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电针“中髎”“下髎”对慢传输型便秘大鼠结肠5-羟色胺信号系统及粪便短链脂肪酸的影响

针刺研究 2022年第12期47卷 1101-1106,1112页

作者：马嘉泽陈鹏张加敏丁康周惠芬南京中医药大学附属南京中医院南京210029 南京中医药大学附属南京中医院盆底中心南京210001

目的:观察电针“中髎”“下髎”对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠5-羟色胺(5-HT)信号系统及粪便中短链脂肪酸(SCFA)的影响,探讨电针治疗STC的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组及电针组,每组8只。采用洛哌丁胺灌胃建立... 详细信息

目的:观察电针“中髎”“下髎”对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠5-羟色胺(5-HT)信号系统及粪便中短链脂肪酸(SCFA)的影响,探讨电针治疗STC的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组及电针组,每组8只。采用洛哌丁胺灌胃建立STC大鼠模型。阳性药组予6 g/kg乳果糖灌胃治疗,电针组电针“中髎”“下髎”,每次30 min,两组均每日治疗1次,连续干预14 d。观察各组大鼠首粒黑便排出时间及粪便含水率;Western blot法检测各组大鼠结肠组织中5-羟色胺4受体(5-HT4R)、色氨酸羟化酶1(TPH1)、5-HT转运体(SERT)相对表达量;ELISA法检测各组大鼠血清P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)含量;高效液相色谱-质谱联用法检测各组大鼠结肠组织中5-HT含量及粪便中SCFA含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠首粒黑便排出时间延长(P5),粪便含水率降低(P5);结肠组织中5-HT含量及5-HT4R、TPH1、SERT蛋白表达量降低(P5);血清SP含量降低(P5),VIP含量升高(P5);粪便SCFA含量(除异丁酸外)均显著降低(P5)。与模型组比较,电针组和阳性药组大鼠首粒黑便排出时间缩短(P5),粪便含水量升高(P5);结肠组织中5-HT含量及5-HT4R、TPH1、SERT蛋白表达量升高(P5);粪便中乙酸及丁酸含量均明显升高(P5);电针组血清SP含量升高(P5),VIP含量降低(P5)。电针组大鼠血清VIP含量较阳性药组显著降低(P5);结肠组织TPH1、SERT蛋白表达量较阳性药组显著升高(P5)。结论:电针“中髎”“下髎”可以通过干预5-HT信号系统的多个环节促进肠道动力,从而缓解STC。

关键词：慢传输型便秘电针中髎下髎 5-羟色胺信号系统

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5-HT信号系统在胃肠中的作用及针灸通过其对IBS的调节

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世界华人消化杂志 2015年第21期23卷 3396-3405页

作者：庞婷婷余芝徐斌南京中医药大学国家重点省部共建针药结合实验室江苏省南京市210023

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号系统在胃肠道中扮演重要的角色,关于5-HT信号通路参与胃肠作用调节的研究也相对较多,本文集中梳理5-HT信号通路中相关知识背景及研究概况,具体为5-HT受体分型及其在胃肠道的分布情况、5-HT系统... 详细信息

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号系统在胃肠道中扮演重要的角色,关于5-HT信号通路参与胃肠作用调节的研究也相对较多,本文集中梳理5-HT信号通路中相关知识背景及研究概况,具体为5-HT受体分型及其在胃肠道的分布情况、5-HT系统在胃肠道中的生理病理作用,5-HT信号通路的改变对胃肠道的影响,在了解这些知识背景的基础上进一步梳理针灸是如何通过5-HT信号系统调节胃肠疾病尤其是肠易激综合征的,以期为今后的科研及临床工作提供参考,为针灸治疗胃肠疾病的研究提供理论和临床依据.

关键词： 5-羟色胺信号系统胃肠道肠易激综合征针灸

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基于5-HT信号系统枳芍散对肝郁脾虚型IBS的作用机理研究

基于5-HT信号系统枳芍散对肝郁脾虚型IBS的作用机理研究

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作者：梁巧文广州中医药大学

学位级别：硕士

目的：以0.5%乙酸生理盐水灌肠结合束缚夹尾建立肝郁脾虚型肠易激综合征(IBS)大鼠模型。本文主旨为：(ⅰ)从脑-肠轴整体角度,将外周(胃肠)神经5-HT信号系统与中枢神经5-HT信号系统相结合,揭示IBS发病机理与5-HT及其上下游元件的关系;(ⅱ... 详细信息

