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3-羟基脂肪酸生产及生理学应用研究现状

科技资讯 2010年第9期8卷 1-1,4页

作者：邹湘辉广东省韩山师范学院生物系广东潮州521041

本文简要介绍了国内外通过微生物和化学合成方法来生产手性聚羟基脂肪酸酯单体3-羟基脂肪酸,以及3-羟基脂肪酸在生理学方面应用的一些研究进展。

关键词： 3-羟基脂肪酸生产应用

气相色谱-质谱联用辅助鉴定细菌内毒素标准品菌种来源的纯度

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色谱 2006年第1期24卷 10-13页

作者：岳丽娜李京华贺高红于万滢邵英光王俊德大连理工大学精细化工国家重点实验室辽宁大连116012 中国科学院大连化学物理研究所辽宁大连116023

为分析内毒素标准品菌种来源的纯度,建立了采用气相色谱-质谱联用法、以N,O-双三甲基硅三氟乙酰胺作为硅烷化试剂对待测物进行衍生、对内毒素标准品所含的3-羟基脂肪酸种类进行检测的方法。色谱柱为DB-5(60m×0.25mm i.d.);载气为氦气,... 详细信息

为分析内毒素标准品菌种来源的纯度,建立了采用气相色谱-质谱联用法、以N,O-双三甲基硅三氟乙酰胺作为硅烷化试剂对待测物进行衍生、对内毒素标准品所含的3-羟基脂肪酸种类进行检测的方法。色谱柱为DB-5(60m×0.25mm i.d.);载气为氦气,恒压,柱前压206kPa;进样器温度250℃;柱箱初始温度为90℃,保持5m in,以5℃/m in的升温速率升至280℃,保持5m in。进样量为1μL,不分流进样。质谱离子源为电子轰击离子源(E I),离子源温度为250℃,接口温度为280℃。通过对内毒素标准品和大肠杆菌、绿脓杆菌、去离子水中3-羟基脂肪酸种类的比较,探讨了通过3-羟基脂肪酸种类来辅助判断内毒素标准品菌种来源的问题。结果显示,来源为大肠杆菌的9 000EU/支内毒素国家标准品中只含有3-羟基十四烷酸;20EU/支的内毒素工作标准品中除含有3-羟基十四烷酸外,还含有3-羟基十二烷酸,说明其含有非大肠杆菌的细菌。

关键词：气相色谱质谱 3-羟基脂肪酸内毒素标准品大肠杆菌

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基于脂类的环境pH代用指标:进展与思考

第四纪研究 2021年第4期41卷 1094-1114页

作者：黄钰莹裴宏业李婧婧党心悦钱施赵世锦杨欢中国地质大学(武汉)流域关键带演化湖北省重点实验室湖北武汉430074 中国地质大学(武汉)生物地质与环境地质国家重点实验室湖北武汉430078 中国科学院南京地理与湖泊研究所湖泊与环境国家重点实验室江苏南京210008

pH是环境中影响生物地球化学过程的关键因子之一,其变化能够影响土壤肥力、改变环境微生物群落结构、影响海洋生物形成钙质骨骼和介壳等。不同沉积环境中pH的变化受控于不同的因素。对于地质历史时期一些重建起来难度较大的环境因素,如... 详细信息

pH是环境中影响生物地球化学过程的关键因子之一,其变化能够影响土壤肥力、改变环境微生物群落结构、影响海洋生物形成钙质骨骼和介壳等。不同沉积环境中pH的变化受控于不同的因素。对于地质历史时期一些重建起来难度较大的环境因素,如降雨量和大气CO_(2)浓度等的变化,pH能够充当“桥梁”的作用。通过重建沉积物或者水体中pH的变化进而间接实现对这些环境因子变化的反演。通过调查现代环境中生物脂类与环境关系等手段,已经逐渐发展起来一系列的环境pH代用指标,包括细菌支链型甘油二烷基甘油四醚化合物(GDGTs)的环化指标(CBT、CBT5ME、CBT6ME)和异构体指标IR(IR6ME、IBT等)、革兰氏阴性菌3-羟基脂肪酸的RIAN、Branched Index、RIN指标、C31藿烷的ββ/(αβ+ββ)立体异构体指标、长链正构2-烷基酮指标等。本文总结了基于生物脂类的pH指标其建立过程及应用原理,并对这些指标在古环境中的应用进行概述,归纳各自优缺点和应用范围,并提出了这些指标未来的研究方向。

关键词： pH 代用指标 GDGTs 单醚类化合物 3-羟基脂肪酸藿烷脂肪酮

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细菌内毒素检测中问题的研究

细菌内毒素检测中问题的研究

作者：岳丽娜大连理工大学

学位级别：硕士

细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的脂多糖成分,能导致人体发热、休克甚至死亡。内毒素能与鲎试剂发生特异性的反应而被检测,主要的检测方法有:凝胶法、浊度法和比色法。其中凝胶检测法具有检测速度快、特异性好、操作方便等优点,被... 详细信息

