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鱼腥草素钠及与红霉素联用对产膜表皮葡萄球菌lrgB的影响

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生物学杂志 2020年第2期37卷 41-45页

作者：官妍许甘霏安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012 安徽大学生命科学学院合肥230601

程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD)常被认为是真核生物所独有,其中占主导地位的是凋亡;而与真核生物凋亡类似的细菌Cid/Lrg系统近年来也被人们所关注。表皮葡萄球菌是导致医院内感染最主要的病原菌之一;而表皮葡萄球菌致病与... 详细信息

程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD)常被认为是真核生物所独有,其中占主导地位的是凋亡;而与真核生物凋亡类似的细菌Cid/Lrg系统近年来也被人们所关注。表皮葡萄球菌是导致医院内感染最主要的病原菌之一;而表皮葡萄球菌致病与其易在人体内置的人工装置(关节、隐形眼镜、心脏瓣膜、留置导管等)表面形成生物膜密切相关。为评估鱼腥草素钠及其与红霉素联用对表皮葡萄球菌溶解死亡和形成生物膜的影响,采用连续稀释法,测定鱼腥草素钠、红霉素、万古霉素对表皮葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC);荧光定量PCR测定鱼腥草素钠及其与红霉素联用、红霉素、万古霉素等对表皮葡萄球菌作用后不同时间段lrgB(受lytSR调控的基因B)的转录水平;显微镜下观察鱼腥草素钠及与红霉素联用对表皮葡萄球菌生物膜形态的影响情况。实验发现,鱼腥草素钠及与红霉素联用在作用伊始,对lrgB表达均有显著上调作用(P鱼腥草素钠与红霉素联用在作用6、12、24和48 h时,对lrgB表达亦有显著下调作用(P鱼腥草素钠与红霉素联用对表皮葡萄球菌生物膜的破坏作用。实验结果证实,鱼腥草素钠及与红霉素联用,在特定浓度下可调节lrgB的表达,因此具有抑制和破坏表皮葡萄球菌生物膜的形成,促进细菌溶解、死亡等作用的可能。

关键词：表皮葡萄球菌鱼腥草素钠红霉素程序性细胞死亡 lrgB基因生物膜

鱼腥草素钠对头孢他啶抗铜绿假单胞菌生物被膜的增强作用及抗菌协同作用

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时珍国医国药 2013年第10期24卷 2353-2355页

作者：朱玲玲孙振新程惠娟陈逸杰刘彬张昌峰朱小明安徽中医学院安徽合肥230038

目的研究鱼腥草素钠对头孢他啶抗铜绿假单胞菌生物被膜的增强作用及两药抗菌协同作用。方法微量倍比稀释法测定头孢他啶、鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC),棋盘稀释法测定两药协同抗菌作用,结晶紫染色法[1]测定单药及联合... 详细信息

目的研究鱼腥草素钠对头孢他啶抗铜绿假单胞菌生物被膜的增强作用及两药抗菌协同作用。方法微量倍比稀释法测定头孢他啶、鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC),棋盘稀释法测定两药协同抗菌作用,结晶紫染色法[1]测定单药及联合用药对铜绿假单胞菌生物被膜的最小抑膜浓度(SMIC),肉眼观察药物对铜绿假单胞菌菌毛介导蹭行运动的影响,扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)下观察药物对生物膜形态的影响。结果头孢他啶对铜绿假单胞菌的MIC 4μg/ml,鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌的MIC 512μg/ml,两药联合后,头孢他啶对铜绿假单胞菌的MIC 1μg/ml,鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌的MIC 64μg/ml,部分抑菌浓度指数(FIC,FIC=联合用药时甲药MIC/单独应用甲药时MIC+联合应用乙药时MIC/单独应用乙药时MIC)为0.375,表明两药有协同抗菌作用。头孢他啶对铜绿假单胞菌生物被膜SMIC50粘附期为16μg/ml,早期生物被膜阶段16μg/ml,成熟期生物被膜阶段32μg/ml,两药联合后铜绿假单胞菌生物被膜SMIC50粘附期为8μg/ml,早期为8μg/ml,成熟期为16μg/ml,鱼腥草素钠对头孢他啶抗铜绿假单胞菌生物被膜有增强作用。肉眼观察蹭行运动,协同组抑制效果最佳。电镜下,协同组抑制铜绿假单胞菌生物被膜效果最强。结论鱼腥草素钠能显著增强头孢他啶抗铜绿假单胞菌生物被膜的作用,且两药具有协同抗菌作用。

