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冷环境下运动与限食对肥胖大鼠脂代谢及12,13-DiHOME的调节作用研究

冷环境下运动与限食对肥胖大鼠脂代谢及12,13-DiHOME的调节作用研...

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作者：林宝璇广州体育学院

学位级别：硕士

研究目的:通过观察冷环境下运动和限食对营养性肥胖大鼠血脂和12,13-Di HOME、肩胛间脂肪中甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、12,13-Di HOME合成酶Ephx1/2与脂肪酸转运相关蛋白CD36、FATP1的m RNA和蛋白表达及胰岛素敏感性的变化,探... 详细信息

研究目的:通过观察冷环境下运动和限食对营养性肥胖大鼠血脂和12,13-Di HOME、肩胛间脂肪中甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、12,13-Di HOME合成酶Ephx1/2与脂肪酸转运相关蛋白CD36、FATP1的m RNA和蛋白表达及胰岛素敏感性的变化,探讨冷环境下运动和限食影响肥胖大鼠12,13-Di HOME合成及对脂代谢和胰岛素敏感性的调节作用,旨在为肥胖防治提供方法和理论依据。研究方法:实验通过8周45%高脂饲料建立营养性肥胖大鼠模型,将48只肥胖大鼠随机均分为常温安静组（NC）、常温运动组（NE）、低温安静组（CC）、低温运动组（CE）、低温安静热量控制组（CCR）和低温运动热量控制组（CER）等6组进行5周的冷环境运动干预。常温组大鼠生活温度为24℃-26℃,低温组生活温度为3℃-4℃;运动组大鼠隔天进行一次耐力训练,跑速为25 m/min,30min/组,2组/d,组间间歇10min持续5wk;CCR和CER组根据NC和NE组热量摄入进行热量控制,干预期间记录大鼠体重和摄入量,5周干预后测试口服葡萄糖耐量（OGTT）、胰岛素耐量（ITT）并计算HOMA稳态模型（HOMA-IR）,腹主动脉采集血液、取肾周、睾周和肩胛间脂肪,检测血脂四项、血浆和肩胛间脂肪游离脂肪酸（FFA）、12,13-Di HOME含量,用q RT-PCR和Weatern-blot检测肩胛间脂肪Ephx1/2、CD36、FATP1的m RNA及蛋白表达。采用Graph Pad Prism8.0.2图表绘制和图形分析,SPSS 25.0对数据进行统计学分析,组间采用单因素方差分析,因素间交互作用采用三因素方差分析,指标间相关性采用Pearson相关分析,P＜0.05表示有显著差异,P＜0.01表示有非常显著差异。研究结果:1)与NC组相比,NE、CC、CE、CCR、CER组体重、Lee’s指数和内脏脂肪率均非常显著下降（P＜0.01）;与NE组相比,CC组内脏脂肪率显著降低（P＜0.05）且CE、CCR、CER组非常显著下降（P＜0.01）;与CC组相比,CCR和CER组的内脏脂肪率非常显著降低（P＜0.01）;温度、运动与摄食均对体重、Lee’s指数和内脏脂肪率有显著作用,但因素间无交互作用。2)与NC组相比,CC、CE、CCR、CER组血清FFA、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）和血浆12,13-Di HOME极显著升高（P＜0.01）、TG极显著下降（P＜0.01）;CER组的LDL-C极显著低于NE和CCR组（P＜0.01）;CER组清12,13-Di HOME显著低于CC组（P＜0.05）。三因素分析结果显示温度对TG、FFA和12,13-Di HOME的影响达到极显著水平（P＜0.01）,温度和运动对FFA的交互作用明显（P＜0.01）且运动和摄食对TG和LDL-C有明显交互作用（P＜0.05）。3)与NC组相比,其余各组肩胛间脂肪的FFA和12,13-Di HOME含量均极显著上升（P＜0.01）,NE、CE和CCR的TG含量显著或极显著上升（P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01）,与CC组相比,CCE组的肩胛间脂肪TG与FFA、CER组FFA均极显著降低（P＜0.01）,且CER组FFA极显著高于CCR组（P＜0.01）;且温度和运动对TG、12,13-Di HOME及运动和摄食对FFA有极显著交互作用（P＜0.01）。4)与NC组相比,NE组的FATP1、Ephx1和Ephx2 m RNA表达量显著或非常显著上升（Ephx1 P＜0.05,FATP1和Ephx2 P＜0.01）,CC和CCR组的大鼠肩胛间脂肪CD36、FATP1、Ephx1和Ephx2 m RNA表达均非常显著上升（P＜0.01）;与NE相比,CE组的CD36和Ephx2 m RNA表达均非常显著上升（P＜0.01）,CER组的FATP1、Ephx1和Ephx2 m RNA表达均非常显著上升（P＜0.01）;而与CE组相比,CER组的肩胛间脂肪CD36和FATP1 m RNA表达显著或非常显著上升（P＜0.05,P＜0.01）;三因素分析结果显示,温度对CD36、Ephx1和Ephx2的m RNA表达均有极显著影响（P＜0.01）,而FATP1受运动和摄食的影响（P＜0.01）,同时运动还影响Ephx1和Ephx2的m RNA表达（P＜0.05）;但温度和运动、运动和摄食仅对Ephx1的m RNA表达有显著交互作用（P＜0.01、P＜0.05）。5)与NC组相比,NE组的Ephx1和Ephx2蛋白表达均显著上升（P＜0.05）,CC和CCR组的非常显著上升（P＜0.01）;与NE相比,CE和CER组的Ephx2蛋白表达非常显著或显著上升（P＜0.01,P＜0.05）;与CC组相比,CE组的Ephx1表达非常显著降低（P＜0.01）,Eph

