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鳖甲

中华中医药学刊 2009年第7期27卷 1381-1381页

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鳖甲抗肝纤维化活性物质的筛选与分离鉴定

中华肝脏病杂志 2010年第5期18卷 346-352页

作者：高建蓉刘焱文李昌煜姚航平张赤志陈进文邵志华刘建文蔡卫民丁永祥朱有法唐尹萍胡春玲施婧妮胡祖良张洪球杨玲浙江衢化医院感染科衢州324004 湖北中医学院浙江中医药大学浙江大学医学院华东理工大学华中科技大学同济医学院协和医院

目的筛选鳖甲抗肝纤维化的活性物质,并对其进行分离鉴定.方法在生物化学与药理学跟踪技术下,通过膜分离技术筛选鳖甲抗肝纤维化的活性部位;采用凝胶色谱柱分离法在活性部位筛选活性组分;应用高效液相色谱分离法对活性组分进行分离纯化... 详细信息

目的筛选鳖甲抗肝纤维化的活性物质,并对其进行分离鉴定.方法在生物化学与药理学跟踪技术下,通过膜分离技术筛选鳖甲抗肝纤维化的活性部位;采用凝胶色谱柱分离法在活性部位筛选活性组分;应用高效液相色谱分离法对活性组分进行分离纯化;通过4700串联飞行时间质谱仪对鳖甲活性纯化组分进行结构鉴定.对数据进行方差分析和组间q检验. 结果筛选出鳖甲蛋白质和肽类的分子量＜6000的物质具有生物学活性,从而确定了鳖甲抗肝纤维化的活性部位.将活性部位分离为8个组分（Bjl～Bj8）,筛选出Bj4、Bj6和Bj7三个活性组分.对活性组分Bj7进行分离纯化,得到7个纯化组分（Bj701～Bj707）;经筛选得出Bj704和Bj707的生物学活性较为显著.通过4700串联飞行时间质谱仪对Bj707纯化组分Bj707-A进行测试,选择质/荷比为526、542和572三个丰度最强的分子离子峰,用De Novo Explorer分析软件进行分析,测出该3个肽类化合物的氨基酸序列分别为NDDY（Asn-Asp-Asp-Tvr）、NPNPT（Asn-Pro-Asn-Pro-Thr）、HGRFG（His-Gly-Arg-Phe-Gly）;根据分子离子峰的丰度判断,M572的肽类化合物含量最高.结论应用学科交叉的研究方法,提取分离并鉴定了鳖甲抗肝纤维化的3个活性肽类物质,为鳖甲用于临床抗肝纤维化、新药开发奠定了基础.

关键词：肝硬化分离和提纯鳖甲活性物质鉴定

鳖甲药材指纹图谱与其抗肝纤维化作用的谱效关系研究

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中草药 2014年第17期45卷 2506-2510页

作者：肖云芝于超刘朝勇万露徐平华韩晋袁海龙中国人民解放军第三〇二医院北京100039 成都中医药大学药学院四川成都611137

目的研究不同产地鳖甲药材的HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用的谱效关系,揭示鳖甲药材抗肝纤维化作用的"药效成分组"。方法 HPLC-DAD法测定了12个产地鳖甲药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,并... 详细信息

目的研究不同产地鳖甲药材的HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用的谱效关系,揭示鳖甲药材抗肝纤维化作用的"药效成分组"。方法 HPLC-DAD法测定了12个产地鳖甲药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,并进行主成分分析(PCA)。以LX-2肝星状细胞为模型研究其对肝细胞的抑制效果,采用SPSS软件对数据进行相关分析,研究谱效相关性。结果 12个产地鳖甲药材HPLC指纹图谱中共有7个特征共有峰,其中峰2、5与LX-2肝星状细胞抑制效果(A值)的相关性呈现中等程度相关,峰4的相关性最强。由PCA可知,峰4的量对鳖甲质量有着重要的影响。结论 12个产地鳖甲药材对LX-2肝星状细胞均有抑制作用,HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用之间有一定的相关性,为进一步控制鳖甲药材内在质量提供参考。

关键词：鳖甲指纹图谱抗肝纤维化作用主成分分析谱效关系 LX-2肝星状细胞

基于抗肝纤维化生物活性及近红外谱效相关的鳖甲质量评价研究

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中草药 2023年第10期54卷 3150-3157页

作者：曹梦珍黄倩牛明赵旭肖小河成都中医药大学药学院四川成都610032 中国人民解放军总医院第五医学中心肝病医学部研究所北京100039

目的从鳖甲临床抗肝纤维化功效出发并结合近红外光谱,探索建立关联抗肝纤维化活性的鳖甲质量生物活性评价方法。方法建立转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的LX-2肝纤维化细胞模型,采用qRTPCR检测鳖甲对I... 详细信息

