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马蔺幼胚高效再生体系的建立

植物研究 2023年第3期43卷 333-339页

作者：安文杰王银杰刘清泉杨永恒张婷范少茹张永侠原海燕山西林业职业技术学院太原030009 江苏省中国科学院植物研究所南京210014

以马蔺(Iris lacteal var.chinensis)幼胚为外植体,探究不同时期幼胚及不同植物生长调节剂对愈伤组织、体胚和不定芽诱导的影响。结果表明:在本试验条件下最佳取材时间为授粉后35~45 d,此时,幼胚发育完全但胚乳尚未完全硬化,幼胚剥取容... 详细信息

以马蔺(Iris lacteal var.chinensis)幼胚为外植体,探究不同时期幼胚及不同植物生长调节剂对愈伤组织、体胚和不定芽诱导的影响。结果表明:在本试验条件下最佳取材时间为授粉后35~45 d,此时,幼胚发育完全但胚乳尚未完全硬化,幼胚剥取容易;愈伤组织最适诱导培养基为MS+1.0 mg·L^(-1)2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.2 mg·L^(-1)6-苄氨基嘌呤(6-BA),诱导率为83.33%;最适体胚诱导培养基为MS+0.25 mg·L^(-1)2,4-D+0.05 mg·L^(-1)6-BA,诱导率71.67%;最佳不定芽诱导和增殖培养基为MS+1.0 mg·L^(-1)噻苯隆(TDZ)+0.2 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA),诱导率为78.33%,增殖系数为3.65;在添加0.1 mg·L^(-1)NAA的MS培养基上诱导生根,4周后的生根率达95%以上;生根培养4周的植株清洗掉根部培养基后,移栽至经高温消毒的蛭石中培养,成活率达95%以上。该研究建立了高效的马蔺再生体系,可为马蔺的遗传改良和基因功能研究奠定基础。

关键词：马蔺幼胚离体培养愈伤诱导高效再生

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欧李高效再生体系的建立

中国农学通报 2022年第13期38卷 60-65页

作者：杨文静王占军甘晓燕何建龙张丽宁夏农林科学院农业生物技术研究中心银川750002 宁夏农林科学院荒漠化治理研究所银川750002

研究旨在利用植物组织培养技术,筛选出引进资源品种(系)SN6、SN7和自育品系YC24的最适培养基,确定3个欧李品种的再生体系,为欧李高效快速规模化繁殖提供技术性支持。以3个欧李品种(系)为材料,对外植体的消毒方式、分化、增殖和生根培养... 详细信息

研究旨在利用植物组织培养技术,筛选出引进资源品种(系)SN6、SN7和自育品系YC24的最适培养基,确定3个欧李品种的再生体系,为欧李高效快速规模化繁殖提供技术性支持。以3个欧李品种(系)为材料,对外植体的消毒方式、分化、增殖和生根培养阶段的最适培养基和激素配比进行研究。结果表明,头孢霉素浓度为100 mg/L时,外植体存活率最高、污染率最低;SN6、SN7的最适分化培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L ZT+0.05 mg/L IBA,YC24的最适分化培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT+0.05 mg/L IBA;SN6的最适生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA+1.0 g/L活性炭,SN7、YC24的最适壮苗生根一步培养基为1/2MS+0.05 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA。本研究建立了欧李嫩枝快速繁殖体系,可为优良种质的后续练苗移栽、扩大培养和推广应用提供参考。

关键词：欧李内生菌分化生根矮壮素高效再生

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朱顶红无菌苗叶片高效再生体系

园艺学报 2020年第2期47卷 301-309页

作者：王春夏张梦迪王锦霞王志平孙红梅沈阳农业大学园艺学院设施园艺省部共建教育部重点实验室北方园艺设施设计与应用技术国家地方联合工程研究中心沈阳110866

以朱顶红(Hippeastrum vittatum)叶片为外植体进行离体培养,具有取材方便、试材充足、成本低等优势,但叶片诱导再生率极低,是朱顶红离体培养的一大难题。本试验中分别以‘花孔雀’和‘黑天鹅’朱顶红无菌苗叶片为外植体,探究了不同植物... 详细信息

