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3-苯氧基苯甲酸降解菌的分离及降解特性研究

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微生物学通报 2005年第5期32卷 62-66页

作者：许育新李晓慧秦华李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部环境微生物工程重点开放实验室中国科学院南京土壤研究所生物与生化研究室南京210008

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7·0,30... 详细信息

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7·0,30℃,160r/min,装瓶量为100mL/250mL的条件下,PBM11经过24h可完全降解200mg/L的3-PBA;添加低浓度的外源营养物质能够在一定程度上促进降解;Cu2+和Co2+等对其降解性能有抑制作用,而Fe3+有明显的促进作用;通过分析底物利用情况,初步推断3-PBA降解的中间产物可能为原儿茶酸和苯酚。经过7d的处理,PBM11对土壤中100mg/L3-PBA的降解率为66·25%。从PBM11中检测到一个质粒。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸降解菌降解特性中间产物

3-苯氧基苯甲酸降解真菌的筛选及其降解特性

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食品科学 2013年第7期34卷 152-156页

作者：袁怀瑜刘书亮王志龙赵楠赖文四川农业大学食品学院四川雅安625014

以传统发酵食品为菌源,经不同质量浓度3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)梯度驯化,筛选出6株具有3-PBA降解能力的霉菌,其中从砖茶中分离的降解菌YAT1可在22h内完全降解PD培养基中100mg/L的3-PBA,根据其形态特征和ITS序列分析(GenBank Accession ***... 详细信息

以传统发酵食品为菌源,经不同质量浓度3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)梯度驯化,筛选出6株具有3-PBA降解能力的霉菌,其中从砖茶中分离的降解菌YAT1可在22h内完全降解PD培养基中100mg/L的3-PBA,根据其形态特征和ITS序列分析(GenBank Accession ***366070),将其鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。动力学研究表明,YAT1降解3-PBA的过程符合一级动力学方程,在测试的底物(3-PBA)质量浓度、温度、pH值范围内,3-PBA半衰期为5.635～12.160h,远远低于其自然降解半衰期(180d),且该反应的速率受pH值影响不大,受底物质量浓度和温度的影响较大。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸生物降解黑曲霉降解特性

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3-苯氧基苯甲酸降解酶产生条件的优化

食品工业科技 2009年第10期30卷 181-184页

作者：夏闻姚开贾冬英刘书亮四川大学轻纺与食品学院四川成都610065

采用Plackett-Burman法考察了K2HPO4、KH2PO4、MgSO4.7H2O、(NH4)2SO4、3-苯氧基苯甲酸浓度和初始pH、装液量及接种量8个因素对产酸克雷伯氏菌生成3-苯氧基苯甲酸降解酶的影响,并利用Box-Behnken实验设计及响应面分析对其产酶条件进行... 详细信息

采用Plackett-Burman法考察了K2HPO4、KH2PO4、MgSO4.7H2O、(NH4)2SO4、3-苯氧基苯甲酸浓度和初始pH、装液量及接种量8个因素对产酸克雷伯氏菌生成3-苯氧基苯甲酸降解酶的影响,并利用Box-Behnken实验设计及响应面分析对其产酶条件进行了优化。结果表明,培养基中(NH4)2SO4浓度、培养基装液量和接种量对菌体产生3-苯氧基苯甲酸降解酶的影响具有显著性;当培养基中K2HPO4浓度为2.0g/L、KH2PO4浓度为0.5g/L、MgSO4.7H2O浓度为0.2g/L、(NH4)2SO4浓度为0.9g/L、3-苯氧基苯甲酸浓度为200mg/L、初始pH为7.2、250mL锥形瓶装液量为56.6mL、接种量(种子液OD600为1.000)为5.9%(v/v)时,3-苯氧基苯甲酸降解酶的活力可达25.72U/mL。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸降解酶优化备件响应面分析

丝状真菌降解拟除虫菊酯类农药和3-苯氧基苯甲酸研究进展

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食品科学 2023年第19期44卷 207-219页

作者：周巧张梦梅李建龙胡凯弟李琴刘书亮四川农业大学食品学院四川雅安625014

拟除虫菊酯(pyrethroids,PYRs)类农药由于低毒、高效被广泛使用,其残留造成的环境和食品安全问题日益严重,3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid,3-PBA)是PYRs的主要中间降解产物之一,比母体农药更稳定,毒性更强,其残留进一步加重了环... 详细信息

