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Sorbicillinoids类黄色色素在里氏木霉生长发育、压力响应及纤维素酶表达中的作用

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Sorbicillinoids类黄色色素在里氏木霉生长发育、压力响应及纤维...

作者：安宁山东大学

学位级别：硕士

纤维素是地球上含量最为丰富的碳水化合物之一,也是最廉价的可再生资源。里氏木霉（Trichoderma reesei）是一种能够高效降解纤维素的丝状真菌,能够在诱导碳源存在的条件下迅速做出响应并产生大量的纤维素酶。目前里氏木霉已广泛地应用... 详细信息

纤维素是地球上含量最为丰富的碳水化合物之一,也是最廉价的可再生资源。里氏木霉（Trichoderma reesei）是一种能够高效降解纤维素的丝状真菌,能够在诱导碳源存在的条件下迅速做出响应并产生大量的纤维素酶。目前里氏木霉已广泛地应用于纤维素酶的工业生产,但生产中的高成本仍是制约生物能源以及许多生物基大宗产品生产的一个瓶颈问题。木霉属真菌会产生诸多的次级代谢物质,而黄色色素只产生于里氏木霉。里氏木霉的黄色色素是由一个含有polyketide synthase（PKS）编码基因在内的基因簇合成,并且其产生的时间及水平均受到严格的调控。有研究表明里氏木霉所产的黄色色素可能属于聚酮化合物Sorbicillinoids家族,但黄色色素在里氏木霉生理生长过程以及纤维素酶的表达调控中的具体作用仍不清楚,对该问题的研究将会为通过菌株改造以进一步提升纤维素酶产量及简化其提取流程奠定理论基础。为了研究里氏木霉所产黄色色素在其生长发育及纤维素酶表达调控过程的作用,本论文对位于该黄色色素合成基因簇内的两个转录因子的编码基因及一个PKS编码基因进行敲除或过表达,同时获得了黄色色素高产及缺陷的突变株,并分析了这些突变株的营养生长、产孢能力、细胞壁完整性、抗逆性以及纤维素酶表达情况等。取得的主要成果如下:一、分别构建转录因子Ypr1过表达菌株OEypr1和Ypr2敲除菌株Δypr2,分析发现两个突变株均高产黄色色素,并且突变株的生理生长及纤维素酶的表达均受到严重影响。以里氏木霉QM9414-△pyr4为出发菌株构建了 Ypr1过表达和Ypr2敲除两株黄色色素高产菌株,碳源利用实验表明这两个突变株对葡萄糖的利用能力显著下降;显微镜观察结果显示它们菌丝体中心膨大,菌丝分支变粗变短;孢子计数分析发现突变株产生分生孢子的数量明显减少;进一步的压力响应分析实验发现细胞壁的完整性和抗逆性均严重受损。突变株以不定形纤维素为诱导碳源时,胞外纤维素酶的表达基本消失,且这种降低是由纤维素酶基因在转录水平的下调引起。二、分别构建转录因子Ypr1敲除菌株Δypr1和Ypr2过表达菌株OEypr2,分析发现两个突变株均不产黄色色素,并且突变株的生理生长及纤维素酶的表达均有所增强。通过在里氏木霉野生型中敲除Ypr1及过表达Ypr2得到了Δypr1及OEypr2两株黄色色素缺陷突变株。与野生型QM9414相比,黄色色素缺陷菌株Δypr1及OEypr2在液体葡萄糖培养基中的生物量增加;孢子计数分析发现突变株分生孢子产生的数量要明显高于野生型;压力响应分析实验发现突变株的细胞壁完整性及抗逆性均有所增强;突变株以不定形纤维素为诱导碳源时,胞外纤维素酶酶活提高了约15%,但纤维素酶基因的相对转录水平并无明显提升。通过与上述黄色色素高产菌株进行对比,发现黄色色素缺陷菌株在生长发育、压力响应及纤维素酶表达方面均表现出与之相反的表型。三、在里氏木霉野生型及高产黄色色素菌株中敲除黄色色素合酶基因sor1,得到的两个突变株均不产黄色色素,且在生理生长及纤维素酶表达等方面表现出与上述通过改造转录因子获得的黄色色素缺陷菌株（Δypr1和OEypr2）一致的表型。通过在野生型及高产黄色色素菌株OEypr1中敲除黄色色素合酶编码基因sor1得到Δsor1及OEypr1-Δsor1菌株,这两株突变株均无黄色色素产生,并且它们对液体葡萄糖的利用能力、生孢能力、细胞壁完整性、抗逆性以及纤维素酶的表达能力均强于野生型,这与黄色色素缺陷的△ypr1及OEypr2菌株的表型相似。由此可知黄色色素而非其转录调控因子ypr1或ypr2是造成色素突变株的生长表型及产酶表型变化的主要因素。HPLC-MS检测发现黄色色素的成分主要是Sorbicillinoids家族的二聚物及单体物。综上所述,本论文的研究首次阐述了里氏木霉产生的黄色色素在其生长发育、压力响应及纤维素酶表达中的重要作用。相对于野生型菌株,不产黄色色素的突变菌株表现出生物量增加、抗逆性增强、纤维素酶产量提升以及无需色素处理的优良性状,表明其具有较大的工业应用潜力,能够进一步为以里氏木霉为宿主的蛋白生产提高效率并有效降低成本。

