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秋水仙素不同处理方法和浓度诱导百合2n配子的研究

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北方园艺 2010年第11期 98-100页

作者：臧淑珍杨佳明赵兴华付波张道旭屈连伟辽宁省农业科学院花卉研究所辽宁沈阳110161

以亚洲百合杂种系中的瓦迪索为试材,进行秋水仙素不同处理方法和处理浓度诱导百合2n配子的研究。结果表明:用注射法处理瓦迪索诱导效果优于用脱脂棉包裹法;注射法中秋水仙素浓度0.1%,用量为0.1 mL的处理效果最好,花蕾异常膨大率、花蕾... 详细信息

以亚洲百合杂种系中的瓦迪索为试材,进行秋水仙素不同处理方法和处理浓度诱导百合2n配子的研究。结果表明:用注射法处理瓦迪索诱导效果优于用脱脂棉包裹法;注射法中秋水仙素浓度0.1%,用量为0.1 mL的处理效果最好,花蕾异常膨大率、花蕾长宽比、花径、柱头长度与对照差异均达极显著水平,大花粉比率最高为0.032。

关键词：百合秋水仙素 2n配子

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彩色马蹄莲2n配子育种的理论基础

安徽农业科学 2009年第7期37卷 2940-2942页

作者：石景峰吴红芝云南农业大学园林园艺学院云南昆明650201

以彩色马蹄莲和2n配子方面的文献为基础,综述了2n配子的发生情况、鉴定方式、遗传学机制及其在育种中的作用和提高2n配子产生频率所面临的问题,并对2n配子在彩色马蹄莲杂交育种利用的优越性和可行性进行了分析。

关键词：未减数配子 2n配子彩色马蹄莲育种

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花卉2n配子的形成及细胞学机制研究进展

江苏农业科学 2011年第5期39卷 242-246页

作者：林超莫锡君宋安润周旭红徐州幼儿高等师范学校江苏徐州221004 云南省农业科学院花卉研究所/云南省花卉育种重点实验室/云南省花卉工程中心云南昆明650205 大理学院农学与生物科学学院云南大理671003

综述了花卉2n配子的形成及细胞学机制研究现状,总结近年来花卉2n配子的发生物种、发生频率及鉴别2n配子的发生方法,包括花粉粒大小和形态特征、流式细胞仪、后代非期望倍性的出现、2n配子形成的细胞学特征;对减数分裂异常导致2n配子形... 详细信息

综述了花卉2n配子的形成及细胞学机制研究现状,总结近年来花卉2n配子的发生物种、发生频率及鉴别2n配子的发生方法,包括花粉粒大小和形态特征、流式细胞仪、后代非期望倍性的出现、2n配子形成的细胞学特征;对减数分裂异常导致2n配子形成的细胞学机制进行详细的阐述,为利用花卉2n配子进行多倍体育种提供依据。

关键词：花卉 2n配子多倍体减数分裂异常

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橡胶树三倍体的2n配子来源及发生途径鉴定

南方农业学报 2018年第2期49卷 208-213页

作者：张源源方家林黄肖李维国安泽伟中国热带农业科学院橡胶研究所/国家橡胶树育种中心/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州571737

【目的】明确形成三倍体橡胶树云研77-2和云研77-4的2n配子来源及发生途径,为利用天然2n配子杂交选育多倍体新品种提供参考。【方法】以三倍体橡胶树云研77-2和云研77-4及其亲本为试验材料,通过SSR分子标记鉴定其2n配子来源及发生途径,... 详细信息

【目的】明确形成三倍体橡胶树云研77-2和云研77-4的2n配子来源及发生途径,为利用天然2n配子杂交选育多倍体新品种提供参考。【方法】以三倍体橡胶树云研77-2和云研77-4及其亲本为试验材料,通过SSR分子标记鉴定其2n配子来源及发生途径,并分析2n配子传递亲本的杂合性。【结果】分别通过4个位点可判定形成云研77-2和云研77-4的2n配子来源于母本GT1,无位点判定2n配子来源于父本PR107。从8个位点判定形成云研77-2的2n配子发生途径为第一次减数分裂核复原(FDR),从2个位点判定形成云研77-2的2n配子发生途径为第二次减数分裂核复原(SDR),形成云研77-2的2n配子发生途径为FDR的概率为80.00%。从8个位点判定形成云研77-4的2n配子发生途径为FDR,从3个位点判定形成云研77-4的2n配子发生途径为SDR,形成云研77-4的2n配子的发生途径为FDR的概率为72.73%。形成云研77-2和云研77-4的2n配子分别传递亲本60%和70%的杂合性。【结论】形成云研77-2和云研77-4的2n配子均来源于母本GT1,且其发生途径均为FDR。

