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8-硝基白杨素对溶血性磷脂酰胆碱损伤内皮细胞的保护作用

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中国动脉硬化杂志 2014年第5期22卷 453-458页

作者：徐晓东向永胜邵玲邓长金白军荆门市第一人民医院湖北省荆门市448000 杭州市红十字会医院浙江省杭州市310003

目的研究8-硝基白杨素(8-NOChR)对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)损伤内皮细胞的保护作用及可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT检测LPC对HUVEC的损伤作用及不同浓度8-NOChR拮抗LPC损伤HUVEC生长作用;平皿克隆检测不同浓度的8-NO... 详细信息

目的研究8-硝基白杨素(8-NOChR)对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)损伤内皮细胞的保护作用及可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT检测LPC对HUVEC的损伤作用及不同浓度8-NOChR拮抗LPC损伤HUVEC生长作用;平皿克隆检测不同浓度的8-NOChR拮抗LPC抑制HUVEC细胞克隆形成;FCM检测8-NOChR调整LPC损伤HUVEC细胞周期变化;用Western blot检测细胞周期相关蛋白表达。结果 MTT提示经LPC作用的HUVEC生长活性呈时间和浓度依赖性降低,与NS组或0.1%DMSO组比较差异有统计学意义(P8-NOCHR呈浓度依赖性地提高LPC损伤的HUVEC生长活性(P0.05)。结论 8-NOCHR拮抗LPC损伤的内皮细胞的生长活性,可能与其激活Cyclin A和Cyclin B,下调P53和P21蛋白表达相关。

关键词： 8-硝基白杨素细胞生长活性细胞周期

8-硝基白杨素对卵巢癌化疗增敏作用及诱导其细胞凋亡的研究

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中国妇幼保健 2014年第24期29卷 3982-3984页

作者：陈砚芬宋晓晖湖北省武汉市妇女儿童医疗保健中心妇科 430000

目的:探讨8-硝基白杨素有无化疗增敏的作用及诱导细胞凋亡的原理。方法:体外培养卵巢癌HO-8910细胞,经8-硝基白杨素和顺铂处理后,以3-(4,5)-双甲基-2-噻唑-(2,5)-二苯基溴四氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况;以流式细胞仪检测细胞凋亡... 详细信息

目的:探讨8-硝基白杨素有无化疗增敏的作用及诱导细胞凋亡的原理。方法:体外培养卵巢癌HO-8910细胞,经8-硝基白杨素和顺铂处理后,以3-(4,5)-双甲基-2-噻唑-(2,5)-二苯基溴四氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况;以流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:8-硝基白杨素联合顺铂合用72 h时抑制率高达71.8%,与顺铂单独作用相比差异有统计学意义(P8910细胞增殖并诱导其发生凋亡,且与8-硝基白杨素联合应用时抑制作用明显增加。

关键词： 8-硝基白杨素顺铂卵巢癌细胞凋亡

8-硝基白杨素增强顺铂抑制卵巢癌HO-8910细胞增殖及诱导凋亡的效应

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8-硝基白杨素增强顺铂抑制卵巢癌HO-8910细胞增殖及诱导凋亡的效应

作者：陈砚芬南华大学

学位级别：硕士

目的：研究8-硝基白杨素(NOC)增强常规化疗药物顺氯氨铂(DDP)抑制人卵巢癌HO-8910增殖及诱导细胞凋亡作用,并探讨其作用机制是否与细胞P38MAPK、P-P38MAPK蛋白的表达增强、谷胱甘肽(GSH)的耗竭和Caspase-3活化有关,为将NOC作为临床卵巢... 详细信息

