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毒蕈碱型胆碱能受体激动和拮抗对变应鼻炎2型炎症反应的影响

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毒蕈碱型胆碱能受体激动和拮抗对变应鼻炎2型炎症反应的影响

作者：黄爱洁中南大学

学位级别：硕士

目的:胸腺基质淋巴细胞生成素(Thymic Stromal Lymphopoietin,TSLP)、2型固有淋巴细胞(group 2 innate lymphoid cells,ILC2s)及2型辅助性T细胞(type 2 helper T cell,Th2s)均参与并促进2型炎症反应,在变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的发病机制中起重要作用。本研究探讨毒蕈碱型胆碱能受体(muscarinic cholinergic receptor,m ACh R)是否通过影响上述参与2型炎症反应的关键细胞及相关因子,从而参与AR的神经免疫调节,并探讨起主要调节作用的受体亚型。方法:(1)探讨m ACh R对于上皮源性因子TSLP的影响。培养人鼻粘膜上皮细胞系RPMI 2650细胞,并用屋尘螨提取物(house dust mite,HDM)刺激。将RPMI 2650细胞分组,用HDM、m ACh R激动剂卡巴胆碱(Carbachol,Car)、选择性M3ACh R拮抗剂4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(4-diphenylacetoxypiperidinium iodide,4-DAMP)的不同组合处理24小时,蛋白质免疫印迹法(Western Blot,WB)检测各组TSLP的蛋白表达水平。(2)探讨m ACh R对于ILC2细胞以及Th2细胞的影响。体外分离培养人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),分组后分别用Car及4-DAMP的不同组合处理24 h。流式细胞术检测各组PBMCs中ILC2细胞、Th2细胞比例,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组细胞培养上清液中白细胞介素4(interleukin4,IL-4)表达情况。结果:(1)HDM增加RPMI 2650细胞中TSLP的表达,Car刺激使其表达增加更明显,加入4-DAMP干预后TSLP的表达降低。(2)Car刺激后,PBMCs中Th2细胞和ILC2细胞的比例上升,分泌IL-4增加;加入4-DAMP拮抗后ILC2细胞、Th2细胞比例下降,分泌IL-4减少。结论:(1)激动m ACh R可以进一步促进HDM刺激所致的RPMI2650细胞TSLP表达增加,并上调PBMCs中ILC2细胞、Th2细胞比例,增加IL-4的分泌从而加重2型炎症反应。(2)拮抗M3ACh R可以减轻m ACh R的促炎作用,提示其可能是发挥关键促炎作用的受体亚型。图5幅,表7个,参考文献79篇

关键词：变应性鼻炎毒蕈碱型胆碱能受体 2型炎症反应 TSLP ILC2细胞 Th2细胞

2型固有淋巴样细胞在MC903诱导的小鼠特应性皮炎样反应中的作用

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中华皮肤科杂志 2021年第4期54卷 335-341页

作者：杨婷张考苑李子卓李旭于波窦侠北京大学深圳医院皮肤科深圳518036

目的探讨2型固有淋巴样细胞(ILC2)在特应性皮炎(AD)中的作用。方法以C57BL/6J和Rag1-/-小鼠为研究对象。C57BL/6J小鼠分为模型组和对照组,模型组小鼠两侧耳部连续14 d每日涂抹卡泊三醇(MC903)以制备AD样小鼠模型,对照组仅涂抹无水乙醇,... 详细信息