目的从鳖甲临床抗肝纤维化功效出发并结合近红外光谱,探索建立关联抗肝纤维化活性的鳖甲质量生物活性评价方法。方法建立转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的LX-2肝纤维化细胞模型,采用qRTPCR检测鳖甲对I型胶原(type I collagen,COL1)m RNA表达的影响,计算鳖甲对COL1 m RNA相对表达量的抑制率;采用Western blotting检测鳖甲对COL1蛋白表达的影响,以评价鳖甲在细胞模型上的抗肝纤维化生物活性。采集并处理不同批次鳖甲药材的近红外光谱数据,通过谱-效相关分析探究鳖甲药材近红外光谱数据与其抗肝纤维化活性的相关性,筛选活性波段,建立鳖甲的效应近红外谱,以效应近红外谱下面积评价鳖甲药材的质量。结果体外实验表明,与模型组比较,鳖甲水提物(water extract of Trionycis Carapax,WECT)处理组细胞中COL1 mRNA与蛋白表达水平显著下调(P0.6、P鳖甲药材的效应近红外谱,计算各特征波段下面积和,并分析其与生物活性的相关性,两者相关系数R为0.81353。结论WECT可抑制LX-2细胞外基质的产生来治疗肝纤维化;效应波谱下面积和(5226~5235 cm^(-1)、5943~6071 cm^(-1)与6379~6396 cm^(-1))作为鳖甲药材的质量评价系数,用于评价鳖甲药材的质量,可区分不同批次鳖甲药材的抗肝纤维化活性。

关键词：鳖甲肝纤维化质量评价生物评价近红外光谱谱效相关分析

鳖甲胶原蛋白酶解物的分离纯化及体外抗氧化性研究

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核农学报 2020年第5期34卷 1047-1053页

作者：卢梦楠李兰芳景玉蕾宋伟李彩燕钱国英浙江万里学院生物与环境学院浙江宁波315000

为建立中华鳖背甲中胶原蛋白酶解物(CH)的制备条件,并明确其体外抗氧化活性,本研究采用单因素试验探讨鳖甲胶原蛋白酶解物的分离条件。结果表明,其最佳提取工艺参数:胃蛋白酶添加量4000 U·g-1、pH值2.5、酶解温度35℃。通过透析纯化后... 详细信息

为建立中华鳖背甲中胶原蛋白酶解物(CH)的制备条件,并明确其体外抗氧化活性,本研究采用单因素试验探讨鳖甲胶原蛋白酶解物的分离条件。结果表明,其最佳提取工艺参数:胃蛋白酶添加量4000 U·g-1、pH值2.5、酶解温度35℃。通过透析纯化后获得体外抗氧化活性最好的组分为分子量鳖甲的开发利用及鳖源新型抗氧化物质的研发提供了一定的理论基础。

关键词：鳖甲胶原蛋白酶解物分离纯化层析抗氧化

柱前衍生化高效液相色谱法测定鳖甲生、制品中氨基酸的含量

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中药材 2016年第4期39卷 802-805页

作者：廖彭莹周利琴廖丹葵孙丽霞孙建华韦建华广西大学化学化工学院/广西高校资源化工应用新技术重点实验室广西南宁530004 广西中医药大学广西南宁530001

目的：建立柱前衍生化高效液相色谱法分析鳖甲生、制品中氨基酸的组成和含量。方法：采用酸水解法制备鳖甲生、制品的氨基酸样品溶液,以邻苯二甲醛（OPA）和9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,梯度洗脱。结果：1... 详细信息

目的：建立柱前衍生化高效液相色谱法分析鳖甲生、制品中氨基酸的组成和含量。方法：采用酸水解法制备鳖甲生、制品的氨基酸样品溶液,以邻苯二甲醛（OPA）和9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,梯度洗脱。结果：18种氨基酸在38 min内得到较好分离,在一定浓度范围内线性关系良好（r≥0.9991）,鳖甲生、制品中检出的16种氨基酸的平均加样回收率在90.43%~110.69%之间,RSD在0.76%~5.89%之间（n=6）。结论：该方法分离效果较好,可用于测定鳖甲生、制品的氨基酸含量。

关键词：鳖甲氨基酸柱前衍生化高效液相色谱法

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中药龟鳖甲的商品鉴定

中国中药杂志 2000年第5期25卷 259-262页

作者：王忠壮林锦明叶光明全山丛胡晋红第二军医大学长海医院药学部上海200433 第二军医大学药学院上海200433 中国人民解放军102医院药材科江苏常州213000

