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电针抗吗啡戒断后焦虑的中枢5-ht1a受体机理研究

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电针抗吗啡戒断后焦虑的中枢5-HT1A受体机理研究

作者：孟都成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究针刺对吗啡戒断后焦虑小鼠的中枢5-ht含量及其1A受体水平的影响。以此探讨针刺抗吗啡戒断后焦虑的中枢5-ht受体机理,为临床上针刺防治毒瘾戒断后复吸提供科学实验依据。方法:以昆明种小鼠为实验对象,建立吗啡依赖戒断小鼠,将... 详细信息

目的:研究针刺对吗啡戒断后焦虑小鼠的中枢5-ht含量及其1A受体水平的影响。以此探讨针刺抗吗啡戒断后焦虑的中枢5-ht受体机理,为临床上针刺防治毒瘾戒断后复吸提供科学实验依据。方法:以昆明种小鼠为实验对象,建立吗啡依赖戒断小鼠,将吗啡戒断小鼠随机分为模型组和电针组。选用“百会”和“三阴交”穴进行电针治疗,每天1次,每次15分钟。采用高架十字迷宫观察电针治疗对吗啡戒断后焦虑小鼠行为学的影响;运用免疫组织化学法结合计算机图像分析观察电针对吗啡戒断后焦虑小鼠中缝核、海马、杏仁核、前额皮质5-ht含量和5-ht受体含量的影响。结果:1、电针治疗后,电针组小鼠在开臂滞留时间百分比(0.36±0.07,OT%)和进入开臂次数百分比(0.37±0.05,OE%)较模型组(0.22±0.05,OT%;0.24±0.03,OE%)明显增加,经统计学比较,有极显著性差异(P＜0.01),与空白组(0.40±0.06,OT%;0.46±0.05,OE%)相比,无统计学差异;2、电针组与模型组相比较,电针组中缝核、前额皮质神经元内5-ht的光密度(OD)值明显增高、灰度值明显降低,均具有显著性差异(P＜0.01,或P＜0.05);与空白组比较,无明显差异(P＞0.05)。而在杏仁核和海马区各组间5-ht的OD值和灰度值比较均尚未见明显差异(P＞0.05)。3、电针组与模型组相比较,电针组杏仁核、中缝核和前额皮质神经元5-ht受体的OD值明显升高、灰度值明显降低,均具有显著性差异(P＜0.01,或P＜0.05);与空白组比较,无显著差异(P＞0.05)。而各组海马神经元5-ht(1A)受体的OD值和灰度值比较均未见显著性差异(P＞0.05)。结论:1、电针具有抗吗啡戒断后焦虑效应;2、电针抗吗啡戒断后焦虑效应可能与抑制中缝核5-ht能神经元释放5-ht有关;3、电针抗吗啡戒断后焦虑效应可能与提高中缝核、杏仁核、前额皮质5-ht受体水平有关。

关键词：吗啡戒断焦虑电针 5-ht 5-ht1a受体免疫组化

5-ht1a受体对癫痫伴发抑郁的影响及神经保护的研究

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5-HT1A受体对癫痫伴发抑郁的影响及神经保护的研究

作者：陶琳山西医科大学

学位级别：硕士

研究背景：癫痫是神经系统常见疾病之一,抑郁是癫痫病人常伴的心理障碍,文献统计20-55%的癫痫病人合并抑郁，5羟色胺与癫痫和抑郁发病均有关系, 5-ht是神经系统的重要神经递质,参与人类的感觉、运动等许多生理过程,其中3种,5-ht1a,... 详细信息

