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枯草芽孢杆菌等益生菌对白术白绢病的防治研究

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中华中医药学刊 2017年第10期35卷 2621-2624,I0017-I0019页

作者：胡朝晖陈秋强王博林倪方方徐红梅宋腾蛟袁小凤浙江中医药大学浙江杭州310053

前期工作中发现蚕沙发酵肥能有效缓解白术的连作障碍,并从发酵肥中筛选到4株可能缓解白术连作障碍的益生菌。为进一步探讨蚕沙有机肥缓解杭白术连作障碍的微生物作用机制,从致病白术根际分离并培养白绢病致病菌齐整小核菌(Sclerotium ro... 详细信息

前期工作中发现蚕沙发酵肥能有效缓解白术的连作障碍,并从发酵肥中筛选到4株可能缓解白术连作障碍的益生菌。为进一步探讨蚕沙有机肥缓解杭白术连作障碍的微生物作用机制,从致病白术根际分离并培养白绢病致病菌齐整小核菌(Sclerotium rolfsii),利用平板对峙实验将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、荧光性假单胞菌(Psdeuomnoda fluoerncnet)、类芽孢杆菌(Paenibacillus Ash)和黄杆菌(Flavobacterium mizutaii)4种菌与齐整小核菌进行拮抗,并通过盆栽实验验证。对峙实验结果表明,黄杆菌对齐整小核菌的抑菌率为43.6%;枯草芽孢杆菌的抑菌率为67.6%;荧光性假单胞菌的抑菌率为52.5%,而类芽孢杆菌的抑菌率为12.4%其中枯草芽孢杆菌的抑菌效果最为显著,说明黄杆菌、枯草芽孢杆菌和荧光性假单胞菌能够有效拮抗白绢病病菌,而类芽孢杆菌效果不佳。在致病白术土壤中添加这3种有效益生菌,也能够有效提高白术存活率,而且存活率随着益生菌浓度增加而增加,高浓度(2×108CFU/m L)枯草芽孢杆菌效果最明显,达到100%,另外2种益生菌均为80%。结论:从蚕沙发酵肥中筛选出的3种益生菌均能抑制白绢病病原菌的生长,且枯草芽孢杆菌的防治效果最好,可提高病株的存活率及改善病株生长,提示可以用于生物菌肥的开发。

关键词：白术白绢病齐整小核菌枯草芽孢杆菌平板对峙

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苹果白绢病菌生物学特性及室内药剂毒力测定

中国南方果树 2019年第4期48卷 99-103,106页

作者：徐成楠迟福梅冀志蕊张俊祥王娜周宗山中国农业科学院果树研究所

在辽宁绥中县发现苹果白绢病发生为害,为明确病原菌种类,将采集的病样进行分离培养,并采用柯赫氏法则验证致病性,根据病原菌形态和rDNA-ITS和LSU序列分析对病菌进行分子鉴定,同时进行了病菌生物学特性及防治药剂毒力测定。结果表明,分... 详细信息

在辽宁绥中县发现苹果白绢病发生为害,为明确病原菌种类,将采集的病样进行分离培养,并采用柯赫氏法则验证致病性,根据病原菌形态和rDNA-ITS和LSU序列分析对病菌进行分子鉴定,同时进行了病菌生物学特性及防治药剂毒力测定。结果表明,分离株的菌落形态与齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.一致,经分子鉴定,其ITS序列和LSU序列与齐整小核菌的有性型序列同源性达100%,将引起苹果白绢病的病原菌鉴定为齐整小核菌。病原菌在10~35℃均可生长,25~30℃时生长最快;病原菌在pH值为3~12时均可生长,碱性环境不适宜病菌生长。室内毒力测定结果显示,戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻呋酰胺、咯菌腈和氟硅唑等5种药剂均对白绢病菌有抑制作用,其中,噻呋酰胺抑菌效果最好,EC50值为0.056 5 mg/L。

关键词：苹果白绢病齐整小核菌生物学特性毒力测定

广东省花生白绢病菌的分布和生物学性状研究初报

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广东农业科学 2012年第17期39卷 71-73,F0003页

作者：肖翔陈晓兰邓铭光徐大高潘汝谦华南农业大学资源环境学院广东广州510642 惠州市惠城区农业技术推广中心广东惠州516008 广东省农科院植物保护研究所广东广州510640

采用一般调查和定点调查相结合的方法,对广东省花生白绢病的发生危害与分布情况进行了调查,并对花生白绢病菌的形态、生物学性状及其对杀菌剂的敏感性进行了测定。结果表明,广东省各花生产区均有花生白绢病的发生分布,发病率在10%左右,... 详细信息

