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RP-HPLC法测定尿多酸肽注射液中5-羟基吲哚乙酸和4-羟基苯乙酸的含量

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药物分析杂志 2005年第9期25卷 1102-1105页

作者：王召朱瑞廖海明徐康森中国药品生物制品检定所北京100050 北京昭衍新药研究中心北京100070

目的:建立高效液相色谱法测定尿多酸肽注射液中5-羟基吲哚乙酸和4-羟基苯乙酸的含量。方法:采用 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相 A 为1%的三氟乙酸溶液,B 为乙腈-甲醇(75:25);流速1.0 mL·min^(-1),梯度洗脱;检测波长:275nm... 详细信息

目的:建立高效液相色谱法测定尿多酸肽注射液中5-羟基吲哚乙酸和4-羟基苯乙酸的含量。方法:采用 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相 A 为1%的三氟乙酸溶液,B 为乙腈-甲醇(75:25);流速1.0 mL·min^(-1),梯度洗脱;检测波长:275nm;进样量.20μL;柱温:40℃。结果:被测组分与相邻峰完全分离;5-羟基吲哚乙酸的线性范围为4-400 ng(r=0.9995),最低检测限为0.3 ng,精密度的 RSD 均小于1.89%(n=3),平均回收率为(102.2±1.5)%(n=9);4-羟基苯乙酸的线性范围为100-2800ng(r=0.9999),最低检测限为1.2 ng,精密度的 RSD 均小于0.72%(n=3),平均回收率为(96.64±1.14)%(n=9)。结论:方法简便灵敏,结果准确可靠,已用于尿多酸肽注射液的质量控制。

关键词： 5-羟基吲哚乙酸 4-羟基苯乙酸尿多酸肽注射液高效液相色谱法含量 RP-HPLC法测定平均回收率 C18色谱柱线性范围梯度洗脱

离子色谱法测定血清中5-羟基吲哚乙酸含量研究

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中国卫生检验杂志 2012年第6期22卷 1243-1244,1247页

作者：颜金良俞明飞金米聪浙江省宁波市疾病预防控制中心宁波市毒物研究与控制重点实验室浙江宁波315010 浙江省宁波市鄞州区疾病预防控制中心浙江宁波315000

目的:建立简便快速梯度淋洗离子色谱法测定血清中5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量。方法:选用IonPac AS11阴离子分析柱,0 mmol/L～25 mmol/L,KOH淋洗液,流速为1.0 ml/min,电导检测器检测,样品经10000 rpm/min高速离心后用0.25μm滤膜过滤后... 详细信息

目的:建立简便快速梯度淋洗离子色谱法测定血清中5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量。方法:选用IonPac AS11阴离子分析柱,0 mmol/L～25 mmol/L,KOH淋洗液,流速为1.0 ml/min,电导检测器检测,样品经10000 rpm/min高速离心后用0.25μm滤膜过滤后直接进样。结果:本法线性相关性好(r≥0.9994),精密度好(RSD5.0%),样品加标平均回收率为87%～99%,最低检出量0.063μg/ml。结论:该法操作简单、快速、准确、灵敏、适用于大批血清样分析。

关键词： 5-羟基吲哚乙酸离子色谱法血清

UPLC-MS/MS法测定人血清中的神经内分泌肿瘤标志物5-羟基吲哚乙酸

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华西药学杂志 2015年第4期30卷 481-483页

作者：段虹飞李巧艳董玲芳赵宁民秦玉花赵红卫张伟河南省人民医院药学部河南郑州450000

目的采用超高效液相色谱串联质谱法测定人血清中5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）的含量。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相为2.5 mmol·L-1乙酸铵水溶液（含0.02%甲酸）-甲醇（68∶32）,流速0.2 m L... 详细信息

目的采用超高效液相色谱串联质谱法测定人血清中5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）的含量。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相为2.5 mmol·L-1乙酸铵水溶液（含0.02%甲酸）-甲醇（68∶32）,流速0.2 m L·min-1,进样量3μL,柱温35℃,样品室温度6℃;采用电喷雾正离子模式电离,5-HIAA和甲氨蝶呤内标的监测离子分别为m/z 192.2→146.0、m/z 455.3→308.2。结果 5-HIAA的线性范围为0.0100~10.02μmol·L-1,平均回收率为92.1%~96.5%,批内、批间RSD均小于15%。结论所用方法的线性范围宽、分析时间短,可用于神经内分泌肿瘤的诊断及进展监测。

关键词：超高效液相色谱串联质谱法 5-羟基吲哚乙酸神经内分泌肿瘤肿瘤标志物血清诊断

HPLC法同时测定尿多酸肽注射液中4-羟基苯乙酸及5-羟基吲哚乙酸的含量

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江苏药学与临床研究 2005年第2期13卷 22-24页