研究背景：癫痫是神经系统常见疾病之一,抑郁是癫痫病人常伴的心理障碍,文献统计20-55%的癫痫病人合并抑郁，5羟色胺与癫痫和抑郁发病均有关系, 5-ht是神经系统的重要神经递质,参与人类的感觉、运动等许多生理过程,其中3种,5-ht1a,5-ht2C与5-ht7被研究与癫痫有关, 5-ht1a受体是目前被认为与抑郁最有关的受体之一。Maris等人在海人酸大鼠模型中证实5-ht1a激动剂8-OH-DPAT可以显著延长癫痫发作的潜伏期。对5-ht1a受体与惊厥控制的研究较多,但结果不一,可能与选取的动物模型有关。氯化锂匹罗卡品癫痫大鼠模型是国际通用的、理想的颞叶癫痫模型。病理改变为海马神经元脱失、胶质细胞增生。但目前尚未见到文献报道用8-OH-DPAT在氯化锂匹罗卡品模型中进行海马等边缘系统脑区的神经元凋亡、胶质细胞增生的研究，本文旨在通过5-ht1a受体激动剂的干预是否可以影响神经元凋亡、胶质细胞增生，从而进一步明确5-ht1a受体激动剂在癫痫发病机制中的作用，为癫痫伴发抑郁的治疗提供实验依据。目的：通过建立氯化锂-匹罗卡品癫痫伴发抑郁的模型试验，观察5-ht1a受体激动剂8-OH-DPAT对大鼠的脑电图、自发性癫痫的发作次数、海马的神经元丢失及胶质细胞增生的影响;通过强迫游泳，开放视野的行为学方法、荧光定量PCR方法测定5-ht1a受体表达量来评定其抗抑郁的效果。方法：1)建立癫痫伴发抑郁大鼠模型，雌性SD大鼠122只，给予氯化锂-匹罗卡品，诱发大鼠癫痫持续状态，终止发作后存活且状态良好的大鼠出现自发性癫痫，经过抑郁评定指标视为造模成功;2)将造模成功的大鼠随机分为5组：生理盐水组，模型组，药物干预组为卡马西平组单用组，卡马西平分别添加低、高剂量8-OH-DPAT组。分别给予相应药物，通过大鼠的脑电活动、癫痫自发性发作次数、尼氏染色及胶质纤维酸性蛋白免疫组化的方法观察抗癫痫的疗效;通过强迫游泳，开放视野的行为学方法、荧光定量PCR方法测定5-ht1a受体表达量来评定抗抑郁的效果。结果（1）造模过程中，除生理盐水组的6只大鼠之外，其余116只大鼠均诱发出癫痫持续状态，存活且状态良好者112只，出现自发性癫痫者95只。行为学上表现为：出现以口咽自动症为主的复杂部分发作，发展为强直阵挛发作，癫痫持续状态一小时后给与安定中止发作;两天后进入静止期，两周左右发展为反复自发发作。经过强迫游泳和敞箱试验评定抑郁，实验中模型对照组大鼠毛发失去光泽，反应迟钝，活动减少，在规定时间内水平活动、垂直活动明显减少，中央格停留时间延长，情绪性行为评分减低，不动时间延长，癫痫伴发抑郁大鼠造模成功率为25%（2）脑电图及自发性发作：匹罗卡品组、卡马西平组出现阵发的多棘波，后者较前者波幅压低，8-OH-DPAT组散在出现单个棘波或尖波，且波幅明显降低。给药后一周内发作次数：治疗组与模型组比较自发性癫痫发作次数减少，有统计学意义（P＜0.05），高剂量组与其它两治疗组比较大鼠的发作频率明显减少（P＜0.05）。（3）尼氏染色的表达结果：模型组海马区神经元存活较少，尼氏体减少，其它各组与之比较，治疗组神经元损伤均有恢复，具有统计学意义（P＜0.05），治疗组神经元数从高到低依次是高剂量组＞低剂量组＞卡马西平组，低剂量组与高剂量组有明显差异（P＜0.05）。（4）光镜下GFAP的表达结果：免疫组化阳性细胞胞质及突起呈棕黄色，生理盐水对照组胞体相对比较少，染色较淡，模型组平均光密度值最大，药物干预组较模型组均有显著减少（P＜0.05），从高到低依次为：CBZ组＞低剂量＞高剂量组,且高剂量组较低剂量组相比，有统计学意义（P＜0.05）。（5）开放视野、强迫游泳实验：与模型组比较，CBZ组的各项抑郁指标无明显变化，其余两个干预组的抑郁情况均有改善，高剂量组较低剂量比较，具有统计学意义（P＜0.05）。（6）荧光定量PCR结果：NS组5-ht1a的基因表达量最高，PILO组5-ht1a的基因表达量最少，高剂量组5-ht1a的基因表达量高于低剂量组，具有统计学意义（P＜0.05）。结论（1）本实验建立氯化锂-匹罗卡品发作形式很接近人类慢性颞叶癫痫特征，反复出现癫痫自发发作，与人类抑郁症中慢性、低水平的应激源促进抑郁症的发生及发展的机制更为接近，能较好地模拟人类癫痫伴发抑郁的状态，是进行癫痫伴发抑郁研究的一个较为理想的动物模型。（2）8-OH-DPAT可以抑制大鼠的痫性放电，明显的减少自发性癫痫的发作次数，减少神经元的损伤及神经胶质细胞增生，具有抗癫痫的作用（3）8-OH-DPAT改善大鼠开放视野及强迫游泳的抑郁学指标，通过增加5-ht1a受体的含量，具有抗抑郁的作用。

关键词：匹罗卡品癫痫抑郁 5-ht1a受体

5-ht1a受体激动剂对青春期大鼠病理性攻击行为及前额叶皮层ERK-CREB通路的影响

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5-HT1A受体激动剂对青春期大鼠病理性攻击行为及前额叶皮层ERK-CR...

