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鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代的早期发育、倍性鉴定及生长研究

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鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代的早期发育、倍性鉴定及生长...

作者：李松利华中农业大学

学位级别：硕士

彭泽鲫(Carassius auratus ***),属于鲤形目(Cyprinid)、鲤科(Cyprinid)、鲫属(Carassius),又称芦花鲫或彭泽大鲫,是我国重要的经济养殖种类之一。为进一步丰富彭泽鲫养殖品种,本研究以鳡(Elopichthys bambusa)为父本,异源四倍体彭泽鲫... 详细信息

彭泽鲫(Carassius auratus ***),属于鲤形目(Cyprinid)、鲤科(Cyprinid)、鲫属(Carassius),又称芦花鲫或彭泽大鲫,是我国重要的经济养殖种类之一。为进一步丰富彭泽鲫养殖品种,本研究以鳡(Elopichthys bambusa)为父本,异源四倍体彭泽鲫为母本进行异育雌核发育试验,研究其雌核发育子代的早期发育、倍性及生长性能,为彭泽鲫新品种的研发提供基础数据。主要研究结果如下:(1)通过人工干法授精获得受精卵,当胚胎发育至原肠胚期时,统计胚胎受精率为35.35±2.88%,仔鱼孵出后统计孵化率为33.84±2.16%、畸形率为29.28±1.22%,仔鱼能平游后统计出苗率为22.23±3.22%;在孵化水温为25±1℃下,鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代的胚胎发育经历了受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期及出膜期等共计27个时期,历时50h21min,有效积温1271.33℃·h;通过设置饥饿组和投喂组比较试验,结果表明鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代进入不可逆点的时间为孵化后的8～9d,对10d仔鱼摄食节律的研究发现,仔鱼在12:00和18:00具有较高的摄食率和摄食强度。(2)通过对鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代、彭泽鲫的血细胞比较,发现鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代与彭泽鲫红细胞核体积比值为1.98,与理论值1.33相比差异较大;剪取鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代鳍条组织进行细胞培养,原代细胞2d开始迁出,10d铺满T25细胞培养瓶50%底面积,17d铺满T25细胞培养瓶80%底面积。传代细胞3d可铺满T25细胞培养瓶80%底面积,形成可研究染色体核型的单层传代细胞;选取100个清晰的染色体分裂相进行统计分析,染色体数目在201～210之间的占比为61%。挑选10个分裂良好、容易辨认的细胞中期分裂相进行染色体核型分析,结果显示,鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代的染色体核型中有24对中部着丝点染色体(m),24对亚中部着丝点染色体(sm)、12对亚端部着丝点染色体(st)和40对端部着丝点染色体(t),染色体臂数(NF)=148。核型公式为4n=24m+24sm+12st+40t,NF=148;以三倍体彭泽鲫DNA含量为参照测定鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代外周血DNA含量。结果显示,鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代血液中4N细胞峰值最高,彭泽鲫血液中3N细胞峰值最高。峰型尖锐且无杂峰,检测结果真实可靠,即鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代为四倍体。(3)对鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代、异源四倍体彭泽鲫子代进行180d生长对比试验。结果表明,在180d时,鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代在质量和体长上比异源四倍体彭泽鲫子代分别高20.5%和8.6%;鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代与异源四倍体彭泽鲫子代的绝对增重率在0～60d无显著性变化,90d、120d、180d前者显著性大于后者。二者在180d试验周期内绝对增重率变化趋势一致,均呈现0～120d上升,120d～150d下降,150d～180d上升的趋势;鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代与异源四倍体彭泽鲫子代增积量分别在90d、120d达到最大值0.0080±0.0012(g·cm)/d、0.0046±0.0004(g·cm)/d;在肥满度方面,二者0～60d无显著性差异,说明本时期内两种子代体型相似差异大不,90～180d异源四倍体彭泽鲫子代显著性大于鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代,说明本时期内前者较于后者更加肥胖;根据0～180d鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代、异源四倍体彭泽鲫子代质量、体长数据拟合生长方程和曲线,鳡刺激异源四倍体彭泽鲫雌核发育子代:W=0.0459L(R=0.983),异源四倍体彭泽鲫子代:W=0.0443L(R=0.9753),表明前者的大小规格较于后者更加均匀。

