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鼠尾胶原联合血小板源性生长因子BB培养内皮细胞

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中国组织工程研究 2015年第8期19卷 1177-1183页

作者：曹雯赵爱超陈邦党刘芬马依彤马翔新疆医科大学第一附属医院冠心病二科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:有研究证实,Ⅰ型鼠尾胶原可促进成肌纤维细胞的增加,对内皮细胞的迁移及成管有较为明显的作用,推断胶原可为细胞的生长提供一个较为合适的内环境。目的:探讨鼠尾胶原联合血小板源性生长因子BB抗人脐静脉内皮细胞凋亡的效果及安全... 详细信息

背景:有研究证实,Ⅰ型鼠尾胶原可促进成肌纤维细胞的增加,对内皮细胞的迁移及成管有较为明显的作用,推断胶原可为细胞的生长提供一个较为合适的内环境。目的:探讨鼠尾胶原联合血小板源性生长因子BB抗人脐静脉内皮细胞凋亡的效果及安全性。方法:将第4代人脐静脉内皮细胞培养于铺有鼠尾胶原的培养皿上,用Alamar Blue法检测不同时间点的还原比率。将第4代人脐静脉内皮细胞分为4组培养于24孔板,其中生长因子组是在细胞接种前加入血小板源性生长因子BB蛋白于细胞悬浮液中;联合组需事先加入血小板源性生长因子BB蛋白于鼠尾胶中,铺于板底;最后各组均使用H2O2诱导凋亡,73 h后采用Western blot测定血小板源性生长因子BB、凋亡相关蛋白及抗凋亡蛋白的表达,同时Tunnel检测细胞凋亡阳性率。结果与结论:在铺有鼠尾胶原培养皿中培养人脐静脉内皮细胞的成管数量明显多于正常培养人脐静脉内皮细胞的成管数量(P鼠尾胶原培养的细胞与正常对照细胞生长状态相似,说明鼠尾胶原对细胞无明显毒性作用。联合组血小板源性生长因子BB、Bcl-2、p-Akt表达高于其余3组(P鼠尾胶原对人脐静脉内皮细胞无明显毒性作用,联合血小板源性生长因子BB生长因子后可显著增强抗细胞凋亡效果。

关键词：生物材料材料相容性人脐静脉内皮细胞鼠尾胶原血小板源性生长因子BB 抗凋亡国家自然科学基金

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鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用

中国组织工程研究 2014年第52期18卷 8463-8469页

作者：包馨慧李晓梅陶静杨毅宁马依彤陈邦党新疆医科大学第一附属医院新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:胶原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞... 详细信息

背景:胶原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果与结论:两组培养皿中,随着过氧化氢浓度的增高,均可见细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降,细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高,Bcl-2/Bax比值显著降低,呈剂量依赖性。而在相同浓度过氧化氢诱导下,与对照组相比,实验组细胞凋亡状态明显减弱,细胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,细胞凋亡率和丙二醛水平明显减低。表明鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能与提高超氧化物歧化酶活力,减少丙二醛产生及提高Bcl-2的表达有关。

关键词：生物材料材料相容性鼠尾胶原 Ⅰ型胶原蛋白心肌细胞氧化应激过氧化氢国家自然科学基金

鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对角膜上皮细胞增殖的影响

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毒理学杂志 2015年第2期29卷 130-133页

作者：罗敏辉任海涛李培宁唐小江卫秦芝南方医科大学公共卫生与热带医学学院毒理学系广东广州510515 广东省医学实验动物中心佛山泰尔健生物科技有限公司广东药学院

目的探讨鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对体外培养角膜上皮细胞增殖的影响。方法采用鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿,以普通培养器皿作对照,培养角膜上皮细胞,观察细胞形态,进行细胞计数并描绘细胞生长曲线,比较... 详细信息

目的探讨鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对体外培养角膜上皮细胞增殖的影响。方法采用鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿,以普通培养器皿作对照,培养角膜上皮细胞,观察细胞形态,进行细胞计数并描绘细胞生长曲线,比较不同基质对角膜上皮细胞的增殖作用。结果使用基质包被的培养器皿培养角膜上皮细胞,细胞增殖速度较普通组快,细胞形态、活力和长势比普通组更佳,促进增殖的能力为鼠尾胶原>多聚赖氨酸>明胶。结论鼠尾胶原可促进角膜上皮细胞增殖,且增殖效果优于多聚赖氨酸和明胶。

关键词：角膜上皮细胞基质鼠尾胶原增殖

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鼠尾胶原对Caco-2细胞模型建立的影响

中药药理与临床 2010年第5期26卷 155-157页

作者：鄢良春刘青春赵军宁毕岳琦四川省中医药科学院药理毒理研究所国家中医药管理局中药质量生物学评价重点研究室成都610041 成都华西海圻医药科技有限公司成都610041

目的:研究鼠尾胶原对Caco-2细胞模型建立的影响,探讨适宜于Caco-2细胞模型建立的鼠尾胶原浓度。方法:将培养皿铺以750,250,50μg/ml三个浓度鼠尾胶原,各组接种相同数量的Caco-2细胞,培养21天,观察各组的细胞形态、跨膜电阻值和荧光素钠... 详细信息

目的:研究鼠尾胶原对Caco-2细胞模型建立的影响,探讨适宜于Caco-2细胞模型建立的鼠尾胶原浓度。方法:将培养皿铺以750,250,50μg/ml三个浓度鼠尾胶原,各组接种相同数量的Caco-2细胞,培养21天,观察各组的细胞形态、跨膜电阻值和荧光素钠透过率的差异。结果:各组细胞在形态上没有差异,低浓度的鼠尾胶原能提高Caco-2细胞单层的跨膜电阻值,降低荧光素钠透过率(P鼠尾胶原可以增加Caco-2细胞的贴壁性,提高Caco-2细胞模型建立的成功率。

