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黄粉甲低温贮存对管氏肿腿蜂发育和繁殖的影响

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昆虫知识 2007年第6期44卷 877-881页

作者：陈倩刘冰高灵旺沈佐锐中国农业大学农学与生物技术学院北京100094

寄主的活动能力和营养状况是影响寄生蜂繁育效果的主要因素。以黄粉甲蛹为寄主,筛选其最佳贮存温度和时间,达到短时间内降低寄主活动能力的同时,保证其有充足营养满足寄生蜂发育所需,对于管氏肿腿蜂的规模化生产有重要意义。在9,3,-3,-... 详细信息

寄主的活动能力和营养状况是影响寄生蜂繁育效果的主要因素。以黄粉甲蛹为寄主,筛选其最佳贮存温度和时间,达到短时间内降低寄主活动能力的同时,保证其有充足营养满足寄生蜂发育所需,对于管氏肿腿蜂的规模化生产有重要意义。在9,3,-3,-9℃条件下,分别贮存黄粉甲TenebriomolitorL.蛹5,15,25,35和45d对管氏肿腿蜂Scleroderma guaniXiaoetWu发育、存活以及增殖的影响。结果表明,寄主活动能力随贮存温度的降低而减弱,有利于管氏肿腿蜂的寄生,寄生率和蜂种存活率不断升高;寄主的不同贮存对寄生蜂卵孵化率影响小于对幼虫存活率影响,而对蛹羽化率则无任何影响。管氏肿腿蜂各阶段历期与寄主贮存温度和时间有着一定关系,-3和-9℃条件下,寄主贮存时间越长,所接寄生蜂产卵前期越短;不同贮存温度和时间的寄主间,寄生蜂卵期、幼虫期和蛹期的持续时间存在一定差异,最短分别为3.39,6.27和15.15d,而对预蛹期无显著差异;幼期的变化趋势同产卵前期。寄主经不同温度和时间贮存后,所繁育的管氏肿腿蜂最高产卵量为33.19粒/雌、最高出蜂量为20.07头/雌、雌雄最高性比可达17.53∶1,分别是CK的2.21,3.17和1.26倍。总体而言,寄主经-9℃贮存15-25d后最有利于繁蜂,其中-9℃贮存15d出蜂量最高。单雌出蜂量较现有报道提高3倍。

关键词：管氏肿腿蜂黄粉甲低温贮存存活发育繁殖

黄粉甲蛹低温贮存时间对管氏硬皮肿腿蜂母代和子代寄生与繁育的影响

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林业科学 2008年第5期44卷 65-69页

作者：陈倩梁洪柱高灵旺沈佐锐北京市西山试验林场北京100093 中国农业大学农学与生物技术学院北京100094

研究繁蜂替代寄主黄粉甲蛹经-9℃贮存5、15、25、35和45d后所繁育出的管氏硬皮肿腿蜂对青杨天牛寄生的影响。母代蜂在产卵前期、幼虫期、寄生率、幼虫存活率以及产卵量、出蜂量间与对照存在显著差异。但子代蜂各阶段发育历期、存活率、... 详细信息

研究繁蜂替代寄主黄粉甲蛹经-9℃贮存5、15、25、35和45d后所繁育出的管氏硬皮肿腿蜂对青杨天牛寄生的影响。母代蜂在产卵前期、幼虫期、寄生率、幼虫存活率以及产卵量、出蜂量间与对照存在显著差异。但子代蜂各阶段发育历期、存活率、产卵量、出蜂量等各方面与对照则均无显著差异。

关键词：低温贮存黄粉甲管氏硬皮肿腿蜂繁育

黄粉甲肌动蛋白解聚因子基因的克隆及表达分析

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生物技术 2016年第2期26卷 103-107,145页

作者：李丽芳赵满黄镜梅 Elena N.Elpidina 朱家颖西南林业大学森林灾害预警与控制重点实验室云南昆明650224 A.N.Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology Moscow State University

