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携带TSLC1基因的双靶向溶瘤腺病毒联合阿霉素对SMMC-7721肝癌细胞的杀伤作用

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中国细胞生物学学报 2013年第3期35卷 282-289页

作者：郭科妮卓玲燕刘涛李晓艳李阿荣王毅刚浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所杭州310018

研究携带TSLC1基因的溶瘤腺病毒(***-E1A(24)-TSLC1)联合化疗药物阿霉素(adriamycin,ADM)对SMMC-7721肝癌细胞的体外杀伤作用。实时定量PCR检测TSLC1在不同肝细胞中的表达情况;用荧光显微镜观察阿霉素、***-E1A(24)-TSLC1单独作用和两... 详细信息

研究携带TSLC1基因的溶瘤腺病毒(***-E1A(24)-TSLC1)联合化疗药物阿霉素(adriamycin,ADM)对SMMC-7721肝癌细胞的体外杀伤作用。实时定量PCR检测TSLC1在不同肝细胞中的表达情况;用荧光显微镜观察阿霉素、***-E1A(24)-TSLC1单独作用和两者联合作用的细胞形态学的变化;采用MTT法、结晶紫染色、Hoechst33342染色检测各处理组细胞的存活率和凋亡水平情况;通过Western blot检测TSLC1和E1A蛋白水平的表达。结果表明,联合应用***-E1A(24)-TSLC1和阿霉素的细胞凋亡现象比单独作用的效果显著,表明阿霉素能够增强携带TSLC1基因的溶瘤腺病毒对肝癌细胞SMMC-7721的杀伤作用,为肝癌治疗的临床应用奠定一定基础。

关键词： TSLC1 溶瘤腺病毒阿霉素 SMMC 7721

实时定量PCR检测氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721中CHOP和GRP78 mRNA表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2010年第5期36卷 847-850页

作者：刘颖孙世龙刘晓梅杜海英李鹏杜忠君孙磊李阳徐艳玲孙志伟吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室吉林长春130021 吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室吉林长春130021 首都医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室北京100054

目的:观察氯化镉(CdCl2)处理人肝癌SMMC-7721细胞系中CHOP和GRP78mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨氯化镉对肝癌细胞内质网应激的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721细胞为研究模型,细胞暴露于氯化镉浓度为0、5、10、20、30及40μmol·L-... 详细信息

目的:观察氯化镉(CdCl2)处理人肝癌SMMC-7721细胞系中CHOP和GRP78mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨氯化镉对肝癌细胞内质网应激的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721细胞为研究模型,细胞暴露于氯化镉浓度为0、5、10、20、30及40μmol·L-1的培养液中24h,0μmol·L-1组为对照组。采用SYBR荧光实时定量PCR法检测CHOP和GRP78mRNA表达,相对定量采用比较CT值法。结果:随着氯化镉剂量的增加,CHOPmRNA表达水平有逐渐增多的趋势,各组mRNA表达均高于对照组,其中10、20和40μmol·L-1组与对照组比较差异有显著性(P7721细胞中CHOP和GRP78mRNA表达增多。

关键词：氯化镉 SMMC 7721 CHOP 葡萄糖调节蛋白78

黄连素对SMMC-7721人肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响研究

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临床和实验医学杂志 2014年第9期13卷 716-719页

作者：王丽芳陈垦臧林泉张海涛杜侃广东药学院护理学院广东广州510310 广东药学院药科学院药理系广东广州510006

目的研究黄连素对SMMC-7721人肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响,为临床肝癌的治疗提供科学的参照。方法选取人的SMMC-7721型肝癌细胞,分别在加入500μM、250μM、125μM、62.5μM、31.25μM、0μM黄连素的培养液中进行体外培养。于0 h、24 ... 详细信息