以朱顶红(Hippeastrum vittatum)叶片为外植体进行离体培养,具有取材方便、试材充足、成本低等优势,但叶片诱导再生率极低,是朱顶红离体培养的一大难题。本试验中分别以‘花孔雀’和‘黑天鹅’朱顶红无菌苗叶片为外植体,探究了不同植物生长调节剂和不同取材部位对不定芽诱导和继代增殖的影响。结果表明:最佳外植体为MS培养基中培养10 d形成的幼嫩叶片基部(0.5 cm),在光照16h·d-1(光照强度36μmol·m-2·s-1)下,不定芽诱导的最适培养基为MS+2 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 NAA+2 mg·L-1 TDZ,两个品种的不定芽均以间接途径发生,其中‘花孔雀’在培养40 d后形成愈伤组织,55 d形成不定芽,诱导率可达69.44%;‘黑天鹅’在培养45d后形成愈伤组织,65d形成不定芽,诱导率达到66.67%;最适体细胞胚诱导培养基为MS+2 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 PIC,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的诱导率分别达到66.67%和63.89%;最佳不定芽增殖培养基为MS+2 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 NAA+1mg·L-1 TDZ,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的增殖系数分别达到4.67和3.46;在不添加植物生长调节剂的MS培养基中进行生根培养,30 d后两个品种的生根率均达到100%;将生根培养30 d的小植株转移至室温条件下放置3 d,摘去封口膜再驯化3 d后,移栽至经高温消毒的草炭︰蛭石(体积比)为1︰1的基质中,成活率达到100%。

关键词：朱顶红离体培养高效再生无菌苗叶片

基于己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶共表达的辅酶NADPH高效再生

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微生物学通报 2016年第12期43卷 2619-2626页

作者：郑雅楠陈少云刘文洪郭莹浙江中医药大学生命科学学院浙江杭州310053

【目的】构建己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的大肠杆菌共表达体系,以葡萄糖为底物实现辅酶NADPH的高效再生。【方法】通过分子生物学方法,克隆己糖激酶HKgs、HKpp基因,并于Escherichia coli BL21(DE3)中表达,再将己糖激酶HKgs、HKpp分... 详细信息

【目的】构建己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的大肠杆菌共表达体系,以葡萄糖为底物实现辅酶NADPH的高效再生。【方法】通过分子生物学方法,克隆己糖激酶HKgs、HKpp基因,并于Escherichia coli BL21(DE3)中表达,再将己糖激酶HKgs、HKpp分别与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶Gpd PP共表达,实现NADPH的原位再生。比较两个共表达工程菌的辅酶再生效果,并针对催化活力较高的工程菌BL21(HKgs+Gpd PP)进行表达条件优化。【结果】NADPH再生活力达到856 U/L。该辅酶再生体系与醇脱氢酶Adh R联合催化,使不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯的催化活力提高至原始值的2.5倍。【结论】通过己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在大肠杆菌中的共表达,构建了一个新的NADPH高效再生体系,并用于醇脱氢酶催化的不对称还原反应。

关键词：共表达己糖激酶葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 NADPH 高效再生

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百合试管小鳞茎高效再生体系的研究

江苏农业科学 2012年第9期40卷 58-60页

作者：屈云慧吴丽芳杨春梅汪国鲜吴伯志云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201 云南花卉育种重点实验室云南昆明650205 云南省农业科学院云南昆明650205

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+5 500 mg/L琼脂,光照强度1 500～2 000 lx。芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+90 g/L蔗糖+300 mg/L... 详细信息

