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芹菜素对哮喘小鼠转录激活蛋白3及th_2型细胞因子抑制作用的实验研究

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中国中西医结合杂志 2010年第4期30卷 383-387页

作者：庞玲玲李若然周林福史莹代文静殷凯生南京医科大学第一附属医院呼吸科南京210029

目的研究芹菜素对哮喘小鼠2型辅助性t细胞(th2)优势应答的抑制作用及其机制。方法选择32只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只:正常组(A组)、哮喘组(B组)、芹菜素高剂量治疗组〔C组,20 mg/(kg.d)〕、芹菜素低剂量治疗组〔D组,2 m... 详细信息

目的研究芹菜素对哮喘小鼠2型辅助性t细胞(th2)优势应答的抑制作用及其机制。方法选择32只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只:正常组(A组)、哮喘组(B组)、芹菜素高剂量治疗组〔C组,20 mg/(kg.d)〕、芹菜素低剂量治疗组〔D组,2 mg/(kg.d)〕。卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型。药物治疗组以芹菜素溶于1%二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射。小鼠末次雾化吸入24 h后,用小鼠肺功能仪检测气道对乙酰胆碱(Ach)阻力;苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎症浸润情况;支气管肺泡灌洗液(BALF)瑞氏染色计数嗜酸性粒细胞百分比;酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清总IgE、BALF液中th2型细胞因子〔白细胞介素(IL)4、IL-13〕;免疫印迹(Western blot)测定肺组织中信号转导和转录激活蛋白3(GAtA-3)表达水平。结果与正常组比较,哮喘组Ach气道阻力、气道炎症、BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞分类计数、血清总IgE、BALF中IL-4、IL-13以及肺组织GAtA-3蛋白表达明显增高(PtA-3和th2细胞因子的表达而降低哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性,具有潜在的临床应用前景。

关键词：支气管哮喘芹菜素信号转导和转录激活蛋白3 2型辅助性t细胞

外周血tfh2和th2细胞趋化因子受体表达与AR患者血清特异性IgE浓度及疾病严重程度相关性分析

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2022年第4期57卷 418-424页

作者：王男姚银陈彩玲王志超刘争华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻咽喉头颈外科武汉430030

目的:明确变应性鼻炎(AR)患者外周血2型辅助性t细胞(th2细胞)和2型滤泡辅助性t细胞(tfh2细胞)的趋化特点,并探究其趋化因子受体的表达与过敏原特异性免疫球蛋白E(sIgE)水平及疾病严重程度的关系。方法:分离2017年4月至2018年2月间在华... 详细信息

目的:明确变应性鼻炎(AR)患者外周血2型辅助性t细胞(th2细胞)和2型滤泡辅助性t细胞(tfh2细胞)的趋化特点,并探究其趋化因子受体的表达与过敏原特异性免疫球蛋白E(sIgE)水平及疾病严重程度的关系。方法:分离2017年4月至2018年2月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院就诊的41例AR患者[男20例,女21例,年龄35.0(24.5,47.0)岁]和42名健康对照[男24例,女18例,年龄35.0(24.8,46.5)岁]的外周血单个核细胞,多色流式检测趋化因子受体CC类趋化因子受体(CCR)2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR8、趋化因子C-X3-C-基序受体1(CX3CR1)和趋化因子(C-X-C基序)受体4(CXCR4)在th2和tfh2细胞中的表达。分析这些趋化因子受体在th2和tfh2细胞上的表达量与血清sIgE水平及受试者视觉模拟量表(VAS)评分的关系。使用GraphPad Prism 7.0软件进行统计学分析。结果:对照组th2与tfh2细胞的趋化特性具有明显差异:th2细胞高表达趋化因子受体CCR2、CCR3、CCR5、CCR8和CX3CR1;而tfh2细胞高表达引导免疫细胞归巢的趋化因子受体CCR7和CXCR4。AR患者外周血th2细胞较对照组表达更高水平的CCR2、CCR5和CX3CR1( P值均th2细胞的比例均与VAS评分呈正相关( r值分别为0.58、0.61, P值均tfh2细胞较对照组表达更高水平的CCR7( Ptfh2细胞的比例与血清sIgE水平呈正相关( r=0.51, Pth2细胞占th2细胞的百分比可一定程度上反映AR的严重程度,而CCR7 + tfh2细胞占tfh2细胞的百分比与血清sIgE水平呈正相关。

