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亚砷酸诱导骨髓基质干细胞向神经细胞的分化作用

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中华实验外科杂志 2005年第9期22卷 1120-1122页

作者：孟凡刚吴承远朱树干刘玉光宫杰魏东光张建山东大学齐鲁医院神经外科瑞典斯德哥尔摩Karolinska医院

目的研究亚砷酸体外诱导骨髓基质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的作用。方法应用亚砷酸诱导体外培养的人胚胎和成年小鼠MSCs,观察诱导过程中的形态学变化;应用抗Nestin、抗MAP2、抗βⅢtubulin、抗磷脂碱性蛋白(MBP)及抗胶质纤维酸性蛋白(... 详细信息

目的研究亚砷酸体外诱导骨髓基质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的作用。方法应用亚砷酸诱导体外培养的人胚胎和成年小鼠MSCs,观察诱导过程中的形态学变化;应用抗Nestin、抗MAP2、抗βⅢtubulin、抗磷脂碱性蛋白(MBP)及抗胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体进行免疫细胞化学染色,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测mRNA表达,以2巯基乙醇(BME)作为对照。结果经亚砷酸和BME诱导后,MSCs均表现为神经元细胞的形态特征。亚砷酸诱导组细胞形态变化较BME诱导组出现晚,且死亡率远低于后者。免疫细胞化学示Nestin、MAP2和βⅢtubulin阳性表达,MBP及GFAP为阴性表达。RTPCR可见Nestin、MAP2、βactin和βⅢtubulinmRNA阳性表达。结论亚砷酸和BME均可在体外诱导人胚胎和成年小鼠MSCs向神经细胞分化,但亚砷酸诱导更为缓和。

关键词：骨髓基质干细胞亚砷酸 2-巯基乙醇神经细胞分化神经细胞分化分化作用免疫细胞化学染色逆转录-聚合酶链反应 Nestin

微柱凝胶法检测O型孕妇血清IgG抗AB效价

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临床检验杂志 2005年第4期23卷 306-307页

作者：谢作听吴文鹤王春香林海芬周湘静蔡雪娇温州医学院附属第一医院输血科浙江温州325000 温州医学院检验卫生学院

抗AB是指O型血清中除抗A、抗B外与A型红细胞和B型红细胞均反应的交叉反应性抗体，但它不是抗A和抗B的简单混合。国内有关IgG抗AB在妊娠中的意义未见文献报道，目前也无建立理想的检测方法。为此，笔者建立2-巯基乙醇(2-me)裂解-37℃吸收... 详细信息

抗AB是指O型血清中除抗A、抗B外与A型红细胞和B型红细胞均反应的交叉反应性抗体，但它不是抗A和抗B的简单混合。国内有关IgG抗AB在妊娠中的意义未见文献报道，目前也无建立理想的检测方法。为此，笔者建立2-巯基乙醇(2-me)裂解-37℃吸收-56℃释放微柱凝胶法用于O型孕妇血清的IgG抗AB效价测定，现报道如下。

关键词：微柱凝胶法抗AB 血清IgG O型孕妇交叉反应性抗体 2-巯基乙醇 O型血清文献报道检测方法效价测定孕妇血清红细胞抗B

山羊胎儿成纤维细胞的冷冻保存和体外培养(英文)

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2004年第4期32卷 55-58页

作者：王超李向臣安志兴张志平舒建洪张涌西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

将胎儿成纤维细胞悬浮于不同的冷冻保护液中 ,在不同的温度下进行冷冻保存试验。结果显示 ,当保护液中含有 90 0 m L / L胎牛血清 (FBS)时 ,- 196℃下保存的山羊胎儿成纤维细胞解冻后的细胞贴壁率高于- 80℃ ,且前者贴壁细胞增殖也较后... 详细信息

