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药物分析杂志 2023年第4期43卷 595-601页

作者：张燕停陆雨顺夏蕴实穆锐孙印石中国农业科学院特产研究所长春130112

目的:建立超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)法同时测定西洋参中鸟嘌呤、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、2’-脱氧鸟苷、β-胸苷、腺苷8个核苷类成分,并对山东省威海市7个地区11批西洋参不同部位的核苷含量进行测定,以期为西洋参... 详细信息

目的:建立超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)法同时测定西洋参中鸟嘌呤、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、2’-脱氧鸟苷、β-胸苷、腺苷8个核苷类成分,并对山东省威海市7个地区11批西洋参不同部位的核苷含量进行测定,以期为西洋参质量控制与评价提供科学依据。方法:采用Acquity UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为水-乙腈,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长为260 nm,进样量2μL。结果:8个核苷的质量浓度在1.00~200.00μg·mL^(-1)范围内线性良好,相关系数均>0.9996,平均加标回收率为98.1%~99.9%,RSD范围为1.2%~2.6%,灵敏度、准确度及精密度均符合要求。山东省威海地区西洋参芦头、须根和主侧根部位样品核苷含量分别为2556.18、1829.93和1100.67 mg·kg^(-1),结果具有显著性差异(P苷含量测定及不同部位的区分,并对西洋参的质量进行初步评价。

关键词：西洋参鸟嘌呤尿苷腺嘌呤肌苷鸟苷 2’-脱氧鸟苷 β-胸苷腺苷核苷类成分不同部位超高效液相色谱法质量评价

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N-羟乙基-1,8-萘二酰亚胺探针与核苷间电子转移的激光闪光光解研究

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高等学校化学学报 2004年第11期25卷 2134-2136页

作者：李慧卿江致勤王欣潘洋王峰俞书勤同济大学化学系上海200092 中国科技大学化学物理系合肥230026

The time resolved transient absorption property, kinetics and mechanism of electron transfer(ET) process of the fluorescence probe, N-(2-hydroxyethyl)-1,8-naphthalimide(NPI) were studied. The transient absorption spectra of NPI in H 2O-CH 3CN solution were successfully detected upon pulsed excitation at 355 nm. 3NPI was proved as the primary excited state with lifetime of 147 μs. 3NPI underwent the T-T energy transfer with β-carotene and ET with triphenyl amine to produce NPI -·. In the absence of quenchers, the self-quenching of 3NPI by the ground states of NPI took place via ET. The ET from nucleosides to 3NPI was also explored. NPI showed a strong electron-accepting capability and the absorbance of 3NPI was strongly quenched by the nucleosides. The formation of NPI -· was facilitated to a great extent simultaneously. The bimolecular quenching rate constants of NPI by GUA and DGUA were determined as k 3=8.8×106 mol -1·L·s -1, k 4=2.1×107 mol·L·s -1. The ET between NPI and nucleosides was verified and the mechanism was proposed.

关键词：萘二酰亚胺核苷 2’-脱氧鸟苷电子转移激光闪光光解

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HPLC法测定沪地龙中7个核苷类成分的含量

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药物分析杂志 2018年第1期38卷 97-103页

作者：周恒曹依敏苗水王少敏陈铭兰岚季申上海市食品药品检验所上海201203

目的:建立中药材沪地龙中7个核苷类成分的分析方法。方法:采用0.1%氨水超声提取沪地龙药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、2’-脱氧鸟苷,并应用反相高效液相色谱法测定其含量;色谱条件:采用Gemini C18色谱柱(250 mm×4.... 详细信息

目的:建立中药材沪地龙中7个核苷类成分的分析方法。方法:采用0.1%氨水超声提取沪地龙药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、2’-脱氧鸟苷,并应用反相高效液相色谱法测定其含量;色谱条件:采用Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以5 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温30℃。结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷和2’-脱氧鸟苷的线性范围分别为0.51~102.09μg·mL^(-1)(r=1.000 0),0.52~103.78μg·mL^(-1)(r=1.000 0),0.50~101.03μg·mL^(-1)(r=1.000 0),0.52~104.79μg·mL^(-1)(r=1.000 0),0.50~99.99μg·mL^(-1)(r=1.000 0),0.55~110.54μg·mL^(-1)(r=1.000 0),0.50~99.28μg·mL^(-1)(r=1.000 0);平均回收率(n=6)分别为98.6%(RSD=2.6%)、104.6%(RSD=1.8%)、105.3%(RSD=1.4%)、96.2%(RSD=2.6%)、91.0%(RSD=0.42%)、88.1%(RSD=2.1%)和106.5%(RSD=2.1%)。12批样品中上述7个核苷类成分的含量测定结果分别为0.046~0.864、0.263~0.770、0.034~0.631、0.379~0.994、1.655~3.595、0.544~1.465和0.074~0.208 mg·g^(-1)。结论:该方法可用于沪地龙药材中核苷类成分的含量测定。

