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基于UHPLC-Q-TOF-MS和生物信息分析探讨鳖血柴胡炮制理论的科学内涵

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中国现代应用药学 2023年第7期40卷 917-927页

作者：宁艳梅任远徐倩娟段海婧杜丽东吴国泰甘肃中医药大学兰州730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室兰州730000

目的基于UHPLC-Q-TOF-MS分析鳖血柴胡炮制前后药效物质的变化,结合生物信息分析阐释鳖血柴胡炮制理论的科学内涵。方法采用UHPLC-Q-TOF-MS技术和多元变量模式识别分析方法对鳖血柴胡炮制前后化学成分的变化进行定性定量分析,通过PubChem... 详细信息

目的基于UHPLC-Q-TOF-MS分析鳖血柴胡炮制前后药效物质的变化,结合生物信息分析阐释鳖血柴胡炮制理论的科学内涵。方法采用UHPLC-Q-TOF-MS技术和多元变量模式识别分析方法对鳖血柴胡炮制前后化学成分的变化进行定性定量分析,通过PubChem、STITCH、SwissTargetPrediction、SEA、Metascape和SymMap数据库对鳖血柴胡炮制前后的“差异成分-靶点-功效-中医证候”进行相关分析。结果鳖血柴胡炮制后松脂素、山奈酚素、鸟嘌呤核苷、淫羊藿苷F2、柴胡皂苷BK1、柴胡皂苷D、异土木香内酯等37种成分发生了明显改变,生物信息分析显示差异成分相关靶点主要富集定位在肝脏、骨髓、小肠、脾脏等组织,靶点功效主要与G蛋白偶联受体信号传导通路、蛋白质磷酸化、神经活性配体-受体相互作用、激素反应等生物学过程相关,与肝气郁滞、风热、火热、肝肾亏虚、阴虚阳亢、肝风等中医“肝阴虚”类证候呈现相关性,显示其主入肝经,侧重于疏肝解郁、疏散肝经风热、清肝泻火、滋补肝肾、滋阴潜阳、平肝息风等功效。结论鳖血柴胡炮制前后药效物质及药性发生了一定的变化,其变化与“肝阴虚”相关证候有明显的关联性,提示基于“柴胡劫肝阴”理论的鳖血柴胡炮制理论具有一定的科学性。

关键词：鳖血柴胡炮制理论 UHPLC-Q-TOF-MS 生物信息分析

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鳖血柴胡背后的用药地域化与医家争论

中药材 2020年第11期43卷 2822-2825页

作者：刘鹏广州中医药大学基础医学院广东广州510006

柴胡用鳖血拌炒,与清代叶天士、王士雄等温病医家对“柴胡劫肝阴”的认同密切相关。“柴胡劫肝阴”原本是叶天士等江浙医家表明暑疟不宜采取张仲景用柴胡之法进行治疗,体现了疟证、温病及其用药的地域化。而后,“柴胡劫肝阴”的内涵有... 详细信息

柴胡用鳖血拌炒,与清代叶天士、王士雄等温病医家对“柴胡劫肝阴”的认同密切相关。“柴胡劫肝阴”原本是叶天士等江浙医家表明暑疟不宜采取张仲景用柴胡之法进行治疗,体现了疟证、温病及其用药的地域化。而后,“柴胡劫肝阴”的内涵有所泛化,扩大为一切肝阴不足之证皆不能应用柴胡。以徐大椿为代表的明清尊经医家对“柴胡劫肝阴”的批判,表面上是柴胡治疟的宜忌,本质上则是不同医家对于如何师法经典存在不同的观点或尺度。同时也体现了明清时期医界的温补与养阴之争。

关键词：鳖血柴胡温病伤寒地域化

基于转录组学研究鳖血柴胡治疗肝阴虚证的作用机制

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江西中医药 2024年第6期55卷 58-63,80页

作者：赵夏侯梦雨马鑫莹许瑞娜叶耀辉马越兴刘婷江西中医药大学南昌330004 南昌医学院南昌330052

目的:研究鳖血柴胡对肝阴虚证的治疗作用及机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、柴胡组、鳖甲-柴胡组、鳖血柴胡组,每组6只。采用腹腔注射CCl4联合灌胃温热中药的方法建立肝阴虚证模型。通过检测肝功能指标... 详细信息

