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麻蝇幼虫肠道蛋白酶BGP的分离纯化及性质

中国生物化学与分子生物学报 1998年第4期14卷 402-406页

作者：卢晓风程惊秋裴炎西南农业大学生物技术中心

棕尾别麻蝇幼虫肠液经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，Ｘ光片显影，呈现两条蛋白酶活性带．ＩＥＦ后，两条蛋白酶活性带的等电点分别为ｐＨ７．７和６．８．麻蝇幼虫肠液经５５％～７５％硫酸铵沉淀，以及连续两次制备等电聚焦，分离纯化出等电点... 详细信息

棕尾别麻蝇幼虫肠液经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，Ｘ光片显影，呈现两条蛋白酶活性带．ＩＥＦ后，两条蛋白酶活性带的等电点分别为ｐＨ７．７和６．８．麻蝇幼虫肠液经５５％～７５％硫酸铵沉淀，以及连续两次制备等电聚焦，分离纯化出等电点约为ｐＨ７．７，分子量约为３５ｋＤ的蛋白酶ＢＧＰ．该酶能分解酪蛋白和类胰蛋白酶专一底物Ｂｚ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－ＡｒｇＮＡ，不能分解弹性蛋白酶专一底物ｅｌａｓｔｉｎ－ＣｏｎｇｏＲｅｄ和类胰凝乳蛋白酶专一底物Ｓｕｃ（Ａｌａ）２Ｐｒｏ－ＰｈｅＮＡ．ＳＢＢＩ，Ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ和ＰＭＳＦ能强烈抑制其活性．专一底物和抑制剂的结果表明，ＢＧＰ是一种类胰蛋白酶．其最适反应温度为５０℃，最适作用ｐＨ为８．５．不耐高温，５０℃保温３０ｍｉｎ活性急剧下降．Ｈｇ２＋，Ｚｎ２＋和Ｃｕ２＋能抑制酶活性．Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋对酶无激活作用，ＥＤＴＡ无抑制作用．

关键词：麻蝇蛋白酶分离纯化性质

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中国麻蝇属昆虫研究进展

中国媒介生物学及控制杂志 2022年第1期33卷 153-158页

作者：王超闫利平李心钰张东刘起勇中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室传染病预防控制国家重点实验室世界卫生组织媒介生物监测与管理合作中心北京102206 北京林业大学生态与自然保护学院北京100083

蝇类是重要的病媒生物,可机械性携带、传播多种病原,引起多种疾病传播,部分蝇种还可生物性传播疾病。麻蝇(Flesh flies)是蝇类中常见的类群,对其监测具有重要公共卫生价值,但关于麻蝇的识别鉴定一直存在困难。该文对麻蝇相关研究进行梳... 详细信息

蝇类是重要的病媒生物,可机械性携带、传播多种病原,引起多种疾病传播,部分蝇种还可生物性传播疾病。麻蝇(Flesh flies)是蝇类中常见的类群,对其监测具有重要公共卫生价值,但关于麻蝇的识别鉴定一直存在困难。该文对麻蝇相关研究进行梳理并评述,为麻蝇分类、形态、系统发生等研究提供参考,同时也可推进蝇类病媒生物预防与控制的研究。

关键词：东亚麻蝇分类形态系统发生

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麻蝇全蛋白提取及凝集素的纯化鉴定

麻蝇全蛋白提取及凝集素的纯化鉴定

作者：陈卫华江西师范大学

学位级别：硕士

麻蝇是一种开发利用价值极高的昆虫生物资源,它不仅是一种很有前途的廉价、优质动物蛋白源,而且经深加后可获得多种有效成分,具有较大的发展潜力,可开发成医药、保健品、生化制剂及化工产品,并应用于癌症、艾滋病等难治病的治疗,是近年... 详细信息

麻蝇是一种开发利用价值极高的昆虫生物资源,它不仅是一种很有前途的廉价、优质动物蛋白源,而且经深加后可获得多种有效成分,具有较大的发展潜力,可开发成医药、保健品、生化制剂及化工产品,并应用于癌症、艾滋病等难治病的治疗,是近年来研究的一个热点和亮点。本论文对麻蝇全蛋白提取和凝集素纯化鉴定进行了系统研究,得到较完整的全蛋白提取物及高纯度凝集素单一蛋白;并对麻蝇全蛋白电泳图谱、凝集素进行了初步分析。实验目的:建立麻蝇全蛋白质的提取方法和合理的提取方案,获得麻蝇全蛋白纯品,为制作麻蝇全蛋白电泳图谱创造条件,为麻蝇蛋白质组学研究积累基础数据。进行麻蝇凝集素的纯化与鉴定研究,获得高纯度麻蝇凝集素,为综合开发和利用麻蝇资源打下基础,为其它昆虫蛋白资源的开发利用建立可资借鉴的方案。实验方法:在预备试验的基础上,根据麻蝇蛋白的组成特点,分别用盐溶、醇溶、碱提等方法从脱脂麻蝇粉中分离提取清蛋白、小分子肽、球蛋白、醇溶蛋白和碱溶性蛋白等几类蛋白,并测定蛋白质含量,采用正交实验等技术,优化提取条件,设计麻蝇全蛋白提取方案,获得纯度较高的麻蝇全蛋白,用于制作麻蝇全蛋白电泳图谱。采用亲和层析法和戊二醛法纯化凝集素,通过SDS—PAGE凝胶电泳鉴定与分析了凝集素的理化性质与生物活性。实验结果:脱脂麻蝇粉蛋白质的主要成分是清蛋白、球蛋白和小分子肽;大部分蛋白质的分子量分部在32-86.2KD之间;蛋白质得率为44.94%,回收率为85.6%,Tris-饱和酚法获得的麻蝇全蛋白电泳图谱较为理想。亲和层析法所获凝集素的效价为256;麻蝇凝集素的相对分子质量为82.9KD。

