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5-ht2a受体在尼可刹米增强新生大鼠延髓脑片呼吸放电中的作用

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生理学报 2008年第2期60卷 216-220页

作者：千智斌吴中海南方医科大学生理学教研室

本文旨在探讨中枢呼吸兴奋剂尼可刹米对新生大鼠基本节律性呼吸的产生和调节的影响及5-ht2a受体在其中的作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,含面神经后核内侧区（the medial region of the nucleus retrofacialis,mNRF）并保留舌下神... 详细信息

本文旨在探讨中枢呼吸兴奋剂尼可刹米对新生大鼠基本节律性呼吸的产生和调节的影响及5-ht2a受体在其中的作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,含面神经后核内侧区（the medial region of the nucleus retrofacialis,mNRF）并保留舌下神经根,灌流改良Kreb＇s液（modified Kreb＇s solution,MKS）,记录舌下神经根呼吸相关节律性放电活动（respiratory-re-lated rhythmic discharge activity,RRDA）,观察不同浓度尼可刹米、5-ht2a受体特异激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯基丙烷[1-（2,5-dimethoxy-4-iodophenyl）-2-aminopropane,DOI]、5-ht2a受体特异拮抗剂酮舍林（ketanserine）以及联合使用尼可刹米和酮舍林对舌下神经根RRDA的影响。结果显示,尼可刹米在0.5-7μg/mL时对延髓脑片RRDA有兴奋作用,在5μg/mL时对吸气时程（inspiratory time,TI）、放电积分幅度（integral amplitude,IA）、呼吸周期（respiratory cycle,RC）等呼吸指标综合效果最显著。DOI明显延长TI、增强IA、缩短RC,对RRDA有兴奋作用。酮舍林明显缩短TI、减弱IA、延长RC,对RRDA有抑制作用。联合使用DOI和酮舍林对RRDA无明显作用。酮舍林可完全阻断尼可刹米对RC的作用,部分阻断尼可刹米对IA的作用,对尼可刹米引起的TI变化无明显影响。结果提示,尼可刹米增强新生大鼠离体延髓脑片舌下神经根RRDA,5-ht2a受体可能是尼可刹米作用途径之一。

关键词：面神经后核内侧区尼可刹米 5-ht2a受体延髓脑片

脊髓5-ht2a受体对大鼠慢性内脏痛敏反应及其电针治疗的影响

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中国药理学通报 2011年第9期27卷 1263-1266页

作者：焦海霞刘庆林春陈瑜陈爱琴福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系神经生物学研究中心疼痛研究室福建福州350004 湖北民族学院医学院湖北恩施445000

目的探讨脊髓5-羟色胺2A(5-ht2a)受体对大鼠慢性内脏痛敏反应及其电针治疗的影响。方法 SD大鼠分为正常对照组,慢性内脏痛模型组、模型加溶媒对照组、模型加酮色林组、模型加电针组、模型加针药合用组等6组。慢性内脏痛模型采用对新生... 详细信息

目的探讨脊髓5-羟色胺2A(5-ht2a)受体对大鼠慢性内脏痛敏反应及其电针治疗的影响。方法 SD大鼠分为正常对照组,慢性内脏痛模型组、模型加溶媒对照组、模型加酮色林组、模型加电针组、模型加针药合用组等6组。慢性内脏痛模型采用对新生幼鼠给予结直肠扩张刺激方法制备;电针选取双侧"足三里"和"上巨虚",疏密波,强度1 mA,持续30 min,隔日1次,持续4次。记录各组大鼠在结直肠扩张刺激诱导下腹壁撤退反射评分和腹外斜肌放电幅值。结果①在20和40mmHg压力刺激下,模型加酮色林组大鼠腹壁撤退反射评分高于模型组(P5,P5,P5)。结论脊髓5-ht2a受体能够降低慢性内脏痛大鼠的痛觉敏化,但在电针治疗慢性内脏痛敏反应中可能不起主要作用。

关键词：慢性内脏痛电针 5-ht2a受体肌电脊髓镇痛

跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑和中脑导水管周围灰质5-ht1A受体、5-ht2a受体蛋白表达的影响