作者：吕小娟重庆医科大学

学位级别：硕士

目的通过5-ht1a受体激动剂对青春期大鼠病理性攻击行为及对攻击关键脑区前额叶皮层ERK-CREB通路的影响,以探索5-ht1a受体影响病理性攻击行为的作用靶点通路。方法1动物分组及药物干预出生后21天Sprague Dawley(SD)雄性大鼠64只(体重50±... 详细信息

目的通过5-ht1a受体激动剂对青春期大鼠病理性攻击行为及对攻击关键脑区前额叶皮层ERK-CREB通路的影响,以探索5-ht1a受体影响病理性攻击行为的作用靶点通路。方法1动物分组及药物干预出生后21天Sprague Dawley(SD)雄性大鼠64只(体重50±10g),购自重庆医科大学动物实验中心。随机分为6个组模型组(8只)、对照组(8只)、模型打药组(8只)、对照打药组(8只)、模型盐水组(8只)及对照盐水组(8只),其余16只作为居住-入侵实验的工具(入侵鼠)。造模方法：对模型组、模型盐水组、模型打药组采用社会孤养、昼夜颠倒、非奖赏性挫败实验、预激惹刺激实验及居住-入侵实验等国际通用早年慢性应激方法应激至青春期。余三组大鼠常规喂养。造模成功后对模型打药组和对照打药组进行7天的5-ht1a受体激动剂(8-OH-DPAT,0.5mg/kg)腹腔注射,另对模型盐水组及对照盐水组进行生理盐水相同体积比例进行7天的生理盐腹腔注射作为对照处理。居住-入侵实验用于检测行为学指标,蛋白免疫印迹法用于检测生物学指标。2行为学检测2.1攻击行为检测居住-入侵实验：检测指标：(1)攻击潜伏期(2)危险部位攻击(3)对手屈服后继续攻击(4)攻击／威胁比(4)威胁次数(6)攻击总数3生物学检测蛋白免疫印迹：检测六组大鼠前额叶皮层ERK、CREB、p-ERK、p-CREB的改变情况。结果1.干预前攻击行为检测结果：模型组攻击潜伏期显著低于对照组(p1);余病理性攻击指标均显著高于对照组(p1)。2.干预后攻击行为检测结果：模型打药组攻击性明显减低,其攻击潜伏期高于模型盐水组(p5),危险部位攻击次数和屈服后继续攻击次数低于模型盐水组(p5;p1),但攻击潜伏期仍显著低于对照组盐水组和对照打药组(p1)而危险部位攻击次数、屈服后继续攻击、攻击/威胁比等仍高于对照组盐水组及对照打药组(p5)。模型盐水组攻击潜伏期显著低于对照盐水组及对照打药组(p1),而其他指标(除威胁次数外)均显著高于对照盐水组及对照打药组(p1)。对照打药组及对照盐水组各个攻击指标间差异均无统计学意义(p5)。3.干预前生物学检测结果：Western Blot实验结果发现模型组前额叶皮层ERK、CREB蛋白总量表达与对照组并无明显差异,而p-ERK/ERK低于对照组(P5), p-CREB/CREB显著低于对照组(P1)。4.干预后生物学指标检测结果：结果发现对照盐水组、模型盐水组、对照打药组、模型打药组总ERK及总CREB均无明显变化,模型打药组额叶皮层内p-ERK/ERK水平显著高于模型盐水组,低于对照打药组(P1,P5),与对照盐水组无明显差异(P>0.05)。模型盐水组大鼠前额叶皮层内p-ERK/ERK水平仍低于对照盐水组(P5),显著低于对照打药组(P1)。对照打药组前额叶皮层内p-ERK/ERK水平高于对照盐水组(P5),模型打药组前额叶皮层内p-CREB/CREB水平显著高于模型盐水组(P1),但和对照盐水组及对照打药组无明显差异(P5)。模型盐水组大鼠前额叶皮层内p-CREB/CREB水平显著低于对照盐水组(P1)。对照打药组与对照盐水组无明显差异(P5)结论1.前额叶皮层内ERK、CREB参与了早年慢性应激所致的青春期大鼠病理性攻击行为发生;2.5-ht1a受体激动剂可以减少早年慢性应激所引起的青春期大鼠病理性攻击行为;3.5-ht1a受体激动剂可增加青春期病理性攻击大鼠前额叶皮层内ERK及CREB磷酸化水平。本研究结果提示前额叶皮层内ERK、CREB参与了早年慢性应激所致的青春期大鼠病理性攻击行为发生,且前额叶皮层内ERK-CREB通路有可能是5-ht1a受体减少病理性攻击行为及神经发生及神经保护作用的靶点通路。

关键词： 5-ht1a受体 ERK-CREB通路前额叶皮层青春期大鼠病理性攻击行为

睡眠剥夺对正常大鼠和抑郁模型大鼠不同脑区腺苷A1受体及5-ht1a受体表达的影响

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睡眠剥夺对正常大鼠和抑郁模型大鼠不同脑区腺苷A1受体及5-HT1A受...