关键词：橡胶树三倍体 2n配子发生途径第一次减数分裂核复原(FDR) 第二次减数分裂核复原(SDR)

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部分蔷薇属植物核型分析及2n配子研究

部分蔷薇属植物核型分析及2n配子研究

作者：马雪东北农业大学

学位级别：硕士

蔷薇属（Rosa L.）植物隶属于蔷薇科蔷薇亚科，全世界共有212种，我国有95种，是世界著名的观赏植物之一，在园林绿化中应用广泛。然而，由于东北地区气候条件的影响，兼具观赏性和抗性的月季品种寥寥无几。野生蔷薇资源抗性好观赏性差... 详细信息

蔷薇属（Rosa L.）植物隶属于蔷薇科蔷薇亚科，全世界共有212种，我国有95种，是世界著名的观赏植物之一，在园林绿化中应用广泛。然而，由于东北地区气候条件的影响，兼具观赏性和抗性的月季品种寥寥无几。野生蔷薇资源抗性好观赏性差，多为二倍体，单倍体花粉不可育、萌发率极低，无法与观赏性较好的四倍体栽培月季品种进行远缘杂交。因此，如何克服远缘杂交不亲和性及不育性，培育出观赏性好且抗性强的品种是我们当前育种工作亟待解决的关键问题。本研究以12个寒地野生蔷薇属种质资源和10个现代月季栽培品种为试材，对未知倍性的6个野生蔷薇种质进行核型分析，观察7个散粉量较大的二倍体野生蔷薇种质的花粉形态，并进行2n配子的研究，以2n配子诱导率较高的5个野生蔷薇属种质作为父本、以观赏性好的10个现代月季品种为母本进行远缘杂交育种，一方面了解蔷薇属植物遗传背景;另一方面诱导具有可育性的2n配子，克服远缘杂交不亲和性及不育性，为蔷薇属植物育种提供理论依据，加快育种进程。本研究主要结果如下： 1．本研究通过对未知倍性的野生蔷薇种质进行核型分析，得出染色体形态及核型模式图，结果表明除了白玫瑰（*** Alba.）初步确定为四倍体外，其余材料均为二倍体。四季玫瑰（R. rugosa f. plena）、红玫瑰（R. rugosa f. plena(Reg.)Bvhouw.）、刺玫蔷薇（R. davurica Pall.）核型公式为K（2n）=2x=14m，属1A型;深山蔷薇（***）核型公式为K（2n）=2x=12m+2sm，属1B型;长白蔷薇（*** Kom.）核型公式为K（2n）=2x=14m，属1B型。由此可见，核型分析的方法可以作为染色体倍性确定的有效途径之一。根据核型分析可初步确定，深山蔷薇与长白蔷薇亲缘关系较近。 2．对散粉量较好的7个二倍体种质的花粉进行扫描电镜观察，结果表明，野生蔷薇属种质花粉形状主要呈超长球形和长球形，均具三萌发沟;花粉大小属于中等孢粉，平均极轴长度为39.36μm，平均赤道轴长度为20.84μm。根据外部纹饰差异聚类分析，得出在相似系数为0.26时，可分为4组。第1组包括单瓣黄刺玫（R. xanthina var. normalis）;第2组包括苦水玫瑰（R. sertata×rugosa）、刺玫蔷薇（R. davurica Pall.）;第3组包括日本无刺蔷薇（*** var.）、野蔷薇（R. multiflora Thunb.）;第4组包括深山蔷薇（***）、长白蔷薇（*** Kom.）。花粉形态观察可以为2n配子的鉴定提供依据，亲缘关系分析可在今后的育种中起到指导亲本选配的作用。 3．通过2n配子的研究，得出自然条件下2n配子存在率极低，2n配子与正常花粉形状相近，大小约为正常花粉的1.5倍。经秋水仙素诱导，野野蔷薇（R. multiflora Thunb.）、苦水玫瑰（R. sertata×rugosa）、刺玫蔷薇（R. davurica Pall.）、单瓣黄刺玫（R. xanthina ***）、日本无刺蔷（*** var.）5个种质的2n配子具有明显的诱导效果，不同种质间具有显著性差异且均显著高于对照组及自然条件下产生的2n配子比例。其中野蔷薇（*** Thunb.）诱导率最高，达到18.12%。说明，秋水仙素诱导是产生2n配子的适宜方法。通过综合分析比较，不同种质最佳诱导条件不同，但当秋水仙素浓度为0.15%、0.20%时诱导效果较好。 4．50个杂交组合中有24个杂交组合获得杂交果，占48.0%。共授粉261朵花，得到90个杂交果，总座果率为34.48%，共收获514粒杂交种，萌发150株，总萌发率为29.18%，成苗64株，总成苗率12.45%。 5．在远缘杂交过程中，对新引进的现代月季品种进行观察发现，第一玫瑰红、摩纳哥公主2个品种生长健壮、花量繁多，且杂交座果率也较其他品种高，可在今后的育种中优先选作母本，而戴高乐生活力较弱，座果率极低，应选择性淘汰。对于败育的杂交果，可以采用胚挽救的方法进行离体胚培养。