目的 :鉴定鳖甲、龟甲类商品药材。方法 :形态鉴定及差热分析法。结果 :发现鳖甲伪品 2种 ,龟甲伪品 3种 ,并提出鳖甲、龟甲类药材的形态和差热鉴定特征。结论 :目前市售的海鳖甲系伪品鳖甲 ,其原动物为产于南亚地区的缘板鳖及鼋 ,花龟... 详细信息

目的 :鉴定鳖甲、龟甲类商品药材。方法 :形态鉴定及差热分析法。结果 :发现鳖甲伪品 2种 ,龟甲伪品 3种 ,并提出鳖甲、龟甲类药材的形态和差热鉴定特征。结论 :目前市售的海鳖甲系伪品鳖甲 ,其原动物为产于南亚地区的缘板鳖及鼋 ,花龟、海龟及太平洋丽龟甲为伪品龟甲 ;利用形态及差热分析特征可将鳖甲、龟甲与其伪品准确区分开。

关键词：鳖甲龟甲伪品鉴定差热分析法

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鳖甲的本草考证

中国实验方剂学杂志 2022年第3期28卷 163-170页

作者：童东昌刘利娟宁迪敏朱文豪田雪飞湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院长沙410007

鳖甲是临床常用药物,现代对鳖甲的研究主要聚焦于实验研究及临床观察,鲜见文献研究。该文在系统查阅鳖甲古今文献的基础上,通过分析历代本草方书中的相关内容,对鳖甲的名称、基原、产地、品质评价、功效主治、炮制方法及用药禁忌进行全... 详细信息

鳖甲是临床常用药物,现代对鳖甲的研究主要聚焦于实验研究及临床观察,鲜见文献研究。该文在系统查阅鳖甲古今文献的基础上,通过分析历代本草方书中的相关内容,对鳖甲的名称、基原、产地、品质评价、功效主治、炮制方法及用药禁忌进行全面考证。通过考证发现,在基原上,古籍文献所载的鳖甲当来源于中华鳖Trionyx sinensis的背甲,山瑞鳖***的背甲不宜作为中药鳖甲的来源。鳖甲的道地产区在今长江中下游的岳阳、荆州、安徽东南部及江苏西部。关于鳖甲的品质评价,本草古籍中常以鳖甲的肋数如七肋、九肋作为品质评价的标准,但通过文献研究及对药材市场的实地考察,发现以肋数作为品质的评价标准在现代并不可取。随着时代的更迭,鳖甲的功效主治在《神农本草经》的基础上逐渐扩展,后世将鳖甲广泛应用于内外妇儿各科。需要注意的是,鳖甲治劳热骨蒸当来源于《神农本草经》,而不是《本草衍义》等古籍所言的《药性论》。在炮制方面,鳖甲炮制方法多样,主要以醋制为主。在用药禁忌方面,鳖甲不能与矾石、理石配伍,孕妇禁用,脾虚胃弱、肝虚无热者慎用。该文的考证结果为鳖甲的正本清源及进一步资源开发利用提供了参考依据。

关键词：鳖甲本草考证基原品质功效主治炮制

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鳖甲寡肽化合物I-C-f-6对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

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中国病理生理杂志 2010年第A10期26卷 2073-2074页

作者：张宇忠北京中医药大学基础医学院病理课程组

目的:探讨鳖甲寡肽化合物(I-C-f-6)对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤影响。方法:实验分正常组、模型组和药物组等3组,造模前1周药物组皮下注射I-C-f-6(0.17μg/g BW),造模时模型组和药物组用CCl4(0.1mL/g BW腹腔注射0.15%CCl4橄榄油... 详细信息

目的:探讨鳖甲寡肽化合物(I-C-f-6)对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤影响。方法:实验分正常组、模型组和药物组等3组,造模前1周药物组皮下注射I-C-f-6(0.17μg/g BW),造模时模型组和药物组用CCl4(0.1mL/g BW腹腔注射0.15%CCl4橄榄油溶液)诱导急性肝损伤模型,适时检测血清中ALT、AST活性和肝组织中过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽氧化酶(GPx)活性及丙二醛(MDA)浓度。结果:I-C-f-6可有效降低CCl4诱发之ALT、AST活性(P<0.01);提升肝脏中抗氧化酶SOD、GPx、GR活性(P<0.01)。结论:结果

关键词：急性肝损伤 I-C-f-6 鳖甲寡肽谷胱甘肽氧化酶模型组过氧化物歧化酶抗氧化酶谷胱甘肽还原酶