将胎儿成纤维细胞悬浮于不同的冷冻保护液中 ,在不同的温度下进行冷冻保存试验。结果显示 ,当保护液中含有 90 0 m L / L胎牛血清 (FBS)时 ,- 196℃下保存的山羊胎儿成纤维细胞解冻后的细胞贴壁率高于- 80℃ ,且前者贴壁细胞增殖也较后者快 ,二者间差异显著 ;而在 - 2 0℃条件下只有一小部分细胞能够存活 ,与前两者相比差异极显著 ,说明 - 2 0℃不适合冷冻胎儿细胞。冷冻保护液中含有 10 0 m L / L二甲基亚砜 (DMSO)的保护效果明显好于 5 0 m L / L DMSO,二者间差异显著。用组织块法培养的细胞 ,在两种培养基 DMEM和 M199中添加 10 0 m L / L FBS和 2 mm ol/ L 2 -巯基乙醇 (2 - Me) ,其组织块成活率及细胞生长速度均高于单纯添加 10 0 m L / LFBS,同时证明 DMEM和 M199都能用于胎儿成纤维细胞的体外培养。以 DMEM培养液为基础 ,分别添加 2mm ol/ L 2 - Me,5 m L / L FBS,10 0 m L / L FBS和 2 m mol/ L 2 - Me+10 0 m L / L FBS对山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养 ,结果显示 ,细胞在 10 0 m L / L FBS和 2 mm ol/ L 2 - Me+10 0 m L / L FBS培养液中生长迅速 ,两者间无明显差异 ,2 - Me的存在促进了细胞的增殖 ;两者都与添加 2 m mol/ L 2 - Me组存在显著差异 ;添加 2 m mol/ L 2 - Me和 5m L / L

关键词：山羊胎儿成纤维细胞冷冻保存体外培养 2-巯基乙醇二甲基亚砜

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HgCl_2对泥鳅精子运动的影响

四川动物 2012年第1期31卷 50-53页

作者：陈杰胡家会陈玉明王曰文陈凤梅聊城大学生命科学学院山东聊城252059

为了检测不同浓度的HgCl2对泥鳅Misgurnus anguillicaudatus精子运动的影响,以泥鳅精子为实验材料,用含终浓度分别为0(对照)、1、5、10、15和20μmol/L的HgCl2待测液分别孵育0、2、4和6h后激活,激活后立即在显微镜(OlympusIX81)下观察... 详细信息

为了检测不同浓度的HgCl2对泥鳅Misgurnus anguillicaudatus精子运动的影响,以泥鳅精子为实验材料,用含终浓度分别为0(对照)、1、5、10、15和20μmol/L的HgCl2待测液分别孵育0、2、4和6h后激活,激活后立即在显微镜(OlympusIX81)下观察精子运动参数。为进一步探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的机制,用终浓度为20μmol/L的HgCl2保存液孵育泥鳅精子10min,以含终浓度分别为0、0.1、1、10mmol/L的2-巯基乙醇和20μmol/LHgCl2混合液为激活液激活。激活后立即在显微镜下观察精子运动,发现2-巯基乙醇可逆转HgCl2对泥鳅精子的抑制作用,为探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的可能机制提供参考。

关键词：泥鳅精子运动 2-巯基乙醇逆转作用

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抗-A、抗-B效价质控品的制备及初步应用

临床血液学杂志（输血与检验） 2020年第2期33卷 272-274页

作者：贺锋湖南省株洲市中心医院湖南株洲412000

目的:制备抗-A、抗-B效价检测质控品并进行初步应用。方法:倍比稀释抗-D单克隆抗体,确定抗体最佳稀释度,实验组取质控品1.56μL加入200μL血清中,对照组取1.56μL NS加入200μL血清中,根据凝集强度判断实验是否在控,并比较2组抗体效价... 详细信息