关键词：蔷薇属植物核型分析 2n配子杂交育种

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彩色马蹄莲2n配子育种研究

彩色马蹄莲2n配子育种研究

作者：石景峰云南农业大学

学位级别：硕士

本文以彩色马蹄莲二倍体植株幼小花序为试验材料,采用化学(秋水仙素)诱导方法对彩色马蹄莲幼小花序进行2n配子诱导,并对2n配子进行鉴定,经细胞学研究,找出2n配子形成的途径及类型。通过筛选,将2n雄配子与正常的1n雌配子进行杂交,种子播... 详细信息

本文以彩色马蹄莲二倍体植株幼小花序为试验材料,采用化学(秋水仙素)诱导方法对彩色马蹄莲幼小花序进行2n配子诱导,并对2n配子进行鉴定,经细胞学研究,找出2n配子形成的途径及类型。通过筛选,将2n雄配子与正常的1n雌配子进行杂交,种子播种后获得的三倍体植株后代。研究结果如下:1.在彩色马蹄莲的诱导时期的选择中发现,在太阳升起温度逐渐升高的时候最适合用秋水仙素处理,大概时间为夏季8:00,冬季往后延长一小时为9:00。秋水仙素处理的最佳浓度为0.15%;2.采用不同浓度秋水仙素( 0.025%,0.05%,0.1%,0.15%,0.2%)对彩色马蹄莲处于减数分裂Ⅰ期的幼小花序进行诱导,并成功的诱导出了2n雄配子。秋水仙素处理浓度以0.15%的诱导效果最好。2n雄配子出现花粉粒变大,配子形成过程中,出现平行、融合纺锤体,中期较多的单价体,四分体时期出现二分体或三分体等较明显特征;3.彩色马蹄莲花蕾经秋水仙素诱导后,配子出现了明显的加倍现象,染色体数从16条增加到32条,同时有重复加倍现象;4.将筛选得到的2n雄配子与正常的n雌配子进行杂交,待种子成熟后通过无菌播种或无菌培养获得了杂交后代植株。通过染色体检测结果表明:诱导的2n雄配子与正常的n雌配子杂交获得了三倍体后代,染色体数为48(2n=3x=48)。

关键词：彩色马蹄莲 2n配子未减数配子秋水仙素三倍体

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不结球白菜2n配子细胞遗传学研究

不结球白菜2n配子细胞遗传学研究

作者：于旭红南京农业大学

学位级别：硕士

本论文以二倍体不结球白菜为材料,对其减数分裂、自然及诱导产生的2n雌雄配子进行了细胞遗传学研究,为有性多倍化遗传育种提供理论基础。主要研究结果如下： 1.以二倍体不结球白菜为材料,采用染色压片法对其减数分裂和雄配子发育进... 详细信息