关键词：鱼腥草素钠头孢他啶铜绿假单胞菌生物膜

鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌生物被膜的清除作用

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中成药 2012年第12期34卷 2274-2277页

作者：程惠娟汪长中胡跃龙卢文波高磊李露天安徽中医学院安徽合肥230038

目的研究鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌早期生物被膜及成熟期生物被膜的清除作用。方法用96孔板建立体外铜绿假单胞菌生物被膜,给药24 h后MTT法检测生物被膜最低清除浓度(sessile minimal eradicating concentration,SMEC),扫描电镜下观察... 详细信息

目的研究鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌早期生物被膜及成熟期生物被膜的清除作用。方法用96孔板建立体外铜绿假单胞菌生物被膜,给药24 h后MTT法检测生物被膜最低清除浓度(sessile minimal eradicating concentration,SMEC),扫描电镜下观察药物对生物膜形态影响。结果鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌生物被膜的SMEC50,早期是15.6 mg/L,成熟期是250 mg/L,在早期生物被膜向成熟生物被膜发展过程中SMEC50均在250 mg/L,镜下观察250mg/L药物质量浓度能清除大部分的生物被膜,同时可使铜绿假单胞菌发生形态变异。结论鱼腥草素钠对早期及成熟期的生物被膜有一定的清除作用,对早期生物被膜的清除作用更强于成熟期生物被膜。

关键词：鱼腥草素钠铜绿假单胞菌生物被膜最小清除浓度

鱼腥草素钠联合阿奇霉素对金黄色葡萄球菌生物被膜早期黏附的影响

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中成药 2015年第8期37卷 1813-1817页

作者：濮燕屏程惠娟段强军黄卫锋安徽中医药大学安徽合肥230038

目的研究鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate,SH)联合阿奇霉素(azithromycin,AZM)对金黄色葡萄球菌生物被膜早期黏附的影响。方法微量倍比稀释法测定鱼腥草素钠和阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentratio... 详细信息

目的研究鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate,SH)联合阿奇霉素(azithromycin,AZM)对金黄色葡萄球菌生物被膜早期黏附的影响。方法微量倍比稀释法测定鱼腥草素钠和阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);连续稀释法行活菌计数,测定1 MIC鱼腥草素钠、1 MIC阿奇霉素单药组和1/2MIC鱼腥草素钠+1/2MIC阿奇霉素联合组对金黄色葡萄球菌生物被膜黏附的影响;结晶紫染色法评价不同浓度鱼腥草素钠和阿奇霉素单用及联合组对金黄色葡萄球菌早期生物被膜生长量的影响;扫描电镜(SEM)观察各药物组对金黄色葡萄球菌生物被膜形态的影响。结果鱼腥草素钠和阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的MIC分别为64、0.25 mg/L。鱼腥草素钠联合阿奇霉素联合用药组能增强阿奇霉素对生物被膜早期黏附的清除作用,尤以2MIC药物浓度联合组作用最强(与阴性对照组比较P鱼腥草素钠、阿奇霉素可减少金黄色葡萄球菌的早期黏附,抑制生物被膜的形成,联合用药后对金黄色葡萄球菌生物被膜的抑制具有协同作用,预期两药联合使用可以提高生物被膜相关感染的临床疗效。