细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的脂多糖成分,能导致人体发热、休克甚至死亡。内毒素能与鲎试剂发生特异性的反应而被检测,主要的检测方法有:凝胶法、浊度法和比色法。其中凝胶检测法具有检测速度快、特异性好、操作方便等优点,被各国药典收录。并规定当各种内毒素检测方法得出的检测结果不一致时,以凝胶法为仲裁方法。然而凝胶法存在一些缺欠,如:结果判断有主观性影响,灵敏度差。为解决这些问题,论文考察了不同浓度的内毒素与鲎试剂在试管中的反应,采用传统的凝胶法观察凝胶的形成情况,同时在BET-32C内毒素测定仪上采用动态浊度法检测其浊度(由吸光度表示又称光密度,OD)值,建立两者之间的关系。凝胶形成时凝胶的OD值为0. 067±0. 012。我们选择下限0. 055为凝胶形成的临界值,将OD临界值作为凝胶检测的指标,采用内毒素检测仪器代替目视法观察凝胶的形成情况,建立了半自动凝胶检测法。使用19种鲎试剂对该临界OD值进行验证,其中18种鲎试剂的结果与药典规定的鲎试剂复核试验结果一致。此外,对克林霉素磷酸注射液和头孢拉定注射液(共7个批号)分别用传统的凝胶法和本论文提出的半自动凝胶检测法进行内毒素限量的测定对比,结果一致。在常规内毒素检测中,需要做药品阳性对照实验,目的在于证明被检查的供试品对检测不存在抑制因素。在检测克林霉素磷酸注射液中的内毒素时经常出现药品阳性对照试管假阴性结果的问题。本论文采用半自动凝胶检测法,对这一问题进行了研究,结果发现使用灵敏度0. 125EU/ml的鲎试剂,药品干扰仍然存在。稀释药品,使用更高灵敏度的鲎试剂可以解决这一问题。在使用浊度法检测内毒素时经常出现标准曲线斜率变化大的现象。为此论文研究了标准品的菌种纯度问题。采用气相色谱质谱联用法,对内毒素标准品和大肠杆菌、绿脓杆菌、环境内毒素样品中3-羟基脂肪酸种类进行了比较,结果显示,20EU/支的标准品中含有3-羟基十二烷酸,即其含有非大肠杆菌的细菌来源。这与药典规定不符。

关键词：内毒素鲎试剂检测法凝胶法浊度法 3-羟基脂肪酸

石油烃降解菌群的分离鉴定及菌株间依存机制研究

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石油烃降解菌群的分离鉴定及菌株间依存机制研究

作者：余焱复旦大学

学位级别：硕士

本研究以市政污水处理厂的剩余活性污泥作为菌种来源,以柴油为唯一碳源,采用生物滴滤池挂膜富集培养石油烃降解菌群。进一步筛选、分离出的一株高效石油烃降解菌X2b经形态学和生理生化鉴定,结果表明,X2b为芽孢杆菌属,接近于蜡状芽孢杆... 详细信息