作者：张金玲汕头大学

学位级别：硕士

背景：腺苷是一种睡眠因子，它主要通过其受体来调节睡眠。其中，腺苷A受体起主要作用。此外，腺苷作为一种神经调质，可以通过其受体尤其是腺苷A受体调节各种神经递质的释放。最近又有研究发现腺苷及其受体与抑郁及抗抑郁过程有一定联... 详细信息

背景：腺苷是一种睡眠因子，它主要通过其受体来调节睡眠。其中，腺苷A受体起主要作用。此外，腺苷作为一种神经调质，可以通过其受体尤其是腺苷A受体调节各种神经递质的释放。最近又有研究发现腺苷及其受体与抑郁及抗抑郁过程有一定联系。而睡眠剥夺可发挥快速抗抑郁效应，但其中的神经生物机制至今未明，目前的研究多集中于单胺类神经递质系统。既然腺苷与睡眠、抑郁症及各种神经递质均有密切关系，那么腺苷是否参与了睡眠剥夺的快速抗抑郁过程呢?在此过程中，腺苷受体的表达是否有所变化呢?目前尚无这方面的报道。本课题在研究正常大鼠连续72小时快眼动睡眠剥夺(rapid eye movement sleep deprivation,REMSD)后腺苷A受体和5-ht受体表达及神经元活性改变的基础上，并与抑郁模型大鼠连续72小时快眼动睡眠剥夺后大鼠不同脑区腺苷A受体和5-ht受体表达变化进行比较，探讨腺苷A受体在睡眠剥夺快速抗抑郁机制中可能的作用。实验一：目的：观察睡眠剥夺对正常大鼠自发活动和不同脑区腺苷A受体和5-ht受体表达的影响及对神经元活性的影响。材料和方法：实验动物为Sprague Dawley 2-3月龄雄性大鼠，随机分为正常+72小时REMSD组(n=8，以下称睡眠剥夺组)、正常+大平台对照组(n=8，以下称大平台对照组)、正常对照组(n=8，以下称正常对照组)。快眼动睡眠剥夺采用小平台水环境法;用大平台水环境做对照，排除水环境的影响。观察快眼动睡眠剥夺作用下大鼠自发活动变化，采用逆转录-聚合酶链反应法(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组大鼠海马、前额皮质、中脑、下丘脑、纹状体腺苷A受体和5-ht受体mRNA表达的变化，运用尼氏染色技术观察神经元的活性变化。实验结果用Excel 2000和SPSS 11.0统计软件进行分析处理。结果以均数±标准误(X±SE)表示，采用单因素方差分析(ANOVA)和t检验(T-test)进行组间均数比较，P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异有高度显著性。结果： 1．正常大鼠经72小时REMSD后，自发活动总路程较大平台对照组增加(P＜0.05);自发活动中央路程与休息时间均较大平台对照组无明显变化(P＞0.05)。正常大鼠经大平台水环境处理后，自发活动总路程、中央路程及休息时间较正常对照组均无明显变化(P＞0.05)。 2．正常大鼠经72小时REMSD后与大平台组比较海马腺苷A受体mRNA转录水平显著降低(P＜0.01)，而5-ht受体mRNA转录水平升高(P＜0.05);大平台对照组经72小时水环境处理使正常大鼠海马腺苷A受体mRNA转录水平显著升高(P＜0.01)，而5-ht受体mRNA转录水平无明显变化(P＞0.05)。 3．72小时REMSD本身不能使正常大鼠前额皮质腺苷A受体mRNA表达发生明显变化(P＞0.05)，而可使5-ht受体mRNA表达升高(P＜0.05);72小时大平台水环境处理使正常大鼠前额皮质腺苷A受体mRNA表达降低(P＜0.05);而对前额皮质5-ht受体mRNA表达无明显影响(P＞0.05)。 4．正常大鼠经72小时REMSD后，与大平台对照组比中脑腺苷A受体mRNA表达与5-ht受体mRNA表达均降低(P＜0.05);72小时大平台水环境处理后，正常大鼠中脑腺苷A受体mRNA表达降低(P＜0.05)，而中脑5-ht受体mRNA表达升高(P＜0.05)。 5．72小时REMSD本身对正常大鼠下丘脑腺苷A受体及5-ht受体mRNA表达均无明显影响(P＞0.05);72小时大平台水环境处理也未改变正常大鼠下丘脑腺苷A受体mRNA表达(P＞0.05)，却可使下丘脑5-ht受体mRNA表达升高(P＜0.05)。 6．72小时REMSD及72小时大平台水环境处理均未改变纹状体腺苷A受体及5-ht受体mRNA表达(P＞0.05)。 7．尼氏染色结果显示，正常大鼠经72小时睡眠剥夺后与大平台对照组比海马尼氏小体染色光密度升高(P＜0.05);大平台对照组与正常对照组比海马尼氏小体染色光密度无明显变化(P＞0.05)。实验二：目的：观察睡眠剥夺对慢性应激抑郁模型大鼠自发活动和不同脑区腺苷A受体和5-ht受体表达的影响。材料和方法：实验动物为Sprague Dawley 2-3月龄雄性大鼠，随机分为正常对照组(n=10，以下称正常对照组)、应激造模组(n=48)。应激造模组采用慢性轻度不可预见性应激(chronic mild unpredicted stress,CMUS)和分养两种经典模型结合的方式来建立抑郁模型，采用随机区组法把造模成功大鼠分为3组：抑郁模型组(n=8，以下称抑郁模型组)、抑郁模型+72小时REMSD组(n=8，以下称睡眠剥夺组)、抑郁模型+大平台对照组(n=7，以下称大平台对