目的：以0.5%乙酸生理盐水灌肠结合束缚夹尾建立肝郁脾虚型肠易激综合征(IBS)大鼠模型。本文主旨为：(ⅰ)从脑-肠轴整体角度,将外周(胃肠)神经5-HT信号系统与中枢神经5-HT信号系统相结合,揭示IBS发病机理与5-HT及其上下游元件的关系;(ⅱ)揭示枳芍散的药效作用机理,探讨枳芍散干预5-HT信号通路的潜在作用机制。方法：1、模型建立与行为学评价32只Sprague-Dawley大鼠,按体质量随机分为4组,8只/组：空白对照组(Control);模型组(Model);枳芍散组(ZSS);得舒特组(Dicetel)。除对照组大鼠外,其他大鼠给予1 mL 0.5%冰醋酸生理盐水灌肠刺激,从肛门注入结肠约2 cm,持续14天。从第8天开始,模型复制的大鼠束缚1小时和夹尾30分,连续14天。正常对照组大鼠以等体积生理盐水灌肠,连续14天,不给予束缚夹尾应激。建模历时3周。每周监测大鼠的行为学,包括排便情况、糖水消耗百分率、旷场试验和腹部回缩反射,对建模情况进行评估。药物治疗14d后,进行行为学检测后,采集组织样品。2、5-HT生化指标测定与组织形态学观察采用竞争酶联免疫法,测定血清、结肠组织、大脑组织中5-HT的含量。通过苏木素-伊红(H-E)染色法,观察结肠和下丘脑组织形态。3、结肠和下丘脑中5-HT、CgA蛋白表达取各组大鼠的结肠和脑组织进行固定、修切、包埋、切片、脱蜡水化、抗原修复、封闭、相应抗体孵育、染色等步骤进行免疫组化染色,通过Optec BK-DM320生物显微镜观察,利用Image-Pro Plu软件进行分析。免疫反应强度以累积光密度(IOD)表示。4、结肠和下丘脑中TPH-1,5-HT3R,5-HT4R,SERT mRNA水平采用实时定量RT-PCR法,分别对结肠和下丘脑组织中5-羟色胺能信号系统相关的基因进行检测,包括TPH-1,5-HT3R,5-HT4R, SERT。GAPDH作为对照内参,数据结果进行了2-ΔΔCt方法分析。5、结肠和下丘脑中TPH-1,5-HT3R,5-HT4R,SERT蛋白表达利用蛋白质印迹法(Western blot),分别检测大鼠结肠和下丘脑中TPH-1,5-HT3R,5-HT4R,SERT蛋白表达。运用NIH Image软件对各蛋白的累积光密度(IOD)进行定量。6、统计方法运用SPSS20.0统计软件进行数据分析,组间数据进行单因素方差分析(ANOVA),数据标示为：均值±标准差(x±S)。P5表示有统计学意义,P5%乙酸生理盐水灌肠结合束缚夹尾建立肝郁脾虚型IBS大鼠模型,IBS大鼠与正常大鼠比较,其排便次数增多,糖水消耗百分率明显减少,自主活动明显降低,内脏高敏。经药物治疗14d后,枳芍散可改善大鼠的排便情况,提高IBS大鼠自主活动性,改善内脏高敏,2、与正常组比较,模型组大鼠的血清和结肠组织中5-HT水平提高,而下丘脑中5-HT含量却是降低的。经药物治疗14d后,枳芍散降低血清和结肠组织中5-HT水平,提高下丘脑中5-HT含量。IBS大鼠的结肠H-E染色,未见明显炎症细胞浸润,下丘脑H-E染色,细胞组织形态出现细胞核萎缩,细胞排列紊乱。3、结肠和下丘脑免疫组化结果：①在结肠组织中,相对于对照组,模型组大鼠的5-HT和CgA免疫反应的强度显著增加。经枳芍散(ZSS)治疗的IBS大鼠,其结肠中5-HT和CgA的表达明显下调。②然而在下丘脑中,模型组大鼠的5-HT和CgA免疫反应强度却低于对照组大鼠。药物治疗后,枳芍散上调IBS大鼠下丘脑5-HT和CgA免疫表达。4、结肠和下丘脑中TPH-1,5-HT3R,5-HT4R,SERT mRNA水平结果：①在结肠组织中,模型组与对照组大鼠相比,其SERT,5-HT4R和TPH-1的mRNA基因表达水平有显著差异,其中SERT的mRNA水平下降到0.31倍,5-HT4R和TPH-1水平分别提高至2.25倍和2.27倍。模型组与对照组大鼠之间的5-HT3R mRNA表达水无显著性差异。ZSS治疗后,5-HT4R和TPH-1的mRNA水平降低,而SERT的表达明显增加。各组之间的5-HT3R mRNA水平均无显著性差异。②然而在下丘脑中,各组之间的TPH-1和5-HT3R mRNA表达水平比较,均无统计学差异。模型组与对照组大鼠比较,其5-HT4R mRNA表达下调至0.47倍、SERT mRNA表达上调至2.52倍,有统计学差异。经ZSS治疗后的IBS大鼠,其5-HT4R mRNA表达水平上调至0.67倍(p5),而SERT mRNA表达水平下调,但没有统计学差异。5、结肠和下丘脑中TPH-1,5-HT3R,5-H

关键词：枳芍散腹泻型IBS 血清素(5-HT) 5-羟色胺信号系统脑-肠轴互动

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