目的:研究鳖血柴胡对肝阴虚证的治疗作用及机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、柴胡组、鳖甲-柴胡组、鳖血柴胡组,每组6只。采用腹腔注射CCl4联合灌胃温热中药的方法建立肝阴虚证模型。通过检测肝功能指标、阴虚指标及炎症因子指标,观察肝脏HE染色切片,评价鳖血柴胡对肝阴虚证的治疗作用。并通过转录组测序技术探究鳖血柴胡治疗肝阴虚证的作用机制,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证转录组测序结果的准确性。结果:与模型组比较,柴胡组、鳖甲-柴胡组及鳖血柴胡组均可显著降低血清中肝功能指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平(P鳖血柴胡通过调控687个基因起到治疗肝阴虚证的作用。KEGG通路富集结果显示,差异基因显著富集在补体与凝血级联反应通路,PPI分析得到的10个hub基因中,有5个都显著富集于此通路。结论:柴胡经鳖血炮制后劫肝阴之性减弱,可用于肝阴虚证的治疗。其机制是通过调控补体与凝血反应通路,调节免疫反应与炎症反应,进而起到治疗肝阴虚证的作用。

关键词：鳖血柴胡肝阴虚证转录组机制

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鳖血柴胡的研究进展

江西中医药 2017年第3期48卷 61-63页

作者：叶耀辉史毅张博文马越兴郑红梅龚千锋江西中医药大学药学院南昌330004

鳖血柴胡作为江西的樟帮特色炮制饮片,在临床上具有广泛应用。本文从鳖血柴胡的历史溯源,概述了鳖血柴胡的炮制工艺、化学成分、药理作用等,并对鳖血柴胡的应用前景进行展望,以期为鳖血柴胡的深入研究提供参考。

关键词：鳖血柴胡炮制化学成分

Box-Behnken响应面法优化鳖血柴胡炮制工艺

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中药材 2017年第2期40卷 334-337页

作者：叶耀辉郑红梅张博文马越兴史毅于欢龚千锋江西中医药大学江西南昌330004

目的:采用Box-Behnken响应面法优选鳖血柴胡的最佳炮制工艺。方法:以HPLC测得的主要药效成分柴胡皂苷a、d之和为响应指标,采用3因素3水平的Box-Behnken响应面法设计试验,考察鳖血用量、炒制温度、炒制时间对鳖血柴胡炮制工艺的影响。结... 详细信息

目的:采用Box-Behnken响应面法优选鳖血柴胡的最佳炮制工艺。方法:以HPLC测得的主要药效成分柴胡皂苷a、d之和为响应指标,采用3因素3水平的Box-Behnken响应面法设计试验,考察鳖血用量、炒制温度、炒制时间对鳖血柴胡炮制工艺的影响。结果:鳖血柴胡的最佳炮制工艺参数为:鳖血用量15%(每100 g柴胡药材拌入15 g鳖血),炒制温度:110℃,炒制时间:15 min。在此最优工艺条件下,柴胡总皂苷含量可达2.109%。结论:Box-Behnken响应面法用于鳖血柴胡炮制工艺考察简单,可靠。

关键词：鳖血柴胡炮制工艺 Box-Behnken响应面法

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多指标正交试验优选鳖血柴胡的炮制工艺

中国实验方剂学杂志 2015年第15期21卷 8-11,7页

作者：于欢李小宁钟凌云张金莲宁希鲜阳强龚千锋北京中医药大学中药学院北京100102 江西中医药大学药学院南昌330004

目的：优选鳖血柴胡的炮制工艺。方法：以柴胡皂苷a,c,d及醇溶性浸出物含量的综合评分为指标,通过正交试验考察炮制时间、鳖血用量、炮制温度对鳖血柴胡炮制工艺的影响。采用HPLC测定柴胡皂苷a,c,d的含量,流动相乙腈（A）-水（B）梯度... 详细信息