本论文以二倍体不结球白菜为材料,对其减数分裂、自然及诱导产生的2n雌雄配子进行了细胞遗传学研究,为有性多倍化遗传育种提供理论基础。主要研究结果如下： 1.以二倍体不结球白菜为材料,采用染色压片法对其减数分裂和雄配子发育进行系统的细胞学研究。结果表明：（1）雄花的外部特征与花粉母细胞减数分裂有着密切关系,可作为细胞分子学和小孢子培养的选材依据;同一植株、同一花蕾乃至同一花药,能观察到2-4个分裂相,减数分裂具不同步性;（2）第一次减数分裂后期有落后染色体出现,表现出遗传异质性,第二次减数分裂中期有平行和垂直两种类型纺锤体,四分体时期四分体呈现正四面体型、十字交叉型和左右对称型,胞质分裂属同时型;（3）雄配子体发育过程中单核期所占的时间较长.成熟花粉粒属于三核花粉粒。 2.以自然产生2n配子的二倍体普通白菜为材料,采用常规压片法研究2n雄配子发生的细胞学机制。结果表明,小孢子母细胞第一次减数分裂正常,第二次减数分裂中期和后期出现平行、三极型异常纺锤体,四分体时期形成含2n配子的二分体和三分体,最终导致2n花粉的形成。因纺锤体定位异常而产生的2n配子遗传上等同于FDR（第一次分裂重组）型,因而在有性多倍化育种中具有重要的利用价值。 3.以自然产生2n雌配子的二倍体不结球白菜不育系为材料,首次用压片法观察其胚囊母细胞减数分裂过程,并研究2n雌配子形成的细胞学机制。结果表明,二倍体不结球白菜胚囊母细胞的减数分裂类型为陆续型,即减数第一次分裂后形成二分体,随后进行减数第二次分裂。第一次减数分裂正常,第二次减数分裂出现异常。四分体时期形成多种形态：含有一个2n雌配子的三分体;含有两个2n雌配子的二分体;含n配子的直线型四分体和五分体及“T”型四分体等。不结球白菜2n雌配子的形成属于SDR型（第二次减数分裂核重组）。第二次减数分裂完成后功能大孢子逐渐发育成单核胚囊,双核胚囊,四核胚囊,八核胚囊至成熟胚囊。 4.以二倍体不结球白菜幼嫩雌蕊为材料,采用常规压片法进行染色体核型分析。结果表明：幼嫩雌蕊中处于分裂有丝分裂中期的细胞较多,随体可见。核型公式为2n=2x=20=14m+2sm+4st（2SAT）,其中第1、2、3、4、7、8、9对为中着丝粒染色体,第6对为近中着丝粒染色体,第5、10对染色体为近端部染色体,且随体位于第10对染色体上。染色体相对长度变异范围是0.62-1.42,染色体相对长度组成为2n=1L+5M1+2M2+2S。核型分类属于基本对称型的2B型。 5.以秋水仙素处理过的二倍体不结球白菜为材料,用压片法分别研究诱导产生2n雄配子和2n雌配子的细胞学机理。结果表明,诱导2n雄配子的减数分裂过程中出现了染色体桥,环状染色体,不联会及胞质分裂失败等现象。最终形成二分体,三分体及少量非整倍体。诱导2n雌配子的减数分裂过程中出现了解联会及胞质分裂异常的现象,最终形成二分体,双核体。诱导2n雌配子和雄配子的遗传效应既有FDR型（第一次减数分裂重组）也有SDR型（第二次减数分裂重组）。

关键词：不结球白菜花粉母细胞减数分裂 2n配子胚囊母细胞减数分裂诱导2n配子核型分析

基于2n配子途径的杂交兰多倍体育种技术研究

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基于2n配子途径的杂交兰多倍体育种技术研究

作者：徐仕英华南农业大学

学位级别：硕士

杂交兰是国兰和大花蕙兰杂交培育的兰花新类型,既有国兰的幽香和株型优美,又有大花蕙兰的花大色艳,市场前景广阔。多倍体育种是兰花育种的主要方法,但目前有关利用2n配子途径选育多倍体杂交兰新品种的报道较少。本研究以株系44-58、‘... 详细信息