采用一般调查和定点调查相结合的方法,对广东省花生白绢病的发生危害与分布情况进行了调查,并对花生白绢病菌的形态、生物学性状及其对杀菌剂的敏感性进行了测定。结果表明,广东省各花生产区均有花生白绢病的发生分布,发病率在10%左右,严重的超过50%,对花生生产造成严重损失;花生白绢病菌的菌丝宽度为6.1-8.2μm,菌丝生长速率介于0.8-1.1 mm/h之间,每培养皿(直径9 cm)产生菌核的数量为55-378个,菌核大小范围为0.89-3.54 mm×0.80-2.40 mm,平均大小范围为1.13-2.12 mm×1.06-1.80 mm;每菌核干重为0.4-2.7 mg。杀菌剂离体毒力测定结果表明,己唑醇和戊唑醇对花生白绢病菌具有较好的抑制作用。

关键词：花生白绢病齐整小核菌生物学性状杀菌剂

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魔芋白绢病病原菌的分离鉴定

安徽农业科学 2005年第12期33卷 2307-2307,2320页

作者：马琼秦恩华李又萍湖北民族学院生物科学与技术学院湖北恩施445000

以从染病魔芋植株上收集的白绢病菌核为分离材料,分离到3株产菌核的丝状病原真菌;根据病原菌形态学及致病性特征,鉴定3株病原菌为半知菌亚门,丝孢纲,无孢目,小核菌属的齐整小核菌(Sclerotiumrolfsii Sacc.)。

关键词：魔芋白绢病病原菌分离鉴定齐整小核菌

一株从金钱树上分离的产纤维素降解酶的菌株的分离及特性鉴定

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基因组学与应用生物学 2009年第4期28卷 715-719页

作者：曾涛陈汉清曾会才中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室海口571101 海南大学环境与植物保护学院儋州571737

本研究从金钱树(Zamioculcas zamiifolia)白绢病(Southern blight)病株上分离到一株产纤维素酶菌株SM,经形态观察和rDNA-ITS序列分析鉴定为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc),经以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基培养和刚果红染色... 详细信息

本研究从金钱树(Zamioculcas zamiifolia)白绢病(Southern blight)病株上分离到一株产纤维素酶菌株SM,经形态观察和rDNA-ITS序列分析鉴定为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc),经以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基培养和刚果红染色测定,证明SM菌株可产生高活性纤维素降解酶。本文对SM菌株产纤维素降解酶的液态发酵条件进行了研究,结果表明:在起始pH6.0,无机氮:有机氮:纤维素碳源之比为0.07g:1.4g:1.6g,温度为30℃,摇床转速为160r/min,发酵培养时间为5d的条件下,该菌株发酵液的CMC酶活性达到11.7U/mL,滤纸酶活性达到2.156U/mL,β-葡萄糖苷酶活性达到3.911U/mL。

关键词：金钱树白绢病齐整小核菌纤维素降解酶酶活性

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生物除草剂菌克阔剂型及其除草效果的研究

生物除草剂菌克阔剂型及其除草效果的研究

作者：庄超南京农业大学

学位级别：硕士

菌克阔是利用从外来入侵恶性杂草加拿大一枝黄花(Solidago canadensis)白绢病病株上分离得到的齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)菌株SC64开发的生物除草剂,其生物活性成分为该菌的菌丝体。通过前期系统研究表明菌克阔可以用于禾本科作物... 详细信息