关键词：睡眠剥夺抑郁症腺苷A1受体 5-ht1a受体

海马齿状回的5-ht1a受体在大鼠主动回避学习中的作用

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海马齿状回的5-HT1A受体在大鼠主动回避学习中的作用

作者：蒋丰泽延边大学

学位级别：硕士

学习和记忆是脑的高级功能,神经递质和学习记忆之间的关系一直是脑功能研究的热点。5-ht是经典的单胺类神经递质,它在学习和记忆功能的调节中起着重要的作用。5-ht受体有多种亚型,其中5-ht1a受体在学习记忆研究中受到广泛关注。海马是... 详细信息

学习和记忆是脑的高级功能,神经递质和学习记忆之间的关系一直是脑功能研究的热点。5-ht是经典的单胺类神经递质,它在学习和记忆功能的调节中起着重要的作用。5-ht受体有多种亚型,其中5-ht1a受体在学习记忆研究中受到广泛关注。海马是哺乳类动物完成学习记忆活动的关键结构,而且也是来自中缝核的5-ht能神经元传入的主要靶点,突触后5-ht1a受体主要存在于海马的CA1和齿状回（dentate gyrus,DG）等区域。海马的主要亚区,包括CA1、CA3DG,在学习记忆活动中各自起着不同的作用。虽然研究报道CA1区的5-ht1a受体在几种海马依赖性学习记忆中起着重要作用,但DG内的5-ht及其5-ht1a受体在大鼠主动回避学习中的作用未见报道。因此,为了研究海马DG内的5-ht及其5-ht1a受体在大鼠主动回避学习中的作用,本实验利用穿梭箱观察大鼠的主动回避学习,并用脑部微量透析法和高效液相色谱法观察此过程中的海马DG内5-ht的含量变化。其次,往DG区微量注射WAY-100635（5-htIA受体阻断剂）及8-OH-DPAT（5-htIA受体激动剂）,观察其对大鼠主动回避学习的影响。本实验结果如下： 1.穿梭箱训练过程中,大鼠的主动回避反应率随着训练轮数的增加而增加,在第5轮训练时达到条件反射的建立标准,其后进行实验性消退,第8轮训练时达到消退标准;而在主动回避条件反射建立过程中,大鼠海马DG区细胞外液的5-ht含量没有出现明显的变化,却在进行首次实验性消退的第六轮训练时出现明显的增加,最大值达到训练前的164.90+26.07%（P＜0.05）,随后逐渐回降。 2.每天训练前往DG区注射WAY-100635的大鼠,达到主动回避条件反射建立标准所需的训练次数为133.3±4.2次,与对照组（123.3±3.3次）相比无显著性差异（P＞0.05）;其后,大鼠达到消退标准所需的训练次数,WAY-100635组为53.3±4.2次、对照组为46.7±8.4次,两组间无显著性差异（P＞0.05）。 3.每天训练前往DG区注射8-OH-DPIAT的大鼠,达到主动回避条件反射建立标准所需的训练次数为106.7±13.3次,明显少于对照组的146.7±6.7次（P＜0.05）;8-OH-DPAT组大鼠达到消退标准所需的训练次数为113.3±13.3次,与对照组的50.0±6.8次相比明显增加（P＜0.05）。结论：激活海马DG区的5-ht1a受体可易化主动回避学习及巩固相关记忆。