拟除虫菊酯(pyrethroids,PYRs)类农药由于低毒、高效被广泛使用,其残留造成的环境和食品安全问题日益严重,3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid,3-PBA)是PYRs的主要中间降解产物之一,比母体农药更稳定,毒性更强,其残留进一步加重了环境和农产品污染。近年来,丝状真菌对PYRs和3-PBA降解的相关研究陆续被报道,其主要集中在降解菌株筛选、降解特性、降解途径及降解酶定位等方面,对于降解过程中涉及的关键酶及其编码基因少见报道。随着测序技术的发展,分子生物学技术为挖掘丝状真菌降解酶及编码基因提供了新途径。本文简述了PYRs和3-PBA的基本性质、残留现状及危害,综述了降解PYRs和3-PBA的丝状真菌、降解途径及降解酶,并对降解酶及其编码基因筛选和验证方法进行了展望,以期为揭示丝状真菌对PYRs及3-PBA的降解途径和降解机制提供理论依据,为消减环境及农产品中残留农药提供参考。

关键词：拟除虫菊酯类农药 3-苯氧基苯甲酸丝状真菌降解途径降解酶降解酶基因

3-苯氧基苯甲酸降解菌Sphingobium sp. BA3的分离鉴定、生物学特性及基因工程菌的构建

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3-苯氧基苯甲酸降解菌Sphingobium sp. BA3的分离鉴定、生物学特...

作者：段晓芹南京农业大学

学位级别：硕士

从石油污染土壤中分离到1株能以3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)为唯一碳源生长的细菌BA3 (GenBank Accession ***176409)。据其生理生化特征和16S rRNA基因序列序列相似性分析,将该菌鉴定为鞘脂菌属(Sphingobium sp.)。对BA3的生物学特性研究结... 详细信息

从石油污染土壤中分离到1株能以3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)为唯一碳源生长的细菌BA3 (GenBank Accession ***176409)。据其生理生化特征和16S rRNA基因序列序列相似性分析,将该菌鉴定为鞘脂菌属(Sphingobium sp.)。对BA3的生物学特性研究结果显示,该菌株在pH5.0-8.0范围内生长良好,在pH7.0生长最好,最适生长温度为30℃,装液量20mL时,生长量最大,随着装液量的增加生长呈下降趋势。在5-15mg·L-1的盐浓度范围生长较好,以葡萄糖为碳源,以有机氮为氮源的培养基中生长较好,对链霉素有抗性。该菌株在60h内对100mg L-1的3-苯氧基苯甲酸降解率达到99%。降解3-苯氧基苯甲酸的最适温度为30℃,pH值为7.0,降解速率与初始接种量呈正相关。接种量大于3%时有较高降解效果。通过降解菌株BA3利用化合物的情况,发现能利用邻苯二酚、原儿茶酸、对苯二酚、和间苯二酚等,但不能利用苯酚、对硝基苯酚和2,4-二硝基苯酚。根据下载的1,2-双加氧酶基因的保守区设计引物,从3-PBA降解菌株BA3扩增到邻苯二酚1,2-加氧酶基因,得到400bp大小的片段,通过比对发现该序列与Sphingobium ***3和Sphingobium ***2的catA基因同源性最高,达到84%。拟除虫菊酯类杀虫剂pytH水解酶基因为研究发现的一个新的菊酯水解酶基因,过PCR从菊酯降解菌株JZ-2总DNA扩增了pytH,将pytH定向克隆到pBBRMCS-5载体上,构建重组质粒pPYTH,在辅助质粒pRK600的帮助下,三亲接合将pPYTH转移到3-PBA降解菌株Sphingobium ***3中,得的工程菌Sphingobium ***3-pytH可以快速降解菊酯类杀虫剂及其中间产物3-PBA;BA3-pytH对菊酯的降解效率较出发菌株JZ-2高。该基因工程菌应比野生菌株JZ-2在菊酯污染环境的生物修中具有优势。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸生物降解鞘脂菌菊酯水解酶基因基因工程菌