目的:制备抗-A、抗-B效价检测质控品并进行初步应用。方法:倍比稀释抗-D单克隆抗体,确定抗体最佳稀释度,实验组取质控品1.56μL加入200μL血清中,对照组取1.56μL NS加入200μL血清中,根据凝集强度判断实验是否在控,并比较2组抗体效价差异。取不同时间点冷藏保存的质控品,检测其IgM、IgG抗-D抗体效价,评估质控品性质是否稳定。结果:质控品IgM抗体效价为1∶512,最佳稀释度为1∶256,实验组、对照组抗-A、抗-B效价差异无统计学意义,不同时间点保存的质控品抗体效价差异无统计学意义。结论:自制抗体效价质控品具有良好稳定性与可靠性,可有效发现IgM抗体破坏不完全、稀释度误差、凝集度判断标准不同造成的效价检测失控问题。

关键词：新生儿溶血病抗体效价质控品 2-巯基乙醇

丹参注射液诱导骨髓基质干细胞定向发育为神经细胞的实验研究

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山东大学学报（医学版） 2006年第1期44卷 24-28页

作者：吴承远孟凡刚王建刚刘兆华朱树干刘玉光魏东光刘猛山东大学齐鲁医院神经外科山东济南250012 山东大学药物安全评价中心山东济南250012 瑞典斯德哥尔摩Karolinska医院神经科学研究所

目的:研究复方丹参注射液体外诱导人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)体外定向神经细胞发育的规律。方法:应用复方丹参注射液诱导体外培养的人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞,观察诱导过程中的形态学变化,并于诱导后5、24、72 h分别... 详细信息

目的:研究复方丹参注射液体外诱导人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)体外定向神经细胞发育的规律。方法:应用复方丹参注射液诱导体外培养的人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞,观察诱导过程中的形态学变化,并于诱导后5、24、72 h分别应用抗Nestin、抗bⅢ-tubulin、抗MBP及抗GFAP抗体进行免疫细胞化学染色,RT-PCR检测mRNA表达,Westem Blot检测蛋白表达。应用5mmol/L和10 mmol/L的2-巯基乙醇作为诱导对照组。结果:复方丹参注射液和2-巯基乙醇均可诱导骨髓基质干细胞分化为神经样细胞,但复方丹参注射液诱导作用更为缓和,细胞死亡率远低于2-巯基乙醇诱导组。免疫细胞化学示Nestin和bⅢ-tubulin呈阳性表达,MBP及GFAP呈阴性表达。RT-PCR可见Nestin和bⅢ-tubulin mRNA呈阳性表达,Westem Blot检测证实,Nestin和bⅢ-tubulin蛋白呈阳性表达。结论:复方丹参注射液可在体外诱导人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞向神经细胞发育,是较为理想的诱导剂。

关键词：骨髓细胞复方丹参注射液 2-巯基乙醇神经元

大鼠骨髓基质干细胞的分离培养与向神经元样细胞诱导分化的实验研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2003年第1期12卷 12-15页

作者：陈红霞高英茂邴鲁军山东大学医学院组织胚胎学教研室济南250012

目的　探讨大鼠骨髓基质干细胞的提取、分离培养和体外扩增的最佳条件 ,研究其在体外培养中定向诱导分化为神经元样细胞的可能。方法　通过密度梯度离心和贴壁培养法从成年大鼠骨髓中分离骨髓基质干细胞 ,进行培养扩增 ,观察其生长特性 ... 详细信息

目的　探讨大鼠骨髓基质干细胞的提取、分离培养和体外扩增的最佳条件 ,研究其在体外培养中定向诱导分化为神经元样细胞的可能。方法　通过密度梯度离心和贴壁培养法从成年大鼠骨髓中分离骨髓基质干细胞 ,进行培养扩增 ,观察其生长特性 ;用 2 巯基乙醇 ( β mercaptoethanol,β ME)对传代细胞诱导分化 ,并通过免疫细胞化学染色鉴定分化细胞的类型。结果　原代培养时形成由基质干细胞组成的细胞集落 ,细胞集落 14d时接近融合 ,传代后 ,细胞体积变大 ,约 5～ 7d传代一次。β ME诱导后 ,70 %以上的细胞在形态上呈神经元样 ,免疫细胞化学染色呈NSE阳性 ,GFAP阴性 ,说明诱导分化的细胞为神经元 ,而不是星形胶质细胞。结论　骨髓基质干细胞在体外培养条件下生长良好 ,并可连续传代 ;在 β