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中国应用生理学杂志 2021年第3期37卷 272-275页

作者：张换鸽胡柏平重庆市体育科学研究所国家体育总局体质评价与运动机能监控重点实验室重庆401331 陕西师范大学体育学院西安710062

目的:探讨跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑(MH)和中脑导水管周围灰质(PAG)5-ht1A受体、5-ht2a受体蛋白表达的影响,为研究运动对攻击行为改善的神经生物学机制提供实验基础。方法:3月龄雄性SD大鼠40只,体重160~180 g,随机分为4组:安静... 详细信息

目的:探讨跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑(MH)和中脑导水管周围灰质(PAG)5-ht1A受体、5-ht2a受体蛋白表达的影响,为研究运动对攻击行为改善的神经生物学机制提供实验基础。方法:3月龄雄性SD大鼠40只,体重160~180 g,随机分为4组:安静组(A)、攻击模型组(G)、攻击跑台组(GP)、入侵组(R)。A组和R组分别群居饲养,其中R组在建造攻击模型时作为外来入侵鼠,从开始造模到实验结束,入侵G组和GP组诱导攻击行为发生,在结果中不作处理。G组和GP组单笼饲养一周后,采用单笼喂养+入侵鼠入侵建造攻击模型,大鼠攻击模型建立后,GP组进行跑台训练干预8周,每周5 d,每天30 min,17:00~20:00进行训练,训练负荷按照适应性低强度(15 m/min×10 min)→大强度(20 m/min×10 min)→恢复性低强度(15 m/min×10 min)这三个阶段连续完成,训练中的大强度每两周增加一次,每次增加5 m/min,直到强度达到30 m/min不再增加。免疫组化检测MH和PAG中5-ht1A受体、5-ht2a受体蛋白表达的变化。结果:与A组相比,G组MH和PAG中5-ht1A受体蛋白表达均明显降低(P5),5-ht2a受体蛋白表达在MH和PAG中均明显增加(P5)。与G组相比,GP组MH中5-ht1A受体蛋白表达明显增加(P5),PAG中5-ht1A受体蛋白表达差异无显著性(P>0.05),5-ht2a受体蛋白表达在MH和PAG中均明显降低(P5)。结论:跑台运动使攻击行为大鼠MH中5-ht1A受体蛋白表达增高,MH和PAG中5-ht2a受体蛋白表达降低。

关键词：攻击行为跑台运动 5-ht1A受体 5-ht2a受体大鼠

阻断炎症局部5-ht2a受体对大鼠脊髓背角一氧化氮合酶表达的影响

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中国疼痛医学杂志 2008年第2期14卷 96-100页

作者：黄浩蔡巧燕林玮洪炎国生命科学学院福建省发育和神经生物学重点实验室福州350108

目的:研究阻断局部炎症组织中的5-ht2a受体后,脊髓背角一氧化氮合酶的变化,以了解外周5-ht2a受体在慢性炎症维持中的作用。方法:给大鼠足掌皮下注射2%角叉菜胶(carrageenan),1h后注射5-ht2a受体拮抗剂酮舍林(ketanserin)20μg。24h于大... 详细信息

目的:研究阻断局部炎症组织中的5-ht2a受体后,脊髓背角一氧化氮合酶的变化,以了解外周5-ht2a受体在慢性炎症维持中的作用。方法:给大鼠足掌皮下注射2%角叉菜胶(carrageenan),1h后注射5-ht2a受体拮抗剂酮舍林(ketanserin)20μg。24h于大鼠同一位点注射1%福尔马林(formalin)。25h灌流、取材,进行NADPH-d组织化学实验。结果:注射角叉菜胶和福尔马林后,双侧脊髓背角浅层的NADPH-d阳性神经元数目均增多,以同侧更为显著。给予酮舍林后明显抑制这种增加。外周阿片受体拮抗剂纳洛酮(naloxone methiodide)可使酮舍林对炎症引起NADPH-d阳性神经元的抑制作用完全消失。结论:阻断外周5-ht2a受体能抑制角叉菜胶和福尔马林炎性痛刺激引起脊髓背角神经元的活化,这种抑制作用可能是通过激活阿片镇痛机制,继而抑制一氧化氮信号通路实现的。

