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过瘤胃胆碱对黔北麻羊瘤胃发酵及血浆生化指标的影响

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动物营养学报 2017年第1期29卷 333-338页

作者：赵鹏吴文旋吴佳海田兴舟莘海亮袁鑫杨春红杨康孙伦韩娥贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州大学新农村发展研究院贵阳550025 贵州省草业研究所贵阳550006 黔东南民族职业技术学院凯里556000

本试验旨在研究过瘤胃胆碱(RPC)对成年黔北麻羊瘤胃发酵及血浆生化指标的影响。以体况良好,年龄、体重[(35.0±1.2)kg]一致的成年黔北麻羊6只为试验动物,分为对照组和试验组,每组3个重复,每个重复1只羊。采用交叉试验设计,对照组饲喂基... 详细信息

本试验旨在研究过瘤胃胆碱(RPC)对成年黔北麻羊瘤胃发酵及血浆生化指标的影响。以体况良好,年龄、体重[(35.0±1.2)kg]一致的成年黔北麻羊6只为试验动物,分为对照组和试验组,每组3个重复,每个重复1只羊。采用交叉试验设计,对照组饲喂基础饲粮,不含RPC;试验组补饲10 g/d的RPC。试验持续30 d,分2期,每期15 d;每期最后1 d采集瘤胃液测定p H、氨态氮浓度、微生物蛋白产量、挥发性脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)浓度、纤维素酶(微晶纤维素酶、羧甲基纤维素酶、纤维二糖酶、木聚糖酶)活性,同时采血测定血浆葡萄糖、尿素氮、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、肌酐浓度。结果显示:1)RPC对山羊采食速度没有影响,对采食量没有显著影响(P>0.05);2)RPC对瘤胃液p H、氨态氮浓度、微生物蛋白产量、挥发性脂肪酸浓度及4种纤维素酶活性影响较小,2组间差异均不显著(P>0.05);3)RPC对血浆生化指标影响较小,2组间差异均不显著(P>0.05)。由此可见,补饲10 g/d的RPC对成年黔北麻羊的采食量、瘤胃发酵参数和血浆生化指标没有显著影响。

关键词：过瘤胃胆碱瘤胃发酵血浆生化指标黔北麻羊

FTO基因多态性与黔北麻羊血清脂代谢指标的关联性研究

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农业生物技术学报 2019年第5期27卷 875-884页

作者：翁吉梅龙安距艾锦新罗铮蔡惠芬罗卫星贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/动物科学学院

脂肪肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene, FTO)是通过全基因组扫描技术发现的肥胖易感基因。FTO通过转录因子及转运蛋白调节脂肪酸转运和脂肪代谢相关基因的表达,参与脂肪组织的发育、维持及沉积。黔北麻羊(Capra hirc... 详细信息

脂肪肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene, FTO)是通过全基因组扫描技术发现的肥胖易感基因。FTO通过转录因子及转运蛋白调节脂肪酸转运和脂肪代谢相关基因的表达,参与脂肪组织的发育、维持及沉积。黔北麻羊(Capra hircus)是贵州省三大地方品种之一,产肉性能良好,肉质鲜美。本研究以黔北麻羊为研究对象,探究FTO基因外显子多态性与脂代谢相关的血清生理生化指标的关联性。首先采用混合DNA池结合PCR直接测序技术筛选SNPs,然后单个样本直接测序确定突变位点的基因型,运用SPSS 17.0对FTO基因各突变位点不同基因型与血清瘦素、激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive lipase, HSL)、脂联素、总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)进行分析。结果显示,在受试群体中共发现9个SNPs,分别为:g.C10943T、g.G109518T、g.T125300A、g.C125357T、g.G125405T、gT125417C、g.T426229C、g.C426244G和g.G426347A,其中g.G109518T和g.G426347A位点突变分别位于第二和第九内含子区域。卡方分析显示,各突变位点都属于中度多态性(0.5黔北麻羊脂质代谢具有一定的相关性,为筛选山羊脂肪沉积及肉质调控的辅助选择标记提供了理论参考。

关键词： FTO 单核苷酸多态性黔北麻羊血液脂代谢指标

贵州黑山羊、黔北麻羊IL-2基因的克隆与生物信息学分析

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基因组学与应用生物学 2018年第8期37卷 3287-3295页

作者：鲜思美李鹏飞刘嫒李婷包细明张益冯将贵州大学动物科学学院

为获得贵州特色品种黑山羊与黔北麻羊IL-2基因,本试验以Con A刺激的贵州黑山羊与黔北麻羊外周血淋巴细胞为材料,采用RT-PCR方法分别扩增贵州黑山羊与黔北麻羊IL-2基因,进行克隆与生物信息学分析。结果显示,（1）贵州黑山羊与黔北麻羊IL-... 详细信息