菌克阔是利用从外来入侵恶性杂草加拿大一枝黄花(Solidago canadensis)白绢病病株上分离得到的齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)菌株SC64开发的生物除草剂,其生物活性成分为该菌的菌丝体。通过前期系统研究表明菌克阔可以用于禾本科作物田、草坪的阔叶杂草以及加拿大一枝黄花的生物防治。为菌克阔的产业化生产和推广应用提供更为扎实的技术基础,本文在前期的研究基对上对菌克阔的剂型配方、施用方法等关键技术进行了改进,结果如下:菌克阔防除加拿大一枝黄花的田间应用技术单一的割除、翻耕或使用齐整小核菌菌株SC64,均不能很好的防除加拿大一枝黄花。割除+翻耕+使用菌株SC64不但能有效防除加拿大一枝黄花地上部分,阻止了种子产生,而且还杀死地下根状茎。2012年8月在南京郊区进行试验,采用割除+翻耕+菌克阔菌剂,设置四4种剂量:60g/m2、90g/m2、120g/m2、150g/m2,对加拿大一枝黄花的30d株防效在91%到95.3%,60d的株防效为89.5%到91.9%。同年9月常州郊区进行试验,设置了 8个处理。割除+翻耕+菌剂处理的30d株防效能达到95.2%以上,180d的株防效在47%到67.2%,显著高于割除+翻耕及其它所有处理。虽然割除+翻耕处理30d的株防效与割除+翻耕+菌剂处理差异不明显,但是由于其不能抑制后续的出苗,60d株防效低于割除+翻耕+菌剂处理。因此割除+翻耕+使用菌剂可能是在不依靠化学除草剂的短期内有效防除加拿大一枝黄花的可选方法。菌克阔复配防除旱直播稻田杂草的田间应用技术禾长孺孢菌稗草专化型正在被开发成生物除草剂—克稗霉。本试验初次尝试利用菌克阔与克稗霉复配使用来防除旱直播稻田禾本科、阔叶和部分莎草科杂草。大田试验在南京江浦常年稻麦连作田进行。试验设置了 9种不同的处理。试验结果显示,随着菌克阔+克稗霉复配剂量的增大,杂草的防除效果明显增强。复配施用小区7d总草株防效可达38.0%～71.0%,21d的株防效为35.7%～62.8%,鲜重防效可达40.2%～78%。其中,最大剂量复配处理防效显著高于化学处理。单独使用克稗霉或者单独使用菌克阔的小区,总草防效均低于同等剂量生物除草剂混配的小区防效,且分别对阔叶草和异型莎草以及对稗草的防效为0。综述所述,试验表明齐整小核菌菌株SC64在禾长蠕孢菌稗草专化型HGE配合下扩大杀草谱,复配使用提高了整体除草效果。有望通过复配应用于直播稻田一次性防除稗草、主要的阔叶草和部分莎草。醋正在被开发用于防除杂草。本试验初次尝试利用齐整小核菌与醋复配使用来防除旱直播稻田杂草。大田试验在南京江浦常年稻麦连作田进行。试验设置了 9种不同的的处理。结果显示,混合用药7d后各个处理株防效可达24%～35.4%,21d的株防效为26.5%～38.8%,21d的鲜重防效可达19.6%～25.4%,均低于化学除草剂防效。单独使用醋的小区杂草的防效较低,说明这个浓度的醋对杂草的杀伤性小。菌克阔+醋复配与单独使用同剂量菌克阔的小区,7d的株防效无差异,但是21d的株防效和鲜重防效均显著较高。说明醋具有增强菌克阔防除杂草效果的作用。菌克阔颗粒剂剂型的研制本文结合齐整小核菌的生物学特性,尝试以海藻酸钙小球为载体包埋菌丝体制备颗粒剂。将110ml菌丝悬浮液离心后得到的菌丝团,加入到100ml 2%海藻酸钠溶液中混匀制成混合液,经由装有滴定管的漏斗装置缓慢滴入到100ml 1%的氯化钙溶液中,边在磁力搅拌机上搅拌氯化钙溶液,直至Ca2+向液滴内渗透凝聚成实心凝胶球(直径约5mm),过滤出凝胶球置于自然条件下风干成固体颗粒剂(直径约1.5mm)。货架期试验结果表明,颗粒在4℃条件储藏90天后,在PDA平板上形成的菌落直径和菌丝活力仍与贮藏初期一样大。在盆钵试验中,用量为50kg/亩和80kg/亩时,对鳢肠幼苗株防效达到65.57%和76.67%,均高于含菌丝体的棉籽壳固体基质100kg/亩的防效。初次尝试以秸秆粉与齐整小核菌菌丝混合制成固体颗粒剂型。将液体培养的菌丝悬浮液离心至原来的3分之一倍的体积备用;将灭菌后的水稻或玉米农作物秸秆粉和淀粉(w1/w2,10:1)混合,边加入无菌水(w1/v1,5:2)边用玻璃棒搅拌,倒入颗粒成型机制成颗粒,置于50℃烘箱里烘干(约4h)后,6-8目筛子过筛获得2～2.4mm颗粒;将固体颗粒放入圆形造粒机中旋转搅拌,逐渐往颗粒上加菌丝悬浮液(w3/v2,3:4),直至菌丝粘裹成颗粒为止,取出湿颗粒放置阴凉处晾干即制成颗粒剂。生测试验显示,4个处理剂量10kg/亩、20kg/亩、30kg/亩、40kg/亩对一枝黄花幼苗7d的株防效为85%～100%,均显著高于含菌丝体的棉籽壳基质40kg/亩的防效,颗粒致病性强。综上所述,秸秆粉颗粒剂具有发展成齐整小核