一株3-苯氧基苯甲酸降解菌的筛选及其协同Bacillus licheniformis G-04降解高效氯氰菊酯的研究

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微生物学报 2019年第1期59卷 157-168页

作者：胡琼唐洁刘波陈廷廷孙擎张庆西华大学食品与生物工程学院四川成都610039 西华大学食品与生物工程学院古法发酵生物技术研究所四川成都610039

【目的】从长期受拟除虫菊酯类农药污染的白菜根系土壤分离1株3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid, 3-PBA)降解菌,并探究其与Bacillus licheniformis G-04协同作用对高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin,Beta-CP)的降解及污染土壤的生物... 详细信息

【目的】从长期受拟除虫菊酯类农药污染的白菜根系土壤分离1株3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid, 3-PBA)降解菌,并探究其与Bacillus licheniformis G-04协同作用对高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin,Beta-CP)的降解及污染土壤的生物修复,为土壤农药残留危害处理提供优良菌种。【方法】采用富集驯化、筛选纯化方法,筛选3-PBA降解菌,并通过形态和生理生化特征以及16S rRNA序列分析进行鉴定。利用Origin 8.0分析3-PBA降解菌与B. licheniformis G-04的生长降解动力学过程。同时,采用高效液相色谱法评估两菌株协同降解Beta-CP的能力及其对受Beta-CP污染土壤的修复作用。【结果】筛选得到1株3-PBA高效降解菌HA516,48 h对3-PBA (100 mg/L)的降解率达到87.73%,经鉴定为皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii);构建了该菌株和B. licheniformis G-04的生长降解动力学方程,结果表明模型与实验数据能较好拟合;以6.7∶3.3的接种比例先接种B. licheniformis G-04,24 h后再接入A. pittii HA516协同作用,在48 h,Beta-CP (50 mg/L)的降解率达78.37%,较单菌株(B. licheniformisG-04)的降解率(40.47%)提高了37.90%,半衰期从58.39h缩短为24.51h。土壤修复实验表明,第7天协同组对Beta-CP(30mg/kg)的降解率较单菌株提高了33.26%,达到79.27%。【结论】***516是1株3-PBA高效降解菌,能与B. licheniformis G-04协同增效降解Beta-CP,可作为修复3-PBA或拟除虫菊酯类农药污染的优良微生物资源。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸高效氯氰菊酯协同降解 Acinetobacter pittii HA516 Bacillus licheniformisG-04 土壤生物修复

食源米曲霉菌株的分离及其降解高效氯氰菊酯和3-苯氧基苯甲酸的特性研究

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微生物学报 2021年第9期61卷 2693-2708页

作者：赵恬叶张梦梅陈媛王熙刘爱平何利邹立扣李建龙刘书亮四川农业大学食品学院四川雅安625014 四川农业大学资源学院四川成都611130 四川农业大学食品加工与安全研究所四川雅安625014

【目的】通过研究不同食源米曲霉菌株对高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin,β-CP)及其必经代谢产物3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid,3-PBA)的降解特性,了解不同菌株的降解共性及差异性,为农副产品和发酵食品的农残减除提供理论基础... 详细信息

【目的】通过研究不同食源米曲霉菌株对高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin,β-CP)及其必经代谢产物3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid,3-PBA)的降解特性,了解不同菌株的降解共性及差异性,为农副产品和发酵食品的农残减除提供理论基础和食品用安全微生物资源。【方法】以发酵食品为菌源,通过形态学鉴定、ITS测序和菌株产黄曲霉毒素B1(AFB1)的测定筛选鉴定米曲霉菌株,采用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、液相色谱-质谱法(LC-MS)对米曲霉模式菌株RIB40(保藏编号:ATCC 42149)、米曲霉M4(保藏编号:CGMCC 11645)和鉴定获得的米曲霉菌株的β-CP和3-PBA降解特性进行研究。【结果】鉴定获得15株不产AFB1的食源米曲霉,17株米曲霉在马铃薯液体培养基(PD)中振荡培养5 d,对50 mg/L的β-CP降解率为19.33%−50.29%不等,检测到降解产物3-PBA,对50 mg/L的3-PBA降解率为45.59%−99.67%不等;分别在添加50 mg/Lβ-CP和3-PBA的无机盐培养基(MM)中振荡培养5 d,米曲霉菌株均未生长,对β-CP和3-PBA无降解;在富集培养基(GM)中振荡培养2 d,对100 mg/L的3-PBA转化或降解率为69.28%−99.58%不等,检测到3-苯氧基苄醇(3-PBlc)和羟基-3-苯氧基苯甲酸(HO-3-PBA)。【结论】食源米曲霉具有共代谢降解β-CP和3-PBA的共性,3-PBA为β-CP降解中间产物,米曲霉对3-PBA普遍具有较高的降解率。在3-PBA降解初期,米曲霉可将其短暂还原生成毒性相对较低的3-PBlc,同时,3-PBA逐渐羟基化生成水溶性更强的HO-3-PBA参与下游降解。