关键词：冷环境运动 12,13-DiHOME 脂代谢胰岛素敏感性

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2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血浆12，13-DiHOME与代谢指标的相关性研究

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血浆12，13-diHOME与代谢指标的...

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作者：王思超山东大学

学位级别：硕士

背景:随着社会经济发展水平的提高和人民生活质量水平的提升,糖尿病患病率在全球范围内节节攀升,逐步提高,严重影响了人民健康水平和生存质量,全球每年死于糖尿病及其并发症的总人数达到了惊人的数百万人之多。现如今糖尿病患者中,占绝... 详细信息

背景:随着社会经济发展水平的提高和人民生活质量水平的提升,糖尿病患病率在全球范围内节节攀升,逐步提高,严重影响了人民健康水平和生存质量,全球每年死于糖尿病及其并发症的总人数达到了惊人的数百万人之多。现如今糖尿病患者中,占绝大多数的是2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患者。近两年国内研究显示,2型糖尿病在20岁以上成人中,患病率高达9.7%。胰岛素抵抗是2型糖尿病的核心特征,在疾病的发生发展中占据主导地位,并通过其牵连多种并发症。2型糖尿病常常合并有多种并发症,尤其是代谢性相关疾病,诸如高血压、高血脂、高尿酸血症、超重、非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）等,甚至与其互为因果,关系密切。非酒精性脂肪肝病是目前最常见的慢性肝病类型之一,是指由非酒精摄入过多或其他明确病因引发的,脂类在肝脏细胞中过量沉积并达到自身肝重一定比例（＞5%）,显微镜观察下以弥漫性大泡型肝细胞脂肪变性为主要特征的病理综合征,包括病变较轻微的单纯性脂肪肝,以及病程较严重发展的脂肪性肝炎,甚至造成肝硬化,而肝硬化迁延不愈时一定几率可发展为肝癌。肝组织穿刺活检是非酒精性脂肪肝诊断的“金标准”,但因其有创、成本偏高、操作较为复杂、术后并发症较多等原因,临床应用受限不易开展,影像学检查如核磁共振,因其操作简便、无创、诊断较灵敏,成为临床上常见的诊断方式,但同样价格较为昂贵,对基数较大的慢性疾病患者来说往往不作为首选,且占用过多公共卫生资源。超声因其价格低廉、操作简单、无创、低风险、病变识别度较高等优点,再加上近年来逐步完善的计算机辅助超声肝脂肪定量方法,可一定程度上较为准确的测量肝脏脂肪含量,慢慢被人们所接受,并已经逐渐成为非酒精性脂肪肝研究领域的一个新热点。非酒精性脂肪肝发病率正逐年上升,成为全球范围内最常见的代谢性疾病之一,但目前为止其具体的发病机制尚未研究透彻,说法众多,其中“二次打击”学说是众多专家学者所赞成的假说之一:第一次打击是指由各种代谢性危险因素（如胰岛素抵抗）导致脂质在肝脏细胞内过量沉积;第二次打击是指体内氧化应激相关因素导致肝脏的炎性病变和肝脏纤维化的形成发展。