关键词：齐整小核菌菌株SC64 剂型加拿大一枝黄花旱直播稻田生物除草剂

广西茉莉花病害调查及主要病害的病原生物学特性和防治技术研究

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广西茉莉花病害调查及主要病害的病原生物学特性和防治技术研究

作者：覃丽萍广西大学

学位级别：硕士

从广西横县曹村、石井村、榻村、木脚村、岭脚农业生态园、南宁市仁义路茉莉种植地调查发现白绢病、炭疽病、枝枯病、顶枯病、叶斑病、烟霉病六种真菌病害和一种病毒病黄环斑花叶病,另外还发现一种丛枝病,其病因尚未能确定。对茉莉白... 详细信息

从广西横县曹村、石井村、榻村、木脚村、岭脚农业生态园、南宁市仁义路茉莉种植地调查发现白绢病、炭疽病、枝枯病、顶枯病、叶斑病、烟霉病六种真菌病害和一种病毒病黄环斑花叶病,另外还发现一种丛枝病,其病因尚未能确定。对茉莉白绢病病菌齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc. )的生物学特性进行了研究。结果表明,28℃、pH5.0～6.0、蔗糖作为碳源、硝酸钾作为氮源及黑暗等条件适合菌丝的生长;28～34℃、pH4.0～6.0、光照、相对湿度100%加水等条件适合菌核萌发。用生长速率法和抑菌圈法室内测定白绢病菌对各种杀菌剂的敏感性,结果表明,戊唑醇、丙环唑、腈菌唑、氟啶胺、氟哇唑等杀菌剂在室内对菌丝的生长具有较强的抑制作用,对白绢病菌菌丝生长的抑制率均达100%,抑菌圈直径分别达到25.2mm、18.33mm、17.45mm、14.01嗍、11.65mm。用拮抗真菌G、拮抗细菌B和化学农药氟啶胺进行防治茉莉白绢病的试验,结果发现拮抗真菌G、拮抗细菌B和氟啶胺可延缓白绢病的发生、发展,但无论是单独使用还是共同使用,防治白绢病的效果差异均不显著,防治效果最高的为拮抗菌G与氟啶胺共同使用的处理,接种30d后其防效最高,为46.70%。另外还在田间进行了氟啶胺对茉莉白绢病的防治试验。

关键词：茉莉花白绢病齐整小核菌生物学特性防治技术

贵州省草乌病害调查及白绢病菌生物学特性研究

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贵州省草乌病害调查及白绢病菌生物学特性研究

作者：李小霞贵州大学

学位级别：硕士

从贵州省清镇市恒霸药业基地、清镇市石关村和施秉县山口村等草乌种植基地，调查发现了白绢病、白粉病、锈病、腐霉病、叶斑病和褐斑病六种真菌病害和一种病毒病(病原菌尚未确定)。对草乌白绢病的病菌齐整小核菌(Sclerotium rolfsii S... 详细信息

从贵州省清镇市恒霸药业基地、清镇市石关村和施秉县山口村等草乌种植基地，调查发现了白绢病、白粉病、锈病、腐霉病、叶斑病和褐斑病六种真菌病害和一种病毒病(病原菌尚未确定)。对草乌白绢病的病菌齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc．)的生物学特性进行研究。结果表明，30℃、pH5.0～7.0、淀粉作为碳源、硝酸钙作为氮源及光暗交替等条件适合菌丝的生长;30～35℃、pH3.0～6.0、相对湿度100％+水膜等条件适合菌核萌发;30℃、淀粉作为碳源、硝酸钠作为氮源及全光照等条件有利于产核。用生长速率法和抑菌圈法，测定白绢病菌对几种杀菌剂的敏感性，结果表明，12.5％烯唑醇对菌丝的生长具有较强的抑制作用，EC为0.13μg／ml，抑菌圈直径在浓度32μg／ml为20.6mm。白绢病菌的药剂作用机制研究，结果表明，12.5％烯唑醇处理草乌白绢病菌可溶性蛋白含量高于对照;还原糖含量在菌丝处理的前6h内急剧下降，在6h达到最低，然后逐渐上升至对照水平，几丁质酶活性、几丁糖含量均高于对照。镜检发现菌丝出现细胞泡囊化和消融现象。对草乌白绢病的发病条件进行室内和田间的调查研究，显示温度和湿度是影响白绢病菌萌发和生长的主要因素。对草乌白绢病进行了田间防治试验，但防治效果差异不显著。同时室内也进行了生防菌筛选的实验，以期为其综合防治提供科学依据。