[目的]克隆黄粉甲Tenebrio molitor肌动蛋白解聚因子基因,研究该基因在黄粉甲不同组织、不同发育阶段及被管氏肿腿蜂Scleroderma guani寄生后的表达情况。[方法]采用RACE技术、克隆该基因、实时荧光定量PCR检测其表达情况。[结果]该基... 详细信息

[目的]克隆黄粉甲Tenebrio molitor肌动蛋白解聚因子基因,研究该基因在黄粉甲不同组织、不同发育阶段及被管氏肿腿蜂Scleroderma guani寄生后的表达情况。[方法]采用RACE技术、克隆该基因、实时荧光定量PCR检测其表达情况。[结果]该基因全长758 bp,分子量为16.96 k Da,无信号肽,与赤拟谷盗Tribolium castaneum肌动蛋白解聚因子的相似性达97%。荧光定量PCR分析表明,该基因在黄粉甲各发育阶段均有表达,成虫中表达量最高,在脂肪体中的表达量高于血细胞。被管氏肿腿蜂寄生6 h后,肌动蛋白解聚因子基因在寄生与未寄生黄粉甲蛹内的相对表达量无差异;寄生12 h后,该基因在寄生蛹中的表达量降低了1.96倍;寄生24 h和48 h后,该基因在寄生蛹中的表达量分别升高3.16倍和5.6倍。[结论]管氏肿腿蜂寄生能影响黄粉甲肌动蛋白解聚因子基因的转录水平。

关键词：肌动蛋白解聚因子序列分析转录黄粉甲管氏肿腿蜂

黄粉甲储存蛋白hexamerin基因的克隆及表达分析

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西南林业大学学报（自然科学） 2019年第4期39卷 96-102页

作者：徐志文任雪敏赵满刘乃勇吴国星杨斌朱家颖西南林业大学云南省森林灾害预警与控制重点实验室云南昆明650233 云南农业大学植物保护学院云南昆明650201

基于RACE技术从黄粉甲蛹中克隆得到储存蛋白hexamerin基因(TmolHex1和TmolHex2),应用生物信息软件和荧光定量PCR技术分析了基因的序列和表达特征。结果表明:克隆获得的TmolHex1和TmolHex2基因的开放阅读框分别为2133bp和2103bp,分别编码... 详细信息

基于RACE技术从黄粉甲蛹中克隆得到储存蛋白hexamerin基因(TmolHex1和TmolHex2),应用生物信息软件和荧光定量PCR技术分析了基因的序列和表达特征。结果表明:克隆获得的TmolHex1和TmolHex2基因的开放阅读框分别为2133bp和2103bp,分别编码710和700个氨基酸,其编码蛋白预测理论分子量分别为85.53kDa和84.35kDa,等电点分别为6.05和6.72。TmolHex1和TmolHex2氨基酸序列中存在信号肽序列,富含芳香氨基酸,且具有芳香储存蛋白家族特征序列。TmolHex1和TmolHex2基因在黄粉甲的老熟幼虫和蛹脂肪体中表达量最高,表明其可能在生长发育、变态和能量代谢方面发挥重要作用。

关键词：黄粉甲 hexamerin 基因克隆序列分析表达特征

黄粉甲抗冻蛋白基因afp72 cDNA的克隆和序列分析

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安徽农业科学 2008年第14期36卷 5763-5766页

作者：闫清华邵强李延兰丰慧根河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 新乡医学院生命科学技术系河南新乡453003

[目的]为抗冻蛋白基因afp72的体外表达和生物学功能研究奠定基础。[方法]从黄粉甲脂肪体中提取总RNA,通过RT-PCR克隆抗冻蛋白基因afp72,并构建克隆重组质粒pUCm-T-afp72。经双酶切后,将其与表达载体pMAL-p2X连接并转化到大肠杆菌TBI,构... 详细信息