关键词：鳡异源四倍体彭泽鲫早期发育倍性鉴定生长比较

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鳡的人工繁殖与胚胎发育

水产学报 2007年第5期31卷 639-646页

作者：宓国强沈土山许谷星黄鲜明顾志敏贾永义刘启文浙江省淡水水产研究所浙江省湖州市锦山鱼种场

于2003年至2006年,在浙江湖州市锦山鱼种场进行了鳡的亲鱼培育及人工繁殖的研究。结果表明:2龄野生鳡在池塘中经3年专塘培育后,雌雄鱼的性腺成熟率达100%;性腺成熟的亲鱼经催产,产卵率达100%、受精率86.5%、孵化率88.3%。与此同时,对鳡... 详细信息

于2003年至2006年,在浙江湖州市锦山鱼种场进行了鳡的亲鱼培育及人工繁殖的研究。结果表明:2龄野生鳡在池塘中经3年专塘培育后,雌雄鱼的性腺成熟率达100%;性腺成熟的亲鱼经催产,产卵率达100%、受精率86.5%、孵化率88.3%。与此同时,对鳡的胚胎发育作了详细观察。鳡受精卵在2123℃下孵化至出膜,有效积温为705.34℃.h。

关键词：鳡亲本培育人工繁殖胚胎发育

鳡肌肉生长抑制素(MSTN)基因的克隆及其组织特异性表达分析

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水产学报 2010年第10期34卷 1486-1494页

作者：郁建锋张营王星果徐建荣卢祥云李建林顾志良中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室常熟理工学院生物科学与工程系

以鳡肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE的方法,获得了鳡肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因的3个重叠片段,测序后拼接得到2177bp全长cDNA序列,其包含了5′端非翻译区的89个核苷酸和3′端非翻译区1052个核苷酸以及1125个核苷酸的开放性... 详细信息

以鳡肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE的方法,获得了鳡肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因的3个重叠片段,测序后拼接得到2177bp全长cDNA序列,其包含了5′端非翻译区的89个核苷酸和3′端非翻译区1052个核苷酸以及1125个核苷酸的开放性阅读框,翻译编码375个氨基酸,其中前22个氨基酸为鳡MSTN的信号肽。鳡MSTN具有MSTN的共同特征,有蛋白酶水解位点RIRR和在C端生物活性区含9个保守的半胱氨酸残基。核苷酸和氨基酸同源性分析发现鳡MSTN与厚颌鲂、草鱼和鲤等鲤形目鱼类的同源性较高,与鲈形目的同源性较低,与哺乳动物和鸟类的同源性最低;系统发育分析表明鳡MSTN与厚颌鲂亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析表明,该基因在肌肉和脑中表达量最高,在心肌中也有较高表达,在肝脏、肠、鳃和肾等组织中未见明显表达,此结果表明鳡MSTN基因除对肌肉生长发育有调控作用以外,可能还有其他功能。

关键词：鳡肌肉生长抑制素开放性阅读框表达

鳡胰岛素样生长因子1基因的克隆及其组织特异性表达分析

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2012年第3期33卷 32-39页

作者：郁建锋李建林徐建荣卢祥云柏洁顾志良常熟理工学院生物科学与工程系江苏常熟215500 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

为克隆鳡(Elopichthys bambusa)的胰岛素样生长因子1(IGF1)全长cDNA和启动子序列及明确其组织表达特征,采用反转录PCR(RT-PCR)、cDNA末端快速扩增(RACE)和染色体步移等技术,从鳡肌肉中获得了IGF1基因的全长cDNA(844bp)和上游启动子部分... 详细信息