关键词：麻蝇全蛋白凝集素纯化鉴定

麻蝇胞浆全蛋白质双向电泳及其抗菌等主要活性研究

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麻蝇胞浆全蛋白质双向电泳及其抗菌等主要活性研究

作者：朱延平江西师范大学

学位级别：硕士

麻蝇(Sarcophaga peregrina)是双翅目麻蝇科昆虫。特征为胸部灰色而带淡黑条纹,腹部有淡灰和深灰格子花纹,其繁殖速度极快。麻蝇是一种极具深度开发利用的可再生性昆虫资源。除蛹皮(壳)是优质昆虫壳聚糖的原料外,胞浆含有丰富的蛋白质... 详细信息

麻蝇(Sarcophaga peregrina)是双翅目麻蝇科昆虫。特征为胸部灰色而带淡黑条纹,腹部有淡灰和深灰格子花纹,其繁殖速度极快。麻蝇是一种极具深度开发利用的可再生性昆虫资源。除蛹皮(壳)是优质昆虫壳聚糖的原料外,胞浆含有丰富的蛋白质,是多种活性蛋白的资源库。本论文对麻蝇胞浆全蛋白进行分析并研究了其中的抗菌与抗氧化活性成分。研究内容之一,建立了麻蝇胞浆全蛋白分离提取的实验方案。采用水提、醇提、盐提、碱提等方法,分别获得水溶性蛋白、醇溶蛋白、球蛋白、碱溶蛋白及水不溶性蛋白质,并通过Brandford法测得各种蛋白质含量,其中清蛋白、小分子肽分别为41%和33%,醇溶蛋白质含量则最少为3.98%,为麻蝇胞浆全蛋白分析研究积累原始资料。研究内容之二,采用双向电泳技术建立了麻蝇胞浆全蛋白电泳分析图谱实验方案。重点摸索麻蝇胞浆全蛋白双向电泳工作条件。初步解决了麻蝇胞浆中大量的脂肪、色素及多糖对双向电泳的严重干扰问题,为获得较理想的麻蝇全蛋白双向电泳图谱及其蛋白质组的研究奠定了基础。研究内容之三,采用水杨酸法对麻蝇胞浆各分离蛋白进行抗氧化-羟基清除作用鉴定。获得了其抗氧化的基本数据,清蛋白和球蛋白对羟基自由基的清除率都能达到80%以上,其它蛋白组分的羟基清除也能达到45%以上;经两步层析纯化后的抗菌肽,电泳结果显示为单一条带,抗菌肽分子量小于14.4KD。运用滤纸片法对提取蛋白质进行抗菌活性探究,发现其对毛霉、根霉有明显的抑制作用;为麻蝇胞浆蛋白质在美容保健、动物源天然食品防腐剂等方面的开发利用提供依据。

关键词：麻蝇全蛋白双向电泳抑菌

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应用RAPD技术区分3种麻蝇

安徽农业科学 2011年第8期39卷 4730-4731页

作者：吴薇北仑检验检疫局浙江宁波315800

[目的]探求应用RAPD技术区分麻蝇种类。[方法]用RAPD技术对黑尾黑麻蝇、棕尾别麻蝇、红尾粪麻蝇进行扩增,并对反应体系和程序进行一系列优化,从中选出可以区分3种麻蝇的引物和特异性条带。[结果]引物S247、S266对3种麻蝇扩增结果存在显... 详细信息

[目的]探求应用RAPD技术区分麻蝇种类。[方法]用RAPD技术对黑尾黑麻蝇、棕尾别麻蝇、红尾粪麻蝇进行扩增,并对反应体系和程序进行一系列优化,从中选出可以区分3种麻蝇的引物和特异性条带。[结果]引物S247、S266对3种麻蝇扩增结果存在显著差异。[结论]RAPD技术是一种可以有效区分3种麻蝇的方法。

关键词： RAPD 麻蝇应用

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郑州市郊区秋季尸食性麻蝇生长发育规律

郑州大学学报（医学版） 2011年第1期46卷 130-131页

作者：殷京珍李世才赵祖亮高玉萍郑旭东郑州大学基础医学院法医学教研室郑州450001

利用苍蝇的生长演化规律推断人体死亡时间。尤其是推断中晚期死亡时间,是法医工作中经常使用且行之有效的方法之一。苍蝇的生长发育规律受地区、季节、气候的影响较大。作者选择郑州市郊区作为实验地点,观察该地区秋季自然条件下麻蝇的... 详细信息