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+5 500 mg/L琼脂,光照强度1 500～2 000 lx。芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+90 g/L蔗糖+300 mg/L活性炭+5 500 mg/L琼脂,黑暗条件。提高培养基中的糖浓度可以提高百合再生小鳞茎的重量;在培养基中添加活性炭可提高再生小鳞茎形态的正常率。

关键词：百合试管小鳞茎高效再生

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魔芋高效再生体系的建立与优化

热带作物学报 2012年第1期33卷 84-88页

作者：孙继华杨超刘菊华张静中国热带农业科学院科技信息研究所海南海口571101 农业部热带作物生物技术重点开放实验室中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101 海南省嘉积中学海南琼海571400

研究不同激素及浓度配比对魔芋愈伤组织、不定芽和根诱导的影响。结果表明,诱导愈伤组织的最佳激素组合为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其诱导率为82%;诱导不定芽分化的最佳配方为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其分化率为490%;诱导... 详细信息

研究不同激素及浓度配比对魔芋愈伤组织、不定芽和根诱导的影响。结果表明,诱导愈伤组织的最佳激素组合为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其诱导率为82%;诱导不定芽分化的最佳配方为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其分化率为490%;诱导生根的最佳激素组合配方为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,其生根率为90%。

关键词：魔芋组织培养高效再生

青菜的高效再生和农杆菌介导B.t.及CpTI基因的转化

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植物生理与分子生物学学报 2002年第4期28卷 253-260页

作者：徐淑平卫志明黄健秋中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所上海200032

分别对培养基中适宜的激素组成和AgNO3 添加浓度进行研究 ,建立了青菜下胚轴和子叶外植体的高效再生系统 ,青菜品种“矮抗青”的最高芽分化频率下胚轴可达 6 5 % ,子叶为 5 2 %左右。在此基础上 ,对影响转化频率的不同因素进行了探讨 ,... 详细信息

分别对培养基中适宜的激素组成和AgNO3 添加浓度进行研究 ,建立了青菜下胚轴和子叶外植体的高效再生系统 ,青菜品种“矮抗青”的最高芽分化频率下胚轴可达 6 5 % ,子叶为 5 2 %左右。在此基础上 ,对影响转化频率的不同因素进行了探讨 ,共获 94株卡那霉素抗性植株。对转基因植株总DNA的Southernblot ting分析证明 ,B .t .基因和CpTI基因已整合到青菜植株的细胞核基因组中。经过抗虫性筛选试验 ,从转基因植株的T3 代筛选到 7个转B .t.基因的抗虫纯合株系和 5个转CpTI基因的抗虫纯合株系。

关键词：青菜下胚轴高效再生农杆菌介导转化 B.t.基因 CpTI基因转基因植株

基于不同外植体的朱顶红‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’高效离体再生

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基于不同外植体的朱顶红‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’...

作者：张梦迪沈阳农业大学

学位级别：硕士

朱顶红色彩艳丽,花朵硕大,应用范围广,是国际著名球根花卉。朱顶红自然繁殖率低,目前通常采用分球、扦插和播种等方法繁殖,但其繁殖效率较低,难以满足日益增长的市场需求。利用组织培养技术进行离体快繁是园艺植物最有效的工厂化繁殖方... 详细信息

