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高龄妊娠对子代大鼠海马甲基化水平的影响

解放军医学杂志 2021年第5期46卷 456-461页

作者：潘亚男韩慰杨静程莉蒋莉重庆医科大学附属儿童医院神经内科/国家儿童健康与疾病临床医学研究中心/儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆400014 认知发育与学习记忆障碍转化医学重庆市重点实验室重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所重庆400014

目的探讨高龄妊娠对子代大鼠海马甲基化水平的影响。方法将12月龄及3月龄SD雌性大鼠分别与3月龄SD雄性大鼠合笼,将其子代分为高龄子代组(AMA组)和适龄子代组(对照组),留取子代生后第7、14、28天的大脑及海马标本。实时荧光定量PCR检测... 详细信息

目的探讨高龄妊娠对子代大鼠海马甲基化水平的影响。方法将12月龄及3月龄SD雌性大鼠分别与3月龄SD雄性大鼠合笼,将其子代分为高龄子代组(AMA组)和适龄子代组(对照组),留取子代生后第7、14、28天的大脑及海马标本。实时荧光定量PCR检测两组子代海马DNA甲基转移酶(Dnmt)1、Dnmt3A、Dnmt3B mRNA表达水平,Western blotting检测两组子代海马Dnmt1、Dnmt3A、Dnmt3B蛋白表达水平,免疫荧光及ELISA法检测两组子代海马5-甲基胞嘧啶(5-mC)的定位及表达水平。结果实时荧光定量PCR检测结果显示,AMA组生后第28天海马Dnmt1 mRNA表达水平明显低于对照组(P0.05)。结论高龄妊娠可导致子代海马Dnmts表达紊乱,海马整体甲基化水平升高,可能是高龄妊娠子代脑功能障碍的潜在机制之一。

关键词：高龄妊娠子代大鼠海马 DNA甲基化

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高龄妊娠的产前咨询

中国实用妇科与产科杂志 2020年第9期36卷 811-814页

作者：蒋宇林刘俊涛中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院产科中心北京100730

高龄妊娠是指孕妇妊娠年龄≥35岁,近年来其发生率不断增高,已经逐步成为目前我国围产医学关注的热点问题。针对高龄妊娠中的生殖遗传问题,需特别关注女性的生育力下降的情况,其自然流产发生率升高,胎儿染色体异常和胎儿结构畸形的发生... 详细信息

高龄妊娠是指孕妇妊娠年龄≥35岁,近年来其发生率不断增高,已经逐步成为目前我国围产医学关注的热点问题。针对高龄妊娠中的生殖遗传问题,需特别关注女性的生育力下降的情况,其自然流产发生率升高,胎儿染色体异常和胎儿结构畸形的发生率增加,这就更加强调了产前筛查和诊断的重要性,以及需要关注常常与高龄妊娠相伴随的男性高龄生育的问题。做好上述问题的咨询和管理是完成高质量高龄妊娠围产保健的关键。

关键词：高龄妊娠产前遗传咨询产前筛查产前诊断

高龄妊娠对子代大鼠前额叶皮层神经干细胞增殖及突触可塑性的影响

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生殖医学杂志 2024年第5期33卷 635-640页

作者：田肖风赵鑫曾宪旭刘素娜吕书博石瑛石翠格郑州大学第三附属医院郑州450052 国家卫生健康委科学技术研究所北京100081

目的探究高龄妊娠对子代大鼠前额叶皮层神经干细胞增殖及突触可塑性的影响。方法选择3月龄与12月龄SD雌性大鼠,均与3月龄SD雄性大鼠合笼。子代鼠出生后,将其分为适龄子代组(Con组)和高龄子代组(AMA组)。取出生后1 d的子代大鼠脑组织,利... 详细信息

目的探究高龄妊娠对子代大鼠前额叶皮层神经干细胞增殖及突触可塑性的影响。方法选择3月龄与12月龄SD雌性大鼠,均与3月龄SD雄性大鼠合笼。子代鼠出生后,将其分为适龄子代组(Con组)和高龄子代组(AMA组)。取出生后1 d的子代大鼠脑组织,利用HE染色观察前额叶皮层神经元的形态变化;利用qRT-PCR和Western blot方法分别检测前额叶皮层中G蛋白信号调节蛋白2(RGS2)、巢蛋白(Nestin)、突触后致密区蛋白95(PSD95)、脑源性神经营养因子(BDNF)和突触素(SYN)的mRNA及其蛋白质表达变化情况。结果HE染色结果发现,与Con组比较,AMA组前额叶皮层的神经元数目减少,部分神经元发生变性,出现胞体肿胀、空泡化现象。qRT-PCR和Western blot结果发现,与Con组比较,AMA组Nestin、RGS2、PSD95、BDNF、SYN mRNA及蛋白质相对表达水平均显著下降(P高龄孕鼠子代前额叶皮层的神经干细胞增殖能力减弱,突触可塑性能力降低,可能是造成子代脑发育障碍和认知功能下降的原因之一。