关键词：草乌齐整小核菌生物学特性药剂筛选

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铁皮石斛三种病害的病原菌鉴定及防控措施

铁皮石斛三种病害的病原菌鉴定及防控措施

作者：赵玲琳浙江大学

学位级别：硕士

铁皮石斛,兰科石斛兰属多年生草本植物。现代药理学研究证明其成分具有多种功效,在食用、药用等方面都体现出一定的价值。但铁皮石斛对生长环境和气候条件要求十分苛刻,且生长发育缓慢,野生资源十分稀缺。20世纪90年代,浙江省在全国率... 详细信息

铁皮石斛,兰科石斛兰属多年生草本植物。现代药理学研究证明其成分具有多种功效,在食用、药用等方面都体现出一定的价值。但铁皮石斛对生长环境和气候条件要求十分苛刻,且生长发育缓慢,野生资源十分稀缺。20世纪90年代,浙江省在全国率先开始铁皮石斛的规模化种植和产业化开发,目前已是铁皮石斛种植与深加工产业的主要分布地。然而,铁皮石斛的人工栽培往往是大棚设施栽培且高密度栽培,棚内湿度大、通风不良、相对闷热,非常利于病害的发生,浙江省又地处亚热带,夏季高温高湿,梅雨季持续时间久,导致病害的发生更加持久、普遍。为明确浙江省几种常见的铁皮石斛病害的病原物,以及筛选出适合铁皮石斛生长的绿色防控措施和高效低毒低残留的化学应急技术,本文进行了一些初步的研究探索。主要研究结果如下:(1)通过对铁皮石斛种植基地的病害发生规律调查,病害典型症状样本的采集、病原菌的分离、纯化、致病性测定、形态观察、rDNA-ITS序列分析等,明确引起铁皮石斛白绢病的病原菌为齐整小核菌Sclerotium rolfsii,该病发生高峰期为高温高湿的梅雨季节或夏、秋高温季节;明确引起铁皮石斛轮纹病的病原菌为露湿漆斑菌Myrothecium roridum,该病发生高峰期为6月,根据调查该病发生与棚内空气湿度关系明显;明确引起铁皮石斛炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioids,在浙江该病发生高峰期为高温高湿的梅雨季节或夏、秋高温季节。(2)通过对这三种病害进行室内药剂筛选,明确25%吡唑醚菌酯乳油2000倍液、99%恶霉灵可湿性粉剂3000倍液和29%吡萘嘧菌酯悬浮剂1500倍液对铁皮石斛白绢病病原菌齐整小核菌Sclerotium rolfsii菌丝生长抑制率均达100.0%;明确6%春雷霉素可湿性粉剂1000倍液、42.8%氟菌肟菌酯悬浮剂3500倍液、29%吡萘嘧菌酯悬浮剂1500倍液、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1000倍液对铁皮石斛轮纹病病原菌露湿漆斑菌Myrothecium roridum菌丝生长和分生孢子萌发的抑制率均达100.0%;明确6%春雷霉素可湿性粉剂1000倍液、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1000倍液对铁皮石斛炭疽病病原菌胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioids菌丝生长抑菌率可达96.4%、96.3%。在室内药剂筛选的基础上,对铁皮石斛白绢病、铁皮石斛炭疽病进行田间药效试验,结果表明,25%吡唑醚菌酯乳油2000倍液、10%苯醚甲环唑可湿性粉剂1000倍液可对铁皮石斛白绢病进行有效防控,试验还采用了生物防治制剂10亿孢子/克锌·木霉菌孢子粉剂,虽防治效果略低于化学药剂,但也表现出较好的防效,也推荐使用;对铁皮石斛炭疽病进行有效防控则推荐使用6%春雷霉素可湿性粉剂1000倍液。通过不同栽培方式下铁皮石斛白绢病、炭疽病的发生情况调查,结果表明采用多层卧式竹制种植架、立式多孔位种植架这两种创新生态栽培方式,可显著减轻铁皮石斛白绢病、铁皮石斛炭疽病的病害发生。此外,调节控制设施大棚内的温湿度可以明显控制病害的蔓延扩展。

关键词：铁皮石斛齐整小核菌露湿漆斑菌胶孢炭疽菌防控措施