朱顶红色彩艳丽,花朵硕大,应用范围广,是国际著名球根花卉。朱顶红自然繁殖率低,目前通常采用分球、扦插和播种等方法繁殖,但其繁殖效率较低,难以满足日益增长的市场需求。利用组织培养技术进行离体快繁是园艺植物最有效的工厂化繁殖方法之一。然而,迄今为止,朱顶红的组培快繁尚未实现产业化生产,技术体系尚不完善。本试验为进一步完善朱顶红高效离体再生技术体系,以朱顶红‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’两个品种的鳞片、花器官以及无菌苗叶片为材料,研究了不同植物生长调节剂浓度和配比、不同培养条件对各类外植体愈伤组织以及不定芽诱导的影响,以期为实现朱顶红种球工厂化繁殖奠定技术基础。主要试验结果如下:1.以鳞片为外植体,其中TDZ的浓度显著影响诱导效果。最佳外植体为鳞片基部(0.5 cm)。最适愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ,其中‘Blossom Peacock’在培养50 d形成愈伤组织(胚性愈伤为100%),诱导率可达80.00%,继续培养30 d形成体细胞胚,将发育的体细胞胚继代在MS培养基中,培养35 d形成小植株;‘Royal Velvet’在培养60 d形成愈伤组织,诱导率为64.29%,继续培养60 d形成不定芽。最适小鳞茎诱导培养基为MS+0.5 mg/L NAA+3.0 mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的诱导率分别达到71.43%和70.00%。2.以花瓣(幼嫩花苞中未显色)为外植体时,最佳培养条件为暗培养三周转到光培养(光照16 h/d,光照强度36μmol/m2/s);最佳诱导培养基为MS+0.5 mg/L NAA+1.0mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的不定芽诱导率分别达到83.33%和77.78%。以花梗为外植体,最佳培养条件为光培养;最佳诱导不定芽培养基为MS+0.5mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的诱导率分别达到37.50%和29.17%。3.以无菌苗叶片为外植体,最佳外植体为MS培养基中培养10 d形成的幼嫩叶片基部(0.5 cm),在光照16 h/d(光照强度36μmol/m2/s)下,以叶片凸面与培养基接触方式进行培养。朱顶红不定芽诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ,两个品种的不定芽均以间接途径发生,其中‘Blossom Peacock’在培养40 d后形成愈伤组织,55 d天形成不定芽,诱导率可达69.44%;‘Royal Velvet’在培养45 d后形成愈伤组织,65 d天形成不定芽,诱导率达到66.67%。最适体细胞胚诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L PIC,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的体细胞胚诱导率分别达到66.67%和63.89%。最适不定芽增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的增殖系数分别为4.67和3.46。4.综合可见,朱顶红‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的最佳外植体为无菌苗幼嫩叶片基部,在光照16 h/d(光照强度36μmol/m2/s)下,以MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+2.0 mg/L TDZ为最佳不定芽诱导培养基,以MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L TDZ为最佳不定芽增殖培养基,获得大量朱顶红小植株。在不添加激素的MS培养基中进行生根培养,30 d后两个品种的生根率均达到100%。将生根培养30 d的小植株转移至室温条件下放置3 d,摘去封口膜再驯化3 d后,移栽至经高温消毒的草炭:蛭石(体积比)为1:1的基质中,成活率达到100%。

关键词：朱顶红离体培养高效再生鳞片花器官无菌苗叶片

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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杉木高效再生与基因转化的初步研究

生命科学研究 2002年第4期6卷 351-355页

作者：林荣华叶冰莹庄振宏林泳许魏琳陈由强朱锦懋福建师范大学生物工程学院中国福建福州350007

用取自60d龄无菌苗上的杉木茎段为外植体,在MS+6 BA0.75mg L+IBA0.25mg L培养基中诱导芽分化,丛生芽的诱导率达到95.8%,每个外植体平均有5.2个芽.切取诱导芽单苗,转至MS+NAA1.0mg L培养基上诱导根再生,外植体出根率为91.4%.在此基础上,... 详细信息

用取自60d龄无菌苗上的杉木茎段为外植体,在MS+6 BA0.75mg L+IBA0.25mg L培养基中诱导芽分化,丛生芽的诱导率达到95.8%,每个外植体平均有5.2个芽.切取诱导芽单苗,转至MS+NAA1.0mg L培养基上诱导根再生,外植体出根率为91.4%.在此基础上,将杉木茎段与农杆菌AGL1共培养2d,通过在含200mg L卡那霉素的再生培养基中培养,初步筛选出卡那霉素抗性苗,转化频率为1.1%.

关键词：杉木高效再生基因转化茎段农杆菌介导