关键词：食源微生物米曲霉生物降解 beta-氯氰菊酯 3-苯氧基苯甲酸

茯砖茶中降解3-苯氧基苯甲酸的“金花菌”筛选及其降解特性

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食品与发酵工业 2013年第10期39卷 45-51页

作者：李金永刘书亮姚开李建龙四川农业大学食品学院硕士研究生四川雅安625014 四川大学轻纺与食品学院四川成都610065

以茯砖茶为菌源，分离筛选出20株具有3-苯氧基苯甲酸（3-PBA）降解能力的“金花菌”，其中分离的菌株ET1可在7d内完全降解PD培养基中100mg／L的3-PBA，根据其形态特征和ITS序列分析（Gen Bank Accession ***317836），将其鉴定为冠突散... 详细信息

以茯砖茶为菌源，分离筛选出20株具有3-苯氧基苯甲酸（3-PBA）降解能力的“金花菌”，其中分离的菌株ET1可在7d内完全降解PD培养基中100mg／L的3-PBA，根据其形态特征和ITS序列分析（Gen Bank Accession ***317836），将其鉴定为冠突散囊菌（Eurotiumcristatum）。动力学研究表明，菌株ET1降解3-PBA的过程符合一级动力学方程，在测试的3-PBA质量浓度、温度、pH值范围内，3-PBA半衰期为1．7～3．2d，远远低于其自然降解半衰期（180d），且该反应的速率受pH值影响较大，受3-PBA质量浓度和温度的影响相对较小。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸微生物降解 “金花菌” 冠突散囊菌降解特性

一株路德维希肠杆菌的筛选及其对3-苯氧基苯甲酸的降解特性分析

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微生物学报 2018年第5期58卷 830-841页

作者：刘波唐洁陈廷廷曾林曾朝懿张庆西华大学食品与生物工程学院四川成都610039 西华大学食品与生物工程学院古法发酵生物技术研究所四川成都610039

【目的】3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid,3-PBA)的消除是解决拟除虫菊酯类农药污染的关键,目的是从受拟除虫菊酯类农药污染植物根系土壤中分离出3-PBA高效降解菌株。【方法】采用富集驯化、筛选纯化方法,以3-PBA为唯一碳源、能... 详细信息

【目的】3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid,3-PBA)的消除是解决拟除虫菊酯类农药污染的关键,目的是从受拟除虫菊酯类农药污染植物根系土壤中分离出3-PBA高效降解菌株。【方法】采用富集驯化、筛选纯化方法,以3-PBA为唯一碳源、能源筛选3-PBA降解菌株;菌株鉴定采用形态、生理生化和16S r RNA序列分析法;并研究其生长降解动力学特性,最后采用Box-Behnken响应面分析确定最佳降解条件。【结果】从川北地区大豆根系土壤中筛选得到1株高效降解菌BPBA031,经鉴定为路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii);该菌株耐3-PBA浓度达1600 mg/L,其生长降解过程分别符合Logistic生长动力学(μm=0.09149 h^(–1),X_m=1.1145)和一级降解动力学模型(k=0.02085,t_(1/2)=33.24 h);对3-PBA降解的最适条件为34–37°C、3-PBA浓度25–200 mg/L和p H 7.5–8.5;在35.19°C、30.0 mg/L 3-PBA和p H 7.58条件下,该菌株48 h对3-PBA的降解率达83.75%。【结论】路德维希肠杆菌BPBA031是1株高效3-PBA降解菌,可作为生物修复受3-PBA或拟除虫菊酯类农药污染环境的潜在菌株资源。

关键词：路德维希肠杆菌生物修复 3-苯氧基苯甲酸降解特性