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卵形鲳鲹黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备及其工艺优化

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食品与发酵工业 2021年第23期47卷 185-192页

作者：侯梦凡胡晓杨贤庆陈胜军吴燕燕许加超中国海洋大学食品科学与工程学院山东青岛266003 中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室广东广州510300

以卵形鲳鲹为原料,采用不同蛋白酶对其进行水解以制备黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制肽。以水解度和XOD抑制活性为评价指标,在单因素试验的基础上结合响应面法优化了酶解法制备XOD抑制肽的工艺,并对酶解产物的分子质量分布和... 详细信息

以卵形鲳鲹为原料,采用不同蛋白酶对其进行水解以制备黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制肽。以水解度和XOD抑制活性为评价指标,在单因素试验的基础上结合响应面法优化了酶解法制备XOD抑制肽的工艺,并对酶解产物的分子质量分布和氨基酸组成进行了分析。结果表明中性蛋白酶为最适用酶,确立的最佳酶解工艺条件为:料液比1∶3(g∶mL),酶解温度54℃,pH 7.0,酶解3.85 h,加酶量0.19%。在此条件下测得水解度和XOD抑制活性值分别为11.82%和52.41%,与预测值基本一致。该法制备所得的XOD抑制活性肽主要以分子质量<3000 Da的组分为主,占比为93.92%,其疏水氨基酸占比高达36.95%,亮氨酸、丙氨酸、缬氨酸和异亮氨酸含量较高。该研究可为卵形鲳鲹的精深加工和高值化利用提供指导。

关键词：卵形鲳鲹黄嘌呤氧化酶抑制肽多肽酶解工艺肽分子质量氨基酸分析

蓝圆鲹黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备及其活性分析

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食品与发酵工业 2021年第13期47卷 146-153页

作者：周雅胡晓李来好杨贤庆陈胜军吴燕燕杨少玲上海海洋大学食品学院上海201306 中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点研究室广东广州510300

以蓝圆鲹为原料,选用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶及碱性蛋白酶对其进行水解。以酶解产物黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)的抑制活性为指标,通过单因素试验及正交试验确定了最佳的酶解制备条件。结果显示,最佳酶... 详细信息

以蓝圆鲹为原料,选用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶及碱性蛋白酶对其进行水解。以酶解产物黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)的抑制活性为指标,通过单因素试验及正交试验确定了最佳的酶解制备条件。结果显示,最佳酶解条件为采用中性蛋白酶,加酶量0.3%(质量分数),料液比1∶2(g∶mL),pH 7.0,酶解温度50℃,酶解时间6 h。在此条件下,蓝圆鲹多肽(round scad peptides,RSPs)的XOD抑制活性为64.03%(15 g/L),Fe^(2+)结合活性为61.56%;此法获得的RSPs分子质量92.35%分布在1000 Da以下;氨基酸分析表明,RSPs中与XOD抑制活性有关的疏水性氨基酸(如Ala、Val、Leu、Ile)以及与金属离子结合活性相关的氨基酸(如Glu、Asp、Arg、His)含量较高;此外,紫外光谱和红外光谱扫描结果表明,RSPs可与Fe 2+发生结合反应,其与Fe 2+的结合位点可能是酰胺键、氨基的N原子与羧基的O原子。

关键词：蓝圆鲹酶解制备黄嘌呤氧化酶抑制肽

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青占鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽制备工艺优化

食品安全质量检测学报 2023年第5期14卷 265-274页

作者：苏浩恩张俊杰徐婕仲雅琦徐迪莎潘春飞缪文华郑斌浙江海洋大学食品与药学学院舟山316022 浙江冠素堂食品有限公司舟山316000

目的优化青占鱼黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XOD)抑制肽的制备工艺。方法以青占鱼为原料,选用5种蛋白酶对其水解制备XOD抑制肽,测定XOD抑制率和水解度并用以评价效果,通过单因素和响应面分析相结合的实验方法优化酶解条件,最后对... 详细信息

目的优化青占鱼黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XOD)抑制肽的制备工艺。方法以青占鱼为原料,选用5种蛋白酶对其水解制备XOD抑制肽,测定XOD抑制率和水解度并用以评价效果,通过单因素和响应面分析相结合的实验方法优化酶解条件,最后对其分子量分布情况进行了检测分析。结果复配酶制剂为最适酶,最佳酶解工艺为:加酶量4000 U/g、酶解时间4 h、酶解温度55℃、pH 7.0、料液比1:2 (g/mL);同时测得最优工艺下XOD抑制率和水解度的实际值分别为68.22%和19.15%,与理论值基本无差别。采用该法制备的青占鱼XOD抑制肽分子量分布情况为:5500~3000Da的肽段占比56.44%,3000~1500Da的肽段占比31.07%,肽段占比12.49%,均在5500Da以下,证明表达生物活性的是小分子肽。结论本研究可为青占鱼制备XOD抑制肽的生产工艺与机制研究提供一定的技术参考与理论支持。