关键词：变应性鼻炎趋化因子受体 2型辅助性t细胞 2型滤泡辅助性t细胞免疫球蛋白E

Let-7e-5p调控Fas/FasL影响小鼠变应性鼻炎发病的机制研究

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天津医药 2023年第4期51卷 360-365页

作者：唐桥斐曹建秋张爽沈阳医学院附属第二医院耳鼻喉科 110002 沈阳医学院附属第二医院干诊科 110002

目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(AR+antagomir-NC)组和let-7e-5p抑制剂(AR+antagomir)组。除Control组外,其余组应用卵白蛋白(OVA)致敏建立AR模型,AR+agomir组和AR+antagomir组同时给予let-7e-5p agomir或let-7e-5p antagomir进行干预,末次激发致敏后对小鼠变应性鼻炎进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织,统计嗜酸性粒细胞数量,real-time PCR检测let-7e-5p、Fas、FasL m RNA表达,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测血清免疫球蛋白E(IgE)、特异性IgE(sIgE)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-13水平,双荧光素酶实验分析let-7e-5p和Fas、FasL的靶向关系。结果与Control组比较,AR组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增生明显,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平下降,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P性鼻炎评分降低,鼻黏膜结构清晰,嗜酸性粒细胞数量减少,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平升高,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平下降(均Ptagomir-NC组比较,AR+antagomir组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增厚,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达减少,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P2、IFN-γ水平差异无统计学意义。与NC+3’UtR-Wt组比较,let-7e-5p agomir+3’UtR-Wt组荧光素酶活性下降(Pt-7e-5p通过靶向调节Fas/FasL影响1型辅助性t细胞(th1)/2型辅助性t细胞(th2)平衡,从而参与AR小鼠变应性鼻炎发病的进展。

关键词：鼻炎变应性常年性疾病模型动物 let-7e-5p Fas FasL 1型辅助性t细胞 2型辅助性t细胞

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布地奈德抑制支气管哮喘小鼠tSLP及th2优势免疫作用的研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2012年第9期32卷 1207-1210页

作者：王文璐李红岩苗伟伟汪凤凤刘洪泱黄茂殷凯生周林福南京医科大学第一附属医院呼吸内科江苏南京210029 南京市市级机关医院呼吸科江苏南京210018

目的:研究布地奈德抑制哮喘小鼠th2优势应答的作用及其机制。方法:选择24只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为3组:正常对照组、哮喘模型组、布地奈德组,每组8只。卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型。小鼠末次雾化吸入激发24 h后,采用小... 详细信息

目的:研究布地奈德抑制哮喘小鼠th2优势应答的作用及其机制。方法:选择24只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为3组:正常对照组、哮喘模型组、布地奈德组,每组8只。卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型。小鼠末次雾化吸入激发24 h后,采用小鼠肺功能仪检测气道对乙酰胆碱(Ach)的阻力;苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎症浸润情况;支气管肺泡灌洗液(BALF)瑞氏染色计数嗜酸性粒细胞百分比;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清总IgE、BALF液中白细胞介素4(IL-4)和IL-13;免疫印迹(Western blot)测定肺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(tSLP)表达水平。结果:与正常对照组比较,哮喘模型组气道阻力、气道炎症、血清总IgE、BALF中th2细胞因子(IL-4、IL-13)以及肺组织tSLP蛋白表达明显增高(P型组比较,布地奈德组各项观测指标均明显降低(PtSLP表达、抑制th2细胞因子水平而降低哮喘气道炎症和气道高反应性,可能是糖皮质激素治疗哮喘的重要机制。