关键词：海马齿状回区 5-ht 5-ht1a受体主动回避学习大鼠

快眼动睡眠剥夺对抑郁模型大鼠脑内5-ht1a受体mRNA的影响

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快眼动睡眠剥夺对抑郁模型大鼠脑内5-HT1A受体mRNA的影响

作者：张印南汕头大学

学位级别：硕士

背景与目的：睡眠剥夺的快速抗抑郁效应在生物精神病学研究领域已成为最令人着迷的现象之一。睡眠剥夺可发挥快速抗抑郁效应，但令人遗憾的此效应经过一夜的恢复性睡眠又被逆转，其中的神经生物机制至今未明。睡眠剥夺可能通过改变5-羟... 详细信息

背景与目的：睡眠剥夺的快速抗抑郁效应在生物精神病学研究领域已成为最令人着迷的现象之一。睡眠剥夺可发挥快速抗抑郁效应，但令人遗憾的此效应经过一夜的恢复性睡眠又被逆转，其中的神经生物机制至今未明。睡眠剥夺可能通过改变5-羟色胺(serotonin 5-ht)系统起作用，5-ht受体作为突触前的自身受体在调节中缝核5-ht神经元的活性中发挥着关键作用，并且作为突触后受体介导5-ht对边缘系统、皮层、下丘脑及其它一些脑区部位的作用，使得5-ht受体的调节对于精神疾病非常重要。睡眠剥夺后5-ht能神经元的放电频率的增加可能源于5-ht自身受体的脱敏。受体脱敏可表现为受体结合力的下降以及数目的下调，其中受体转录水平的下降可以反映合成新受体蛋白的基础下降，在一定程度上可代表受体数目的改变。本研究拟通过对抑郁模型大鼠进行连续72小时快眼动睡眠剥夺(rapid eye movement sleep deprivation，REMSD)观察大鼠自主行为和不同脑区5-ht受体mRNA的改变，旨在探讨睡眠剥夺可能的快速抗抑郁机制。材料和方法：实验动物为Sprague Dawley 2-3月龄雄性大鼠，随机分为正常对照组(n=10)、应激造模组(n=48)，应激造模组大鼠共接受21

关键词：快眼动睡眠剥夺抑郁症慢性轻度不可预见性应激 5-ht1a受体

跑台训练对永久性MCAO大鼠脑组织5-ht、5-ht1a受体及BDNF的影响

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跑台训练对永久性MCAO大鼠脑组织5-HT、5-HT1A受体及BDNF的影响

作者：蓝晓芳重庆医科大学

学位级别：硕士

背景：脑卒中是一种高发病率、高死亡率、高致残率的神经系统疾病，严重影响人们的健康及生活质量。已经证实运动训练能促进卒中患者的神经功能恢复及神经可塑性，但其机制尚不完全清楚。因此对于其机制的研究是必要的。5-ht是中枢神经... 详细信息

背景：脑卒中是一种高发病率、高死亡率、高致残率的神经系统疾病，严重影响人们的健康及生活质量。已经证实运动训练能促进卒中患者的神经功能恢复及神经可塑性，但其机制尚不完全清楚。因此对于其机制的研究是必要的。5-ht是中枢神经系统的一种重要神经递质，与神经可塑性相关，本研究围绕5-ht对运动训练促进神经可塑性的机制进行探讨。目的：探讨永久性MCAO后跑台训练对神经功能评分及大鼠缺血侧海马及皮质5-ht含量、5-ht1a受体、BDNF及突触素表达的影响。方法：成年SD大鼠85只，随机分为模型组（n=30）、运动训练组（n=25）及假手术组（n=30）。采用MCAO方法造成局部永久性脑梗死模型。运动训练组于造模后第三天进行16天的跑台训练。运用mNSS对模型组及运动训练组进行神经功能评分。采用HE染色及尼氏染色观察各组海马CA2区及缺血皮质神经细胞形态。高效液相色谱-电化学法检测海马及皮质组织5-ht含量。运用逆转录PCR方法检测海马5-ht1a受体mRNA水平变化，Western blot检测各组海马5-ht1a受体、突触素及皮质5-ht1a受体、BDNF、突触素的蛋白水平。结果：MCAO术后19天,运动训练组mNSS评分较模型组明显改善（P＜0.001）。HE染色及尼氏染色显示假手术组中海马CA2区及皮质细胞形态完整;模型组细胞形态不规则，细胞受损明显;运动训练组细胞受损减轻。运动训练组海马组织5-ht含量（14.5±1.71ng/ml）较模型组（7.13±0.71ng/ml）明显增加（P＜0.001）。模型组皮质5-ht含量降至3.81±1.86ng/ml（假手术组为43.84±2.05ng/ml），运动训练后增加至10.06±1.80ng/ml。海马5-ht1a受体蛋白及mRNA表达水平在运动训练后较模型组明显增加（P＜0.05）,突触素蛋白表达在运动训练组也较模型组增加（P＜0.05）。皮质5-ht1a受体、BDNF及突触素蛋白水平在缺血后下调（P＜0.05），运动训练后上调（P＜0.05）。结论：跑台训练可改善永久性MCAO大鼠神经功能评分,增加海马组织5-ht含量及5-ht1a受体表达,增加皮质5-ht、5-ht1a受体及BDNF的表达，提高突触可塑性。