目的研究黄连素对SMMC-7721人肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响,为临床肝癌的治疗提供科学的参照。方法选取人的SMMC-7721型肝癌细胞,分别在加入500μM、250μM、125μM、62.5μM、31.25μM、0μM黄连素的培养液中进行体外培养。于0 h、24 h、48 h、72 h时使用MTT方法对细胞活性进行测定,基于统计学处理方法,分析黄连素对SMMC-7721人肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响作用。结果黄连素对SMMC-7721人肝癌细胞的生长具有显著的抑制作用,且随着作用时间和作用浓度的增加抑制作用呈上升趋势,但黄连素不会影响SMMC-7721人肝癌细胞的复制增殖周期。结论黄连素对能够显著抑制SMMC-7721人肝癌细胞的生长,并诱导细胞的凋亡,作用程度与作用时间和浓度呈正相关,但对细胞的增殖周期没有影响。

关键词： SMMC - 7721 人肝癌细胞黄连素细胞凋亡细胞周期

聚焦超声对肝癌细胞SMMC 7721超微结构的影响

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临床超声医学杂志 2005年第3期7卷 145-147页

作者：张军杨祖奎王春毅杜永红胡凯王智彪四川达州市第二人民医院普外科 635000 重庆医科大学附属第一医院肝胆外科重庆医科大学医学超声工程研究所

目的观察聚焦超声对体外肝癌细胞SMMC7721超微结构的影响。方法0.8MHz聚焦超声照射体外培养的SMMC7721细胞25s,将照射后的细胞体外培养24h以后对存活贴壁的细胞进行电镜观察。结果部分照射后存活的细胞有超微结构的改变:线粒体肿胀、脂... 详细信息

目的观察聚焦超声对体外肝癌细胞SMMC7721超微结构的影响。方法0.8MHz聚焦超声照射体外培养的SMMC7721细胞25s,将照射后的细胞体外培养24h以后对存活贴壁的细胞进行电镜观察。结果部分照射后存活的细胞有超微结构的改变:线粒体肿胀、脂质沉积,粗面内质网扩张。结论0.8MHz聚焦超声照射体外肝癌细胞SMMC7721以后,大部分细胞死亡,存活的细胞中部分细胞有超微结构的改变。

关键词：聚焦超声肝癌肿瘤细胞 SMMC 7721 超微结构超声波治疗

蝎毒对人肝癌细胞(SMMC7721)和宫颈癌(Hela)细胞抑制作用的研究

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现代生物医学进展 2011年第23期11卷 4447-4450页

作者：彭岩臧师竹王亮栾兰李野辛毅张翠丽大连医科大学机能学实验室大连医科大学生物技术系辽宁大连116044

目的:探讨蝎毒粗粉及经初步纯化的蝎毒对人肝癌细胞(SMMC7721)和Hela细胞株的抑制作用。方法:以四甲基偶氮唑盐法(MTT),Western Blotting,免疫细胞化学以及荧光标记的方法,对人肝癌细胞(SMMC7721)和Hela细胞株的凋亡相关蛋白进行检测。... 详细信息

目的:探讨蝎毒粗粉及经初步纯化的蝎毒对人肝癌细胞(SMMC7721)和Hela细胞株的抑制作用。方法:以四甲基偶氮唑盐法(MTT),Western Blotting,免疫细胞化学以及荧光标记的方法,对人肝癌细胞(SMMC7721)和Hela细胞株的凋亡相关蛋白进行检测。结果:蝎毒粗毒及经初步纯化的蝎毒具有诱导SMMC7721和Hela凋亡的作用。结论:蝎毒粗毒及经初步纯化的蝎毒对人肝癌细胞(SMMC 7721)及Hela细胞的生长具有明显的抑制作用。

关键词： SMMC 7721 Hela 蝎毒肿瘤凋亡

V-ATPase V1G1亚基在肝癌中的表达及其功能的研究

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V-ATPase V1G1亚基在肝癌中的表达及其功能的研究

作者：朱璇广西医科大学

学位级别：硕士

背景及目的:在全球常见的癌症中,肝癌由于其进展快,预后差,且无论其近期治疗方案和早期鉴定进展如何,仍然是全球癌症死亡的第三大原因。肝癌的发病机制非常复杂,包括病毒感染、黄曲霉毒素摄入、基因遗传、饮水、吸烟及饮酒感染等多种因... 详细信息