目的探讨2型固有淋巴样细胞(ILC2)在特应性皮炎(AD)中的作用。方法以C57BL/6J和Rag1-/-小鼠为研究对象。C57BL/6J小鼠分为模型组和对照组,模型组小鼠两侧耳部连续14 d每日涂抹卡泊三醇(MC903)以制备AD样小鼠模型,对照组仅涂抹无水乙醇,第15天时收集小鼠外周血血清,处死小鼠后,取耳部皮肤行组织病理检查,摘取脾脏,用实时荧光定量PCR检测皮肤和脾中炎症因子表达水平,同时采用流式细胞仪检测皮肤中ILC2比例。Rag1-/-小鼠分为模型组、对照组和实验组,模型组和对照组处理及评估同C57BL/6J小鼠,实验组小鼠在涂抹MC903前2 d开始腹腔注射单克隆抗体CD90.2拮抗ILC2功能,隔2 d 1次,共计7次,每次300μg/150μl,其他处理同模型组,第15天时收集小鼠外周血血清,处死小鼠后,取耳部皮肤行组织病理检查,用实时荧光定量PCR检测皮肤中炎症因子表达水平,同时采用流式细胞仪检测皮肤中ILC2比例。采用两独立样本t检验进行两组间比较,单因素方差分析进行多组间比较。结果模型组C57BL/6J小鼠耳部皮肤可见明显的红肿、干燥、结痂,HE染色可见表皮厚度增加,真皮嗜酸性粒细胞浸润,血清IgE水平[(6751.016±282.324)μg/L]高于对照组[(6387.038±267.853)μg/L,P=0.007),且皮肤白细胞介素(IL)-4、IL-13和干扰素γ(IFN-γ)的表达水平较对照组明显增高(P值分别为0.005、0.012,278);模型组ILC2比例(5.604±2.105)%较对照组(1.750±1.104)%明显增高(P=0.003)。在Rag1-/-小鼠中,模型组耳部皮肤也可见明显红肿、干燥、结痂,HE染色可见表皮厚度增加,真皮嗜酸性粒细胞浸润,模型组皮肤IL-4、IL-5、胸腺基质淋巴生成素和IL-33的表达较对照组明显增高(P值分别为0.010、0.043、0.034、0.007),而IL-13和IFN-γ差异无统计学意义(P值分别为0.274,0.697);模型组ILC2比例(5.165±2.436)%高于对照组[(0.835±0.578)%,P=0.014];抗体拮抗Rag1-/-小鼠ILC2后,实验组小鼠皮损较模型组明显减轻,HE染色可见表皮增厚减轻,真皮嗜酸性粒细胞浸润减少,而细胞因子表达分析显示,实验组IL-4、IL-5、IL-13、TSLP、IL-33水平与模型组差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论ILC2参与了MC903诱导的AD样小鼠炎症反应,且该反应不依赖于适应性免疫。

关键词：皮炎,特应性 Th2细胞免疫,先天白细胞介素类干扰素γ 卡泊三醇 2型固有淋巴样细胞 2型炎症反应

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鼻腔中央区变应性疾病研究进展

南京医科大学学报（自然科学版） 2023年第8期43卷 1172-1179页

作者：邹鑫源陆美萍南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科江苏南京210029 南京医科大学第一附属医院过敏诊疗中心江苏南京210029

鼻腔中央区变应性疾病(central compartment allergic disease,CCAD)是国际上新近命名的一种慢性鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)亚型,其特征在于吸入性变应原在鼻腔中央区域黏膜产生2型炎症反应。早期可表现为局限于中鼻甲、上鼻... 详细信息

鼻腔中央区变应性疾病(central compartment allergic disease,CCAD)是国际上新近命名的一种慢性鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)亚型,其特征在于吸入性变应原在鼻腔中央区域黏膜产生2型炎症反应。早期可表现为局限于中鼻甲、上鼻甲及鼻中隔后上部位的黏膜水肿和息肉样变,进展后可导致邻近窦口发生阻塞,形成弥漫性鼻窦炎伴鼻息肉(diffuse sinus-itis with nasal polyps,CRSwNP),给治疗带来了更多挑战。文章就CCAD临床症状、内镜和影像学表现、致敏特点及组织病理学特征做一综述,总结CCAD与其他类型CRS的本质区别,为优化临床诊疗策略提供一定参考。

关键词：中央区变应性疾病慢性鼻窦炎变应原 2型炎症反应

度普利尤单抗治疗非特应性皮炎皮肤病的研究进展

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临床皮肤科杂志 2024年第8期53卷 496-499页

作者：符德爽张江安郑州大学第一附属医院皮肤科河南郑州450052

度普利尤单抗是2型炎症反应的有效抑制剂,除了被批准用于中重度特应性皮炎的治疗,在其他2型炎症反应性皮肤病的治疗中也显示出了疗效。该文主要综述了度普利尤单抗在非特应性皮炎皮肤病中的应用,包括正在开展临床试验评估的变态反应性... 详细信息