关键词：鼠尾胶原 Caco-2细胞跨膜电阻

鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用

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临床耳鼻咽喉科杂志 2006年第10期20卷 463-465页

作者：鄢开胜罗凌惠付勇陈广理龚树生华中科技大学协和医院耳鼻咽喉科武汉430022

目的:建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性,免疫组织化学结果... 详细信息

目的:建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性,免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论:成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法,并且制作简便,成本低廉。

关键词：耳蜗血管纹细胞培养鼠尾胶原

鼠尾胶原在培养鼠下切牙颈环上皮细胞中的应用

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实用口腔医学杂志 2010年第1期26卷 51-54页

作者：胡孝丽王铎冷卫东罗志晓湖北十堰郧阳医学院附属太和医院口腔科 442000 山东大学口腔医学院牙体科

目的:建立用自制鼠尾胶原为贴附底物的大鼠颈环上皮细胞的体外培养模式。方法:制作鼠尾胶原,观察用自制的鼠尾胶原培养出大鼠颈环上皮细胞的效果,并对纯化的上皮细胞进行免疫组织化学染色鉴定。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠... 详细信息

目的:建立用自制鼠尾胶原为贴附底物的大鼠颈环上皮细胞的体外培养模式。方法:制作鼠尾胶原,观察用自制的鼠尾胶原培养出大鼠颈环上皮细胞的效果,并对纯化的上皮细胞进行免疫组织化学染色鉴定。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠颈环上皮细胞,呈多角形,克隆状生长,β1整合素和角蛋白免疫组织化学染色阳性。结论:鼠尾胶原可作大鼠颈环上皮细胞的体外培养贴附底物,为今后研究牙齿发育机制提供简便的方法和途径。

关键词：颈环上皮细胞细胞培养鼠尾胶原

鼠尾胶原对过氧化氢所致体外心肌细胞氧化损伤的影响

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数理医药学杂志 2015年第1期28卷 16-18页

作者：包馨慧李晓梅杨毅宁马依彤陈邦党陶静陈小翠新疆医科大学第一附属医院心脏中心乌鲁木齐830054

目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致的离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿和普通培养皿中,均用0u M、100u M、200u M和300u M H2O2诱导。24h后,通过电子显微镜观察各组乳... 详细信息

目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致的离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿和普通培养皿中,均用0u M、100u M、200u M和300u M H2O2诱导。24h后,通过电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果:铺有鼠尾胶原的培养皿和普通培养皿中,随着H2O2浓度的增高,电子显微镜下可观察到细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率明显下降,细胞凋亡率明显增高,Bcl-2/Bax比值显著降低。而在相同浓度H2O2诱导的鼠尾胶原组与普通组中,铺有鼠尾胶原培养皿培养的细胞凋亡状态较普通培养皿培养的细胞明显减弱,且细胞存活率及Bcl-2/Bax比值增高,细胞凋亡率减低。结论:鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用。

关键词：鼠尾胶原 I型胶原蛋白心肌细胞氧化应激过氧化氢

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

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鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

第十届中国实验动物科学年会

作者：任海涛钟志勇郑佳琳饶子亮邝少松王刚唐小江广东省医学实验动物中心

目的建立了一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原的方法,通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,再用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、使用醋酸进行复溶进行鼠尾胶原的纯化。超纯水透析除去无... 详细信息

目的建立了一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原的方法,通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,再用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、使用醋酸进行复溶进行鼠尾胶原的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定,本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量:1:500,酶解时间:72h,盐析浓度:2mol/L,提取所用酸溶液:0.05 mol/L醋酸溶液。为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。

关键词：鼠尾胶原蛋白质提取蛋白质分离蛋白质纯化蛋白质鉴定

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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鼠尾胶原蛋白海绵止血作用研究

转化医学杂志 2013年第2期2卷 70-72页

作者：任海涛钟志勇严家荣饶子亮黄红坤黄小琼武昕唐小江广东省医学实验动物中心广东佛山528248

目的制备一种高纯度的鼠尾胶原蛋白海绵,研究鼠尾胶原海绵的止血作用。方法用制备的鼠尾胶原蛋白海绵对新西兰兔耳缘静脉、耳缘动脉、肝脏、股动脉创面止血,观察其止血时间、敷料与创面的黏合情况、再出血、渗血和吸收及伤口愈合情况。... 详细信息

目的制备一种高纯度的鼠尾胶原蛋白海绵,研究鼠尾胶原海绵的止血作用。方法用制备的鼠尾胶原蛋白海绵对新西兰兔耳缘静脉、耳缘动脉、肝脏、股动脉创面止血,观察其止血时间、敷料与创面的黏合情况、再出血、渗血和吸收及伤口愈合情况。结果鼠尾胶原海绵组、胶原蛋白海绵组耳缘动脉、肝脏、股动脉创面止血时间与对照组比较明显缩短,差异有统计学意义(P鼠尾胶原海绵组在肝脏、股动脉创面止血时间比胶原蛋白海绵组缩短,差异有统计学意义(P鼠尾胶原蛋白海绵在对创面的修复性能上优于胶原蛋白。结论鼠尾胶原蛋白及其冻干海绵可以作为人工皮肤及创伤敷料研究的首选材料,同时也为鼠尾胶原蛋白海绵用于止血、创面修复及进一步研究其止血机制提供事实依据。

关键词：鼠尾胶原止血动物实验新西兰兔