目的：研究8-硝基白杨素(NOC)增强常规化疗药物顺氯氨铂(DDP)抑制人卵巢癌HO-8910增殖及诱导细胞凋亡作用,并探讨其作用机制是否与细胞P38MAPK、P-P38MAPK蛋白的表达增强、谷胱甘肽(GSH)的耗竭和Caspase-3活化有关,为将NOC作为临床卵巢癌化疗增敏剂的开发和利用提供实验和理论依据。方法：以体外培养的人卵巢癌细胞HO-8910为研究对象,不同剂量的顺铂和8-硝基白杨素干预卵巢癌HO-8910细胞后,利用MTT法检测细胞增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,Western-Blot检测P38MAPK,P-P38MAPK蛋白水平的表达;分光光度法分别检测GSH含量的变化以及Caspase-3活性的变化;结果：MTT法检测结果显示：与对照组相比,各剂量的DDP、NOC对HO-8910细胞的生长均有抑制作用,并呈明显的剂量依赖性和时间依赖性;且2u mol/LDDP+20μmol/L NOC联合给药组细胞生长抑制率71.8%与单用20μmol/L DDP处理组的细胞生长抑制率72.4%相当(P>0.05),说明NOC与DDP联合应用,产生了相当于10倍剂量DDP对HO-8910细胞的增殖抑制效果AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测结果显示：NOC和DDP作用HO-8910细胞48小时后,2μmol/L DDP+20μmol/L NOC联合给药组细胞凋亡率43.5%,几乎达到20μ mol/L DDP单独用药组细胞凋亡率47.7%(P>0.05)。Western结果显示：与对照组相比,各用药组P38MAPK、P-P38MAPK的表达均表现不同程度地增强(P0.05)：分光光度法检测结果显示,与对照组相比,各用药组的GSH含量不同程度降低(P8-硝基白杨素能增强顺铂对人卵巢癌HO-8910细胞的生长增殖抑制作用。 2.8-硝基白杨素能促进顺铂诱导HO-8910细胞的凋亡。 3.8-硝基白杨素的化疗增敏作用可能与细胞内GSH的耗竭,Caspase-3活性增加,促进P38MAPK、P-P38MAPK蛋白表达有关。

关键词： 8-硝基白杨素顺铂卵巢癌细胞凋亡

8-硝基白杨素增强顺铂诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡作用及其机制

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山西医科大学学报 2015年第4期46卷 309-313页

作者：陈砚芬钟菊芳宋晓晖武汉市妇女儿童医疗保健中心妇产科武汉430016

目的探讨8-硝基白杨素(8-NOCHR)体外增强顺铂(DDP)诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡的效应及其机制。方法采用MTT法检测8-NOCHR增强DDP对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响,Western blot检测不同浓度8-NOCHR及DDP作用后HO-8910细胞P38MAPK和P-P... 详细信息

目的探讨8-硝基白杨素(8-NOCHR)体外增强顺铂(DDP)诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡的效应及其机制。方法采用MTT法检测8-NOCHR增强DDP对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响,Western blot检测不同浓度8-NOCHR及DDP作用后HO-8910细胞P38MAPK和P-P38MAPK蛋白水平的表达情况;分光光度法分别检测8-NOCHR及DDP作用后HO-8910细胞GSH含量的变化以及Caspase-3活性的变化。结果 8-NOCHR能增强DDP对HO-8910细胞的诱导凋亡效果。各用药组P38MAPK、P-P38MAPK的表达均表现不同程度地增强(P8-NOCHR能促进顺铂诱导HO-8910细胞的凋亡;8-NOCHR的化疗增敏作用与细胞内GSH的耗竭,Caspase-3活性增加,促进P38MAPK、P-P38MAPK蛋白表达有关。

关键词： 8-硝基白杨素顺铂卵巢癌细胞凋亡

8-硝基白杨素诱导人肝癌HepG2细胞分化研究

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现代医药卫生 2015年第19期31卷 2892-2895页

作者：何贵成严思佳丁恩艾小红南华大学附属第一医院肿瘤内科湖南衡阳421001

目的探讨传统中药蜂胶的有效成分白杨素的人工半合成类似物8-溴-7-甲氧基白杨素,即8-硝基白杨素(BrMC)是否具有诱导人肝癌细胞分化作用。方法体外培养人肝癌Hep G2细胞,分别加入1.0μg/m L BrMC和1.0μg/m L全反式维甲酸(ATRA),同时设... 详细信息

目的探讨传统中药蜂胶的有效成分白杨素的人工半合成类似物8-溴-7-甲氧基白杨素,即8-硝基白杨素(BrMC)是否具有诱导人肝癌细胞分化作用。方法体外培养人肝癌Hep G2细胞,分别加入1.0μg/m L BrMC和1.0μg/m L全反式维甲酸(ATRA),同时设溶媒对照组和空白对照组。瑞氏-姬姆萨染色法检测BrMC诱导Hep G2细胞形态与核质比的变化;酶促反应试剂盒检测BrMC和ATRA诱导Hep G2细胞中碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)的活性;放射免疫法检测甲胎蛋白(AFP)的质量分数;Diamondstone分光光度法(速率法)检测酪氨酸转氨酶(TAT)的活性。结果1.0μg/m L BrMC处理的细胞核质比远低于溶媒对照组,差异有统计学意义(P8、96 h的Hep G2细胞液中AFP质量分数,γ-GT、ALP、TAT活性分别与溶媒对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 BrMC能降低Hep G2细胞核质比、减少Hep G2细胞的AFP分泌、有效地活化Hep G2细胞TAT、ALP;且BrMC和ATRA均能抑制Hep G2细胞γ-GT活性。BrMC通过以上作用诱导人肝癌细胞分化。