关键词：跑台训练大脑中动脉闭塞 5-羟色胺 5-ht1a受体脑源性神经营养因子

全脑缺血大鼠海马自体神经干细胞动员与5-ht1a受体表达关系的初步研究

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重庆医学 2008年第7期37卷 693-696页

作者：黄河清唐军周振华李志方刘国军陈康宁徐海伟李露斯第三军医大学西南医院神经内科第三军医大学西南医院生理教研室中国人民解放军第65426部队

目的探讨西酞普兰对血管性痴呆大鼠海马自体神经干细胞动员的作用及与5-htIA受体表达的关系。方法实验动物随机分为正常对照组（NC）、假手术对照组（SC）、血管性痴呆组（4VO）和西酞普兰干预的血管性痴呆组（4VO＋C）共4个组；采用改... 详细信息

目的探讨西酞普兰对血管性痴呆大鼠海马自体神经干细胞动员的作用及与5-htIA受体表达的关系。方法实验动物随机分为正常对照组（NC）、假手术对照组（SC）、血管性痴呆组（4VO）和西酞普兰干预的血管性痴呆组（4VO＋C）共4个组；采用改良的Pulsinelli’s四血管阻断（4-vessle occlusion，4VO）方法制作血管性痴呆动物模型；BrdU免疫荧光和激光共聚焦方法观察海马齿状回神经干细胞增殖状况；RT—PCR法测定大鼠海马5-htIA受体mRNA相对表达丰度。结果（1）海马BrdU阳性细胞主要表达在DG，多成对或成团排列于颗粒细胞层与海马门区。4VO组及4VO＋C组造模后1d，BrdU阳性细胞数显著下降（P=0．002），此后逐渐增加，到术后14d达峰值（4VO＋C组约为4V0组2倍），且4VO＋C组海马神经干细胞活跃增生的情况一直延续到术后21d（与4V0组比较P=0．00017）。（2）术后1d，4V0组和4VO＋C组大鼠海马5-ht1a受体mRNA相对表达丰度均显著下降（P〈0．01）；两组从术后3～14d表达持续回升，4V0组于14d表达至高峰，而4VO＋C组于术后7d表达至峰值；术后21d两组受体表达均有所回落且显著高于正常水平（P〈0．01）。和4VO组比较，4VO＋C组除术后1d组外其余各组大鼠海马5-ht1a受体mRNA表达到丰度均显著升高（P〈0．01）。（3）大鼠海马DG神经干细胞增殖趋势与海马5-ht1a受体mRNA表达有明显的相关性（r=0．8498）。结论在大鼠四血管阻断血管性痴呆模型中，全脑缺血可刺激海马DG神经干细胞增殖，且给予外源性SSRI类抗抑郁药物西酞普兰可显著增强海马神经发生，同时该作用可能与刺激海马5-ht1a受体表达有关。

关键词：血管性痴呆海马神经干细胞 5-ht1a受体

5-ht1a受体对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电及呼吸神经元电活动的调制

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5-HT1A受体对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电及呼吸神经元电...

作者：秦峥第一军医大学

学位级别：硕士

目的 5-羟色胺(5-hydroxytryptamine;5-ht)在中枢神经系统中的分布十分广泛，它对于呼吸节律的产生，调控发挥着十分重要的作用，而所有这些调节作用都是5-ht与其特异性受体相互作用的结果。本研究旨在探讨5-ht受体在新生鼠延髓脑片标... 详细信息