关键词：青占鱼酶解黄嘌呤氧化酶抑制肽工艺优化

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鲣鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽酶法制备工艺优化

浙江大学学报（农业与生命科学版） 2019年第5期45卷 550-562页

作者：邹琳杭妙佳李阳杜鹃冯凤琴浙江大学生物系统工程与食品科学学院杭州310058 杭州康源食品科技有限公司杭州310003

以鲣鱼为原料,利用酶法制备鲣鱼黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制肽。在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面分析法,以水解度、氮回收率、XOD抑制活性、肌肽及鹅肌肽含量为响应值,对酶解工艺中蛋白酶种类、加酶量、酶解pH... 详细信息

以鲣鱼为原料,利用酶法制备鲣鱼黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制肽。在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面分析法,以水解度、氮回收率、XOD抑制活性、肌肽及鹅肌肽含量为响应值,对酶解工艺中蛋白酶种类、加酶量、酶解pH、温度和时间等影响因素进行优化,得到酶解的最优工艺:采用中性蛋白酶,加酶量为489.86 U/g,酶解pH为7.08,酶解温度为49.5℃,酶解时间为5 h。在此条件下,鲣鱼酶解产物的水解度为22.38%,氮回收率为83.31%,XOD抑制活性达到62.26%,肌肽和鹅肌肽含量分别为0.05%和2.45%(以干基计),与回归模型理论预测值基本一致。由本法所得的鲣鱼XOD抑制肽是以分子质量低于1000 Da的寡肽为主。皮尔逊相关性分析表明,XOD抑制活性与肌肽或鹅肌肽含量无相关性,推测在酶解过程中产生了其他具有XOD抑制活性的小分子肽。

关键词：鲣鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽酶解工艺肌肽鹅肌肽

火麻仁黄嘌呤氧化酶抑制肽的分离鉴定与分子对接研究

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食品工业 2023年第9期44卷 301-305页

作者：魏连会石杰张正海董艳黑龙江省科学院大庆分院大庆163319

建立一种快速、准确筛选火麻蛋白酶解物中活性多肽的方法。在黄嘌呤氧化酶抑制活性导向下,以超滤技术与离子交换法对火麻蛋白酶解物进行分离,确定黄嘌呤氧化酶抑制活性多肽,通过质谱分析与已有序列比对的方法,确定活性多肽的氨基酸序列... 详细信息

建立一种快速、准确筛选火麻蛋白酶解物中活性多肽的方法。在黄嘌呤氧化酶抑制活性导向下,以超滤技术与离子交换法对火麻蛋白酶解物进行分离,确定黄嘌呤氧化酶抑制活性多肽,通过质谱分析与已有序列比对的方法,确定活性多肽的氨基酸序列;通过计算机模拟将多肽与黄嘌呤氧化酶蛋白对接,筛选活性多肽,并确定其与黄嘌呤氧化酶蛋白的作用位点。共鉴定302个多肽,其中AFNVDSETVK和KTNDNAWVSPLAG这2个多肽能与黄嘌呤氧化酶稳定结合。基于串联质谱与分子对接技术,建立从混合多肽中快速筛选、鉴定活性多肽的方法,明确活性多肽与黄嘌呤氧化酶可能的结合位点,为后续的深入研究提供了依据和参考。

关键词：火麻蛋白黄嘌呤氧化酶抑制肽分子对接

鲣鱼背腹肉降尿酸肽制备工艺优化及体外活性研究

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食品与机械 2023年第3期39卷 153-160页

作者：楚玉柔孙继鹏朱秋语姚玮宋茹王家星浙江海洋大学浙江舟山316022 浙江省海洋开发研究院浙江舟山316021

目的:提高鲣鱼加工副产物利用率,开发具有降尿酸活性的食品基料。方法:通过响应面分析酶解过程中酶的种类及添加量、pH值、酶解温度和酶解时间对抑制肽固含量和黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制率的影响。结果:胰蛋白酶为最佳水解鲣鱼背腹肉的蛋白... 详细信息

目的:提高鲣鱼加工副产物利用率,开发具有降尿酸活性的食品基料。方法:通过响应面分析酶解过程中酶的种类及添加量、pH值、酶解温度和酶解时间对抑制肽固含量和黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制率的影响。结果:胰蛋白酶为最佳水解鲣鱼背腹肉的蛋白酶,最佳酶解工艺条件为酶添加量4%,pH 8.0,酶解温度55℃,酶解时间5 h,料液比1∶3(g/mL)。该条件下制备的XOD抑制肽固含量为7.96%,XOD抑制率为43.941%,具有很强的抗氧化能力,清除羟自由基和DPPH自由基的ED 50分别为6.0,10.0 mg/mL。结论:鲣鱼背腹肉有潜力用于制备XOD抑制肽,在抗氧化应激以及预防高尿酸血症方面可作为膳食功能因子切入。

关键词：鲣鱼背腹肉黄嘌呤氧化酶抑制肽抑制率体外活性