杂交兰是国兰和大花蕙兰杂交培育的兰花新类型,既有国兰的幽香和株型优美,又有大花蕙兰的花大色艳,市场前景广阔。多倍体育种是兰花育种的主要方法,但目前有关利用2n配子途径选育多倍体杂交兰新品种的报道较少。本研究以株系44-58、‘小凤兰’、‘君豪兰’和‘宫粉佳人兰’等为材料,研究利用2n配子途径选育杂交兰多倍体新品种技术。主要研究结果如下:1.对‘金嘴墨兰’、‘太平洋兰’、‘小凤兰’、‘君豪兰’和‘宫粉佳人兰’进行2n雄配子发生率鉴定。发现不同兰花品种的2n雄配子发生率不同,‘君豪兰’和‘宫粉佳人兰’2n雄配子发生率较高。2.株系44-58×‘小凤兰’杂交后代种子萌发率为100%,共获得1226个株系,其中疑似多倍体有2个。‘君豪兰’和‘宫粉佳人兰’杂交后种子萌发率为98.00%,共获得231个株系;其中间繁殖体形态有根状茎、原球茎和中间型,比例分别为56.71%、23.38%和19.91%,再生植株形态中,国兰型占20.78%,杂交兰型占77.49%,大花蕙兰型占1.73%,不同株系的中间繁殖体增殖分化特性差异显著。3.有性三倍体与同组合二倍体开花植株的性状差异显著。‘黄荷兰’的株宽、花朵数等均显著大于二倍体株系DH。‘玉桃兰’的株高、假鳞茎直径等均显著大于二倍体株系ZJ-3-88,株系F410的株高、叶片数等也显著大于二倍体株系F103。‘黄荷兰’株型紧凑,花大、黄色、荷型、香气浓郁;‘玉桃兰’株型紧凑,花型圆整,桃红色,香气浓郁。4.‘黄荷兰’和‘玉桃兰’比同组合二倍体组培快繁效率高,其根状茎的诱导率、增殖系数、分化率、生根壮苗和试管苗移栽成活率均高于二倍体,但二倍体试管苗的苗高和根长均显著大于对应有性三倍体。不同有性三倍体组培快繁特性也不同,‘黄荷兰’根状茎的苗分化率和苗分化数以及试管苗叶宽均显著大于‘玉桃兰’,但‘玉桃兰’试管苗的根数显著高于‘黄荷兰’。5.‘黄荷兰’横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成0.50 cm长接种到MS+6-BA 1.00 mg·L+nAA 0.20 mg·L+土豆80.00 g·L+蔗糖30.00g·L+卡拉粉7.00 g·L+AC 0.30 g·L培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成1.00 cm长接入MS+6-BA 1.00mg·L+nAA 0.20 mg·L+蔗糖20.00 g·L+卡拉粉7.00 g·L+AC 0.02 g·L培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4.00 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L+nAA 0.50 mg·L+蔗糖20.00 g·L+卡拉粉7.00 g·L+AC 0.50 g·L中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。通过以上研究,建立了利用2n配子途径选育杂交兰多倍体新品种技术体系,明确有性多倍化对兰花组培快繁特性和主要观赏性状的效应,弄清了影响‘黄荷兰’组培快繁效率的因素,建立了‘黄荷兰’组培快繁技术体系,为进一步开展多倍体杂交兰新品种选育和繁育奠定坚实基础。

关键词：杂交兰有性多倍体 2n配子根状茎快速繁殖

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马铃薯2n配子利用研究进展

马铃薯杂志 1998年第2期12卷 111-119页

作者：郜刚纪颖彪屈冬玉金黎平连勇卞春松中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京100081

马铃薯2n配子在多倍体进化及育种途径上具有重要意义。本文对近年来在马铃薯2n配子发生的细胞学机制、单双向有性多倍化中的遗传效应及在实际育种等方面的研究进展和存在的问题做了简要综述。

关键词：马铃薯 2n配子遗传育种