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鸡γ干扰素对H5亚型禽流感疫苗的免疫增强作用

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农业生物技术学报 2004年第4期12卷 427-430页

作者：贾立军刘秀梵张艳梅彭大新张如宽扬州大学畜牧兽医学院扬州大学畜牧兽医学院扬州225009

利用表达鸡γ干扰素的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)或灭活疫苗联合应用,接种SPF鸡、无母源抗体商品鸡和含有母源抗体商品鸡,研究鸡γ干扰素的免疫增强作用。结果发现,rFPV-IFN-γ... 详细信息

利用表达鸡γ干扰素的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)或灭活疫苗联合应用,接种SPF鸡、无母源抗体商品鸡和含有母源抗体商品鸡,研究鸡γ干扰素的免疫增强作用。结果发现,rFPV-IFN-γ和rFPV-HA联合应用诱导的HI抗体应答水平同rFPV-HA单独免疫相近;rFPV-IFN-γ和灭活疫苗联合应用后HI抗体应答水平略低于灭活疫苗单独免疫组。攻毒后,对于SPF鸡和无母源抗体商品鸡,rFPV-IFN-γ与rFPV-HA或灭活疫苗联合免疫诱导的保护率同相应疫苗单独免疫相当,均为95%~100%;对含有母源抗体的商品鸡,106PFU的rFPV-HA与105PFU 的rFPV-IFN-γ联合免疫组保护率(33.5%)高于rFPV-HA单独免疫组(11.4%~16.8%),而其它剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合应用不能提高免疫保护效力;rFPV-IFN-γ与灭活疫苗联合免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率同灭活疫苗单独免疫组相近。结果表明,rFPV-IFN-γ不能促进疫苗诱导的HI抗体应答;适当剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合免疫含有母源抗体的商品鸡,可提高免疫保护效力,发挥免疫增强作用。

关键词：鸡γ干扰素 H5亚型禽流感疫苗免疫增强

表达MDVgB和/或鸡γ干扰素基因的重组鸡痘病毒免疫效力试验

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畜牧兽医学报 2003年第2期34卷 177-182页

作者：彭大新刘秀梵吴艳涛高崧程坚周春红扬州大学畜牧兽医学院江苏扬州225009

将表达鸡干扰素基因、表达MDVgB基因、共表达MDVgB和鸡干扰素基因的重组鸡痘病毒进行组合免疫 ,观察在SPF鸡、狼山鸡中的免疫保护作用。在狼山鸡中随rFPV gB剂量的减少 ,保护效力逐渐下降 ,而在SPF鸡中 10 4 与 10 6PFU的rFPV gB提... 详细信息

将表达鸡干扰素基因、表达MDVgB基因、共表达MDVgB和鸡干扰素基因的重组鸡痘病毒进行组合免疫 ,观察在SPF鸡、狼山鸡中的免疫保护作用。在狼山鸡中随rFPV gB剂量的减少 ,保护效力逐渐下降 ,而在SPF鸡中 10 4 与 10 6PFU的rFPV gB提供相同的保护效力 ,但存在减缓增重的副反应 ;在所有的疫苗组合中 ,由10 6PFU的rFPV gB、10 5PFU的rFPV IFN Ⅱ和 40 0 0PFUHVT组成三价疫苗的保护效力最高且不影响增重 ,表明鸡干扰素既可降低重组鸡痘病毒的减缓增重的副反应 ,又具有免疫佐剂作用 ,与重组鸡痘病毒及HVT配合成疫苗是预防MD有效的冻干制剂。

关键词：马立克氏病重组鸡痘病毒鸡γ干扰素糖蛋白B 保护效力

重组鸡γ干扰素的高密度发酵生产及对肉鸡巨嗜细胞活性影响

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中国兽医学报 2010年第8期30卷 1083-1085页

作者：王宏华凌红丽侯竹美董瑞娥马向东赵玉惠王雷李志中孙海新青岛康地恩药业有限公司山东青岛266111 青岛宝依特生物制药有限公司山东青岛266114 青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109

研究了培养条件和诱导条件等对工程菌CH1的最终菌体量和表达量的影响,确立最优的高密度发酵条件,还探讨了不同补料流加方式对菌体生长的影响。结果表明,DO-stat流加方式具有显著增加菌体量的作用,发酵液最终菌体密度D600达25.31,湿菌体5... 详细信息

