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作者：李小琴山西医科大学

学位级别：硕士

目的探讨5/6肾切除残肾慢性肾衰幼年大鼠慢性进展性肾小管间质损伤过程中,转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达趋势以及其介导的肾小管上皮细胞转分化(EMT)过程中相关蛋白成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、... 详细信息

目的探讨5/6肾切除残肾慢性肾衰幼年大鼠慢性进展性肾小管间质损伤过程中,转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达趋势以及其介导的肾小管上皮细胞转分化(EMT)过程中相关蛋白成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的动态表达趋势,并观察给予血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和血管紧张素受体阻断剂(ARB)干预治疗的影响。方法96只3周龄幼年雌性SD大鼠,随机将其分为假手术组(n=32)、5/6NX未干预组(n=32)和5/6NX干预组(n=32),采用5/6肾切除法制备残肾慢性肾衰模型,于手术完成后,经测定大鼠肾功能及肾脏病理以评价模型是否成功。5/6NX干预组于模型成功后给予ACEI+ARB联合灌胃。分别于第2、4、8、12周末,每组随机选8只大鼠,于内眦静脉采血测血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN);处死动物,取出肾组织,同时处死假手术组大鼠,取出肾组织;石蜡切片,HE染色观察肾小管间质损害及纤维化程度;免疫组化法检测肾小管上皮细胞TGF-β1、E-cadherin、FSP-1、α-SMA和vimentin等各目标蛋白质分子的表达。结果 ⑴HE染色显示:假手术组大鼠肾组织无明显变化;5/6NX未干预组大鼠随着实验时间的延长,肾小管间质病变日趋明显,表现为组织中炎性细胞(主要为单核细胞)浸润,肾小管上皮细胞肿胀,肾小管塌陷及肾小管间隙加宽,并进行性形成纤维化病变;5/6NX干预组大鼠小管间质病变则相对减轻。 ⑵免疫组化染色半定量积分值显示:5/6NX未干预组和干预组大鼠肾小管上皮细胞E-cadherin的表达随着实验时间的延长而逐渐减少,各时间点与假手术组比差异具有统计学意义(P5),第8与12周,干预组蛋白表达量与未干预组比差异具有统计学意义(P5);而FSP-1、vimentin的表达逐渐增加,均较同期假手术组有显著差异(P5),除第2周外,各时间点干预组蛋白表达量与未干预组比差异具有统计学意义(P5);同时,α-SMA的表达量也逐渐增加,除第2周外,各时间点5/6NX未干预组和干预组α-SMA与假手术组比差异具有统计学意义(P5),第8与12周干预组蛋白表达量与未干预组比差异具有统计学意义(P5);TGF-β1的表达量逐渐增加,除第2周外,各时间点5/6NX未干预组和干预组TGF-β1蛋白的表达量与假手术组比差异具有统计学意义(P5),除第2周外,干预组蛋白表达量与未干预组比差异具有统计学意义(P5)。结论5/6肾切除残肾慢性肾衰幼年大鼠在其肾损伤过程中前致纤维化因子TGF-β1表达呈逐渐上调趋势,其介导的肾小管上皮细胞转分化(EMT)相关标志蛋白FSP-1、α-SMA和vimentin的表达同步上调,而E-cadherin的表达呈下降趋势,给予ACEI和ARB干预后可逆转这些相关蛋白分子的表达趋势。

关键词： 5/6肾切除幼年大鼠肾小管上皮细胞转分化 α-平滑肌肌动蛋白波形蛋白 E-钙黏蛋白成纤维细胞特异性蛋白-1 肾小管间质纤维化

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慢性肾衰幼年大鼠肾小管上皮细胞转分化的分子表型及干预研究

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山西医科大学学报 2009年第4期40卷 312-315页

作者：李小琴马宏赵健玲李卫卫赵晓华武艳李娟王亚娟山西医科大学第一临床医学院儿科太原030001

目的探讨5/6肾切除残肾慢性肾衰幼年大鼠慢性进展性肾小管间质纤维化形成过程中,肾小管上皮细胞转分化(EMT)的相关蛋白a-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的动态表达趋势。方法72只3-4周龄幼年SD雌性大鼠,随机将其分为... 详细信息

目的探讨5/6肾切除残肾慢性肾衰幼年大鼠慢性进展性肾小管间质纤维化形成过程中,肾小管上皮细胞转分化(EMT)的相关蛋白a-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的动态表达趋势。方法72只3-4周龄幼年SD雌性大鼠,随机将其分为假手术组(n=24)、5/6NX未治疗组(n=24)和5/6NX治疗组(n=24)。采用5/6肾切除法制备慢性残肾肾衰模型,采用免疫组化染色法于模型成功后第2,4,8,12周分别检测残肾组织中α-SMA、E-cadherin的表达。结果随着实验时间的延长,5/6NX未治疗组肾小管间质病变日趋明显,表现为组织中炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞肿胀,肾小管塌陷及肾小管间隙加宽,并进行性形成纤维化病变。随着实验时间的延长,α-SMA在5/6NX未治疗组和治疗组中表达强度均呈增高趋势,除第2周外,相同时间点α-SMA在各组的表达强度差异具有统计学意义(P5),在未治疗组表达最高,治疗组次之,假手术组最低。随着实验时间的延长,E-cadherin在5/6NX未治疗组和治疗组中表达强度均呈降低趋势,除第2周外,相同时间点E-cadherin在各组的表达强度差异具有统计学意义(P5),在未治疗组表达最低,治疗组次之,假手术组最高。结论5/6肾切除残肾慢性肾衰幼年大鼠在其肾损伤过程中存在EMT现象,α-SMA和E-cadherin是EMT的标志性蛋白,给予ACEI和ARB干预具有一定的治疗效应。

关键词： 5/6肾切除幼年大鼠肾小管上皮细胞转分化 α-SMA E—cadherin 肾小管间质纤维化

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