyun Ko Young Bum Eun Jong Uk Na Sang-Tae Kim Korean Minjok Leadership Academy Hoengseong-Gun Republic of Korea Department of Neuropsychiatry Bundang Hospital of Seoul National University College of Medicine Biomedical Research Institute Seongnam City Republic of Korea

Oxidative stress has been strongly related with Parkinson disease (PD) and Alzheimer disease pathogenesis. We determined the effects of Lactococcus lactis (LAL) supplementation on the generated loss-of-function mutants of PINK1 B9, an AR-JP-linked gene and aβ42 induced phenotypes in a Drosophila melanogaster model of PD/AD. Enhanced mutant PINK1 B9 and aβ42 expression in D. melanogaster dopaminergic (DA) neurons can curtail lifespan, flight muscle accompanied by locomotive defects and we have observed longevity methods to assay the effects of LAL on D. melanogaster survival. Furthermore, flies expressing mutant PINK1 B9 and aβ42 in their brain fed LAL had up to the two weeks, or 25%, greater median lifespan than those fed a standard sucrose diet. In addition, LAL improved mutant PINK1 B9 and aβ42-induced flight impairments in the Drosophila wing. Our microscopy analyses revealed that individuals fed LAL had improved atypical ommatidia as well as an increased thirteen percentage of flight ability than those fed a control diet. We propose that LAL, rich in naturally occurring probiotics and antioxidants, promotes the survival of neurons in brain and wing muscle tissues with increased levels of mutant PINK1 B9 and aβ42 via a protective cell survival mechanism.

关键词： Drosophila melanogaster Lactococcus lactis PINK1 Lifespan Ommatidia aβ42

Neuroprotective Effect of Icaritin on Alzheimer's Disease of Fruit Fly Transforming aβ42 Gene

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Medicinal Plant 2017年第5期8卷 40-44页

作者： Min DU Xiaoqun DUAN Guilin Medical University Affiliated Hospital of Jining Medical University

[Objectives] The research aimed to explore the prevention and control effects of icaritin( ICT) on fruit fly model of Alzheimer's disease( AD),and provide theoretical basis for the development and application of new clinical medicine. [Methods]AD fruit fly model was established,and ICT was used to respectively intervene normal fruit fly and the fly transforming aβ42. The test was divided into four groups:normal control group( Norm. group,feeding normal food solvent control),ICT intervention group of normal fruit fly( Norm. + ICT group,0. 04 mg/m L of ICT intervention),model control group( aβ42 group,feeding normal feed solvent control) and model feeding ICT group( aβ42 + ICT group,0. 04 mg/m L of ICT intervention). HE dyeing of fruit fly brain tissue,climbing ability,lifetime were respectively detected at whole level,and ATP,SOD and MDA contents of brain tissue were measured. [Results]Compared with AD fruit fly,there was no obvious hollow in fruit fly brain tissue slice of normal control group with the same age. Climbing ability,average lifetime,ATP,SOD and MDA contents in AD fruit fly group feeding ICT in old age were significantly improved. Normal control group was compared with normal control feeding ICT group,climbing ability,ATP,SOD and MDA contents had no statistical difference,and average lifetime was improved in normal feeding ICT group. [Conclusions]ICT could improve the behavior and lifetime of AD fruit fly,increase ATP content of brain tissue,enhance the ability to scavenge free radicals and resist lipid peroxidation,and protect AD fruit fly.

关键词： AD ICT Antioxidation aβ42 Fruit fly

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人β-淀粉样肽aβ42的融合表达与纯化

生物技术 2016年第2期26卷 146-151页

作者：吴骏陈庆梅王利娟华南农业大学生命科学学院广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室广东广州510642

[目的]建立一种快速可靠、获取足量和高纯度的人β-淀粉样肽(Aβ_(42))的方法。[方法]首先利用重叠PCR技术扩增获得Aβ_(42)基因全长。随后将基因连入p GEX-4T-1载体,利用GST系统表达融合蛋白。分别在16℃、25℃、30℃和37℃诱导表达,SD... 详细信息

[目的]建立一种快速可靠、获取足量和高纯度的人β-淀粉样肽(Aβ_(42))的方法。[方法]首先利用重叠PCR技术扩增获得Aβ_(42)基因全长。随后将基因连入p GEX-4T-1载体,利用GST系统表达融合蛋白。分别在16℃、25℃、30℃和37℃诱导表达,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,确定表达的最佳温度。根据优化条件进行目的蛋白的大量表达,利用Gstrap FF柱亲和纯化GST-Aβ_(42)融合蛋白。[结果]成功构建p GEX/Aβ_(42)表达载体,确定30℃为诱导表达的最佳温度。大量表达并经过纯化可获得分子量为30.7 k Da的融合蛋白。[结论]利用GST融合系统表达纯化可得到纯度超过90%的GST-Aβ_(42)融合蛋白,重组蛋白的产率约为1.2 mg/L培养基。当用凝血酶切除GST融合标签后,Aβ_(42)易聚集沉淀。

关键词：人β-淀粉样肽 aβ42 GST表达系统融合蛋白亲和纯化