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细胞与分子免疫学杂志 2015年第7期31卷 918-922页

作者：刘理静钱红湖南医药学院临床医学系湖南怀化418000

目的探讨miR-21在肺纤维化小鼠肺组织中的表达及其在肺成纤维细胞增殖、转分化、胶原蛋白合成中的作用。方法将30只C57BL／6小鼠随机分为对照组（n=5）和模型组（n=25）。经气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型，分别于第3、7、14、28... 详细信息

目的探讨miR-21在肺纤维化小鼠肺组织中的表达及其在肺成纤维细胞增殖、转分化、胶原蛋白合成中的作用。方法将30只C57BL／6小鼠随机分为对照组（n=5）和模型组（n=25）。经气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型，分别于第3、7、14、28、56天随机处死5只小鼠，而对照组于第56天全部处死作为总体对照，采用荧光实时定量PCR测定肺组织中miR-21表达。另外，NIH3T3肺成纤维细胞分别予Lipofectamine^TM 2000转染试剂（空白对照组）以及miR-21阴性对照物、模拟物、抑制物处理，通过MTY法检测细胞增殖能力，应用荧光实时定量PCR和Western blot法分别检测d平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、含1型血小板结合蛋白基序的去整合素和金属蛋白酶1（ADAMTS-1）、1型胶原蛋白（Coll）、3型胶原蛋白（C013）mRNA与蛋白表达情况。结果模型组第7～56天，肺组织中miR-21表达水平明显高于对照组，第28天达到高峰。在共同培养24、48、72、96h后，miR-21模拟物组细胞活力较空白对照组增加，而miR-21抑制物组细胞活力较空白对照组降低。与空白对照组比较，miR-21模拟物组α-SMA、Coll、CoBmRNA与蛋白表达水平升高，ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平减少；然而miR-21抑制物组α-SMA、Coll、Co13 mRNA与蛋白表达水平下降，ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平上升。阴性对照组上述指标与空白对照组比较，无显著性差异。结论miR-21在肺纤维化小鼠肺组织中表达上调，miR-21高表达可促进肺成纤维细胞增殖、转分化以及胶原蛋白的合成。

关键词： miR-21 肺纤维化 α平滑肌肌动蛋白 ADAMTS-1 1型胶原蛋白 3型胶原蛋白

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大黄素通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1通路的活性减轻大鼠肺纤维化

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第10期32卷 1342-1346,1351页

作者：刘理静钱红肖华贺兼斌谢茂峰王在岩龙兴云湖南医药学院临床医学院湖南怀化418000 南华大学附属第一医院呼吸内科湖南衡阳421001 怀化市第一人民医院呼吸内科湖南怀化418000

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路在大黄素抗肺纤维化中的作用。方法按随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为6组:正常对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量组(20 mg/... 详细信息

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路在大黄素抗肺纤维化中的作用。方法按随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为6组:正常对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量组(20 mg/kg)、大黄素高剂量组(80 mg/kg)和泼尼松组(5 mg/kg),每组10只大鼠。假手术组大鼠气管内注入生理盐水,而后4组大鼠气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型,次日起,大黄素低、高剂量组大鼠分别以20 mg/kg、80 mg/kg大黄素2 m L灌胃,泼尼松组予5 mg/kg醋酸泼尼松2 m L灌胃,其余3组则以生理盐水2 m L灌胃。造模后第28天处死大鼠,取血并分离肺组织。常规HE和Masson染色观察肺组织病理改变,荧光实时定量PCR检测各组大鼠肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA的水平,Western blot法检测肺组织TGF-β1、ADAMTS-1、Col1、Col3蛋白水平,ELISA测定血清中1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)水平。结果与模型组比较,各药物处理组肺泡炎及肺纤维化程度明显减轻。与正常对照组、假手术组比较,模型组肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平以及血清P1CP、P3NP浓度升高,而肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平降低。与模型组相比,给予低、高剂量大黄素或泼尼松处理后,肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平及血清P1CP、P3NP浓度则下调,肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平上调。与大黄素低剂量组相比,大黄素高剂量组和泼尼松组上述指标明显改善,但后二者相比无明显差异。结论大黄素抑制TGF-β1/ADAMTS-1途径的活性引起肺组织Col1、Col3降解增多,是其抗肺纤维化的重要机制。

关键词：大黄素肺纤维化转化生长因子β1 含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶 1型胶原蛋白 3型胶原蛋白

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