其发病机制与炎症反应、氧化应激、糖脂代谢紊乱、脂肪毒性、胰岛素抵抗等紧密关联,其中胰岛素抵抗不仅是2型糖尿病发病的中心环节,也是非酒精性脂肪肝不可忽略的关键因素,甚至可能成为两者之间联系中的一道重要桥梁。脂肪组织不仅是人体之中重要的能量储存仓库,还是一个活性较高的内分泌组织器官,可以分泌多种被称为脂肪因子的生物信号分子,它们通过自分泌或旁分泌的方式影响机体功能,对能量稳态、葡萄糖及脂质代谢、食物摄入、炎症和免疫等生物学功能都有调节作用。脂肪因子的分泌平衡紊乱与功能失调,参与肥胖、糖尿病、非酒精性脂肪肝及动脉粥样硬化等多种代谢性疾病的发病过程。研究脂肪因子与代谢综合征各个组分及相关并发症的关系,将为多种代谢性疾病的诊治开辟全新的诊疗思路和广阔的应用前景。其中,12,13-二羟基-9Z-十八碳烯酸（12,13-dihydroxy-9Z-octadecenoic acid,12,13-1dihome）是新近国外发现的一种脂肪因子,可在机体多种组织少量产生,如白色脂肪组织、心肌、骨骼肌、脑、骨髓,而其最主要的来源是棕色脂肪组织,合成可受机体活动状态及环境温度变化的影响。有研究表明,12,13-DiHOME与血糖稳态、脂肪酸及其他脂类代谢平衡、质量指数、肝脏转氨酶水平、棕色脂肪组织代谢产热等密切相关,可增加棕色脂肪组织对脂肪酸和葡萄糖的摄取,并在心肺功能、机体免疫与炎症反应方面具有一定影响。相关的动物实验显示,给予外源性12,13-DiHOME处理的实验组小鼠对寒冷暴露的耐受性优于对照组小鼠,且实验组小鼠脂质氧化加强、循环中甘油三酯水平降低。最近一项研究调查了寒冷暴露对人体脂类信号因子的影响,发现人体血浆12,13-DiHOME的浓度与体质量指数、胰岛素抵抗（由HOMA-IR表示）、空腹血浆胰岛素及血糖含量、肝转氨酶水平成反比。研究表明12,13-DiHOME 是过氧化物酶体增殖物激活受体 γ（peroxisome proliferators-activated receptors γ,PPAR-γ）的配体,PPAR-γ及其激活因子/抑制因子在脂肪代谢、各类炎症和免疫反应中发挥了极其重要的作用,例如PPAR-γ在脂肪分解转化等方面发挥着关键作用,且具有降低血脂、血糖等功能,间接说明12,13-DiHOME有潜力在未来开发成为治疗代谢相关疾病的重要媒介。临床上的多项研究己经表明,12,13-DiHOME与糖脂代谢等密切相关,但目前未见12,13-DiHOME与2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者的相关研究报道,本文旨在通过横断面研究探讨血浆12,13-DiHOME水平与2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝

关键词： 2型糖尿病非酒精性脂肪肝 12,13-DiHOME 糖脂代谢内脏脂肪面积

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低温运动对肥胖大鼠棕色脂肪12,13-DiHOME合成及脂肪酸转运调节影响的研究

低温运动对肥胖大鼠棕色脂肪12,13-DiHOME合成及脂肪酸转运调节影...