关键词： 5-ht2a受体福尔马林炎性痛觉过敏脊髓一氧化氮合酶内源性阿片镇痛

大鼠脑干前庭核5-ht2a受体mRNA表达水平在晕船适应中的变化

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中国职业医学 2007年第3期34卷 192-194页

作者：郑璇马文领郭俊生陈新民第二军医大学海军医学系军队卫生学教研室上海200433

目的探讨晕船适应过程中大鼠脑干前庭核5-ht2a受体 mRNA的变化。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照组、晕船刺激1d组、3d组、7d组和14d组,利用晕船模拟装置对大鼠进行晕船刺激,根据大鼠脑图谱对前庭核进行取材,抽提总RNA,反转录后进行... 详细信息

目的探讨晕船适应过程中大鼠脑干前庭核5-ht2a受体 mRNA的变化。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照组、晕船刺激1d组、3d组、7d组和14d组,利用晕船模拟装置对大鼠进行晕船刺激,根据大鼠脑图谱对前庭核进行取材,抽提总RNA,反转录后进行实时定量聚合酶链反应检测。结果晕船刺激1d、3d、7d、14d的相对表达量分别为对照组的3.35、3.54、1.23、1.02倍。晕船刺激第1天、第3天5-ht2a受体 mRNA显著升高(P5-ht2a受体 mRNA升高。

关键词：晕船 5-ht2a受体大鼠

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5-ht2a受体拮抗剂的筛选与药效学评价

中国药理学与毒理学杂志 2023年第7期37卷 545-545页

作者：赵玉俞纲苏瑞斌军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室

目的基于一系列新结构化合物筛选高活性5-ht2a受体拮抗剂，开展抗幻觉药效学评价，并与阳性对照药匹莫范色林(pimavanserin)进行比较。方法 (1)初筛：通过5-ht2a-HEK-293细胞磷酸肌醇IP1检测实验和DOM诱导甩头实验筛选出具有5-ht2a受... 详细信息

目的基于一系列新结构化合物筛选高活性5-ht2a受体拮抗剂，开展抗幻觉药效学评价，并与阳性对照药匹莫范色林(pimavanserin)进行比较。方法 (1)初筛：通过5-ht2a-HEK-293细胞磷酸肌醇IP1检测实验和DOM诱导甩头实验筛选出具有5-ht2a受体拮抗活性的化合物。(2)药效学评价：采用帕金森诱发甩头模型和药物辨别模型进一步评价目标化合物的拮抗活性。结果 (1) IP1实验结果表明，26个化合物中5个化合物对5-ht2a受体表现出较强的拮抗活性，且此5个化合物均可完全抑制DOM诱导甩头行为。其中化合物0946在抑制DOM甩头量效研究中表现出最强的拮抗活性，ID50为0.0019 mg·kg-1，活性相比匹莫范色林(ID50为0.2005 mg·kg-1)提高约100倍。(2)在帕金森诱发甩头实验中，匹莫范色林的ID50为0.1491 mg·kg-1，化合物0946的ID50=0.0024 mg·kg-1，活性提高约60倍；在药物辨别模型中，匹莫范色林3 mg·kg-1使DOM辨别正确率降至32.54%,0946 0.3 mg·kg-1使正确率降至7.30%。结论化合物0946对5-ht2a受体有拮抗作用，受体和整体水平活性均优于阳性对照药匹莫范色林。基于化合物0946有望研发出新的具有抗幻觉效应的精神疾病治疗药物。

关键词： 5-ht2a受体拮抗活性匹莫范色林

5-ht2aR-783A/G遗传多态性对5-ht2a受体基因转录活性的影响

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5-HT2AR-783A/G遗传多态性对5-HT2A受体基因转录活性的影响

作者：胡丽丽中南大学

学位级别：硕士

背景：非典型性抗精神病药物在全球广泛使用,5-ht2a受体为非典型性抗精神病药物（APS）的主要作用耙点。5-ht2aR基因调控区存在-1438A/G多态性,证明该突变A等位基因可显著提高5-ht2aR mRNA的转录活性,且证明-1438G／G与精神分裂症患者脑... 详细信息