为获得贵州特色品种黑山羊与黔北麻羊IL-2基因,本试验以Con A刺激的贵州黑山羊与黔北麻羊外周血淋巴细胞为材料,采用RT-PCR方法分别扩增贵州黑山羊与黔北麻羊IL-2基因,进行克隆与生物信息学分析。结果显示,（1）贵州黑山羊与黔北麻羊IL-2基因核苷酸与氨基酸一致性为100%,完整编码阅读框大小为468 bp,编码155个氨基酸;（2）黔北麻羊、贵州黑山羊IL-2基因与Gen Bank中羊源IL-2基因核苷酸一致性为95.9%~100%,氨基酸一致性为91.1%~100%;（3）遗传进化树结果表明,贵州黑山羊与黔北麻羊IL-2基因处于同一进化分支,与羊源IL-2基因亲缘关系较近;（4）生物信息学分析结果显示,IL-2蛋白二级结构中以α螺旋与无规则卷曲较多,该蛋白为亲水性蛋白,含信号肽序列,无跨膜结构,无特征功能结构域;（5）不同动物IL-2蛋白的抗原性分析存在差异,贵州黑山羊/黔北麻羊IL-2蛋白与羊源IL-2蛋白的比较差异较小,与人和其它动物的比较差异较大。由此得出结论,获得贵州黑山羊与黔北麻羊IL-2基因完整编码区序列,二者核苷酸与氨基酸序列一致。贵州黑山羊/黔北麻羊IL-2基因与羊源IL-2基因亲缘关系近,预测其编码的蛋白为亲水性的分泌型蛋白,不同动物IL-2基因抗原性存在差异。

关键词：贵州黑山羊黔北麻羊 IL-2基因克隆与分析

SMAD1基因对黔北麻羊卵巢颗粒细胞的影响及组织表达分析

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畜牧兽医学报 2020年第7期51卷 1607-1618页

作者：敖叶陈祥周志楠张艳洪磊韦仕南吴雨唐文贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点试验室贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025

旨在验证SMAD1基因在转录组测序中单羔组对多羔组上调的结果,并探究SMAD1基因对黔北麻羊产羔性状的影响。本试验选取健康、体重45 kg、4岁左右的单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采用qRT-PCR法检测SMAD1基因在单、多羔组黔北麻羊母羊子... 详细信息

旨在验证SMAD1基因在转录组测序中单羔组对多羔组上调的结果,并探究SMAD1基因对黔北麻羊产羔性状的影响。本试验选取健康、体重45 kg、4岁左右的单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采用qRT-PCR法检测SMAD1基因在单、多羔组黔北麻羊母羊子宫、输卵管、垂体、下丘脑及卵巢组织的表达水平,PCR扩增黔北麻羊SMAD1基因CDS区,构建pEGFP-N3-SAMD1重组质粒,利用脂质体转染法转染pEGFP-N3-SAMD1重组质粒进入卵巢颗粒细胞,分为超表达SMAD1试验组和pEGFP-N3空载体对照组,通过检测培养基中雌二醇和孕酮的浓度,利用CCK-8法和Annexin V-FITC法检测超表达SMAD1基因对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响,qRT-PCR检测超表达SMAD1基因对SAMD1、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因mRNA表达的影响,来探究SMAD1基因对卵巢颗粒细胞的影响。结果表明,SMAD1基因在黔北麻羊各组织中均有表达。组间比较可知,卵巢和下丘脑组织单羔组极显著高表达于多羔组(P0.05)。本研究成功克隆了SMAD1基因CDS序列,未发现突变位点,并将pEGFP-N3-SAMD1重组质粒转染进入卵巢颗粒细胞,转染试验组培养基中E2含量在12、48 h显著高于对照组(P黔北麻羊发情及妊娠的维持,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,也极显著抑制繁殖相关基因mRNA的表达,而这些繁殖相关基因都能够调控卵泡数、卵泡的发育与形成以及排卵。因此,SMAD1基因能够抑制这些基因的表达,致使黔北麻羊单羔组受胎率低,进而降低产羔数,这为产羔性状相关基因的研究提供了理论基础,初步认为SMAD1基因可作为探究影响山羊产羔性状的候选基因。

关键词：黔北麻羊 SMAD1基因卵巢颗粒细胞差异表达产羔性状

贵州黑山羊和黔北麻羊LEPR基因第7、8、10和18外显子的多态性分析

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基因组学与应用生物学 2016年第12期35卷 3351-3357页

作者：封竣淇徐伟康建兵钱成黄兰罗卫星蔡惠芬贵州大学动物科学学院贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵阳550025