关键词：支气管哮喘布地奈德胸腺基质淋巴细胞生成素 2型辅助性t细胞

定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及th2细胞的作用研究

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定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及Th2细胞的作用研究

作者：颜延凤南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:从抗炎免疫出发,结合功能学、形态学、及分子生物学研究方法探讨定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的干预作用和对th2细胞偏移的影响,初步观察定喘汤对哮喘小鼠th2细胞的效应是否与GAtA-3信号分子相关,从而进一步探讨定喘汤... 详细信息

目的:从抗炎免疫出发,结合功能学、形态学、及分子生物学研究方法探讨定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的干预作用和对th2细胞偏移的影响,初步观察定喘汤对哮喘小鼠th2细胞的效应是否与GAtA-3信号分子相关,从而进一步探讨定喘汤降低哮喘炎性病变的机制。为该方在哮喘的临床治疗提供科学依据。方法:40只雌性C57B1/6小鼠随机分为生理盐水对照组(10只),定喘汤对照组(10只),哮喘组(10只),定喘汤治疗组(10只)。卵蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发建立哮喘模型。末次激发24小时后,测定气道反应性。收集肺泡灌洗液(BALF)及行摘眼球取血,计数BALF及外周血中炎性细胞。HE染色及tNF-α免疫组化观察肺组织炎性病变。酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4,IL-5,IL-13,和tNF-α含量,同时行western blot检测肺组织中GAtA-3蛋白表达的变化。结果:相较于哮喘组,定喘汤治疗组小鼠气道阻力显著降低;组织化学及免疫组化结果显示定喘汤治疗组小鼠肺组织炎性病变缓解,tNF-α表达降低;细胞计数结果显示BALF及外周血的炎性细胞比例在定喘汤治疗组小鼠显著下降;ELISA结果显示定喘汤治疗组小鼠BALF中的IL-4,IL-5,IL-13,和tNF-α含量均降低;Western blot结果显示定喘汤治疗组小鼠肺组织中GAtA-3蛋白表达下降。结论:定喘汤处理可降低哮喘小鼠的th2细胞相关因子的表达,减轻哮喘小鼠的气道炎性病变,降低tNF-α的表达,降低气道高反应性。GAtA-3可能介导定喘汤抑制哮喘小鼠th2细胞的作用。该结果进一步明确抑制th2细胞在定喘汤降低哮喘炎性病变中起重要作用。

关键词：哮喘定喘汤 2型辅助性t细胞 GAtA-3

血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠IL-25、NMU以及ILC2调控作用初步研究

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热带医学杂志 2021年第9期21卷 1103-1108,1133,F0004页

作者：单文琪薛菲常明汪雪峰江苏大学附属医院儿科江苏镇江212000 江苏大学附属医院中心实验室江苏镇江212000

目的通过注射卵清蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型并用血吸虫多肽SJMHE1干预,研究SJMHE1对白细胞介素-25(IL-25)、神经介素U(NMU)和2型细胞因子表达水平,以及2型固有淋巴细胞(ILC2)和2型辅助性t细胞(th2细胞)的调控作用。方法将6~8周BALB/c... 详细信息

