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电针“水沟-尾尖”穴对速眠新麻醉兔不同脑区Orexin及其受体的影响

电针“水沟-尾尖”穴对速眠新麻醉兔不同脑区Orexin及其受体的影响

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作者：李威豪西南大学

学位级别：硕士

针灸在临床上已被广泛用于多种疾病的治疗,如脑部损伤性疾病、各种原因引起的昏迷病症等;Orexin作为重要的脑神经肽,可激活脑神经元兴奋,对机体睡眠-觉醒具有重要的调节作用。本试验选用水沟穴和尾尖穴作为电针穴位组合,探究电针水沟和... 详细信息

针灸在临床上已被广泛用于多种疾病的治疗,如脑部损伤性疾病、各种原因引起的昏迷病症等;Orexin作为重要的脑神经肽,可激活脑神经元兴奋,对机体睡眠-觉醒具有重要的调节作用。本试验选用水沟穴和尾尖穴作为电针穴位组合,探究电针水沟和尾尖穴对速眠新麻醉兔的促醒效果和生理指标、外周血Orexin A、B的浓度以及不同脑区Orexin相关基因表达的变化。1电针对速眠新麻醉兔的促醒作用及生理指标的影响为观察电针对速眠新麻醉兔的促醒效果及生理指标的影响,24只健康雄性伊拉兔随机分为对照组、针刺组、电针组和拮抗剂组,每组6只。各组试验兔均采用肌注速眠新麻醉,完全麻醉30 min时进行以下处理:对照组不做任何处理,自然苏醒;针刺组分别在水沟穴和尾尖穴进行针刺,10 min运针1次,每个穴位1min/次;电针组在针刺水沟穴和尾尖穴的基础上进行电针操作,电针参数为断续波40 Hz;拮抗剂组肌肉注射苏醒灵0.2 m L/kg体重。观察并记录各组试验兔完全麻醉、第一次翻正和完全苏醒时间。并在试验操作前(即完全麻醉30 min时)和处理后10、20、30、40、50、60 min分别监测各组试验兔血氧饱和度(SpO2)、呼吸、心率及体温的变化。结果显示,电针组试验兔的第一次翻正和完全苏醒时间相比对照组显著缩短(P0.05);在苏醒过程中,电针组试验兔SpO2与针刺组和拮抗剂无显著差异(P>0.05),在50和60 min时显著高于对照组(P0.05);电针组试验兔的呼吸频率在苏醒期间与对照组和针刺组均无显著差异(P>0.05)。提示,电针可以显著缩短麻醉兔的苏醒时间,同时可以显著减少速眠新麻醉药对试验兔SpO2、体温和心率的影响。2电针促醒对速眠新麻醉兔外周血Orexin A和Orexin B的影响12只健康的雄性伊拉兔随机分为对照组和电针组,每组6只,在完全麻醉30min时,各试验组同时进行耳中动脉采血;然后电针组试验兔进行电针促醒,对照组不做任何处理,电针组出现第一次翻正时,两组同时进行第二次采血;电针组完全苏醒时,两组同时进行第三次采血。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血Orexin A和Orexin B浓度。结果显示,电针组试验兔在苏醒过程中血清Orexin A和Orexin B的浓度先降低后升高,且Orexin A变化趋势相比Orexin B较为明显,而同时间点的对照组则是先升高后降低,两组统计学比较无显著差异(P>0.05)。提示,电针对麻醉兔促醒可能与Orexin A的表达有关。3电针促醒对速眠新麻醉兔不同脑区Orexin及其受体表达的影响36只健康雄性伊拉兔随机分为对照组和电针组,每组18只。完全麻醉30 min时,两组各断头处死6只试验兔,电针组试验兔在第一次翻正和完全苏醒两个时间点时,每个时间点两组各处死6只试验兔,并快速分离脑组织(大脑皮层、下丘脑、海马、脑干和小脑),分别使用荧光定量(q-PCR)、蛋白质印记(Western blot)、免疫组化(IHC)检测不同脑区Orexin或其受体的相对表达变化。3.1 q-PCR检测不同脑区Orexin mRNA的相对表达变化q-PCR检测发现,在完全麻醉30 min时,两组试验兔不同脑区Orexin基因表达均无显著差异(P醒时,电针组下丘脑和海马prepro-Orexin mRNA表达量显著下调(P0.05)。提示,电针通过上调下丘脑prepro-Orexin mRNA、以及大脑皮层和下丘脑OX1R mRNA的表达促进麻醉苏醒。3.2 Western blot检测不同脑区Orexin A和OX1R蛋白相对表达变化Western blot检测结果显示,与对照组相比,在第一次翻正时,电针组大脑皮层Orexin A蛋白表达显著降低(P醒时

关键词：电针麻醉促醒水沟穴尾尖穴 Orexin

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