关键词：里氏木霉黄色色素纤维素酶生理生长转录因子

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影响南瓜黄色色素提取效果的因素

山西农业大学学报 1997年第2期17卷 144-147页

作者：吴彩娥郝利平郝林赵邦花郝教敏山西农业大学食品科学系

本试验对影响南瓜黄色色素提取效果的因素进行了研究。试验表明：原料的切分方式、提取温度、提取时间对南瓜黄色色素的提取效果有显著影响。用９５％乙醇作溶剂时，原料切分成０．５～１ｍｍ的薄片、在７０℃温度下提取４０分钟，效果... 详细信息

本试验对影响南瓜黄色色素提取效果的因素进行了研究。试验表明：原料的切分方式、提取温度、提取时间对南瓜黄色色素的提取效果有显著影响。用９５％乙醇作溶剂时，原料切分成０．５～１ｍｍ的薄片、在７０℃温度下提取４０分钟，效果达到最佳；用丙酮作溶剂时原料磨成浆状，在５０℃温度下提取６０分钟效果达到最佳。南瓜黄色色素提取时原料与溶剂的比例为１∶１０时，既有利于色素物质的溶出，又不会影响到浓缩工艺，是最佳配比。从而确定了南瓜黄色色素提取的工艺参数。

关键词：南瓜黄色色素提取溶剂提取液

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黄鱼中检出黄色色素的报告

浙江预防医学 1995年第3期7卷 62-62页

作者：马祖荫杭州市拱墅区卫生防疫站

1993年底杭州水产养殖公司供销分公司经销一批南海黄鱼,鱼体及鳍、尾均呈鲜黄色,经省水产厅海洋处鉴别,鱼背鳍有七刺脉,嘴下唇上翘,腹侧线上小鱼鳞八排,与黄鱼特征相吻合,仅尾部较东海黄鱼略短,认定为南海黄鱼。

关键词：黄色色素黄鱼胡罗卜素环己烷水产养殖乙醚提取物最大吸收波长饲料添加剂紫外扫描提取色素

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用冰凉画出火热

动漫界（幼教365） 2024年第26期 30-31页

作者：雪绒花江苏南京

宝宝,你能想象用冰凉的冰块画出火热的太阳吗?在这个火辣辣的盛夏,让我们一起来尝试吧!材料准备:红色色素,黄色色素,水,一次性筷子,纸杯。1兑色素:将红黄色素分别和水搅拌,兑出一杯红色水和一杯黄色水。

关键词：一次性筷子黄色素纸杯红色色素黄色色素火热

姜黄素及其类似物对自由基诱导的线粒体过氧化的保护作用

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有机化学 2004年第Z1期24卷 181-182页

作者：韦庆益陈巍峰包永良杨立刘中立兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室兰州730000

　　姜黄素(curcumin,1)是烹饪调味品姜黄中的一种黄色色素,具有抗炎、抗氧化、免疫调节、抗癌、抗高血脂等多种药理作用[1-3].为了研究它的抗氧化活性构效关系,我们合成了一系列姜黄素类似物,研究了它们对自由基诱导的大鼠肝脏线粒体... 详细信息

　　姜黄素(curcumin,1)是烹饪调味品姜黄中的一种黄色色素,具有抗炎、抗氧化、免疫调节、抗癌、抗高血脂等多种药理作用[1-3].为了研究它的抗氧化活性构效关系,我们合成了一系列姜黄素类似物,研究了它们对自由基诱导的大鼠肝脏线粒体过氧化的保护作用.分别采用水溶性的偶氮引发剂2,2'-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸盐(AAPH)热分解产生过氧自由基(ROO·)及Fenton反应产生羟自由基(HO·)引发大鼠线粒体的过氧化,通过检测硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)的含量测量过氧化的程度,结果发现姜黄素及其类似物均能够不同程度地抑制线粒体的过氧化.其中Curcumin,DMC和MC的抗氧化作用较强(Figure 1).……

关键词：姜黄素类似物其类似物过氧自由基肝脏线粒体过氧化硫代巴比妥酸反应物质抗氧化作用烹饪调味品抗氧化活性药理作用羟自由基偶氮免疫调节脒基丙烷抗高血脂黄色色素含量测量构效关系大鼠程度

姜黄素及其类似物诱导人早幼粒白血病(HL-60)细胞调亡

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有机化学 2003年第Z1期23卷 453-454页

作者：韦庆益陈巍峰蔡育军杨立刘中立兰州大学应用有机化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学应用有机化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学应用有机化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学应用有机化学国家重点实验室兰州730000 兰州大学应用有机化学国家重点实验室兰州730000

　　姜黄素(Curcumin,Cur)是烹饪调味品姜黄中的一种黄色色素,具有抗癌、抗炎、抗氧化等多种药理作用[1～3].为了研究它的抗肿瘤构效关系,我们合成了一系列姜黄素类似物(结构见Scheme 1),研究了它们诱导HL-60细胞凋亡的活性及构效关系.... 详细信息