目的通过注射卵清蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型并用血吸虫多肽SJMHE1干预,研究SJMHE1对白细胞介素-25(IL-25)、神经介素U(NMU)和2型细胞因子表达水平,以及2型固有淋巴细胞(ILC2)和2型辅助性t细胞(th2细胞)的调控作用。方法将6~8周BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组和多肽组,每组6只。正常组小鼠未给予任何干预;哮喘组和多肽组小鼠在第0、7、14天给予腹腔注射抗原混合溶液0.2 m L(含OVA 50μg、10%氢氧化铝,溶于PBS),在第21~28天给予2.5%OVA溶液(溶于PBS)雾化,每次至少40 min,进行哮喘激发;多肽组小鼠第0、7、14天皮下注射多肽乳化液(SJMHE1)100μL;第28天,安乐死法处死所有小鼠。HE染色观察小鼠肺部病理变化,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清IgE水平,用流式细胞术检测小鼠肺脏ILC2和th2细胞比例,用荧光定量PCR检测小鼠肺组织IL-25、NMU、IL-4、IL-5、IL-13 mRNA水平。结果哮喘模型成功建立,SJMHE1能够显著减轻哮喘小鼠肺组织炎症反应。哮喘组和多肽组小鼠血清IgE水平较正常组显著增高,差异有统计学意义(Pth2和ILC2细胞比例显著增高,IL-4、IL-5和IL-13 mRNA相对表达量增高,IL-25和NMU表达量均增高,差异均有统计学意义(Pth2和ILC2细胞比例显著减低,IL-4、IL-5和IL-13 mRNA相对表达量减低,NMU表达量减低,差异均有统计学意义(P性分析显示,IL-25和NMU呈显著正相关(r=0.874,P=0.002)。结论SJMHE1下调NMU的表达量,抑制ILC2和th2细胞的活化和增殖,减轻哮喘小鼠炎症反应。

关键词：哮喘 SJMHE1 2型固有淋巴细胞 2型辅助性t细胞白细胞介素-25 神经介素U

不同血糖水平的冠心病患者外周血中th1、th2细胞比例变化分析

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北华大学学报（自然科学版） 2023年第3期24卷 320-325页

作者：高卉李雷徐州医科大学研究生院江苏徐州221004 徐州医科大学附属医院江苏徐州221006

目的探讨不同血糖水平的冠心病患者外周血中1型辅助性t细胞(th1)、2型辅助性t细胞(th2)的细胞比例变化.方法选取冠心病患者86例,根据血糖检测结果分为冠心病血糖正常组34例,冠心病合并糖耐量异常组20例,冠心病合并糖尿病组32例;另收集... 详细信息

目的探讨不同血糖水平的冠心病患者外周血中1型辅助性t细胞(th1)、2型辅助性t细胞(th2)的细胞比例变化.方法选取冠心病患者86例,根据血糖检测结果分为冠心病血糖正常组34例,冠心病合并糖耐量异常组20例,冠心病合并糖尿病组32例;另收集同期健康志愿者25名为健康对照组.采集空腹外周静脉血,检测空腹血糖、糖化血红蛋白、γ干扰素、白细胞介素4、白细胞介素5、白细胞介素10水平.分离外周血单个核细胞,流式细胞仪检测th1、th2细胞比例.分离并培养人脐静脉内皮细胞,并使用免疫磁珠清除外周血单个核细胞中CD4+t细胞,进行人脐静脉内皮细胞毒性试验.出院后对冠心病患者进行1 a的随访,记录主要不良心血管事件发生情况.结果冠心病合并糖尿病组患者空腹血糖、糖化血红蛋白水平明显高于健康对照组、冠心病血糖正常组、冠心病合并糖耐量异常组(Pth1细胞比例明显高于冠心病合并糖耐量异常组、冠心病血糖正常组、健康对照组,th2细胞比例明显低于冠心病合并糖耐量异常组、冠心病血糖正常组、健康对照组(P细胞介素4、白细胞介素5、白细胞介素10水平明显低于冠心病合并糖耐量异常组、冠心病血糖正常组、健康对照组(P细胞水平明显低于冠心病合并糖耐量异常组、冠心病血糖正常组、健康对照组(Pt细胞的外周血单个核细胞在各组间比较差异无统计学意义(P>0.05).空腹血糖、糖化血红蛋白、th1细胞比例、th2细胞比例对冠心病患者预后均具有较高的预测价值(P性预测值均明显高于各指标单独检测.结论高糖状态下冠心病患者外周血中th1细胞比例升高,th2细胞比例降低,能够加速血管内皮细胞损伤,与空腹血糖和糖化血红蛋白联合检测可用于患者预后评估.