[目的]为抗冻蛋白基因afp72的体外表达和生物学功能研究奠定基础。[方法]从黄粉甲脂肪体中提取总RNA,通过RT-PCR克隆抗冻蛋白基因afp72,并构建克隆重组质粒pUCm-T-afp72。经双酶切后,将其与表达载体pMAL-p2X连接并转化到大肠杆菌TBI,构建表达重组质粒pMAL-p2X-afp72。[结果]afp72 cDNA长度为216 bpa;fp72的测序序列与GenBank中编码84个氨基酸的黄粉甲afps序列的同源性为89.48%a;fp72基因可能来自其他黄粉甲抗冻蛋白基因的突变或缺失;从蛋白水平上证实AFP72是一个抗冻蛋白,afp72是一个抗冻蛋白基因;表达重组质粒pMAL-p2X-afp72的构建是成功的。[结论]该研究为利用基因工程方法构建抗冻蛋白转基因植物提供了材料。

关键词：黄粉甲抗冻蛋白 afp72 克隆表达载体

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黄粉甲翅芽生长因子基因的克隆及表达分析

江苏农业科学 2016年第4期44卷 95-98页

作者：赵满李丽芳王友竹 Elena N.Elpidina 朱家颖西南林业大学云南省森林灾害预警与控制重点实验室云南昆明650224 A.N.Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology Moscow State University

翅芽生长因子(imaginal disc growth factor,IDGF)是一类调节昆虫发育和生长的因子。利用RACE克隆技术,克隆获得黄粉甲(Tenebrio molitor)IDGF基因,其c DNA序列长1 465 bp,开放阅读框为1 296 bp,可编码431个氨基酸,预测理论分子量为48.2... 详细信息

翅芽生长因子(imaginal disc growth factor,IDGF)是一类调节昆虫发育和生长的因子。利用RACE克隆技术,克隆获得黄粉甲(Tenebrio molitor)IDGF基因,其c DNA序列长1 465 bp,开放阅读框为1 296 bp,可编码431个氨基酸,预测理论分子量为48.25 ku,等电点为7.63。氨基酸序列同源比对分析发现,黄粉甲IDGF与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)和蔗根非耳象(Diaprepes abbreviatus)的IDGF相似性分别为89%、71%。系统发育树分析表明,黄粉甲IDGF与赤拟谷盗IDGF进化关系最近。荧光定量PCR分析表明,在不同发育阶段,IDGF基因在幼虫1龄和2龄中的表达量明显高于其他发育阶段。在蛹期不同组织中,IDGF基因在脂肪体中的表达量最高。被管氏肿腿蜂(Scleroderma guani)寄生后,IDGF基因的转录水平未受影响,表明寄生不能调控该基因的转录表达。

关键词：翅芽生长因子基因克隆黄粉甲序列分析管氏肿腿蜂

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黄粉甲抗冻蛋白基因克隆及生物信息学分析

第四军医大学学报 2009年第22期30卷 2591-2594页

作者：任谦熊鸿燕朱才众张世界第三军医大学军事预防医学院军队流行病学教研室重庆400038 西藏军区山南军分区后勤部卫生科西藏山南850700

目的:获得黄粉甲抗冻蛋白基因afpTx及相关生物信息学资料.方法:从黄粉甲幼虫中提取总RNA,通过RT-PCR合成黄粉甲抗冻蛋白基因afpTx的cDNA片段,克隆入载体pMD19-T,进行测序分析.酶切后将其亚克隆入表达栽体pET32a(+),构建表达质粒pET32a-a... 详细信息

目的:获得黄粉甲抗冻蛋白基因afpTx及相关生物信息学资料.方法:从黄粉甲幼虫中提取总RNA,通过RT-PCR合成黄粉甲抗冻蛋白基因afpTx的cDNA片段,克隆入载体pMD19-T,进行测序分析.酶切后将其亚克隆入表达栽体pET32a(+),构建表达质粒pET32a-afpTx,并转化到大肠杆菌DL21后提取质粒,双酶切鉴定.采用MEGA4.0,BioEdit5.0.6软件对本研究克隆的抗冻蛋白基因afpTx进行氨基酸序列同源性变异及进化分析.结果:测序结果afpTx的cDNA长度为336bp;编码112个氨基酸;酶切、电泳结果表明克隆和亚克隆获得成功.抗冻蛋白氨基酸序列相似性分析表明afpTx与GenBank上提交的23条黄粉甲抗冻蛋白的氨基酸序列平均一致性为88%;与11条赤翅甲抗冻蛋白氨基酸序列的平均一致性为67%,2种甲虫的平均一致性为63%.进化树分析结果显示黄粉甲与赤翅甲抗冻蛋白序列是同源序列.赤翅甲的序列趋异度显著大于黄粉甲抗冻蛋白基因序列.结论:成功克隆了本地黄粉甲的afpTx基因,该序列是GenBank上提交的黄粉甲与赤翅甲抗冻蛋白的同源序列.