　　姜黄素(Curcumin,Cur)是烹饪调味品姜黄中的一种黄色色素,具有抗癌、抗炎、抗氧化等多种药理作用[1～3].为了研究它的抗肿瘤构效关系,我们合成了一系列姜黄素类似物(结构见Scheme 1),研究了它们诱导HL-60细胞凋亡的活性及构效关系.采用MTT法测定细胞存活率,通过细胞形态学、DNA电泳梯形条带、流式细胞仪来观察及检测细胞的凋亡.结果发现姜黄素及其类似物作用48 h后能抑制HL-60细胞增值,诱导HL-60细胞凋亡.其中Cur,DMCur,MCur,DiMCur和DiACCur的作用较强.……

关键词：姜黄素类似物其类似物人早幼粒白血病细胞凋亡构效关系细胞形态学细胞存活率烹饪调味品流式细胞仪药理作用细胞增值黄色色素抗肿瘤抗氧化条带梯形抗炎抗癌结构检测

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朝鲜野菊花色素的提取及其稳定性研究

辽宁师范大学学报（自然科学版） 2000年第1期23卷 77-80页

作者：宁淑香邹侠陈静刘焰辽宁师范大学生物系辽宁大连116029 大连市金州高中辽宁大连116100 大连市烹饪职业中专辽宁大连116030

研究用甲醇、乙醇、丙酮、石油醚、氯仿、苯和水为溶剂 ,从朝鲜野菊 ( Chrysanthemum koraiense)的花中提取黄色色素 ,并用 72 1分光光度计对该色素在不同的 p H值、不同的介质、不同的光照条件下的稳定性进行了检测 .结果表明 ,在不同 ... 详细信息

研究用甲醇、乙醇、丙酮、石油醚、氯仿、苯和水为溶剂 ,从朝鲜野菊 ( Chrysanthemum koraiense)的花中提取黄色色素 ,并用 72 1分光光度计对该色素在不同的 p H值、不同的介质、不同的光照条件下的稳定性进行了检测 .结果表明 ,在不同 p H值条件下 ,以水为溶剂提取的色素均为黄色 ,且在氯化钠和蔗糖两种介质中稳定性较好 ,色素的残存率最低为 91.18% ;在不同的温度下这种色素的稳定性亦较好 ;但在不同强度的光照下该色素的稳定性不同 ,较强的光照易使该色素分解褪色 ,在室内散射光下 5 h后 ,其残存率仍为 89.67% .由此表明 ,朝鲜野菊花花朵中的黄色色素 ,经人工提取后 ,可以用于食、饮品及固体药物着色 .

关键词：朝鲜野菊色素提取稳定性花黄色色素

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维生素A的营养研究进展

饲料研究 2010年第4期33卷 33-35页

作者：多乐尹福泉高振华广东海洋大学

McCollum发现,在黄油和蛋黄中含有一种脂溶性物质,有利于小鼠的生长,他给这一物质取名为＂脂溶性A物质＂。1919年,Steenbock提出,胡萝卜及其他植物中的黄色色素与维生素A的作用有关，并将该色素命名为“Carotene”，其效价明显高于叶黄... 详细信息

McCollum发现,在黄油和蛋黄中含有一种脂溶性物质,有利于小鼠的生长,他给这一物质取名为＂脂溶性A物质＂。1919年,Steenbock提出,胡萝卜及其他植物中的黄色色素与维生素A的作用有关，并将该色素命名为“Carotene”，其效价明显高于叶黄素。1929年，Moore证明，植物色素B一胡萝卜素可转变成肝组织中无色的维生素A形式。20年代初期，Wolback通过试验，诱发出维生素A的化学结构；1947年，人工合成的维生素A诞生；

关键词：维生素A 脂溶性物质营养黄色色素胡萝卜素植物色素化学结构人工合成

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棉籽饼(粕)在水产饲料中的应用

科学养鱼 2007年第12期29卷 66-67页

作者：时建伟天津市水产研究所 300221

棉籽饼（粕）是配制水产饲料中常用的植物性蛋白质饲料，但它含有棉酚。棉酚是棉籽中色素腺体所含的一种黄色色素，属萜类化合物，是棉籽饼（粕）的成色成分。棉酚可分为与氨基酸组合、不溶于溶剂的结合型及游离型两种。结合型棉酚在动... 详细信息

棉籽饼（粕）是配制水产饲料中常用的植物性蛋白质饲料，但它含有棉酚。棉酚是棉籽中色素腺体所含的一种黄色色素，属萜类化合物，是棉籽饼（粕）的成色成分。棉酚可分为与氨基酸组合、不溶于溶剂的结合型及游离型两种。结合型棉酚在动物消化系统中不被吸收，可很快地随粪便排出体外，毒性很低；对动物具有毒害作用的是游离型棉酚，中毒症状为精神萎靡、呼吸困难、体弱，但食欲正常，病理解剖则见体内广泛出血及水肿。

关键词：水产饲料棉籽饼植物性蛋白质饲料应用萜类化合物黄色色素色素腺体消化系统