度普利尤单抗是2型炎症反应的有效抑制剂,除了被批准用于中重度特应性皮炎的治疗,在其他2型炎症反应性皮肤病的治疗中也显示出了疗效。该文主要综述了度普利尤单抗在非特应性皮炎皮肤病中的应用,包括正在开展临床试验评估的变态反应性接触性皮炎、钱币状湿疹、慢性手部湿疹、慢性自发性荨麻疹、胆碱能性荨麻疹、寒冷性荨麻疹、瘙痒症、结节性痒疹、大疱性类天疱疮、内瑟顿综合征、瘢痕疙瘩、局限性硬皮病和斑秃等。

关键词：特应性皮炎度普利尤单抗 2型炎症反应

两种度普利尤单抗注射方案联合激素治疗类天疱疮的疗效和安全性

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中华临床免疫和变态反应杂志 2023年第2期17卷 127-132页

作者：杨金张臻刘书韬高海清陈姿桦王兰庭杨凡萍陈圣安唐昶骆肖群复旦大学附属华山医院变态反应(过敏和免疫)科皮肤科上海200040

目的分析两种度普利尤单抗注射方案联合小剂量激素治疗类天疱疮的疗效和安全性。方法80例类天疱疮患者非随机分为研究组A、B及对照组1、2。研究组A予度普利尤单抗首剂600 mg皮下注射,后每两周300 mg注射;研究组B予度普利尤单抗600 mg周... 详细信息

目的分析两种度普利尤单抗注射方案联合小剂量激素治疗类天疱疮的疗效和安全性。方法80例类天疱疮患者非随机分为研究组A、B及对照组1、2。研究组A予度普利尤单抗首剂600 mg皮下注射,后每两周300 mg注射;研究组B予度普利尤单抗600 mg周,连续注射两周后,改为300 mg周连续注射两周,继以每两周予300 mg。研究组在治疗初始同时予小剂量激素[甲泼尼龙2采用静脉用免疫球蛋白联合口服激素。比较各组皮损控制时间、激素用量、疾病相关评分及抗体滴度变化及不良事件发生率。结果研究组B皮损控制时间(11 d)显著短于研究组A(14 d)(P24.6及23.4 mg d)及累积用量(376.8及334.2 mg)均分别显著低于两对照组(P0.05)。两研究组大疱性类天疱疮疾病面积指数(BPDAI)评分及呈现瘙痒评分相对于基线变化较对照组降低更显著(P2、4周,研究组B相关评分较基线变化显著高于研究组A。第4、6周,研究组A自身抗体BP180下降水平较单纯激素治疗组更显著(P反应发生率明显低于对照组1(P<0.05)。结论度普利尤单抗联合小剂量激素治疗类天疱疮相较于既往系统治疗具有更好的疗效和安全性;前4周连续进行度普利尤单抗注射方案较传统注射方案,对于类天疱疮症状缓解表现更佳。

关键词：度普利尤单抗类天疱疮 2型炎症反应自身免疫性大疱病

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生物钟紊乱对2型炎症变应性疾病的影响研究

中国耳鼻咽喉颅底外科杂志 2024年第3期30卷 116-120页

作者：李瀚雄程冯丽祁雪萍王艳杰安云芳赵长青山西医科大学第二医院耳鼻咽喉头颈外科山西省气道炎性疾病神经免疫重点培育实验室山西太原030001

生物钟是机体为适应外界环境周期性变化而进化出的内在机制。流行病学研究发现生物钟紊乱(CRD)是变应性疾病发病的重要诱因,其可能通过影响黏膜(或皮肤)屏障及系统免疫反应,进而改变靶器官的生理病理活动,通过药物或非药物干预可缓解变... 详细信息

生物钟是机体为适应外界环境周期性变化而进化出的内在机制。流行病学研究发现生物钟紊乱(CRD)是变应性疾病发病的重要诱因,其可能通过影响黏膜(或皮肤)屏障及系统免疫反应,进而改变靶器官的生理病理活动,通过药物或非药物干预可缓解变应性疾病的进展。本文聚焦于CRD在2型炎症变应性疾病中的作用,重点探讨CRD对以变应性鼻炎(AR)、哮喘、特应性皮炎、食物过敏为代表的2型炎症变应性疾病的影响,并试图从生物钟角度探讨2型炎症变应性疾病的治疗新策略。

关键词：变态反应 2型炎症反应生物钟紊乱