背景及目的:在全球常见的癌症中,肝癌由于其进展快,预后差,且无论其近期治疗方案和早期鉴定进展如何,仍然是全球癌症死亡的第三大原因。肝癌的发病机制非常复杂,包括病毒感染、黄曲霉毒素摄入、基因遗传、饮水、吸烟及饮酒感染等多种因素,迄今为止,仍未能完全阐明。并且,虽然已经发展了多种颇有疗效的治疗方案,但还没有任何一个方案可以满足肝癌的治疗。V-ATPase在真核细胞中广泛表达,是由14个亚基组成的质子泵,只有V0和V1亚单位相结合才能发挥其蛋白酶的作用。V-ATPase通过分解ATP获得能量,主动转运H+,其作用不仅包括维持细胞内外p H值的平衡、受体介导的内吞作用、细胞内靶向溶酶体酶、蛋白加工和脱粒及小分子的双向转运等,还是肿瘤微环境中重要的调节器,能够将癌细胞内多余的H+泵出胞外或管泡中,以维持胞质和细胞器p H值的稳定。本文研究目的是探讨V-ATPase亚基之一ATP6V1G1在肝癌组织和肝癌细胞中的表达水平,明确ATP6V1G1过表达后对肝癌细胞生物学功能的影响。方法:本研究第一部分通过q RT-PCR和免疫组化检测人肝癌组织标本及配对的癌旁组织标本中ATP6V1G1的m RNA表达情况,并结合临床资料分析ATP6V1G1的表达与相关临床病理特征之间的关系;同时运用q RT-PCR检测SMMC-7721肝癌细胞株、HCC-LM3肝癌细胞株、L02正常肝细胞株中ATP6V1G1的m RNA表达水平。第二部分构建ATP6V1G1过表达的SMMC-7721、HCC-LM3肝癌细胞稳转株,每种细胞各分为对照组、病毒空载组、过表达组三组,采用q RT-PCR及Western-blot分别检测三组细胞中ATP6V1G1的m RNA表达水平和Flag蛋白的表达情况,运用细胞单克隆形成实验检测细胞的克隆能力,并进行CCK8实验检测细胞的增殖能力,利用Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭情况,最后通过流式细胞周期实验检测各组细胞的周期情况。采用SPSS16.0统计学软件进行统计分析,P7721和HCC-LM3进行q RT-PCR检测发现,三组间均有显著的统计学差异(P7721和HCC-LM3分别是正常肝细胞株L02的2.63倍和5.03倍,表达水平明显升高。2.7721和LM3中,过表达组的m RNA表达量均显著高于对照组和病毒空载组(均为P7721、LM3肝癌细胞稳转株构建成功;过表达组的细胞克隆数量均明显高于其他两组(P7721细胞阻滞于G2/M期,即细胞分裂能力增加,并减短S期,促进细胞的生长代谢,同时使LM3的G0/G1期阻滞,S期减短,发挥促癌作用,不同侵袭性的肝癌细胞中,ATP6V1G1过表达对细胞周期影响的具体机制具有一定的差异。结论:***6V1G1在肝癌组织免疫组化中的表达水平升高,且其高表达与肿瘤生长的直径和包膜有无之间密切相关;ATP6V1G1在肝癌细胞中的表达水平显著升高,且随着肿瘤细胞侵袭性的增加而增加;提示其表达水平可成为评估肝癌患者发病及转移风险的潜在生物学指标;***6V1G1过表达对肝癌细胞的单克隆形成能力、细胞增殖能力、细胞迁移及侵袭能力均有促进作用,表明ATP6V1G1参与到肝癌细胞的生长发展以及转移侵袭等各个环节中并发挥促癌作用,为肝癌的发生发展提供了理论依据。本研究提示我们V-ATPase可以成为颇有前景的抗肝癌治疗的新型靶点。

关键词：肝癌 V-ATPase ATP6V1G1 过表达 7721 LM3