为探究LEPR基因的遗传多态性,丰富山羊LEPR基因的研究,本研究以贵州黑山羊和黔北麻羊为试验材料,运用DNA池结合直接测序方法进行LEPR基因SNPs位点的筛选,从而对突变的SNPs位点进行RNA二级结构以及所编码蛋白质的二级结构和三级结构进行... 详细信息

为探究LEPR基因的遗传多态性,丰富山羊LEPR基因的研究,本研究以贵州黑山羊和黔北麻羊为试验材料,运用DNA池结合直接测序方法进行LEPR基因SNPs位点的筛选,从而对突变的SNPs位点进行RNA二级结构以及所编码蛋白质的二级结构和三级结构进行生物信息学分析。在试羊LEPR基因中共发现4个SNPs,分别为Exon7-T81C(同义突变)、Exon8-C39T(同义突变)、Exon10-A70G(Asn-Ser)和Exon18-C94T(Ser-Leu)。分析表明,4个位点突变前后的等位基因频率、mRNA二级结构的最小自由能、LEPR蛋白质二级结构和三级结构均有改变。结果表明,LEPR基因拥有较为丰富的遗传多态性。

关键词： LEPR SNPs 贵州黑山羊黔北麻羊生物信息学

TGFβ2和PPP3CA基因在黔北麻羊性腺轴组织表达及对卵巢颗粒细胞的调控研究

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畜牧兽医学报 2020年第11期51卷 2699-2709页

作者：敖叶陈祥周志楠骆金红韦仕南张艳惠茂茂吴雨杨沛方贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省草业研究所贵阳550006

旨在对转录组测序中单羔组对多羔组TGFβ2和PPP3CA基因的上、下调结果进行验证,并探究黔北麻羊TGFβ2和PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞的调控机制。本研究以单、多羔黔北麻羊母羊为试验对象。通过RT-qPCR技术检测TGFβ2与PPP3CA基因在单、多... 详细信息

旨在对转录组测序中单羔组对多羔组TGFβ2和PPP3CA基因的上、下调结果进行验证,并探究黔北麻羊TGFβ2和PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞的调控机制。本研究以单、多羔黔北麻羊母羊为试验对象。通过RT-qPCR技术检测TGFβ2与PPP3CA基因在单、多羔黔北麻羊性腺轴中的表达水平;构建目的基因真核表达载体。培养黔北麻羊卵巢颗粒细胞,并利用脂质体转染法将pEGFP-N3-TGFβ2、pEGFP-N3-PPP3CA重组质粒导入卵巢颗粒细胞,检测培养基中雌二醇(E2)、孕酮(P4)的浓度。利用CCK-8和Annexin V-FITC法检测TGFβ2、PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。随后,利用RT-qPCR从细胞水平检测超表达TGFβ2、PPP3CA基因对TGFβ2、PPP3CA、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因表达的影响。RT-qPCR结果表明,TGFβ2与PPP3CA基因在被检测的组织中均有表达,且在单羔组中的表达量普遍高于多羔组;免疫荧光法证实,所培养的细胞为黔北麻羊卵巢颗粒细胞;TGFβ2与PPP3CA基因真核表达质粒导入细胞后,在极显著提高TGFβ2与PPP3CA基因表达的同时,能够极显著地抑制卵巢颗粒细胞中FSHR、GnRHR、BMP4、TIMP3基因的表达(P羊繁殖相关基因表达有一定的影响。为进一步研究TGFβ2、PPP3CA基因对黔北麻羊繁殖力的影响提供基础数据。

关键词：黔北麻羊 TGFβ2基因 PPP3CA基因卵巢颗粒细胞差异表达

饲粮非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维对黔北麻羊瘤胃发酵参数、血浆生化指标和养分消化率的影响

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动物营养学报 2017年第7期29卷 2565-2574页

作者：赵鹏吴文旋吴佳海朱伦琴莘海亮袁鑫杨春红杨康孙伦韩娥贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州大学新农村发展研究院贵阳550025 贵州省草业研究所贵阳550006 黔东南民族职业技术学院凯里556000

本试验旨在研究不同饲粮非纤维性碳水化合物(NFC)/中性洗涤纤维(NDF)对黔北麻羊瘤胃发酵参数、血浆生化指标和养分消化率的影响。采用3×3拉丁方试验设计,选取6只健康成年黔北麻羊为试验动物,将其分为3组,每组2个重复,每个重复1只羊。... 详细信息