研究了培养条件和诱导条件等对工程菌CH1的最终菌体量和表达量的影响,确立最优的高密度发酵条件,还探讨了不同补料流加方式对菌体生长的影响。结果表明,DO-stat流加方式具有显著增加菌体量的作用,发酵液最终菌体密度D600达25.31,湿菌体53.4 g/L,蛋白表达量也达到32.3%,实现了ChIFN-γ的高密度发酵和高表达。初步纯化的鸡γ干扰素以500 U/只的剂量对双A肉鸡口服给药,可以提高机体的巨嗜细胞吞噬活性(P鸡γ干扰素的工业化生产和临床应用提供了依据。

关键词：鸡γ干扰素高密度发酵巨嗜细胞活性

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重组鸡 γ干扰素的抗球虫作用

中国兽医杂志 2004年第7期40卷 3-5页

作者：叶秀华蔡建平吴志光汪明中国农业大学动物医学院北京海淀100094 广东省农业科学院兽医研究所广东广州510640

鸡 γ干扰素 (Ch IFN- γ)是一种重要的细胞因子。对 r Ch IFN- γ抗球虫作用进行初步研究。在 7日龄对试验雏鸡口服接种 4× 10 4 个成熟的柔嫩艾美耳球虫卵囊时 ,结果表明 ,r Ch IFN-γ可以增加试验雏鸡的相对增重率 ,同时还发现 r Ch... 详细信息

鸡 γ干扰素 (Ch IFN- γ)是一种重要的细胞因子。对 r Ch IFN- γ抗球虫作用进行初步研究。在 7日龄对试验雏鸡口服接种 4× 10 4 个成熟的柔嫩艾美耳球虫卵囊时 ,结果表明 ,r Ch IFN-γ可以增加试验雏鸡的相对增重率 ,同时还发现 r Ch IFN-γ可以减少 OPG值和肠道病变记分 ,各 r Ch IFN-γ处理组中以肌肉注射 5 0 0 0 U r Ch IFN-γ组的相对增重率最高 ,为 93.0 %,其肠道病变记分和 OPG分别为 1.8和 6 .6 1万 / ml,ACI为 14 1.

关键词：鸡γ干扰素抗球虫作用细胞因子相对增重率鸡球虫病免疫

乳糖诱导重组鸡γ干扰素基因在大肠杆菌中的表达

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中国动物检疫 2008年第6期25卷 25-27页

作者：王宏华凌红丽马向东王雷孙海新赵玉惠青岛康地恩实业有限公司 266111

本文考察了乳糖代替IPTG诱导鸡γ干扰素(ChIFN-γ)在重组大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。分别对乳糖作为诱导剂时的诱导时机、乳糖浓度、诱导持续时间和添加方式等方面进行了分析,并在最优诱导条件下与IPTG诱导进行比较。结果表明,... 详细信息

本文考察了乳糖代替IPTG诱导鸡γ干扰素(ChIFN-γ)在重组大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。分别对乳糖作为诱导剂时的诱导时机、乳糖浓度、诱导持续时间和添加方式等方面进行了分析,并在最优诱导条件下与IPTG诱导进行比较。结果表明,工程菌在对数生长中后期(OD600为1.5)添加终浓度为2g/L的乳糖诱导7h对蛋白的表达和菌体量最为有利。由于乳糖本身可作为碳源被菌体利用,分批流加乳糖效果优于一次性添加。与IPTG诱导相比,乳糖诱导的蛋白表达量为29.8%,稍低于IPTG的32.3%,诱导后蛋白表达时间也有所滞后,但收获的菌体量则显著高于IPTG诱导,约为1.21倍,显示出了乳糖作为诱导剂的自身的优势。研究结果证明乳糖可以作为诱导剂应用于重组鸡γ干扰素的工业化生产,同时也为其它重组基因工程药物的生产提供了有益的参考和借鉴。

关键词：乳糖诱导 IPTG 鸡γ干扰素

鸡γ干扰素基因的分子克隆及其在大肠杆菌中的表达

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江西农业学报 2009年第4期21卷 90-91,94页

作者：张敬峰魏雪涛李银刘宇卓江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

根据GenBank已发表的鸡γ干扰素cDNA基因序列设计一对引物,以血淋巴细胞提取的总RNA为模板,通过RT-PCR的方法克隆出鸡γ干扰素基因,把它与融合表达载体pET32a相重组。通过对阳性宿主菌的不同时间的诱导摸索出最佳表达时间。