关键词：金黄色葡萄球菌生物被膜鱼腥草素钠阿奇霉素黏附作用

鱼腥草素钠预防生物被膜引起的早期肺气虚证的研究

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时珍国医国药 2014年第11期25卷 2577-2579页

作者：黄卫锋段强军吴大强濮燕屏邵菁程惠娟安徽中医药大学中西医结合临床学院安徽合肥230038

目的研究鱼腥草素钠早期抗大鼠呼吸道生物被膜菌感染预防肺气虚证发生的作用。方法健康SD大鼠随机分为正常对照组、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)标准株(ATCC27853)和铜绿假单胞菌临床株(AH16)分别包括模型组、鱼腥草素钠(SH... 详细信息

目的研究鱼腥草素钠早期抗大鼠呼吸道生物被膜菌感染预防肺气虚证发生的作用。方法健康SD大鼠随机分为正常对照组、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)标准株(ATCC27853)和铜绿假单胞菌临床株(AH16)分别包括模型组、鱼腥草素钠(SH)治疗组和阿奇霉素(AZM)阳性对照组。将呼吸道生物被膜菌铜绿假单胞菌标准株(Pa)和临床株(AH16)以滴鼻法感染大鼠,并辅以寒冷、疲劳刺激引起大鼠呼吸道慢性感染,诱导大鼠肺气虚证的发生。治疗组与阳性对照组于感染成功后分别用鱼腥草素钠及阿奇霉素治疗。观察各组证候表现、血气变化,酶联免疫吸附法测定肺泡灌洗液中白细胞介素-8(IL-8)的含量变化,HE染色镜下观察肺支气管组织器官病理改变。结果模型组的大鼠证状符合肺气虚证的证候表现;药物治疗组肺气虚证状不明显;血气分析表明,模型组大鼠血液中动脉氧分压(Partial pressure of oxygen,PO2)均显著下降,与正常对照组比较,P0.05;模型组大鼠肺部灌洗液中的IL-8的含量均明显升高,与正常对照组比较,P鱼腥草素钠治疗组和阿奇霉素阳性大鼠肺部无病理变化出现。结论鱼腥草素钠早期干预铜绿假单胞菌生物被膜呼吸道感染的大鼠能预防肺气虚证的发生。

关键词：鱼腥草素钠铜绿假单胞菌生物被膜肺气虚证

鱼腥草素钠单用或联用氟康唑对白假丝酵母菌生物被膜作用及机制

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鱼腥草素钠单用或联用氟康唑对白假丝酵母菌生物被膜作用及机制

作者：崔艳艳安徽中医药大学

学位级别：硕士

目的探讨鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate,SH)对白假丝酵母菌生物被膜细胞的凋亡诱导作用,以及与氟康唑(fluconazole,FLC)联用抗白假丝酵母菌的作用及机制。方法1.采用微量液体稀释法检测MIC;利用DAPI染色观察耐药白假丝酵母菌生物被... 详细信息