关键词：沪地龙尿嘧啶次黄嘌呤黄嘌呤尿苷肌苷鸟苷 2’-脱氧鸟苷超声提取高效液相色谱法

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异种骨髓移植于SCID鼠免疫重建条件的初步研究

异种骨髓移植于SCID鼠免疫重建条件的初步研究

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作者：刘瑞风山西医科大学

学位级别：硕士

目的: 经过数年研究并论证,我们认为银屑病患者骨髓造血细胞有异常,为了进一步研究其在银屑病发病中的作用,我们拟将银屑病患者骨髓移植于SCID鼠,通过移植后免疫重建,了解其免疫及造血变化,以便揭示造血细胞与银屑病发病的密切关系。但... 详细信息

目的: 经过数年研究并论证,我们认为银屑病患者骨髓造血细胞有异常,为了进一步研究其在银屑病发病中的作用,我们拟将银屑病患者骨髓移植于SCID鼠,通过移植后免疫重建,了解其免疫及造血变化,以便揭示造血细胞与银屑病发病的密切关系。但这一研究涉及目前免疫学、血液学许多尚未完全解决的前沿难题,其中如何促进异种骨髓造血细胞在SCID鼠体内的造血及免疫重建以及SCID鼠的长期存活问题是两个必须解决的难题。为在鼠体内构建一有利于人T细胞发育分化的微环境,需采用胸腺小叶与骨髓单个核细胞共移植的方法。但胸腺中的原胸腺细胞会干扰移植后免疫重建,故于移植前体外培养去除原胸腺细胞非常必要。另外骨髓移植后的免疫排斥反应是影响动物生存状况的主要因素,故通过观察移植后SCID鼠的生存状况,了解免疫排斥反应中导致动物死亡的主要原因,并针对此原因在移植前后对动物进行处理,以最大限度减少免疫排斥反应的强度,从而可以最大限度延长动物生存时间。故本课题主要从以下两方面进行研究: ①通过比较不同培养条件对胸腺小叶中原基胸腺细胞的去除效应,探讨制备去原基胸腺细胞的胸腺组织的理想方法。 ②通过将银屑病患者骨髓移植于SCID鼠后观察SCID鼠的生存状况,探讨免疫排斥反应中导致动物死亡的主要原因。方法: 取6个月龄利凡诺引产儿胸腺,分离胸腺小叶,采用气液交界面培养法,培养于含1.35mmol/L2’-脱氧鸟苷的培养基,以不含2’-脱氧鸟苷的培养基培养的胸腺小叶作为平行对照,分别于不同培养时间取培养的胸腺小叶经HE染色观察结果。将培养的去原基胸腺细胞的胸腺小叶与分离的银屑病患者骨髓单一核细胞共移植于经Coγ射线照射的SCID鼠,移植后第2d开始于SCID鼠皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF),观察动物生存状况。结果: 用含2’-脱氧鸟苷的培养基培养5d后,小叶中胸腺细胞大部分被清除,而对照组在培养的前10d小叶中胸腺细胞数量均无明显减少,且在第10d略有增高。在培养20d后实验组和对照组胸腺小叶中胸腺细胞都明显减少,但胸腺间质也出现不同程度坏死,而且随着培养时间的延长,坏死程度亦加重。 7例SCID鼠于移植后第7d死亡,进行尸解发现全部为肠坏死。2例于移植后经短暂反应后逐渐恢复正常,一直存活至今(移植后第35d)。1例对照鼠无任何异常反应,存活至今。结论: 使用含2’-脱氧鸟苷的培养基培养5d,是制备去原基胸腺细胞胸腺小叶的理想条件。肠坏死是异种骨髓移植后SCID鼠发生急性排斥反应死亡的主要原因。

关键词：胸腺培养 2’-脱氧鸟苷肠坏死骨髓移植 SCID鼠免疫排斥

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