本研究以市政污水处理厂的剩余活性污泥作为菌种来源,以柴油为唯一碳源,采用生物滴滤池挂膜富集培养石油烃降解菌群。进一步筛选、分离出的一株高效石油烃降解菌X2b经形态学和生理生化鉴定,结果表明,X2b为芽孢杆菌属,接近于蜡状芽孢杆菌群。对X2b降解柴油的环境影响因素研究结果表明,相比石油烃中的C15-C23,菌株X2b优先降解C9-C14. X2b降解石油烃的最优NaCl质量浓度为2%,且X2b在NaCl质量浓度为5%的条件下仍可以保持较高的活性,并在发酵培养30d后达到75%的降解率;菌株X2b降解石油烃的最适初始pH为7.0,在pH小于6.0、大于8.0的条件下,菌株X2b对石油烃的降解能力受到明显抑制,且酸性环境的抑制作用大于碱性环境;X2b在初始柴油浓度为1680mg/L和4200mg/L的条件下,3d后即可达到较高的降解率(91.8%和89.9%);但在过高的初始柴油浓度(16800mg/L)条件下,柴油各组分的降解均受到明显抑制,表明过高的石油烃浓度不利于其微生物降解。研究还提取了Bacillus cereusX2b的基因组DNA和质粒DNA,并采用凝胶电泳法确定DNA片段初步信息。在对目的基因alkB的PCR产物进行克隆和鉴定后进行DNA测序。测序结果结合BLAST分析表明,alkB的保守序列大小为547bp,且与四种已报道的alkB烷烃羟化酶基因的序列同源性分别为86%、99%、99%和95%。作为一株高耐盐性和兼性厌氧菌,X2具有应用于高盐海水环境中石油污染生物修复的潜力。本研究从生物滴滤池中筛选、分离出一株高效生物表面活性剂产生菌X1A-2,其产生的表面活性剂可使发酵液的表面张力从67.6mN/m降至约33.0mN/m。经形态学和生理生化鉴定,X1A-2属戈登氏菌属。产生物表面活性剂环境影响因素的研究结果表明,X1A-2可良好适应6.0～8.0的pH环境,在极端pH下,其产表面活性剂能力受到明显抑制;菌株在4%的NaCl质量浓度以下生长状况良好,可以完全适应正常情况下的海水盐度;可良好适应25℃-40℃的温度范围,低温条件下生长较缓慢;石油烃类碳源的存在对其产表面活性剂影响不大,而葡萄糖等糖类碳源对其产表面活性剂有一定抑制作用。X1A-2模拟石油污染状况下产生物表面活性剂的最优条件：pH7.5、温度30℃和NaCl质量浓度2%。本研究从高效生物表面活性剂产生菌X1A-2的发酵液中分离纯化了一种脂肽。结果表明,X1A-2产生物表面活性剂分子量为1022Da,脂肪酸部分为C13p-羟基脂肪酸,氨基酸链接顺序为Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Ile。属脂肽类生物表面活性剂,为表面活性素系列物质中的C13表面活性素。研究结果同时表明,Surfactin系列脂肽可由戈登氏菌属(Gordonia)所产生。对菌株X2b以正十六烷为唯一碳源培养条件下的代谢产物进行了分析,结果表明,X2b的代谢产物中存在正十六醇和3-羟基十烷酸。结合表面活性素在菌体内的合成路径,菌株X2b代谢产物的分析结果,以及X1A-2产生物表面活性剂的鉴定结果,推断出两个菌株的共存机制：即X2b的初级代谢产物3-羟基脂肪酸启动了X1A-2产表面活性素的机制,X1A-2产生的表面活性素进一步促进了石油烃在水体中的分散性,从而使X2b对石油烃的降解效果更好。研究结果从微生物物质传递角度解释了为何石油烃降解菌群中易发现表面活性剂产生菌,以及本研究中不具备石油烃降解能力的X1A-2可在生物滴滤池中繁殖生长的现象。结论可为海洋石油污染的生物修复提供十分有价值的参考。

关键词：高效石油烃降解菌高效生物表面活性剂产生菌 C13表面活性素 3-羟基脂肪酸依存机制

畜禽舍空气细菌内毒素两种检测方法的比较研究

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中国动物检疫 2016年第9期33卷 88-92页

作者：钟召兵王宁杨夫会泰安市岱岳区畜牧兽医局山东泰安271000

[目的 ]比较气相色谱-串联质谱法(GC-MSMS)与鲎试验(LAL)在检测畜禽舍空气内毒素中的应用效果及相关性,以及气载内毒素是否对环境和饲养人员健康构成危害。[方法 ]通过国际标准AGI-30液体冲击式空气采样器,在4个养殖场16个畜禽舍采集空... 详细信息

[目的 ]比较气相色谱-串联质谱法(GC-MSMS)与鲎试验(LAL)在检测畜禽舍空气内毒素中的应用效果及相关性,以及气载内毒素是否对环境和饲养人员健康构成危害。[方法 ]通过国际标准AGI-30液体冲击式空气采样器,在4个养殖场16个畜禽舍采集空气样品,采用GC-MSMS与LAL测定空气细菌内毒素浓度。[结果 ]LAL测定的牛舍、猪舍、羊舍和禽舍空气细菌内毒素浓度中间值分别为1.85×10~5 EU/m^3、2.76×10~6 EU/m^3、4.82×10~5 EU/m^3、6.55×10~6 EU/m^3;而GC-MSMS测定的分别为3.3×10~4 EU/m^3、1.26×10~5 EU/m^3、2.4×10~4EU/m^3和8.21×10~5 EU/m^3。GC-MSMS在禽舍检测出的空气内毒素浓度显著大于其他畜舍(p3EU/m^3。用GCMSMS与LAL测定的禽舍和羊舍空气样品中细菌内毒素浓度之间存在显著相关(p3-羟基脂肪酸。LAL测定的内毒素浓度与含有C_(14)-C_(16)链3-羟基脂肪酸量之间有显著相关(p<0.05)。[结论 ]GC-MSMS与LAL联合应用可以提高检测气载内毒素的准确性,且本研究表明畜禽舍中检测到的空气细菌内毒素浓度可以危害人类和家畜动物健康。

关键词：畜禽舍气载细菌内毒素鲎试验气相色谱-质谱 3-羟基脂肪酸