目的探讨鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate,SH)对白假丝酵母菌生物被膜细胞的凋亡诱导作用,以及与氟康唑(fluconazole,FLC)联用抗白假丝酵母菌的作用及机制。方法1.采用微量液体稀释法检测MIC;利用DAPI染色观察耐药白假丝酵母菌生物被膜细胞核的形态;利用FITC-VAD-FMK染色观察耐药白假丝酵母菌生物被膜细胞Caspase活性;利用JC-1染色,用流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物被膜细胞内线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的变化;利用DCFH-DA染色用流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物被膜细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平的变化;利用AnnexinV-FITC/PI染色用流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物被膜细胞的凋亡率。2.运用肉汤(CLSI M27-A3)稀释法测定SH和氟康唑对白假丝酵母菌的最低抑菌浓度MIC90和SMIC90;采用惯用的棋盘法的分数抑制浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI))对SH和氟康唑的联合用药作用进行评价;使用扫描电子显微镜观察经SH和氟康唑联合作用的白假丝酵母菌生物被膜细胞的形态结构;通过qRT-PCR检测经过SH和氟康唑联用处理后的白假丝酵母菌中影响生物被膜成熟及基质的β-1,3-葡聚糖合酶相关基因的相对表达量变化。结果***对临床耐氟康唑*** 385的MIC是32μg/mL,FLC对其MIC>1024μg/mL;一定浓度的SH能使临床耐药白假丝酵母菌生物被膜细胞内ROS水平升高,MMP降低,凋亡率明显升高,metacaspase酶活性升高,细胞核出现碎裂和皱缩,凋亡率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。***与氟康唑联用表现为协同作用(FICI<0.13.5);扫描电子显微镜观察到SH与氟康唑协同处理的白假丝酵母菌的数量明显比对照组的数量少;当使用16μg/mL的SH处理菌株1601时,以上所有基因表达量在3.71倍-12.63倍的范围内显著增加(P<0.05);用8μg/mL的FLC处理后,与内参基因ACT1的表达量相比,基因ZAP1和基因ADH5的相对表达量保持不变;而基因IFD6和基因PHR1的相对表达量分别显著降低;基因BGL2,基因XOG1和基因FKS1的相对表达量升高。在联合用药(8μg/mL的FLC+16μg/mL的SH)时:(1)BGL2基因的相对表达量不受影响;(2)基因IFD6和基因PHR1的相对表达量降低;(3)基因ZAP1,基因ADH5,基因XOG1和基因FKS1的表达量在1.98倍-4.10倍的范围显著增加(P<0.05)。实验表明SH与氟康唑联合用药对生物被膜的抗菌作用与生物被膜成熟及基质的β-1,3-葡聚糖合酶相关基因表达有关。结论SH对抗白假丝酵母菌有很好的抑制作用。SH可导致白假丝酵母菌细胞核固缩和破碎、PS外翻、MMP下降等一系列凋亡征象;SH与氟康唑联合用药时能产生协同效应,通过影响与β-1,3-葡聚糖合酶有关基因的表达,从而抑制白假丝酵母菌生物被膜的形成达到抑菌作用。本课题的实验研究初步探索了SH的抗真菌作用机制,为将其开发拓展为新的抗白假丝酵母菌等真菌药物奠定了良好的基础。

关键词：鱼腥草素钠联合用药氟康唑白假丝酵母菌生物被膜凋亡

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鱼腥草素钠对椎间盘退变的治疗机制探索

鱼腥草素钠对椎间盘退变的治疗机制探索

作者：魏康华中科技大学

学位级别：硕士

目的:1.探索TLR4/P65通路在椎间盘退变中的机制,并研究鱼腥草素钠对TLR4/P65通路的作用;2.研究TLR4/P65通路对髓核细胞合成代谢与分解代谢的关系,探索鱼腥草素钠对髓核细胞合成代谢与分解代谢的影响。方法:1.通过CCK-8法,确定IL-1β和... 详细信息

目的:1.探索TLR4/P65通路在椎间盘退变中的机制,并研究鱼腥草素钠对TLR4/P65通路的作用;2.研究TLR4/P65通路对髓核细胞合成代谢与分解代谢的关系,探索鱼腥草素钠对髓核细胞合成代谢与分解代谢的影响。方法:1.通过CCK-8法,确定IL-1β和鱼腥草素钠对NP细胞的毒性。选取合适药物浓度对髓核细胞进行干预,运用RT-PCR、蛋白印迹技术（Western Blot）等技术检测MMPs、TLR4/P65通路相关蛋白、炎症相关因子、凋亡相关指标的变化;2.选用大鼠椎间盘针刺退变模型,腹腔注射鱼腥草素钠,共分三组（空白组,针刺组,给药组）进行干预。分别于两周和四周进行磁共振扫描,扫描完成后,去除软组织,组织固定脱钙后,石蜡切片进行HE染色、免疫组化染色。结果:1.鱼腥草素钠可以抑制IL-1β介导的髓核细胞的炎症反应,同时,鱼腥草素钠还可以抑制炎症状态下髓核细胞的分解代谢,促进其合成代谢。此外,鱼腥草素钠还可以抑制髓核细胞的凋亡;***成像提示,针刺之后,椎间盘信号明显降低,而相较于针刺组,在注射鱼腥草素钠之后,明显好转。同时HE切片表示,鱼腥草素钠可以保护椎间盘组织结构的完整性,抑制MMPs的生成。结论:鱼腥草素钠可以通过TLR4/P65通路抑制MMPs的表达,抑制炎症因子,抑制髓核细胞凋亡,有助于治疗椎间盘退变。