作者：高青周立春北京市药品检验所北京100035

目的　以HPLC法同时测定尿多酸肽注射液中4 - 羟基苯乙酸及5 - 羟基吲哚乙酸的含量。方法　采用MightysilRP C1 8(2 5 0mm×4 . 6mm ,5 μm)色谱柱,以1 %的甲酸溶液为流动相A ,乙腈为流动相B ,梯度洗脱,柱温30℃,流量1ml·min-1 ,检测波... 详细信息

目的　以HPLC法同时测定尿多酸肽注射液中4 - 羟基苯乙酸及5 - 羟基吲哚乙酸的含量。方法　采用MightysilRP C1 8(2 5 0mm×4 . 6mm ,5 μm)色谱柱,以1 %的甲酸溶液为流动相A ,乙腈为流动相B ,梯度洗脱,柱温30℃,流量1ml·min-1 ,检测波长2 82nm。结果　4 羟基苯乙酸在1 .0～1 4 0 . 0 μg·ml-1 范围内,色谱峰面积与对照品浓度呈现良好的线性关系,r=1 . 0 0 0 ;平均回收率为1 0 0 . 7%(RSD为0 . 6 %,n =9)。5 羟基吲哚乙酸在0 .1～2 0 . 0 μg·ml-1 范围内,色谱峰面积与对照品浓度呈现良好的线性关系,r=1 . 0 0 0 ;平均回收率为99 .7%(RSD为0 .6 %,n =9)。结论　该方法灵敏度高,准确,选择性、重复性好。

关键词：尿多酸肽 4-羟基苯乙酸 5-羟基吲哚乙酸高效液相色谱法

基于拟靶向胆汁酸代谢组学筛选柴胡抗抑郁的活性部位

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中草药 2024年第3期55卷 832-841页

作者：高芳荣王威宇罗培琰李静秦雪梅高晓霞山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006 山西大学化学化工学院山西太原030006

目的研究柴胡Bupleuri Radix不同极性部位对慢性不可预知应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠抑郁样行为干预作用和神经递质调节作用,筛选出最佳药效部位,并建立一种能够测定抑郁大鼠胆汁酸谱的方法。方法雄性SD大鼠... 详细信息

目的研究柴胡Bupleuri Radix不同极性部位对慢性不可预知应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠抑郁样行为干预作用和神经递质调节作用,筛选出最佳药效部位,并建立一种能够测定抑郁大鼠胆汁酸谱的方法。方法雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、盐酸文拉法辛(35 mg/kg)组、柴胡低极性部位(15 g/kg)组、柴胡中极性部位(15 g/kg)和柴胡高极性部位(15 g/kg)组,每组9只,造模28 d同时给药,动态测定大鼠的体质量变化,通过糖水偏好实验和旷场实验检测行为学变化;采用UPLC-MS测定血清中色氨酸(tryptophane,Trp)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)、多巴胺(dopamine,DA)、乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、酪氨酸(tyrosine,Tyr)含量;采用全自动生化分析仪测定γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和血清总胆红素(serum bilirubin,TBIL)含量;采用ELISA测定盲肠内容物中总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平;采用UPLC-MS/MS拟靶向代谢组学建立36种胆汁酸的拟靶向相对定量方法,测定盲肠内容物胆汁酸谱,并对组间胆汁酸差异性进行分析。结果柴胡不同极性部位组和盐酸文拉法辛组均可回调CUMS引起的大鼠体质量、糖水偏爱率、直立次数、水平穿越格数异常和血清中Trp、5-HT、5-HIAA、NE、DA、Ach、GABA、Glu、Tyr水平(P5、0.01、0.001),且柴胡低极性部位回调效果最好。同时柴胡低极性部位可显著回调大鼠血清γ-GT活性及血清TBIL、盲肠内容物TBA含量(P5、0.01);建立了36种胆汁酸的拟靶向相对定量方法,所建立的方法具有良好的稳定性,胆汁酸谱分析表明,柴胡低极性部位可调节盲肠内容物胆汁酸谱,通过回调其中5种差异胆汁酸(牛磺熊去氧胆酸、熊去氧胆酸、牛磺去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺石胆酸)发挥药效作用。结论柴胡低极性部位为抗抑郁最佳药效部位,同时能够调节胆汁酸谱的代谢紊乱,发挥肝保护作用。