目的：优选鳖血柴胡的炮制工艺。方法：以柴胡皂苷a,c,d及醇溶性浸出物含量的综合评分为指标,通过正交试验考察炮制时间、鳖血用量、炮制温度对鳖血柴胡炮制工艺的影响。采用HPLC测定柴胡皂苷a,c,d的含量,流动相乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（0~50 min,25%~90%A;50~55 min,90%A）,检测波长210 nm。结果：炒制时间对炮制工艺具有显著性影响。最佳炮制工艺为150℃炮制10 min,加鳖血量0.05 m L·g-1。醇溶性浸出物及柴胡皂苷a,c,d质量分数分别为12.42%,0.85%,0.23%,0.90%。结论：优选的炮制工艺合理可靠、重复性好,为规范鳖血柴胡饮片的炮制加工提供参考。

关键词：鳖血柴胡柴胡皂苷a 柴胡皂苷c 柴胡皂苷d 醇溶性浸出物

鳖血柴胡不同比例炮制品解热镇痛作用的实验研究

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甘肃中医学院学报 2014年第6期31卷 5-8页

作者：宁艳梅杨韬甘肃中医学院甘肃兰州730000

目的比较鳖血柴胡不同比例炮制品的解热镇痛作用。方法通过解热实验及热板、扭体实验,观察、比较鳖血柴胡不同比例炮制品对小鼠肛温、痛阈、扭体次数的影响。结果鳖血柴胡不同比例炮制品可降低发热小鼠的肛温,其中柴胡鳖血100∶20组的... 详细信息

目的比较鳖血柴胡不同比例炮制品的解热镇痛作用。方法通过解热实验及热板、扭体实验,观察、比较鳖血柴胡不同比例炮制品对小鼠肛温、痛阈、扭体次数的影响。结果鳖血柴胡不同比例炮制品可降低发热小鼠的肛温,其中柴胡鳖血100∶20组的肛温相对较低;与空白对照组比较,各药物组小鼠痛阈值均显著升高,差异有统计意义(P柴胡鳖血100∶20组的痛阈抑制率最高;与空白对照组比较,鳖血柴胡不同比例炮制品均能显著减少小鼠扭体次数,差异有统计意义(P柴胡鳖血100∶40组的抑制率最高,其次是柴胡鳖血100∶20组。结论鳖血柴胡不同比例炮制品能降低发热小鼠的体温,但解热效果随时间延长有所差别;鳖血柴胡不同比例炮制品对小鼠均有显著的镇痛作用,其中以柴胡∶鳖血为100∶20的比例作用最强。

关键词：鳖血柴胡炮制品解热镇痛小鼠

PITC柱前衍生HPLC测定柴胡炮制前后17种氨基酸含量

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中国实验方剂学杂志 2015年第14期21卷 25-27页

作者：于欢钟凌云阳强宁希鲜张金莲李小宁龚千锋北京中医药大学中药学院北京100102 江西中医药大学药学院南昌330004

目的：建立一种同时测定鳖血柴胡中17种氨基酸含量的方法,为该药材的质量控制提供参考。方法：以异硫氰酸苯酯（PITC）为柱前衍生试剂,采用Prevail C18色谱柱,流动相[乙腈-水（4∶1）]-[乙酸钠缓冲溶液（p H 6.5）-乙腈（97∶3）]梯度洗... 详细信息

目的：建立一种同时测定鳖血柴胡中17种氨基酸含量的方法,为该药材的质量控制提供参考。方法：以异硫氰酸苯酯（PITC）为柱前衍生试剂,采用Prevail C18色谱柱,流动相[乙腈-水（4∶1）]-[乙酸钠缓冲溶液（p H 6.5）-乙腈（97∶3）]梯度洗脱,检测波长254 nm,测定柴胡炮制前后氨基酸的含量。结果：17种氨基酸在32 min内可良好分离;样品平均加样回收率93.4%~107.1%,RSD 1.8%~3.9%。结论：与其他柱前衍生测定氨基酸含量的方法相比,该方法具有可操作性强、成本低、易推广等优势,可作为柴胡及其炮制品中氨基酸的含量测定方法。

关键词：柴胡鳖血柴胡柱前衍生异硫氰酸苯酯氨基酸