目的 5-羟色胺(5-hydroxytryptamine;5-ht)在中枢神经系统中的分布十分广泛，它对于呼吸节律的产生，调控发挥着十分重要的作用，而所有这些调节作用都是5-ht与其特异性受体相互作用的结果。本研究旨在探讨5-ht受体在新生鼠延髓脑片标本中面神经后核内侧区(the medial region of the nucleus retrofacialis，mNRF)的基本呼吸节律性电活动发生和调节中的可能作用。1)应用新生大鼠离体延髓脑片标本，记录与之相连的舌下神经呼吸节律性放电(respiratory rhythmical discharge activity，RRDA)，观察5-ht受体的特异性激动剂8-羟四氢萘(+／-)-8-hydroxy-2-(di-N-propylamino)tetralin hydrobromide(8-OH-DPAT)和特异性拮抗剂多次甲基多苯基多异氰酸酯[4-iodo-N-[2-[4-methoxyphenyl]-1-piperazinyl]ethyl]-N-2-pyridynyl-benzamide hydrochloride](PMPPI)对RRDA的影响，从而探讨5-ht受体在节律性呼吸的产生和调节中的作用;2)在新生大鼠离体延髓脑片标本上，同步记录舌下神经根和mNRF区的双相呼气神经元(biphasic expiratory neurons，BE-neurons)／吸气神经元(inspiratory neurons，I-neurons)的放电活动，观察5-ht受体的特异性激动剂和拮抗剂对呼吸神经元放电活动的影响，进一步探讨5-ht受体对节律性呼吸的调制。方法选用新生SD大鼠(0～3d)，雌雄不拘。1)参照并改良Suzue的方法制作离体延髓脑片标本，该脑片结构中主要包含面神经后核内侧区，前包钦格氏复合体(Pre-B(?)tzinger Complex，PBC)，腹侧呼吸组(ventral respiratory group，VRG)以及舌下神经核，并保留舌下神经根。用玻璃吸附电极记录舌下神经放电作为呼吸活动的指标，实验动物分为两组：(1)8-OH-DPAT和PMPPI组(2)8-OH-DPAT和8-OH-DPAT+PMPPI组，每组新生大鼠5只，共10只新生大鼠。通过灌流液给药，观察不同药物对神经根放电活动的影响;2)制备20只新生SD大鼠(0～3d)离体延髓脑片标本，以改良的Kreb’s液(modified Kreb’s perfusion solution，MKS)恒温灌流，稳定记录到与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动后，随机分成Ⅰ～Ⅳ组(每组n=5)，Ⅰ～Ⅳ组给予5-ht受体的特异性激动剂8-OH-DPAT;浓度分别为1μmol／L，5μmol／L、10μmol／L、20μmol／L持续灌流10 min，观察给药后1、3、5 min时舌下神经的呼吸节律性放电活动的变化。3)实验动物分为两组：(1)8-OH-DPAT和PMPPI组，此组新生大鼠5只，记录双相呼气神经元的放电活动。(2)8-OH-DPAT和PMPPI组，此组新生大鼠5只，记录吸气神经元的放电活动。为了记录呼吸神经元，以微操纵器固定玻璃微电极，并通过控制微推进器作延髓面神经后核内侧区细胞外记录，记录时，每次移动10μm直到记录到自主呼吸单元和面神经后核内侧区双相呼气神经元或吸气神经元放电。5-ht受体特异性激动剂8-OH-DPAT和其特异性拮抗剂PMPPI分别溶于双蒸水中，进一步在MKS中稀释到20μmol／L和10μmol／L。脑片先以20μmol／L 8-OH-DPAT灌流5 min，洗脱8-OH-DPAT，待放电基本恢复后，再以10μmol／L PMPPI灌流5 min。同步记录舌下神经根和双相呼气神经元或吸气神经元放电。实验中，与舌下神经根的呼吸节律性活动相关联的进行的电活动即为双相呼气神经元或吸气神经元。结果 1．记录舌下神经根放电的实验部分： 1) 8-OH-DPAT和PMPPI对RRDA的影响：给予20μmol／L的8-OH-DPAT持续灌流1 min时，较MKS灌流对照，呼吸周期(RC)和呼气时程(TE)分别延长30.11％(t=2.709，P=0.027)和32.24％(t=2.676，P=0.028)，放电的积分幅度(IA)降低17.08％但无统计学意义;灌流3 min后，RC和TE继续延长，较对照组分别延长59.23％(t=3.670，P=0.006)和63.44％(t=3.670，P=0.006)，IA降低24.82％(t=3.406，P=0.009)，在8-OH-DPAT灌流过程中吸气时程(TI)无明显变化。洗脱后改用10μmol／L PMPPI灌流1 min时RC、TE无统计学意义，TI显著缩短(t=3.641，P=0.007);灌流3 min后，相对于对照组RC下降

关键词： 5-ht1a受体延髓面神经后核内侧区呼吸节律双相呼吸神经元吸气神经元