为克隆鳡(Elopichthys bambusa)的胰岛素样生长因子1(IGF1)全长cDNA和启动子序列及明确其组织表达特征,采用反转录PCR(RT-PCR)、cDNA末端快速扩增(RACE)和染色体步移等技术,从鳡肌肉中获得了IGF1基因的全长cDNA(844bp)和上游启动子部分序列(627bp)。结果表明:IGF1基因包含218bp的5′端非翻译区、140bp的3′端非翻译区和486bp的开放性阅读框(ORF),编码161个氨基酸,包含前44个氨基酸残基为信号肽、70个氨基酸残基的4个功能结构域和C端47个氨基酸残基的延伸肽结构域。启动子无TATA框,但含有一成肌分化抗原(Myo D)结合位点。氨基酸同源性和系统发育分析发现,鳡IGF1与鲤形目其他鱼类的同源性较高(94.41%～99.38%),亲缘关系最近。半定量RT-PCR结果显示,IGF1在鳡的肝脏中表达最高,而心脏中未见其明显表达。该研究为明确IGF1参与鳡生长发育的机制研究及其在鳡的繁殖育种中的应用奠定了基础。

关键词：鳡胰岛素样生长因子1 启动子开放性阅读框表达

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鳡与草鱼肌肉营养成分的比较研究

营养学报 2011年第2期33卷 196-198页

作者：丁玉琴刘友明熊善柏华中农业大学食品科技学院国家淡水鱼加工技术研发分中心武汉430070

鳡（Elopichthys bambusa）,属鲤科,鳡属,典型的掠食性鱼类。近年来,鳡的天然资源急剧下降,为了开发鳡资源,对其进行了驯化养殖,人工繁殖和养殖技术得到发展[1-3]。目前国内外关于鳡营养成分分析、营养需求及加工利用等方面的研究较少,

关键词：鳡草鱼营养成分营养评价

不同脂肪源对鳡幼鱼生长、血清生化组成和肝脏的影响

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华中农业大学学报 2013年第2期32卷 116-122页

作者：陈海燕朱邦科樊启学胡培培宋林彭聪宗克金张云龙华中农业大学水产学院武汉430070 宁波大学海洋学院宁波315211

以鱼油为对照组(FO),分别以1/2猪油(PL)、1/2大豆油(SO)、1/2葵花籽油(SFO)、1/2棕榈油(PO)、1/2玉米油(CO)替代1/2鱼油作为脂肪源,配制6组等氮(49.43%±0.19%)等能((18.09±0.03)MJ/kg)的饲料,对鳡幼鱼(体长(6.89±0.20)cm,体质量(3.09±0.23)g)进行为期56d的养殖试验,研究部分替代鱼油对鳡幼鱼生长、血清生化组成以及肝脏的影响。结果表明:终末体质量和增重率均以葵花籽油替代组最大,其次是对照组和大豆油替代组;蛋白质效率、饵料系数各组之间无显著差异;玉米油替代组和猪油替代组的谷草转氨酶活性显著高于对照组,玉米油替代组的谷丙转氨酶活性显著高于对照组;猪油替代组幼鱼肝脏细胞中脂滴较其他组明显;在本研究的替代比例下,综合对鳡幼鱼生长、血清生化指标和肝脏的影响,认为葵花籽油、棕榈油、豆油可以作为脂肪源替代鱼油。

关键词：鳡脂肪源生长血清生化指标切片肝脏

饲料脂肪水平对鳡幼鱼生长、体成分及血清生化指标的影响

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华中农业大学学报 2012年第3期31卷 357-363页

作者：赵巧娥朱邦科沈凡樊启学宋林杨磊杨威孙存军陈海燕华中农业大学水产学院武汉430070

将初始均质量(8.26±0.81)g的鳡(Elopichthys bambusa)300尾,随机分为5组,分别投喂5种脂肪水平(A组:3%、B组:6%、C组:9%、D组:12%、E组:15%)的等氮(45.64%±0.20%)、等能(16.82±0.11MJ/kg)饲料56d,研究饲料脂肪水平对鳡幼鱼生长、体成分及血清生化指标的影响。结果表明:随着饲料脂肪水平的升高,增重率、特定生长率(SGR)先升后降,B组显著高于A、E组(P鳡最适饲料脂肪含量为7.71%,含量过高使鳡生长缓慢,脂肪代谢异常。