关键词：基质干细胞分离提取诱导分化 2-巯基乙醇骨髓神经元样细胞

钴化合物/有序介孔碳复合材料在电化学传感器中的应用

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钴化合物/有序介孔碳复合材料在电化学传感器中的应用

作者：刘玲东北师范大学

学位级别：硕士

近年来,碳基纳米材料以其良好的导电性和化学稳定性被广泛地应用在分析和电化学工艺中。自1999年首次成功合成有序介孔碳(OMC)这种新型碳材料以来,因其具有均一可调的孔结构、较高的比表面积,较大的孔容以及化学惰性这一系列优良的特性... 详细信息

近年来,碳基纳米材料以其良好的导电性和化学稳定性被广泛地应用在分析和电化学工艺中。自1999年首次成功合成有序介孔碳(OMC)这种新型碳材料以来,因其具有均一可调的孔结构、较高的比表面积,较大的孔容以及化学惰性这一系列优良的特性,它在分析中的应用倍受关注。此外,OMC可以很容易地通过价格低廉的硬模板法制得,并且在二氧化硅模板被完全去除的情况下无任何杂质污染。尤其是利用OMC作为催化载体时,它能大大增强催化剂的活性并能促进被分析物质的电子传递。因此,在电化学和电分析领域中研究OMC复合材料修饰电极受到了越来越多的关注。在本论文中,我们首次研究了新型碳材料OMC作为双核酞菁钴和介孔四氧化三钴材料的催化载体,主要包括以下几个方面的研究: 首先,我们用三嵌段共聚物P123做模板剂,正硅酸乙酯做硅源,通过溶胶-凝胶法制得了介孔氧化硅SBA-15。然后再以SBA-15为硬模板,蔗糖和硝酸钴为前驱物分别得到了OMC和介孔Co3O4材料。并用XRD,SEM,TEM和N2-吸脱附等手段对其进行了表征。其次,我们制备了OMC/Co3O4/Nafion/GC修饰电极,并研究了该电极对水合肼的催化氧化作用。结果表明,该修饰电极对水合肼展示出很好的催化效果,且检测的灵敏度显著提高,这与该复合物中OMC和Co3O4之间存在良好的协同效应有关。该修饰电极对水合肼的测定获得了较低的检出限(0.07μM)、较快的响应时间(4 s)和较宽的线性范围(4 320μM),使该电极有望成为有效检测水合肼的电化学传感器。此外,我们采用离子交换的方法成功地制备了一种新型的复合物修饰电极,即利用双核磺化酞菁钴(bi-CoPc)和阳离子交换剂双十二烷基二甲基溴化铵(DDAB)产生离子交换作用,首次制备了一种新型的有序介孔碳(OMC)复合物修饰电极(bi-CoPc/DDAB/OMC/GC)。我们通过紫外可见光谱(UV-vis),电子扫描显微镜(SEM)和电化学方法表征了此复合膜,并研究了它的电催化作用。结果表明,在有OMC的存在时增强了bi-CoPc的电子转移能力,进一步的研究发现bi-CoPc/DDAB/OMC膜在中性溶液中对氧气具4电子的电催化还原作用,能在较低的浓度下对血红蛋白(Hb)进行检测,此外作为2-巯基乙醇(2-ME)的安培检测传感器,有着较宽的线性范围2.5×10-6 M 1.4×10-4 M,较高的灵敏度16.5μA mM-1和较低的检出限0.6μM (S/N=3)。这些都表明了此种新型的复合材料有较广阔的应用前景,将有可能在生物燃料电池,生物传感器和环境传感器等领域得到发展和应用。