背景：非典型性抗精神病药物在全球广泛使用,5-ht2a受体为非典型性抗精神病药物（APS）的主要作用耙点。5-ht2aR基因调控区存在-1438A/G多态性,证明该突变A等位基因可显著提高5-ht2aR mRNA的转录活性,且证明-1438G／G与精神分裂症患者脑中5-ht2aR受体降低或缺失有关。在5-ht2aR基因的高活性调控区存在-783A/G突变,但至今,国内外仍未见该基因多态对5-ht2aR基因转录活性影响的报道。目的：本课题通过分子生物学技术,建立5-ht2aR -783A/G野生型和突变等位基因的TK-PGL4.17重组试验质粒,在细胞水平研究5-ht2aR-783A/G的突变对5-ht2aR基因转录调控的影响。方法：构建TK-PGL4.17-5-ht2aR-783AA和TK-PGL4.17-5-ht2aR -783GG的萤火虫荧光素酶报告基因重组试验质粒,海肾荧光素酶报告基因（PRL-TK）作为内参质粒校正转染效率,试验质粒与内参质粒共转染Hela细胞和人神经母细胞瘤细胞（IMR-32）,转染48小时后裂解细胞,用双报告基因荧光检测试剂盒在自发光检测仪上检测荧光素酶活性,以萤火虫荧光与海肾荧光的比值反应不同基因型插入片断的转录活性,并比较组间差异。结果：在Hela细胞系的研究表明5-ht2aR -783A/G基因多态性显著影响5-ht2aR基因的转录活性,-783A／A野生型对转录活性的影响（101.60±39.24）高于-783G／G突变型（46.59±25.37,P＜0.05）;而在未表达5-ht2aR的细胞系IMR-32上-783A/A野生型（7.57±3.32）和-783G／G突变型（6.38±4.37）未检测到对转录活性的差异（P＞0.05）。结论：本课题首次发现了5-ht2aR-783A/G单核苷酸多态对5-ht2aR转录活性存在影响,为精神分裂症的功能性基因型。

关键词： -783A/G基因多态性 5-ht2a受体 HSV-TK启动子精神分裂症

5-ht2a受体Cx43信号通路介导镜像痛敏的细胞与分子机制

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5-HT2A受体Cx43信号通路介导镜像痛敏的细胞与分子机制

作者：王江博延安大学

学位级别：硕士

疼痛是当前严重困扰人类健康的生物医学难题之一,已被广泛认同为“一种疾病”。疼痛诱发因素多样化,如机体组织损伤、炎症、情绪失衡、运动感觉障碍、遗传突变等均可改变痛觉感受、传递、整合的个体自我保护和内在适应的可塑性,所呈现... 详细信息