关键词：鳡饲料脂肪生长体成分血清生化指标

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草鱼、鳡和翘嘴鲌消化道组织的早期发育

水生生物学报 2012年第6期36卷 1164-1170页

作者：阮国良杨代勤王卫民长江中游湿地农业教育部工程研究中心/长江大学动物科学学院荆州434025 华中农业大学水产学院武汉430070 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室武汉430072

研究仔稚鱼消化机能的发育变化对于掌握鱼类早期发育阶段的消化特点、营养需要及提高仔稚鱼成活与生长等均有重要意义。采用HE、PAS等染色方法,对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鳡(Elopichthys bambusa)和翘嘴鲌(Culter alburnus)消... 详细信息

研究仔稚鱼消化机能的发育变化对于掌握鱼类早期发育阶段的消化特点、营养需要及提高仔稚鱼成活与生长等均有重要意义。采用HE、PAS等染色方法,对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鳡(Elopichthys bambusa)和翘嘴鲌(Culter alburnus)消化道组织的早期发育进行了研究,结果表明:(1)初孵仔鱼卵黄囊的相对体积以鳡的最大;(2)均在孵后2d和3d分别出现肠管和口裂,在孵后3d、4d和2d分别出现肠腔;(3)在孵后4d、7—9d和4d其肠腔内分别出现食物团,表明此时草鱼、鳡和翘嘴鲌已分别开始外源性摄食;(4)在孵后5d、6d和6d其肠道内表面分别出现黏膜褶,随后在稚鱼中其黏膜褶的高度和数量不同程度的发育;(5)草鱼和鳡的肠道分别在孵后14d和30d出现盘曲,而在翘嘴鲌的切片图中未发现其肠道的盘曲;(6)草鱼、鳡和翘嘴鲌的肠道分别于孵后17—23d、30d和24—29d出现数量较多的黏液细胞,此时标志着食性的转换和分化过程基本完善。

关键词：草鱼鳡翘嘴鲌消化道发育

团头鲂、鳡及其杂交F1代的形态差异与系统发育研究

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华中农业大学学报 2020年第1期39卷 116-125页

作者：陈静 SHALABY Hany said ali 易少奎王卫民华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室/农业农村部淡水生物繁育重点实验室

利用不同亚科的雌性团头鲂(Megalobrama amblycephala)和雄性鳡(Elopichthys bambusa)进行人工杂交获得子一代杂交个体,对团头鲂、鳡及其杂交子代的形态特征进行比较和分析,并对团头鲂(♀)×鳡(♂)的线粒体全基因组序列进行扩增和分析... 详细信息

利用不同亚科的雌性团头鲂(Megalobrama amblycephala)和雄性鳡(Elopichthys bambusa)进行人工杂交获得子一代杂交个体,对团头鲂、鳡及其杂交子代的形态特征进行比较和分析,并对团头鲂(♀)×鳡(♂)的线粒体全基因组序列进行扩增和分析。结果显示,在传统可量性状和框架结构中,杂交F1的性状更加偏向于母本团头鲂。在可数性状上,杂交子代的背鳍棘数、胸鳍棘数、腹鳍棘数和臀鳍棘数与母本团头鲂及父本鳡都一致;而其余大多数性状,如背鳍鳍条数、腹鳍鳍条数、臀鳍鳍条数、侧线鳞数、侧线上鳞数、侧线下鳞数和鳔室数,杂交子代的性状更接近于母本团头鲂。杂交鱼的线粒体基因组序列全长为16623 bp,与母本团头鲂一致,其碱基组成为31.23%A、16.19%G、24.69%T和27.90%C,且具有一定的A+T偏向性。其线粒体基因组共编码37个基因,分别为13个蛋白质编码基因、22个tRNA基因和2个rRNA基因,还有1个非编码区(D-Loop)。系统发育树结果显示,团头鲂(♀)×鳡(♂)与母本团头鲂的亲缘关系较近,与父本鳡的亲缘关系较远。

关键词：团头鲂鳡远缘杂交亚科杂交形态差异系统发育线粒体基因组鲤科鱼类