关键词：鸡γ干扰素克隆原核表达基因

鸡γ干扰素cDNA的克隆、表达及重组蛋白的应用研究

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鸡γ干扰素cDNA的克隆、表达及重组蛋白的应用研究

鸡γ干扰素cDNA真核表达质粒的构建及其在小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)中的表达

中国动物学会第七届全国青年寄生虫学工作者学术讨论会

作者：吴志光夏春汪明蒋金书中国农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院

＜正＞鸡γ干扰素（Chicken interferon—gamma,ChIFN-γ）是一类具有强大的免疫调节作用以及广谱抗病毒、抗细菌和抗球虫等作用的细胞因子。为研制我国鸡干扰素生物治疗制剂以及干扰素蛋白与基因免疫佐剂,本研究克隆了我国地方品种惠... 详细信息

＜正＞鸡γ干扰素（Chicken interferon—gamma,ChIFN-γ）是一类具有强大的免疫调节作用以及广谱抗病毒、抗细菌和抗球虫等作用的细胞因子。为研制我国鸡干扰素生物治疗制剂以及干扰素蛋白与基因免疫佐剂,本研究克隆了我国地方品种惠阳胡须鸡IFN-γ丫cDNA,在大肠杆菌和真核细胞中进行了表达,并对重组蛋白进行了初步的临床应用研究。

关键词：鸡γ干扰素原核表达真核表达免疫佐剂

来源： cnki会议评论

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鸡γ干扰素cDNA真核表达质粒的构建及其在小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)...

重组酵母鸡γ干扰素的抗病毒活性测定及临床初步应用

中国畜牧兽医学会2003年学术年会

作者：吴志光夏春汪明蒋金书中国农业大学动物医学院

用基因重组的方法,将鸡γ-干扰素cDNA亚克隆到带有CMV强启动子的真核表达载体pRc/CMV2中,筛选到了正确连接的阳性重组质粒饲pRC/IFN-γ,并在小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)中进行瞬间表达和稳定表达。瞬间表达试验表明细胞裂解液上清和细胞培养... 详细信息

用基因重组的方法,将鸡γ-干扰素cDNA亚克隆到带有CMV强启动子的真核表达载体pRc/CMV2中,筛选到了正确连接的阳性重组质粒饲pRC/IFN-γ,并在小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)中进行瞬间表达和稳定表达。瞬间表达试验表明细胞裂解液上清和细胞培养液上清均具有抗病毒活性,活性可达到160 U/ml。稳定表达试验中,转染细胞经G418筛选,得到3株能稳定表达活性ChIFN-γ蛋白的混合克隆,经CEF-VSV系统活性鉴定,活性最高时可以达到1.28×10U/ml。这一体系的建立为基因工程生产高活性的ChIFN-γ开辟了一条新途径,也为细胞因子基因免疫预防和治疗奠定基础。

关键词：鸡γ干扰素真核表达小鼠骨髓瘤细胞

来源： cnki会议评论

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微生物学报 2006年第1期46卷 115-119页

作者：蔡梅红张素芳曹瑞兵郭伟玲陈溥言江苏大学生物与环境工程学院镇江212013 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院南京210095 山东潍坊华辰科技有限公司潍坊261061

为了获得具有天然抗病毒活性的重组酵母鸡γ干扰素，以ConA（刀豆素A）诱导培养4-10h的鸡全血中提取的淋巴细胞总RNA为模板，通过RT-PCR的方法扩增出鸡γ干扰素成熟蛋白基因。通过EcoRⅠ和XbaⅠ两个酶切位点把鸡γ干扰素成熟蛋白基因插... 详细信息

为了获得具有天然抗病毒活性的重组酵母鸡γ干扰素，以ConA（刀豆素A）诱导培养4-10h的鸡全血中提取的淋巴细胞总RNA为模板，通过RT-PCR的方法扩增出鸡γ干扰素成熟蛋白基因。通过EcoRⅠ和XbaⅠ两个酶切位点把鸡γ干扰素成熟蛋白基因插入到酵母表达载体pPICZa-A上，得到了重组酵母鸡γ干扰素表达载体pPICZa-A-CHIFN-γ，经Bstx Ⅰ线性化后的重组载体被转入酵母菌株X33中，通过PCR的方法来筛选重组酵母菌，在甲醇诱导表达后，SDS-PAGE结果显示有两株重组菌在诱导72h后其表达上清中有大小为16kDa的目的条带。干扰素生物活性测定经典实验（微量病变抑制实验）和临床初步应用结果皆说明重组酵母鸡γ干扰素具有较强的抗病毒的生物活性和较好的临床使用前景。

关键词：鸡γ干扰素分泌表达临床应用