关键词：黄粉甲抗冻蛋白克隆 afpTx基因生物信息学

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管氏肿腿蜂对黄粉甲的寄生行为

昆虫学报 2006年第3期49卷 454-460页

作者：贺凯徐志强代平礼中国农业大学昆虫学系北京100094 中国农业科学院蜜蜂研究所北京100093

在人工扩繁条件下观察管氏肿腿蜂Scleroderma guani对中间寄主黄粉甲Tenebrio molitor的寄生行为,其过程可分为：搜寻-识别-螯刺-清理和取食-产卵-护幼.雌蜂在寄生黄粉甲蛹时上蜂速度和螯刺率变异大,上蜂前时间为1.4～7.0天,螯刺率为8.7... 详细信息

在人工扩繁条件下观察管氏肿腿蜂Scleroderma guani对中间寄主黄粉甲Tenebrio molitor的寄生行为,其过程可分为：搜寻-识别-螯刺-清理和取食-产卵-护幼.雌蜂在寄生黄粉甲蛹时上蜂速度和螯刺率变异大,上蜂前时间为1.4～7.0天,螯刺率为8.7%～91.7%,影响两者的因素包括：雌蜂的交配状况、寄主状况及繁育温度等.蜂毒螯入寄主后可使其组织不腐烂而适于被寄生,被螯刺后的蛹可表现为“保鲜”状态,平均“保鲜”时间为12.6天.蜂在蛹体的平均产卵量为30粒,最多为91粒.蜂卵在蛹体上分布合理,有利于幼虫有效利用寄主营养并避免拥挤和取食竞争.母蜂对幼虫期的发育具保护行为,包括护卵和保护幼虫正常发育并能搬运老熟幼虫集中结茧化蛹.

关键词：管氏肿腿蜂黄粉甲中间寄主寄生行为母蜂护幼

不同温度条件对利用黄粉甲繁育管氏肿腿蜂的影响

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昆虫知识 2003年第4期40卷 356-359页

作者：田慎鹏徐志强中国农业大学昆虫学系北京100094

在恒温 2 0 ,2 2 ,2 4,2 6,2 8和 3 0℃的实验条件下 ,利用黄粉甲TenebriomolitorL .做中间寄主繁育管氏肿腿蜂SclerodermaguaniXiaoetWu ,测定了其发育历期和寄生率等生物学参数。结果显示 ,在被测温度范围内 ,管氏肿腿蜂的发育速率与... 详细信息

在恒温 2 0 ,2 2 ,2 4,2 6,2 8和 3 0℃的实验条件下 ,利用黄粉甲TenebriomolitorL .做中间寄主繁育管氏肿腿蜂SclerodermaguaniXiaoetWu ,测定了其发育历期和寄生率等生物学参数。结果显示 ,在被测温度范围内 ,管氏肿腿蜂的发育速率与温度呈正比关系 ,即随着温度的升高 ,发育历期逐渐缩短。卵至羽化的发育起点温度为 1 3 60℃ ,有效积温为 3 2 0 0 7日·度。温度对管氏肿腿蜂的寄生率、寄生成功率、产卵量、子代蜂的数量和性比都有较显著影响。结合发育历期的结果 ,认为适于人工大量繁蜂的温度范围为 2 4～ 2 8℃ ,2 6℃为最适温度。

关键词：温度黄粉甲繁育管氏肿腿蜂膜翅目寄生蜂