关键词：冠心病血糖 1型辅助性t细胞 2型辅助性t细胞内皮细胞

th2与ILC2细胞在哮喘模型中的数量及产生细胞因子的比较研究

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微生物学免疫学进展 2019年第1期47卷 26-35页

作者：刁渔汉李艳杨义然陈茜文吕喆孙英王炜首都医科大学基础医学院免疫学系北京100069

目的比较过敏原依赖和非依赖性哮喘模型中2型辅助性t细胞(th2 cell)和固有淋巴样2型细胞(type 2innate lymphoid cell,ILC2)的功能。方法滴鼻法制备过敏原卵清蛋白(ovalbumin,OVA)和上皮源性细胞因子(IL-25、IL-33)诱导的亚急性和慢性... 详细信息

目的比较过敏原依赖和非依赖性哮喘模型中2型辅助性t细胞(th2 cell)和固有淋巴样2型细胞(type 2innate lymphoid cell,ILC2)的功能。方法滴鼻法制备过敏原卵清蛋白(ovalbumin,OVA)和上皮源性细胞因子(IL-25、IL-33)诱导的亚急性和慢性哮喘小鼠模型。收集小鼠肺泡灌洗液(bronchoalvelar lavage fluid,BALF)进行细胞计数;取左肺进行石蜡包埋、切片和HE染色;右肺行流式细胞术,以分析在不同时间点各组小鼠th2细胞和ILC2细胞数目和占肺组织总细胞比例,并对th2型细胞因子的来源进行分析。结果与生理盐水组相比,各实验组BALF中总细胞数明显增加; HE染色可见OVA、IL-25和IL-33均可诱导哮喘典型病理学改变;各实验组肺组织中th2细胞与ILC2细胞均明显上升,数量上以th2细胞为主,两者均可产生th2型细胞因子IL-5和IL-13,且以th2细胞为主。而在致哮喘样改变、促进th2细胞和ILC2细胞在小鼠肺部聚集等方面,以IL-33的效应最强。结论在过敏原OVA和非过敏原IL-25、IL-33诱导的哮喘模型中,th2型细胞因子主要来源均为th2细胞,提示th2细胞在哮喘的发生、发展中起到主要作用。IL-33可能是过敏性和非过敏性哮喘患者个体化治疗的潜在靶点。

关键词：哮喘 2型辅助性t细胞固有淋巴样2型细胞白介素-5 白介素-13

冠心病患者外周血th1/th2细胞因子水平表达及意义

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中国卫生工程学 2020年第3期19卷 453-455页

作者：李炳强河南科技大学第一附属医院心内科河南洛阳471000

目的观察冠心病(CAD)患者外周血中1型辅助性t细胞(th1)和2型辅助性t细胞(th2)细胞因子水平并分析临床意义。方法选取本院2018年1月至2019年6月收治的CAD患者78例为研究组,按不同病情分为急性心肌梗死(AMI)组27例、不稳定性心绞痛(UA)组2... 详细信息

目的观察冠心病(CAD)患者外周血中1型辅助性t细胞(th1)和2型辅助性t细胞(th2)细胞因子水平并分析临床意义。方法选取本院2018年1月至2019年6月收治的CAD患者78例为研究组,按不同病情分为急性心肌梗死(AMI)组27例、不稳定性心绞痛(UA)组23例和及稳定性心绞痛(SA)组28例,选取同期本院体检中心健康体检者30例为健康组。分别检测各组外周血th1/th2细胞因子水平,对结果进行比较分析。结果研究组IFN-γ和IL-2水平分别为(196.34±22.71)、(87.45±26.15)ng/L,均显著高于健康组,差异均有统计学意义(均Pth1细胞因子水平高于健康组;随病情加重th1细胞因子水平逐渐升高,th1/th2失衡越严重;检测th1/th2水平可为临床诊治提供参考。

关键词：冠心病 1型辅助性t细胞 2型辅助性t细胞细胞因子临床意义