关键词：椎间盘退变鱼腥草素钠 TLR4/P65通路合成-分解代谢基质金属蛋白酶家族

鱼腥草素钠缓解LPS致小鼠急性肺损伤及其可能机制研究

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鱼腥草素钠缓解LPS致小鼠急性肺损伤及其可能机制研究

作者：杨锴中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

研究目的脓毒症（Sepsis）导致的急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）是一种影响肺功能的常见并发症,主要临床表现为肺通气换气功能障碍和持续性低氧血症。目前,脓毒症引起的急性肺损伤的发病机制尚不清楚,可能的机制包括两个方面,其... 详细信息

研究目的脓毒症（Sepsis）导致的急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）是一种影响肺功能的常见并发症,主要临床表现为肺通气换气功能障碍和持续性低氧血症。目前,脓毒症引起的急性肺损伤的发病机制尚不清楚,可能的机制包括两个方面,其一是肺血管屏障破坏,肺泡通透性增加,同时大量炎症细胞浸润,导致肺通气换气功能严重受损;其二是急性肺损伤的发生过程中,肺部产生大量的超氧阴离子（Superoxide anion）,肺组织的氧化应激（Oxidative stress,OS）反应增加,正常肺泡和线粒体的结构功能遭到破坏,从而影响正常的肺功能。我国自古就有中草药治疗严重肺部感染的记载,本研究旨在探索可以缓解脓毒症引起的急性肺损伤的传统中草药及其具体作用机制。经查阅相关文献我们发现,鱼腥草素钠（Sodium Houttuyfonate,SH）是我国中医学记载的草本植物鱼腥草（Herba Houttuyniae）中分离出的有效成分,具有显著的抗炎和抗纤维化作用。之前的研究显示,鱼腥草素钠可以治疗吸烟引起的慢性阻塞性肺疾病、急性支气管炎和宫颈炎,但其具体作用机制目前尚不清楚,且鱼腥草素钠是否对脓毒症急性肺损伤有保护作用目前也不清楚。因此,本研究旨在探究鱼腥草素钠在小鼠LPS导致的急性肺损伤中对于炎症反应和氧化应激的作用及其可能的机制。研究方法1.构建ALI小鼠模型本实验选用体重相近的6-8周C57BL/6雄性小鼠,每组6只,随机分成对照组（Sham组）,模型组（LPS组）,溶剂对照组（LPS+DMSO组）和治疗组（LPS+SH组）。每只小鼠均在完全麻醉后暴露气管,Sham组小鼠气管不进行注射,LPS组、LPS+DMSO组和LPS+SH组气管内注射LPS（3 mg稀释到15 ml,200 ug/ml）0.5 m L构建小鼠ALI模型,LPS+SH组腹腔内注射鱼腥草素钠溶液2 m L（20 mg/kg,溶于10%DMSO,鱼腥草素钠微溶于水,易溶于DMSO）,LPS+DMSO组腹腔内注射2 m L10%二甲基亚砜（Dimethyl Sulfoxide,DMSO）,Sham组和LPS组注射2 m L生理盐水作为对照。2.探究鱼腥草素钠对急性肺损伤炎症反应的作用ALI建模6小时后进行肺泡灌洗,取肺泡灌洗液测定蛋白水平、促炎因子白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）,白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）,肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）和抑炎因子细胞白介素-10（Interleukin-10,IL-10）水平,测定趋化因子5（Chemokines 5,CCL5）的表达水平,根据肺泡灌洗液中炎症因子水平确定肺损伤程度。取肺组织做苏木精和伊红染色（Hematoxylin and Eosin,HE）切片观察肺组织的损伤程度。肺组织匀浆后蛋白印迹技术（Western blot,WB）测定p38,细胞外调节蛋白激酶（Extracellular regulated protein kinases,ERK）,c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）和p65的磷酸化水平。3.探究鱼腥草素钠对急性肺损伤氧化应激的作用ALI建模6小时后进行肺泡灌洗,收集肺泡灌洗液测定髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）的表达水平;取肺组织匀浆后测定丙二醛（Malondialdehyde,MDA）和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）的表达水平,观察肺组织发生氧化应激的情况。取肺组织做MPO染色切片观察肺组织氧化应激的损伤程度。研究结果1.鱼腥草素钠缓解LPS诱导的急性肺损伤的炎症反应LPS+SH组较LPS组相比,肺泡灌洗液蛋白水平、促炎因子IL-6,IL-1β,TNF-α水平和趋化因子CCL5表达下降,肺湿干比（Wet to Dry ratio,W/D）显著降低,而抑炎因子IL-10水平明显上升（n=6,P＜0.05）;HE病理切片和肺组织损伤评分,LPS+SH组较LPS组肺组织损伤程度减轻（n=6,P＜0.05）;WB结果显示,与LPS组比较,LPS+SH组的p38,ERK,JNK和p65的磷酸化水平降低（n=6,P＜0.05）。2.鱼腥草素钠缓解LPS诱导的急性肺损伤的氧化应激肺组织匀浆液测定MDA和SOD水平,结果显示,与LPS组比较,LPS+SH组MDA水平降低,而SOD水平升高（n=6,P＜0.05）。LPS+SH组较LPS组相比,肺组织MPO染色切片中性粒细胞浸润程度明显减轻。结论鱼腥草素钠可以有效缓解急性肺损伤过程中肺泡结构破坏和肺组织炎症因子的释放,减少肺泡灌洗中蛋白的渗出,减轻肺泡