关键词：高龄妊娠子代前额叶皮层突触可塑性神经干细胞

高龄妊娠对子代大鼠海马甲基化水平影响的研究

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高龄妊娠对子代大鼠海马甲基化水平影响的研究

作者：潘亚男重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨高龄妊娠对子代海马DNA甲基转移酶及整体甲基化水平的影响。方法:将3月龄与12月龄的雌性SD大鼠分别与3月龄雄性SD大鼠合笼,取其子代做为研究对象,分别为适龄子代组（Ctl）和高龄子代组（AMA）。在生后第7、14、28天分别留取子... 详细信息

目的:探讨高龄妊娠对子代海马DNA甲基转移酶及整体甲基化水平的影响。方法:将3月龄与12月龄的雌性SD大鼠分别与3月龄雄性SD大鼠合笼,取其子代做为研究对象,分别为适龄子代组（Ctl）和高龄子代组（AMA）。在生后第7、14、28天分别留取子鼠大脑及海马标本。在每个时间点上,分别进行如下研究:（1）两组分别随机选择8只子鼠,用Q-PCR、Western Blot方法定量检测海马Dnmt1、Dnmt3A、Dnmt3B mRNA及蛋白表达水平,研究高龄妊娠子代海马甲基转移酶表达的改变。（2）两组随机选择8只子鼠,用免疫荧光方法检测海马5-mC定位定量表达;5只子鼠用ELISA方法检测海马5-mC定量表达,研究高龄妊娠子代海马DNA甲基化水平的变化。（3）两组分别选择3只子鼠送公司检测Bdnf基因启动子区域甲基化水平的变化。结果:（1）Q-PCR检测发现生后第7、14天,两组间Dnmt1、Dnmt3A、Dnmt3B mRNA表达均无统计学差异。生后第28天,AMA组海马Dnmt1、Dnmt3A、Dnmt3B mRNA水平均低于Ctl组,其中Dnmt1 mRNA在两组间的差异具有统计学意义（0.82±0.16 vs1.11±0.31,t=2.362,P=0.0332）。（2）Western Blot检测发现生后第7天,AMA组海马Dnmt1、Dnmt3A、Dnmt3B蛋白表达均高于Ctl组,其中Dnmt3A蛋白在两组间的差异具有统计学意义（1.02±0.13 vs 0.85±0.13,t=2.575,P=0.0220）。生后第14天,AMA组海马Dnmt1、Dnmt3A、Dnmt3B蛋白表达较Ctl组下降,两组间差异无统计学意义（t=0.925-1.959,P＞0.05）。生后第28天,AMA组海马Dnmt1、Dnmt3A、Dnmt3B蛋白表达较Ctl组下降,其中Dnmt1和Dnmt3A蛋白在两组间的差异具有统计学意义（0.34±0.10 vs 0.43±0.05,t=2.299,P=0.0374;0.66±0.20 vs 0.91±0.22,t=2.449,P=0.0281）。（3）免疫荧光检测发现5-mC表达于大鼠海马细胞核内,在DG、CA1、CA3区均有表达。DG区细胞排列致密,CA3区细胞排列稀疏,DG区5-mC表达明显强于CA3区。生后第7、14、28天,AMA组5-mC荧光强度高于Ctl组。尤其是在生后第7、14天,两组间差异具有统计学意义（906.42±37.97vs 839.36±59.60,t=2.684,P=0.0178;951.92±41.53 vs 906.93±37.88,t=2.263,P=0.0400）。（4）ELISA检测发现生后第7、14、28天AMA组5-mC表达较Ctl组升高,但两组间差异无统计学意义（t=0.985-2.157,P＞0.05）。（5）测序结果显示生后第7天,AMA组海马Bdnf基因启动子Ⅰ区42位点甲基化水平明显低于Ctl组（t=-3.331,P=0.0313）;生后第14天,AMA组和Ctl组Bdnf基因启动子区域甲基化水平无明显差异。生后第28天,AMA组海马Bdnf基因启动子Ⅲ区74位点甲基化水平明显低于Ctl组（t=-3.607,P=0.0301）。结论:高龄妊娠会导致子代大鼠海马DNA甲基转移酶表达异常,海马整体甲基化水平升高,海马Bdnf基因启动子区域部分位点甲基化水平下降。