关键词：柴胡抑郁神经递质胆汁酸拟靶向代谢组学低极性部位柴胡多炔色氨酸 5-羟色胺 5-羟基吲哚乙酸去甲肾上腺素多巴胺乙酰胆碱 γ-氨基丁酸谷氨酸酪氨酸

龟羚帕安丸对帕金森病大鼠血清NSE、Cys-C、5-HT、5-HIAA及NE水平的影响

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中华中医药学刊 2024年第2期42卷 1-4页

作者：常学辉陈帅杰张良芝王冬莲张创业河南中医药大学第二临床医学院河南郑州450002 河南中医药大学中医学院(仲景学院) 河南郑州450056

目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠血清神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)、胱抑素C(Cystatin C,Cys-C)、5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-Hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)及去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)水平的影响。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定向注射法制作PD大鼠模型,造模成功的PD大鼠随机分为模型组,西药组,中药高、中、低剂量组,中西药合用组,每组15只,另设假手术组15只。模型组及假手术组给予等容积生理盐水灌胃,其余组给予相应药物灌胃,连续给药28 d。大鼠腹主动脉取血,用酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠血清NSE、Cys-C、5-HT、5-HIAA及NE的水平。结果模型组大鼠血清NSE及Cys-C水平均明显升高,血清5-HT、5-HIAA及NE水平均明显降低;中药各剂量组、中西药合用组、西药组血清NSE及Cys-C水平均明显降低,5-HT、5-HIAA及NE水平均明显升高。结论龟羚帕安丸具有明显神经保护作用,作用机制与降低NSE及Cys-C水平,增加5-HT、5-HIAA及NE水平,降低脑实质损伤、神经炎症损伤及提高单胺类神经递质有关。

关键词：帕金森病龟羚帕安丸神经元特异性烯醇化酶胱抑素C 5-羟色胺 5-羟基吲哚乙酸

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人尿液中5-羟吲哚乙酸及人血浆中吉非替尼的检测方法研究

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人尿液中5-羟吲哚乙酸及人血浆中吉非替尼的检测方法研究

作者：李熙拓上海交通大学

学位级别：硕士

5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)是单胺类中枢神经递质的一种,是5-羟色胺(5-HT)生成的无活性的酸性代谢终产物,最终从尿液中排出。5-HIAA是人体内重要的神经递质代谢产物,增高或降低都会间接反映体内某些病理改变。在转移性类癌患者尿液中5-HIA... 详细信息

5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)是单胺类中枢神经递质的一种,是5-羟色胺(5-HT)生成的无活性的酸性代谢终产物,最终从尿液中排出。5-HIAA是人体内重要的神经递质代谢产物,增高或降低都会间接反映体内某些病理改变。在转移性类癌患者尿液中5-HIAA的水平明显升高。临床上将5-HIAA的过度分泌作为类癌瘤的最为特异性的生化指征。检测24小时尿液中5-HIAA的含量可用于类癌综合征病情的监测及治疗疗效的评估。类癌归属于神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasms,NENs),NENs是一类起源于干细胞且具有神经内分泌标记物、能够产生生物活性胺或多肽激酶的肿瘤。其中,胃肠胰神经内分泌肿瘤(gastroenteropancreatic neuroendocrine neoplasms,GEP-NENs)最为多见。在治疗胃肠胰神经内分泌肿瘤的药物研究中,一些新药例如:吉非替尼以及沙利度胺等发挥了一定的效果。本课题对人尿液中5-HIAA和人血浆中吉非替尼的检测方法进行了研究。本论文共分为五章,主要内容包括:第一章介绍了课题研究的意义,类癌的发病特点及诊断,5-HIAA的合成代谢,5-HIAA的常规分析方法,类癌及分子靶向药物治疗进行了综述。第二章建立人尿液中5-HIAA的超高效液相色谱-质谱联用检测方法,并进行方法学验证。该方法使用的色谱柱为Waters HSS T3(100×2.1 mm,1.8μm),质谱条件为电喷雾离子源(ESI),选择负离子提取方式检测。采用人工尿液UR-N-CONTROL LEVEL 2 NP配制标准曲线,质控样品采用人工尿液和天然尿液配制而成,以5-羟吲哚乙酸的同位素氘标记物为内标,尿液样品采用乙腈进行稀释处理后采用UPLC-MS/MS检测。该方法测定的5-羟吲哚乙酸在0.0500至50.0μg/mL范围内线性良好,r≥0.9896,最低定量限(LLOQ)为0.0500μg/mL。5-羟吲哚乙酸批内、批间准确度偏差在-10.7%.8%之间,精密度(CV)≤8.4%。平均回收率为100.3%02.3%。该方法专属性强、灵敏度高,快速。人工尿液和天然尿液在定量分析时无差异,适合于人尿液中5-羟吲哚乙酸的浓度测定。第三章晚期非胰腺来源神经内分泌瘤患者24小时尿液中5-HIAA浓度的测定。本课题建立的人尿液中5-HIAA浓度的检测方法已应用于新一代抗肿瘤药物治疗晚期非胰腺来源神经内分泌肿瘤患者的III期临床研究样本的检测。目前已完成40例患者24小时尿液中5-HIAA基线浓度的检测,检出总量在0.12–37.8 mg范围内,其中7例患者24小时尿液中5-HIAA的总量高于10 mg,15例患者24小时尿液中5-HIAA的总量低于2 mg。第四章建立人血浆中吉非替尼的超高效液相色谱-质谱联用检测方法,并进行方法学验证。该方法使用的色谱柱为Waters BEH C18色谱柱(100×2.1 mm,1.7μm),质谱条件为电喷雾离子源(ESI),选择正离子提取方式检测,以吉非替尼-d3为内标,血浆样品采用乙腈进行蛋白沉淀处理后采用UPLC-MS/MS检测。该方法测定的吉非替尼的标准曲线范围为5.00至3000 ng/mL,浓度与峰面积比的关系可用回归方程:峰面积比=A×浓度+B×浓度+C来表示,r≥0.9962,最低定量限(LLOQ)为5.00 ng/mL。吉非替尼批内、批间准确度偏差在-3.8%.0%之间,精密度(CV)≤11.2%。平均回收率为98.9%01.8%。吉非替尼储备液和血浆稳定性结果良好。该方法的准确度、精密度良好,已应用于临床人血浆样本中吉非替尼浓度的检测。第五章对全文进行总结与展望。