关键词：脓毒症急性肺损伤鱼腥草素钠氧化应激促分裂原活化蛋白激酶核因子κB

鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜及磷脂酶体外抑制作用的研究

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鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜及磷脂酶体外抑制作用的研究

作者：莫文静佳木斯大学

学位级别：硕士

目的:验证鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜的体外抑制作用，并初步探讨其抗菌作用是通过对毒力因子磷脂酶转录表达的影响或干扰而完成的。方法:在体外，建立白色念珠菌生物膜模型，采用MTT法检测鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜的抑菌率，... 详细信息

目的:验证鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜的体外抑制作用，并初步探讨其抗菌作用是通过对毒力因子磷脂酶转录表达的影响或干扰而完成的。方法:在体外，建立白色念珠菌生物膜模型，采用MTT法检测鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜的抑菌率，并利用激光共聚焦显微镜(CLSM)察看其对白色念珠菌生物膜形成的影响，然后用RT-PCR技术检测白色念珠菌毒力因子PLB1、PLB2和PLC1的表达就鱼腥草素钠作用后的变化。结果:随鱼腥草素钠药液浓度的增加，其对白色念珠菌生物膜的抑制效果也有所增加。RT-PCR结果显示，在药液浓度梯度增加时，毒力因子PLB1、PLB2的转录表达水平反而下降，当药液浓度达到240μg/mL时，mRNA的表达水平完全被抑制，而药液浓度的变化对PLC1的表达影响不大。结论:鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜的生长活性有一定的抑制作用,并对本实验所选毒力因子PLB1、PLB2的转录表达产生了明显抑制作用。

关键词：鱼腥草素钠白色念珠菌磷脂酶 RT-PCR