关键词：植物提取物肝肿瘤/病理学肿瘤细胞,培养的 8-硝基白杨素 HepG2细胞分化诱导

PTEN-Akt途径与8-硝基白杨素抑制HL-60细胞增殖作用相关性研究

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PTEN-Akt途径与8-硝基白杨素抑制HL-60细胞增殖作用相关性研究

作者：岳军南华大学

学位级别：硕士

目的观察8-硝基白杨素(NOChR)抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡作用,探讨8-硝基白杨素的抗人急性髓性白血病作用是否涉及PTEN-Akt信号传导途径。方法体外培养人急性髓性白血病细胞系(HL-60)细胞。MTT比色法和细胞计数法检测白杨素(ChR)和NO... 详细信息

目的观察8-硝基白杨素(NOChR)抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡作用,探讨8-硝基白杨素的抗人急性髓性白血病作用是否涉及PTEN-Akt信号传导途径。方法体外培养人急性髓性白血病细胞系(HL-60)细胞。MTT比色法和细胞计数法检测白杨素(ChR)和NOChR对HL-60细胞抑制增殖和生长作用。PI染色流式细胞术(FCM)定量分析NOChR诱导HL-60细胞凋亡程度;AO/EB染色荧光显微镜观察ChR和NOChR诱导HL-60细胞凋亡的细胞形态学变化。Western Blot分析ChR和NOChR对HL-60细胞PTEN,p-Akt蛋白表达的影响。结果MTT比色法结果显示,NOChR显著抑制HL-60细胞增殖,呈浓度依赖性,其IC50值为1.34μM。NOChR抑制HL-60细胞增殖作用的效价强度与阳性对照药物全反式维甲酸(ATRA IC50 =1.33μM)相当,较先导化合物ChR( IC50=7.1μM)高5.3倍。台盼蓝染色后细胞计数结果显示: NOChR显著抑制HL-60细胞生长,呈时间依赖性。PI染色流式细胞术(FCM)分析发现NOChR具有诱导HL-60细胞凋亡作用,且呈浓度和时间依赖性, NOChR(1.0μM)作用48h,HL-60细胞凋亡率达23.16%,而相同浓度ChR的凋亡率仅为5.8%,阳性对照药物ATRA诱导的凋亡率是9.75%。AO/EB染色荧光显微镜观察NOChR处理48h后,HL-60细胞出现典型凋亡的形态学改变,细胞凋亡指数呈浓度依赖性增加。Western blot分析结果表明,NOChR以浓度和时间依赖方式上调HL-60细胞PTEN蛋白表达和抑制P-Akt蛋白表达。NOChR的上调HL-60细胞PTEN蛋白表达作用可被PPARγ特异性阻断剂GW9662(10μM)预孵育拮抗。结论1) 8-硝基白杨素抑制人急性髓性白血病细胞增殖和生长,呈浓度依赖性。2) 8-硝基白杨素能有效地诱导人急性髓性白血病细胞凋亡。3) 8-硝基白杨素抑制人急性髓性白血病细胞增殖作用与其活化PPARγ,上调PTEN蛋白表达,抑制Akt磷酸化相关。

关键词：人急性髓性白血病白杨素 8-硝基白杨素 PTEN p-Akt

PPARγ介导8-硝基白杨素诱导人结肠癌细胞凋亡作用研究

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PPARγ介导8-硝基白杨素诱导人结肠癌细胞凋亡作用研究

作者：伍石华南华大学

学位级别：硕士

目的:研究8-硝基白杨素体外诱导人结肠癌细胞凋亡作用;探讨PPARγ活化介导8-硝基白杨素诱导人结肠癌细胞凋亡作用的分子机理。方法: MTT比色法和细胞计数法测定细胞增殖活性和存活率;PI染色FCM检测细胞凋亡率;AO/EB染色荧光显微镜观察... 详细信息