关键词：超高效液相色谱质谱 5-羟基吲哚乙酸吉非替尼

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消痰和胃方防治化疗延迟性呕吐的机制研究

中华中医药杂志 2012年第4期27卷 977-981页

作者：施俊魏品康解放军总医院军医进修学院学员队北京100853 第二军医大学长征医院中医科上海200003

目的:探索消痰和胃方防治化疗诱导延迟性呕吐的作用机制。方法:大鼠分为空白组、模型组、格拉司琼组(盐酸格拉司琼灌胃2.70mg/kg)和消痰和胃组(消痰和胃方灌胃2.448g/kg),观察顺铂(6mg/kg)腹腔注射造模后0-72h高岭土与正常饲料摄食量;... 详细信息

目的:探索消痰和胃方防治化疗诱导延迟性呕吐的作用机制。方法:大鼠分为空白组、模型组、格拉司琼组(盐酸格拉司琼灌胃2.70mg/kg)和消痰和胃组(消痰和胃方灌胃2.448g/kg),观察顺铂(6mg/kg)腹腔注射造模后0-72h高岭土与正常饲料摄食量;采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法检测72h时大鼠血清、脑干、小肠组织中5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。结果:顺铂干预后0-72h各组正常饲料摄食量存在统计学差异(P5-HT含量存在统计学意义(P=0.0119和P=0.0000),消痰和胃方可降低顺铂诱导后血清与脑干中5-HT含量,并且优于格拉司琼(P5)。结论:消痰和胃方可改善顺铂诱导的厌食症状,其防治化疗延迟性呕吐的机制可能与降低血清与脑干5-HT含量有关。

关键词：消痰和胃方化疗延迟性呕吐 5-羟色胺 5-羟基吲哚乙酸

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糖尿病肾病患者血清色氨酸代谢谱的靶向研究

包头医学院学报 2023年第4期39卷 7-12页

作者：苏玲米焱王彩丽包头医学院第一附属医院肾内科内蒙古包头014010

目的:研究糖尿病肾病(DKD)患者与健康对照人群血清色氨酸不同代谢通路中代谢物的差异,分析差异代谢物与临床指标之间的相关性。方法:以包头医学院第一附属医院肾内科和内分泌科住院部患者为研究对象,选取10例DKD患者为疾病研究组,10例... 详细信息

目的:研究糖尿病肾病(DKD)患者与健康对照人群血清色氨酸不同代谢通路中代谢物的差异,分析差异代谢物与临床指标之间的相关性。方法:以包头医学院第一附属医院肾内科和内分泌科住院部患者为研究对象,选取10例DKD患者为疾病研究组,10例健康体检者为正常对照组,收集血液标本。采用靶向代谢组学方法分析两组人群中血清色氨酸及其代谢物的差异,进行生物信息学和统计学分析,阐明其在DKD中的意义。结果:在两组血清中鉴定出5个差异代谢物,其中DKD患者血清中L-色氨酸(L-TRP)、5-羟色胺(5-HT)的水平明显低于健康对照组(P5),而5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、犬尿氨酸(KYN)和3-吲哚丙酸(IPA)的水平则增加,差异具有统计学意义(P5),5-HIAA和IPA均与血肌酐呈显著正相关,与肾小球滤过率呈显著负相关。结论:DKD患者血清色氨酸代谢物水平与健康对照组相比具有明显的差异,其中的某些差异代谢物还与DKD的发生发展具有明显的相关性。

关键词：糖尿病肾病色氨酸代谢犬尿氨酸途径 5-羟基吲哚乙酸