疼痛是当前严重困扰人类健康的生物医学难题之一,已被广泛认同为“一种疾病”。疼痛诱发因素多样化,如机体组织损伤、炎症、情绪失衡、运动感觉障碍、遗传突变等均可改变痛觉感受、传递、整合的个体自我保护和内在适应的可塑性,所呈现的持续性、慢性化、个性化在多层面制约着临床预防、诊断、治疗策略的有效选择。疼痛表症多样化,如除在躯体损伤部位表现持续自发痛、原发性痛敏和损伤部位周围区域出现继发性痛敏外,在损伤部位同体节的对侧对称部位亦出现所谓“镜像痛敏”。然而,迅猛发展、高潮迭起的疼痛调控研究仍缺乏对诸如镜像痛敏等复杂表症发生、发展和维持机制的系统理解。多方证据表明,5-ht2a受体、缝隙连接、神经胶质细胞均可通过不同途径参与疼痛调控,但有关其互作机制尚待阐明。本文拟基于前期模拟蝎蛰致痛的自然临床现象而构建的实验性镜像痛敏动物模型,经大鼠足底皮下注射东亚钳蝎蝎毒主要成分——蝎毒素多肽类特异性钠通道调制剂Bm K I,采用行为学、实时定量PCR、免疫印迹和免疫荧光等实验技术,探索外周和中枢5-ht2a受体、连接蛋白Cx43与镜像痛敏发生、发展和维持的相关性,解析5-ht2a-Cx43信号通路调控镜像痛敏的分子与细胞机制。主要结果如下:（1）5-ht2a受体拮抗剂与缝隙连接阻断剂对Bm K I诱发疼痛行为的协同抑制:经大鼠单侧足底皮下注射Bm K I,可诱发持续的自发痛、注射同侧的热痛敏和机械痛敏和对侧镜像机械痛敏。单独预先鞘内注射5-ht2a受体拮抗剂酮色林或缝隙连接阻断剂Carbenoxolone（CBX）均可显著抑制Bm K I诱致的自发痛和镜像机械痛敏,同时注射酮色林与CBX呈现显著的协同抑制作用增强。这些结果表明,脊髓和背根神经节5-ht2a与Cx43均参与了Bm K I诱致疼痛发生、发展和维持的调控,二者可能存在表达分布和细胞信号通路的功能联系。（2）背根神经节5-ht2a–Cx43差异表达参与镜像痛敏的调控:q RT-PCR和免疫印迹定量结果显示,Bm K I诱致背根神经节5-ht2a m RNA在同侧轻微降低,而在对侧显著增高;Cx43 m RNA在双侧均上调;卫星胶质细胞标记物GFAP蛋白水平在同侧上调而对侧下调;小胶质细胞标记物Iba1蛋白双侧均上调。免疫荧光双标结果进一步验明,背根神经节5-ht2a受体与Cx43有共标。该受体在GFAP、Iba1阳性卫星胶质细胞、大直径神经元上大量表达,而非肽能神经元表达上少量表达。Bm K I是的5-ht2a受体与这些标记蛋白的共标率显著升高。预先鞘内注射5-ht2a受体阻断剂酮色林则逆转上述变化。这些结果表明,背根神经节5-ht2a受体呈现细胞多样性的差异表达分布。疼痛刺激条件下,5-ht2a-Cx43信号通路在持续外周神经传入的传递整合可能具有重要调控作用。（3）脊髓5-ht2a受体和Cx43差异表达参与镜像痛敏的调控:与背根神经节比较,脊髓5-ht2a与Cx43表达呈现较大差异变化。免疫荧光检测验明,5-ht2a神经元与广泛共存,与星形胶质细胞标记物GFAP、Cx43均有共标于脊髓深层,与小胶质细胞标记物OX42则共标较少。定量结果显示,Bm K I注射后脊髓双侧Cx43蛋白与m RNA、胶质细胞标记蛋白GFAP和Iba1均呈增高趋势。比较发现,Bm K I注射侧与对侧的这些变化存在时间点的差异或互补。预先鞘内给药5-ht2a阻断剂酮色林则逆转上述表达变化。这些结果表明,5-ht2a–Cx43在背根神经节和脊髓存在显著的功能调控差异。脊髓胶质5-ht2a与Cx43的双侧差异表达与镜像痛敏的细胞网络、突触整合功能调控偶联,而调控Cx43的开放和蛋白表达量的变化是5-ht2a本身及其信号转导通路参与镜像痛敏调控的重要机制之一。（4）5-ht2a-Cx43细胞信号转导通路的活细胞成像研究:获得急性分离并传代培养的脊髓星形胶质细胞,用活细胞激光共聚焦显微成像技术,验明递质去5羟色胺可激活胶质细胞缝隙连接通道开放而使得胞外荧光黄染料进入细胞内,而该效应可分别被5-ht2a R拮抗剂酮色林或缝隙连接阻断剂CBX拮抗。结果表明,5-ht2a R-Cx43细胞信号转导通路直接介导了胶质细胞5-羟色胺的疼痛应激响应。综上,脊髓、背根神经节胶质细胞5-ht2a R-Cx43信号通路在机体损伤侧与对侧呈现不对称的时空差异性表达变化,参与镜像痛敏发生、发展和维持的调控。研究结果强力推进了关于外周、中枢的缝隙连接通道开放与关闭、表达变化相关膜受体差异调控机制的新理解,为疼痛,尤其是镜像痛敏,提供了新的诊治策略。

关键词：脊髓背根神经节 5-ht2a受体 Cx43 镜像痛敏

电针不同经穴对IBS模型大鼠ACC神经兀放电及结肠5-ht2a受体影响研究

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电针不同经穴对IBS模型大鼠ACC神经兀放电及结肠5-HT2A受体影响研...