关键词：有序介孔碳 Co3O4 水合肼双核磺化酞菁钴氧气血红蛋白 2-巯基乙醇电催化

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有序介孔碳复合材料的合成及其电催化研究

有序介孔碳复合材料的合成及其电催化研究

作者：芦宝平东北师范大学

学位级别：硕士

纳米碳材料由于其新颖独特的导电性、化学惰性、热学特性以及特殊的机械性能,在科学研究和工业领域中受到人们广泛关注。碳材料的种类有很多,常见的有碳纳米管、碳纳米纤维、石墨烯、介孔碳等。其中有序介孔碳(OMC)是一种新颖的碳材料,1... 详细信息

纳米碳材料由于其新颖独特的导电性、化学惰性、热学特性以及特殊的机械性能,在科学研究和工业领域中受到人们广泛关注。碳材料的种类有很多,常见的有碳纳米管、碳纳米纤维、石墨烯、介孔碳等。其中有序介孔碳(OMC)是一种新颖的碳材料,1999年其合成方法被首次报道。与碳纳米管等其它碳材料相比,OMC具有高的比表面积、有序可调控的孔结构、易于功能化和主客体组装等优点。因此将介孔碳作为电极材料,在电催化和电分析领域有着广泛的应用。本文对有序介孔碳复合材料的电化学及电催化性质进行了讨论,包括以下两个方面:(1)采用电化学聚合将吩噻嗪染料中性红(NR)负载到有序介孔碳(OMC)修饰的玻碳电极(GCE)表面,制得聚中性红/有序介孔碳复合材料(PNR/OMC)修饰电极,运用循环伏安法和电子扫描显微镜对该复合电极进行了表征,讨论了pH和扫描速度对修饰电极动力学过程的影响。在pH 7.0的磷酸缓冲溶液中,观察到聚中性红的两对氧化还原峰Peak I (E0/ = +0.045 V)和peak II (E0/ = -0.49 V)。实验证明,其中只有Peak I对半胱氨酸、NADH、巯基乙醇具有非常明显的电催化作用。运用计时电流方法检测三种物质的浓度。结果显示,在pH 7.0的缓冲溶液中,用此修饰电极检测上述物质,分别都得到了较宽的线性范围、高的灵敏度和较低的检出限。另外,该电极具有良好的重现性和稳定性。(2)提出了一种简单的水热方法合成氢氧化镍/有序介孔碳纳米材料(Ni(OH)2/OMC)。分别采用X射线衍射、X射线能谱、氮气吸附、傅里叶红外光谱等一些手段对复合纳米材料进行表征,证明在有序介孔碳中合成的是β-氢氧化镍。有序介孔碳作为载体,复合氢氧化镍后,与单纯的有序介孔碳相比,其各种性能,特别是电催化性质得到了极大的提高。我们用循环伏安、计时电流等电化学方法,比较研究了三种有机小分子甘氨酸、甲醇和乙醇在不同修饰电极上的电化学行为。结果显示,复合材料修饰电极在电极稳定性,催化性能等方面都优于单纯的有序介孔碳材料。基于此,建立了一种电化学检测非衍生化甘氨酸的方法,使得氢氧化镍/有序介孔碳修饰电极可能成为一种灵敏的甘氨酸电化学传感器。该复合材料对于甲醇的电催化性能,使其在能源、材料、电池等方面将会有着广泛的应用。同时,由于复合电极对乙醇具有非常好的电催化作用,因此构建了一种无酶的乙醇传感器,对于乙醇的检测取得了良好的效果。

关键词：有序介孔碳中性红氢氧化镍烟酰胺腺嘌呤二核苷酸半胱氨酸 2-巯基乙醇甘氨酸甲醇乙醇