关键词：高龄妊娠 DNA甲基转移酶 DNA甲基化海马 BDNF

高龄妊娠发生妊娠高血压疾病的危险因素Logistic分析

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现代诊断与治疗 2023年第16期34卷 2467-2469页

作者：邱丽花肖旺华会昌县妇幼保健院江西会昌342600

目的探讨高龄妊娠发生妊娠高血压疾病(Hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)的危险因素。方法选取2019年11月至2022年11月在本院进行检查的92例高龄妊娠者,调查高龄妊娠者HDCP发生情况,并进行单因素与Logistic多因素回... 详细信息

目的探讨高龄妊娠发生妊娠高血压疾病(Hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)的危险因素。方法选取2019年11月至2022年11月在本院进行检查的92例高龄妊娠者,调查高龄妊娠者HDCP发生情况,并进行单因素与Logistic多因素回归分析。结果92例高龄妊娠者中,35例发生HDCP,57例未发生HDCP,发生率为38.04%(35/92);HDCP组年龄41~45岁、孕前体质量指数(Body mass index,BMI)≥28 kg/m^(2)、文化程度初中及以下、初产妇、有高血压家族史、未规范产检、未服用叶酸、胰岛素抵抗、有焦虑情绪、合并妊娠糖尿病(Gestational diabetes mellitus,GDM)占比与非HDCP组相比更高,差异有统计学意义(P高龄妊娠者HDCP发生的独立危险因素(P高龄妊娠发生HDCP的风险较高,其与孕前BMI、高血压家族史、产次、未规范产检、未服用叶酸、胰岛素抵抗、有焦虑情绪、合并GDM等有关,需进行针对性干预,预防HDCP发生。

关键词：高龄妊娠妊娠高血压疾病危险因素

胎儿超声软指标及高龄妊娠与染色体异常的相关性研究

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中国超声医学杂志 2022年第1期38卷 73-76页

作者：王海蕊李炎菲海夏艳赵媛叶彩玲谭芳纪学芹宁夏医科大学宁夏妇幼保健院超声科

目的探讨胎儿超声软指标及高龄妊娠与染色体异常的相关性,为产前筛查、诊断及遗传咨询提供参考依据。方法在我院产前诊断中心进行超声筛查,发现胎儿超声软指标的孕妇共3 646例,其于进行染色体核型分析的单胎孕妇共1 954例作为研究对象,... 详细信息

目的探讨胎儿超声软指标及高龄妊娠与染色体异常的相关性,为产前筛查、诊断及遗传咨询提供参考依据。方法在我院产前诊断中心进行超声筛查,发现胎儿超声软指标的孕妇共3 646例,其于进行染色体核型分析的单胎孕妇共1 954例作为研究对象,采集孕妇年龄、末次月经、孕周、胎次、孕次及超声软指标结果,随访胎儿染色体核型分析结果。以胎儿超声软指标类型、孕妇年龄及孕产次为自变量,以胎儿染色体核型分析结果是否异常为因变量,使用单因素Logistic回归进行自变量的筛选,P高龄孕妇发生染色体异常的风险最大,超声软指标中发生胎儿染色体异常的风险度按照大小依次是:心室强回声斑块、肾盂扩张、脉络丛囊肿。结论通过胎儿系统超声筛查发现与遗传学异常相关的阳性指标,提示临床行染色体检查并随访至妊娠结局,为孕妇进行孕期健康管理及再次妊娠产前咨询提供参考依据,减少出生缺陷的发生。

关键词：超声软指标高龄妊娠胎儿超声检查染色体异常产前诊断

高龄妊娠对子代生长和海马神经干细胞发育的影响

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高龄妊娠对子代生长和海马神经干细胞发育的影响

作者：杨静重庆医科大学

学位级别：硕士

第一部分高龄妊娠对子代生长发育的影响目的:探讨高龄妊娠对子代一般生长发育的影响方法:将3月龄（n=10）与12月龄（n=10）的雌性SD大鼠分别与3月龄雄鼠随机合笼,以孕鼠每胎所生子鼠为研究对象,分别为适龄子代组（Ct1）和高龄子代组（AM... 详细信息