利用苍蝇的生长演化规律推断人体死亡时间。尤其是推断中晚期死亡时间,是法医工作中经常使用且行之有效的方法之一。苍蝇的生长发育规律受地区、季节、气候的影响较大。作者选择郑州市郊区作为实验地点,观察该地区秋季自然条件下麻蝇的生长发育规律,以便为该地区秋季人体死亡时间的推断提供较为准确的法医昆虫学依据。[第一段]

关键词：法医昆虫学麻蝇死亡时间

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一种麻蝇与家蝇的共栖现象

应用昆虫学报 1996年第6期 371-372页

作者：彭宇钟昌珍华中农业大学植保系!武汉430070 湖北大学生态学研究所!武汉430062

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城镇化对麻蝇肠道微生物的影响

城镇化对麻蝇肠道微生物的影响

作者：孙杰山东师范大学

学位级别：硕士

城镇化是人口由农村向城市迁移聚集的过程,同时又表现为地域景观的变化、产业结构的转变和生产生活方式的变革。城镇化造成的生境破碎化、均质化及环境污染等生态问题,是导致生物多样性丧失的重要因素,直接影响了生态系统的服务功能。... 详细信息

城镇化是人口由农村向城市迁移聚集的过程,同时又表现为地域景观的变化、产业结构的转变和生产生活方式的变革。城镇化造成的生境破碎化、均质化及环境污染等生态问题,是导致生物多样性丧失的重要因素,直接影响了生态系统的服务功能。昆虫是陆地生态系统生物多样性的主要组成部分,驱动着多种重要的生态系统功能,如传粉、草食作用和虫害控制。昆虫取食、消化和排泄都是在消化道中完成,其中肠道是最主要的功能区域。共生微生物普遍存在于昆虫的肠道中。昆虫与微生物建立了多种共生关系,在宿主物种多样性中发挥了核心作用。麻蝇分布广泛,在生态系统中承担着消费者和分解者的重要角色,同时又与人类健康密切相关。所以本研究以麻蝇属昆虫为研究对象,首先调查以市区、郊区和森林为代表的城镇化梯度下麻蝇属物种多样性的变化,并以此为基础,探究不同城镇化水平对麻蝇肠道微生物的影响。本研究包括两部分。第一部分把DNA条形码与形态分类学相结合,通过一代测序技术确定麻蝇属的物种组成,比较城镇化梯度下麻蝇物种多样性的不同。结果表明:城镇化影响麻蝇的物种多样性,且城镇化程度越高的样点,麻蝇物种多样性越高。第二部分基于高通量测序技术探究城镇化对麻蝇肠道微生物的影响,得出以下结论:1.肠道微生物在麻蝇适应城镇化过程中具有积极作用。森林生境麻蝇肠道微生物多样性显著低于市区与郊区(p麻蝇肠道摄入的细菌产生了拮抗作用。2.城镇化会造成麻蝇肠道微生物群落的梯度化,即呈现由高阶元到属水平梯度变化愈加明显的趋势,且在属水平上,郊区麻蝇肠道微生物的群落构成与市区更具相似性。3.城镇化带来的生境改变会导致麻蝇肠道中致病菌的丰度增加。在门水平,有显著差异的菌门中放线菌门丰度最高;在属水平上具有显著差异的菌属既有条件致病菌和病原菌也有对宿主有益的细菌,并且丰度较高的是假单胞菌属等10个菌属。鉴于已有研究和以上结论,所以我们推测,市区和郊区中病原菌的丰度增加可能是麻蝇摄入的食物中含有大量的病原菌,而环境食物中的病原菌与城镇化带来的环境改变有关;市区和郊区中麻蝇肠道有益菌丰度的增加可能是宿主自身产生的防御机制,对细菌群落进行了平衡调控。这可能是麻蝇适应城镇化的微生物机制之一,也维持了市区生境较高的麻蝇属物种多样性。

关键词：城镇化麻蝇 DNA条形码高通量测序肠道微生物

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麻蝇胞浆全蛋白质提取与纯化研究

天津农业科学 2010年第5期16卷 25-27页

作者：朱延平陈卫华江西师范大学生命学院江西南昌330022

使用醇提、水提、盐提、碱提获得麻蝇胞浆全蛋白,电泳结果蛋白条带清晰,蛋白含量较高,蛋白质大小位于10～82kD。该方法适合于麻蝇胞浆蛋白质组学研究中纯化总蛋白质,通过家蝇幼虫蛋白质提取过程的研究,为其它昆虫或动物蛋白提取提供了... 详细信息

使用醇提、水提、盐提、碱提获得麻蝇胞浆全蛋白,电泳结果蛋白条带清晰,蛋白含量较高,蛋白质大小位于10～82kD。该方法适合于麻蝇胞浆蛋白质组学研究中纯化总蛋白质,通过家蝇幼虫蛋白质提取过程的研究,为其它昆虫或动物蛋白提取提供了一个可行的实验依据。

关键词：麻蝇蛋白质纯化硫酸铵电泳