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第十二届全国体育科学大会

作者：林宝璇翁锡全元宇彭燕群何玉婷广州体育学院

研究目的:机体在低温暴露时激发脂肪棕色化而使产热增加,这与低温诱导棕色脂肪组织(BAT)中12,13-DiHOME(12,13-二羟基-9Z-十八碳烯酸)的合成从而增加BAT对循环中脂肪酸的摄取有关;运动也诱导BAT释放的12,13-Di HOME进入血液刺激骨骼肌... 详细信息

研究目的:机体在低温暴露时激发脂肪棕色化而使产热增加,这与低温诱导棕色脂肪组织(BAT)中12,13-DiHOME(12,13-二羟基-9Z-十八碳烯酸)的合成从而增加BAT对循环中脂肪酸的摄取有关;运动也诱导BAT释放的12,13-Di HOME进入血液刺激骨骼肌对脂肪酸的摄取。但对于低温结合运动引起12,13-Di HOME变化及脂代谢效应的研究尚未见报道。本研究通过观察低温结合运动干预营养性肥胖大鼠肩胛间棕色脂肪(iBAT)12,13-DiHOME和游离脂肪酸(FFA)含量及12,13-Di HOME生物合成相关环氧化物水解酶(Ephx1和Ephx2)、脂肪酸转运蛋白CD36表达量的变化,探讨低温环境下运动对营养性肥胖大鼠脂代谢的影响,旨在为肥胖人群特殊环境运动处方提供理论依据。研究方法:购自广东省医学实验动物中心(SCXK(粤)2018-0002)5周龄SD大鼠,经8周高脂饮食(D12451)造模成功后随机选取32只营养性肥胖大鼠分为常温对照组(NC)、常温运动组(NE)、低温对照组(CC)、低温运动组(CE)四组,每组8只。实验在智能气候实验室进行,常温环境温度为24℃-26℃,低温环境温度为3℃-5℃,相对湿度50-60%,明暗周期为12:12。运动组大鼠进行水平跑台有氧运动训练,跑速为25m/min,1组30min,每天2组,组间间歇10min、隔天运动1次。干预5周在末次干预后禁食不禁水12hr,称体重后按0.2ml/100g体重腹腔注射2%kg戊巴比妥钠麻醉,解剖取iBAT,匀浆,采用q PCR和Western Blot检测CD36 mRNA和Ephx1/2蛋白表达,LC-MS/MS检测12,13-Di HOME水平,Elisa检测FFA含量。采用Image J进行蛋白灰度分析,SPSS25.0对组间进行单因素方差分析,以运动和温度作为影响因素采用双因素(2×2)方差分析因素间交互作用,P12,13-Di HOME含量均极显著增加(P12,13-Di HOME有非常显著影响(P12,13-Di HOME的影响有显著交互作用(P12,13-Di HOME合成,且低温的增加效应优于运动,但运动在一定程度上削弱低温环境下iBAT中12,13-Di HOME的合成能力。2)与NC组相比,NE、CC组Ephx1蛋白表达极显著增加(P0.05)。提示低温与运动均可上调iBAT中CD36 mRNA表达而增加对FFA的摄取,且低温作用效应优于运动;低温结合运动干预对CD36m RNA表达和FFA摄取的作用可能来自于两者独立作用的结果。研究结论:低温与运动均可上调棕色脂肪Ephx1和Ephx2的表达并促进12,13-Di HOME合成,使棕色脂肪摄取脂肪酸功能增强;低温促12,13-Di HOME合成及其对脂肪酸摄取作用优于运动干预,且低温结合运动干预对脂肪酸摄取的促进效应更佳。

关键词：低温运动棕色脂肪 12,13-DiHOME 脂肪酸

来源： cnki会议评论

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