第一部分高龄妊娠对子代生长发育的影响目的:探讨高龄妊娠对子代一般生长发育的影响方法:将3月龄（n=10）与12月龄（n=10）的雌性SD大鼠分别与3月龄雄鼠随机合笼,以孕鼠每胎所生子鼠为研究对象,分别为适龄子代组（Ct1）和高龄子代组（AMA）。记录不同年龄孕鼠受孕时间、孕鼠每胎的产子数量、子鼠性别比例、子鼠的死亡数目、子鼠体重、子鼠睁眼状态,并观察子鼠有无发育畸形的情况。结果:（1）与适龄孕鼠相比,高龄孕鼠受孕时间明显延长（30.63±1.558天vs 23.80±0.6464天,t=4.370,P=0.0005）;（2）高龄孕鼠与适龄孕鼠相比,每胎产子数量分别为11.55±0.9664只和11.55±1.337只（t=0,P=1）,两组间差异无统计学意义;（3）AMA组雄性子鼠的数量较Ctl组有增多（5.909±0.8029只vs 4.636±0.7419只,t=1.164,P=0.2580）,但差异无统计学意义;（4）AMA组子鼠死亡数量较 Ctl 组有增加（0.5455±0.3659 只 vs 0.3636±0.1521 只,t=0.4588,P=0.6513）,但两组间差异无统计学意义;（5）在生后第4、5、6、7、14天,AMA组的体重明显高于Ctl组（t值在3.446-6.553,P值均小于0.001）;（6）与Ctl组相比,AMA组睁眼状况延迟,在生后第14-15天最明显（睁眼状态评分分别为1.118±0.2369 分 vs 1.788±0.06908 分,t=3.601,P=0.0007;1.147±0.2339分 vs 1.988±0.0125 分,t=5.535,P＜0.0001）。（7）2 只高龄子代鼠出现发育畸形,分别为肢体缺如、脑发育畸形。结论:除前期发现高龄妊娠影响子代的神经精神发育以外,高龄妊娠还导致雌鼠受孕时间明显延长,影响子鼠一般生长发育情况,包括生后早期子鼠体重增加,睁眼状况延迟。同时,可能出现子鼠发育畸形、死亡增加的风险。第二部分高龄妊娠对子代海马神经干细胞发育的影响目的:在前期发现高龄妊娠影响子代鼠神经精神发育的基础上,探讨高龄妊娠对子鼠海马神经干细胞增殖、迁移、分化的影响。方法:将3月龄（n=10）与12月龄（n=10）的雌性SD大鼠分别与3月龄雄鼠（n=20）合笼,以其子鼠为研究对象,分别为适龄子代组（Ctl）和高龄子代组（AMA）。两组均随机选取40只子代大鼠,分别在生后第7、14、28天分批处死动物,采集海马组织标本。用免疫荧光、Western Blot方法定位及定量检测海马Dcx、Nestin、PSA-NCAM、NeuN、GFAP蛋白表达水平,研究高龄妊娠子代神经干细胞增殖、迁移、分化的变化。结果:（1）Western Blot发现生后7天AMA组海马Dcx蛋白的表达明显低于Ctl 组（0.79±0.09 vs 1.32±0.19,t=2.457,P=0.0276）;免疫荧光显示,AMA 组海马 DG 区 Dcx 的表达明显低于Ctl 组（31.52±1.36 vs 37.74 ±0.91,t=3.806,P=0.0019）,而在海马CA1区、CA3区的表达在两组间均无统计学差异（分别为 33.99±0.64 vs 35.01±0.54,t=1.219,P=0.2429;38.22±1.45 vs 38.35±1.84,t=0.05684,P=0.9555）。（2）Western Blot 检测两组子鼠生后 7 天海马Nestin蛋白的表达,高龄组子鼠海马Nestin的表达有减少（0.70±0.09 vs 0.87±0.15,t=0.9672,P=0.3498）,但差异无统计学意义;而免疫荧光发现,在海马DG区AMA组Nestin的表达明显低于Ctl组（25.67±2.46 vs 34.89 ±2.59,t=2.581,P=0.0218）。（3）免疫荧光发现生后 14 天 AMA 组 DG 区 PSA-NCAM 的表达明显低于 Ctl 组（26.36±1.31vs 33.42±1.52,t=3.523,P=0.0034）,而在CA1区和CA3区表达的差异均无统计学意义（分别为37.26±1.36 vs 35.57±1.39,t=0.8688,P=0.3996;35.82±1.99 vs 35.34±2.73,t=0.1424,P=0.8888）。（4）Western Blot检测生后28天AMA组海马GFAP的表达有减少（1.03±0.14 vs 1.34±0.22,t=1.166,P=0.2631）,但两组间差异无统计学意义,进一步通过免疫荧光发现AMA组GFAP的表达在CA1区、CA3区、DG区均低于Ctl组（24.27±0.98 vs 27.71±0.85,t=2.643,P=0.0193;26.14±1.14vs29.5±0.79,t=2.446,P=0.028