作者：周瑾北京中医药大学

学位级别：硕士

目的本实验以肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)模型大鼠为研究媒介,探究针刺不同经穴对前扣带回皮层(Anterior Cingulated Cortex,ACC)神经元放电的影响,并从靶器官痛相关物质变化角度揭示不同穴位干预的部分分子机制及穴位... 详细信息

目的本实验以肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)模型大鼠为研究媒介,探究针刺不同经穴对前扣带回皮层(Anterior Cingulated Cortex,ACC)神经元放电的影响,并从靶器官痛相关物质变化角度揭示不同穴位干预的部分分子机制及穴位效应差异的特异性规律。方法采用新生期母婴分离和醋酸灌肠并在后期进行结直肠球囊扩张刺激法联合制备肠易激综合征大鼠模型。分为空白对照组、模型组、内关穴组、足三里穴组。空白对照组和模型组不做任何处理,内关穴组和足三里穴组进行电针治疗。采用腹部回撤反射及高架十字迷宫实验评价IBS模型大鼠的肠道敏感性和情绪心理变化及针刺不同穴位的干预效应。并采用免疫组织化学方法检测大鼠结肠组织5-ht2a受体的免疫反应物的表达;采用在体神经元单位放电多通道同步记录技术,记录前扣带回皮层神经元放电变化;结果1.电针不同经穴对IBS模型肠道敏感性的影响腹部回撤反射:与空白对照组相比,模型组大鼠腹部回撤反射潜伏期缩短(P5)。与模型组相比,内关穴组、足三里穴组的潜伏期延长(P5,P5,P5)。2.电针不同经穴对IBS模型大鼠情绪心理变化的影响高架十字迷宫:与空白对照组相比,模型组进入开放臂次数百分比减少(P5),总距离减少(P5),内关穴组开放臂停留时间百分比减少(P5)。3.电针不同经穴对IBS模型大鼠结肠组织5-ht2a受体免疫反应物阳性表达的影响5-ht2a受体表达:与空白对照组相比,模型组、内关穴组、足三里穴组的5-ht2a受体免疫反应物阳性的表达增强(P5-ht2a受体免疫反应物阳性表达减弱(P5-ht2a受体免疫反应物阳性表达减弱(P5)。4.电针不同经穴对IBS模型大鼠ACC神经元放电频率的影响Unit A类神经元:与空白对照组相比,模型组放电频率增加(P5);与模型组相比,内关穴组、足三里穴组放电频率减少(P5)。Unit B类神经元:与空白对照组相比,模型组放电频率减少(P5);与模型组相比,足三里穴组放电频率增加(P5)。结论1.IBS模型大鼠内脏疼痛敏感性增高,情绪心理行为异常改变,符合IBS病理特征,表明母子分离加醋酸灌肠结合结直肠球囊扩张刺激可以成功制备IBS大鼠模型。2.针刺内关穴、足三里穴可降低IBS模型大鼠肠道敏感性,缓解躯体疼痛症状,且足三里穴优于内关穴。针刺可抑制5-ht2a受体免疫反应物的异常表达,参与疼痛的调节。3.经穴效应具有特异性,足阳明胃经足三里穴与手厥阴心包经内关穴干预IBS模型大鼠的效应不同。足阳明胃经的对胃肠道功能的影响效应明显,表明足三里穴的治疗效应具有特异性。4.内关穴、足三里穴对A类神经元的放电频率均有抑制作用,内关穴的抑制作用更明显。足三里穴对B类神经元放电频率有明显兴奋作用。这就表明经穴效应与ACC脑区不同类别的神经元作用特性之间存在一定的联系。但深入的机制还需要从神经元的功能分类进一步深入分析研究。

关键词：肠易激综合征多通道记录脑肠轴前扣带回神经电生理 5-ht2a受体