本试验旨在研究不同饲粮非纤维性碳水化合物(NFC)/中性洗涤纤维(NDF)对黔北麻羊瘤胃发酵参数、血浆生化指标和养分消化率的影响。采用3×3拉丁方试验设计,选取6只健康成年黔北麻羊为试验动物,将其分为3组,每组2个重复,每个重复1只羊。试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组饲粮NFC/NDF分别为2.14∶1.00、1.05∶1.00、0.40∶1.00(实测值)。试验分3期,每期15 d,包括10 d预试期和5 d正试期。检测指标包括:饲粮养分消化率、瘤胃发酵参数(pH、缓冲力、氨态氮和挥发性脂肪酸浓度、纤维素酶活性)、血浆生化指标(脂多糖、白蛋白、尿素氮、葡萄糖含量及过氧化氢酶、谷草转氨酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性)。结果显示:1)3个试验组干物质采食量差异不显著(P>0.05),试验Ⅲ组各养分消化率均显著低于试验Ⅰ组、试验Ⅱ组(P0.05)。3)试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组血浆脂多糖含量依次显著下降(P0.05)。综合来看,过高NFC/NDF对黔北麻羊瘤胃发酵参数和血浆生化指标有不良影响,本试验条件下,饲粮NFC/NDF以1.05∶1.00为宜。

关键词：非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维瘤胃发酵参数血浆生化指标养分消化率黔北麻羊

黔北麻羊FTO基因多态性及其表达与肉质性状的关联性研究

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黔北麻羊FTO基因多态性及其表达与肉质性状的关联性研究

作者：翁吉梅贵州大学

学位级别：硕士

为探索黔北麻羊FTO基因多态性与血清脂代谢相关指标的关联性,以及不同月龄黔北麻羊FTO基因及蛋白的表达情况与肉质性状的相关性,本实验以103只4月龄岁左右黔北麻羊为研究对象,采用PCR产物直接测序技术筛选FTO基因SNPs,并与测定的血清脂... 详细信息

为探索黔北麻羊FTO基因多态性与血清脂代谢相关指标的关联性,以及不同月龄黔北麻羊FTO基因及蛋白的表达情况与肉质性状的相关性,本实验以103只4月龄岁左右黔北麻羊为研究对象,采用PCR产物直接测序技术筛选FTO基因SNPs,并与测定的血清脂代谢相关指标进行关联性分析,同时测定4月龄、1.5岁、2.5岁黔北麻羊肉质性状,将测定结果与荧光定量PCR及蛋白免疫印迹技术检测的FTO基因及蛋白表达量相关性分析,得到与血清脂代谢相关指标特别是与脂肪沉积有显著效应的遗传标记,通过比较不同年龄段黔北麻羊FTO基因及其蛋白的表达情况及与肉质性状的相关性,为揭示FTO基因在黔北麻羊上的遗传效应、调控脂肪代谢的分子机制提供参考,同时为黔北麻羊优良肉质性状选育及分子标记数据库的建立提供依据。实验结果如下:1.黔北麻羊FTO基因SNPs的筛选、生物信息学及遗传特异性分析采用DNA直接测序方法在黔北麻羊FTO基因第2、3、9外显子及部分内含子中共发现9个SNPs。生物信息学分析表明,FTO蛋白存在1个低复杂度区域、1个NTD催化结构域、不存在跨膜结构、有7个Ser、5个Thr、5个Tyr可能成为磷酸化位点。第3外显子的4个突变位于FTO蛋白的NTD催化结构域内,其中g.T125417C,g.T125300A位点的变异引起mRNA二级结构的改变。测序结果显示,各突变位点均存在三种基因型,遗传特性分析表明,各突变位点均属于中度多态性（0.25

关键词：黔北麻羊 FTO基因 SNPs 血清脂代谢指标基因表达关联性分析

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黔北麻羊遗传结构的RAPD分析

西南大学学报（自然科学版） 2007年第2期29卷 53-56页

作者：陈祥张芸廖正录张勇李国红李诗举王学伟简承松魏泓贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省农业厅畜禽品种改良站贵阳550001 贵州师范大学生物系贵阳550001 第三军医大学实验动物中心重庆400038

用27条多态性引物对15份黔北麻羊个体基因组进行RAPD分析.结果共扩增出253条带,其中多态带为141条,多态频率在30·00%～75·00%之间,平均多态频率为55·73%.单个引物获得的扩增带数在2～14条之间,平均每条引物扩增出9·37条带.扩增带分... 详细信息

用27条多态性引物对15份黔北麻羊个体基因组进行RAPD分析.结果共扩增出253条带,其中多态带为141条,多态频率在30·00%～75·00%之间,平均多态频率为55·73%.单个引物获得的扩增带数在2～14条之间,平均每条引物扩增出9·37条带.扩增带分子量范围在210～2700bp.Nei氏公式计算品种内个体间遗传相似性指数在0·7290～0·9377之间,平均值为0·8634.遗传距离指数在0·0623～0·2710之间,平均值为0·1367.结果表明黔北麻羊具有较丰富的遗传结构.

关键词：黔北麻羊遗传多样性随机扩增多态脱氧核糖核酸