目的:研究8-硝基白杨素体外诱导人结肠癌细胞凋亡作用;探讨PPARγ活化介导8-硝基白杨素诱导人结肠癌细胞凋亡作用的分子机理。方法: MTT比色法和细胞计数法测定细胞增殖活性和存活率;PI染色FCM检测细胞凋亡率;AO/EB染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态;DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞的基因DNA梯形条带图谱;Western Blot分析细胞PPARγ,NF-κB,Bcl-2和Bax的表达和活性。结果:MTT比色法测定显示:8-硝基白杨素抑制人结肠癌(HT-29)细胞增殖,呈浓度依赖性;其IC50值为1.78μM。细胞计数结果表明,8-硝基白杨素能显著抑制HT-29细胞生长。PI染色FCM分析、AO/EB染色荧光显微镜观察以及DNA琼脂糖凝胶电泳的结果证实:8-硝基白杨素具有诱导HT-29细胞凋亡作用。Western Blot分析发现8-硝基白杨素能显著上调HT-29细胞PPARγ和Bax蛋白表达,下调NF-κB及Bcl-2蛋白表达。PPARγ特异性阻断剂(GW9662)能部分拮抗8-硝基白杨素下调HT-29细胞Bcl-2蛋白表达作用。结论:1) 8-硝基白杨素具有抑制人结肠癌(HT-29)细胞增殖和生长作用。2) 8-硝基白杨素可诱导HT-29细胞凋亡作用。3) 8-硝基白杨素的体外抗人结肠癌作用与其活化PPARγ,抑制NF-κB活性,上调Bax蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达相关。

关键词：结肠癌白杨素 8-硝基白杨素凋亡过氧化物酶体增殖因子活化受体治疗作用

8-硝基白杨素对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

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国际病理科学与临床杂志 2007年第2期27卷 100-104,F0003页

作者：曾源陈忠东曹建国南华大学附属第一医院妇产科湖南衡阳421001 南华大学肿瘤研究所湖南衡阳421001

目的:观察8-硝基白杨素(8-NOChR)抑制体外培养人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导凋亡作用。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞系细胞。MTT比色法测定Hela细胞增殖活性。软琼脂培养克隆形成法检测Hela细胞集落形成能力。AO/EB染色荧光显微镜观察H... 详细信息

目的:观察8-硝基白杨素(8-NOChR)抑制体外培养人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导凋亡作用。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞系细胞。MTT比色法测定Hela细胞增殖活性。软琼脂培养克隆形成法检测Hela细胞集落形成能力。AO/EB染色荧光显微镜观察Hela细胞凋亡形态学改变。DNA凝胶电泳观察梯形DNA条带。结果:MTT比色测定显示,8-NOChR抑制Hela细胞增殖,呈剂量依赖性。软琼脂培养克隆形成法检测表明,8-NO-ChR显著抑制Hela细胞集落形成,呈剂量依赖性。AO/EB染色荧光显微镜观察发现,8-NOChR诱导Hela细胞呈现典型凋亡细胞形态特征。8-NOChR(30μmol/L)处理Hela细胞72 h,琼脂糖凝胶电泳出现“梯形”DNA条带。结论:8-NOChR具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导细胞凋亡作用。

关键词：宫颈癌白杨素 8-硝基白杨素细胞凋亡

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8-硝基白杨素的合成及其抗肿瘤作用

南华大学学报（医学版） 2004年第3期32卷 283-285,289页

作者：徐阳炎郑兴朱炳阳曹建国南华大学药物药理研究所湖南衡阳421001

目的　探讨 8-硝基白杨素的抗肿瘤活性。方法　荷Lewis肺癌雄性小鼠 5 0只 ,随机分为5组 (NS对照组 ,环磷酰胺组 ,低、中、高剂量 8-硝基白杨素组 ) ,每组 1 0只 ,均采用腹腔注射给药。末次给药 2 4h后 ,颈椎脱位处死小鼠 ,观察各组瘤... 详细信息

目的　探讨 8-硝基白杨素的抗肿瘤活性。方法　荷Lewis肺癌雄性小鼠 5 0只 ,随机分为5组 (NS对照组 ,环磷酰胺组 ,低、中、高剂量 8-硝基白杨素组 ) ,每组 1 0只 ,均采用腹腔注射给药。末次给药 2 4h后 ,颈椎脱位处死小鼠 ,观察各组瘤重减轻情况及转移结节数。结果　低、中、高剂量 8-硝基白杨素均能明显抑制肿瘤的生长和肿瘤转移结节的数 (阳性药对照组和各处理组与对照组相比 ,P均8-硝基白杨素与 1 0 0mg kg的环磷酰胺的抗肿瘤作用相当 (P >0 .0 5 )。结论　 8-硝基白杨素作为一种新黄酮衍生物 ,具有良好的抗肿瘤作用。

关键词： 8-硝基白杨素 Lewis肺癌治疗作用