关键词：高龄妊娠生长发育子鼠海马神经干细胞大鼠

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高龄妊娠和胎儿心脏异常的染色体微阵列分析

高龄妊娠和胎儿心脏异常的染色体微阵列分析

作者：朱小燕宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的应用染色体微阵列分析技术(chromosomal microarray analysis,CMA)和染色体核型分析技术检测羊水染色体非整倍体及拷贝数变异(copy number variation,CNV),分析高龄妊娠和胎儿心脏异常与胎儿染色体异常的相关性,评估CMA在产前诊断... 详细信息

目的应用染色体微阵列分析技术(chromosomal microarray analysis,CMA)和染色体核型分析技术检测羊水染色体非整倍体及拷贝数变异(copy number variation,CNV),分析高龄妊娠和胎儿心脏异常与胎儿染色体异常的相关性,评估CMA在产前诊断中的应用价值。方法统计2017年1月至2019年1月于宁夏医科大学总医院产前诊断中心行侵入性产前诊断的单胎孕妇344例,孕周为188周(平均孕周21+1周),年龄为190岁(平均年龄31岁),同时应用染色体核型分析技术及CMA完成羊水染色体非整倍体及CNV的检测,并对检测结果进行分析。结果1.344例羊水标本均检测成功。染色体核型分析技术、CMA的胎儿染色体异常检出率分别为10.75%(37/344)、17.73%(61/344),两种方法比较,P高龄妊娠组(年龄高龄妊娠A组(年龄359岁)和高龄妊娠B组(年龄≥40岁),三组胎儿染色体非整倍体检出率比较,非高龄妊娠组(2.14%)与高龄妊娠B组(10.00%)差异有统计学意义(P0.0125,差异无统计学意义;三组胎儿染色体CNV检出率比较,P>0.05,差异无统计学意义。3.丈夫高龄组(年龄≥40岁)与非高龄组(年龄0.05,差异无统计学意义。4.胎儿心脏结构异常(28.07%)与胎儿无心脏结构异常(15.68%)两组胎儿染色体异常检出率比较,P0.0125,差异无统计学意义;胎儿心脏结构异常染色体异常检出率为28.07%(16/57),其中非整倍体3例(5.26%),包括2例21三体、1例18三体,致病性拷贝数变异(pathogenic CNV,pCNV)7例(12.28%),包括2例22q11.2缺失综合征、2例同时合并缺失重复、2例缺失和1例重复,致病性不明6例(10.53%);5.胎儿单纯心室强光斑与胎儿心室强光斑合并其他结构异常的胎儿染色体异常检出率比较,P妊娠年龄增加,尤其是妊娠年龄超过40岁时,胎儿发生染色体非整倍体的几率增大。3.胎儿心脏结构异常合并心外结构异常和胎儿心室强光斑合并其他结构异常时发生染色体异常的几率明显增高。

关键词：高龄妊娠胎儿心脏结构异常胎儿心室强光斑染色体微阵列分析技术

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高龄妊娠≠高危

家庭医药（快乐养生） 2023年第5期 58-59页

作者：刘玉红上海中医药大学附属第七人民医院妇产科

随着女性对自我认知的提升以及对事业的关注,加之国家全面二胎政策的开放,女性生育年龄延后的趋势越来越常态化,高龄产妇逐渐成为一支强大的“生力军”。有调查数据显示,目前符合全面“二孩”政策夫妇约9000万对,其中35岁以上占60%,40... 详细信息

随着女性对自我认知的提升以及对事业的关注,加之国家全面二胎政策的开放,女性生育年龄延后的趋势越来越常态化,高龄产妇逐渐成为一支强大的“生力军”。有调查数据显示,目前符合全面“二孩”政策夫妇约9000万对,其中35岁以上占60%,40岁以上占50%。

关键词：高龄产妇高龄妊娠自我认知全面二胎政策数据显示常态化生育年龄高危