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高丽槐素与羟丙基-β-环糊精包合行为及其分子模拟研究

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中国新药杂志 2019年第15期28卷 1889-1895页

作者：杨俊丽杨云汉杜瑶周树娅赵芳叶艳青杨丽娟云南民族大学化学与环境学院生物基材料绿色制备技术国家地方联合工程研究中心昆明650500

目的:制备高丽槐素(MAA)与羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)的包合物,并对其进行表征和分子对接模拟。方法:通过饱和溶液法制备MAA与HP-β-CD的包合物,以载药量为指标,通过正交实验优选最佳的包合工艺。采用核磁共振氢谱(1H NMR和2D NMR)、X... 详细信息

目的:制备高丽槐素(MAA)与羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)的包合物,并对其进行表征和分子对接模拟。方法:通过饱和溶液法制备MAA与HP-β-CD的包合物,以载药量为指标,通过正交实验优选最佳的包合工艺。采用核磁共振氢谱(1H NMR和2D NMR)、X-射线粉末衍射(XRD)、差示扫描量热法(DSC)、扫描电镜(SEM)、紫外-可见光谱法(UV)和Job曲线法对包合物进行表征;运用分子对接计算,模拟MAA与HP-β-CD包合物的包合模式。结果:最优制备工艺条件为:包合温度30℃,HP-β-CD与MAA摩尔比为1∶1,包合时间3 h,乙醇和蒸馏水体积比为1∶2;1H NMR和2D NMR,XRD,DSC,SEM,UV和Job曲线法均验证了MAA与HP-β-CD以1∶1的摩尔比形成包合物;分子对接模拟显示包合物最优构象为MAA从HP-β-CD的小口端进入,并贯穿在HP-β-CD的空腔中;对接结果与核磁共振研究结果相一致。结论:包合物形成后MAA的溶解度从0. 35 mg·mL-1提高到3. 2 mg·mL-1,其稳定性也有显著提高。

关键词：高丽槐素羟丙基-β-环糊精包合物稳定性分子对接

高丽槐素对TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化的抑制作用及机制

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武汉大学学报（医学版） 2024年第9期45卷 1017-1022页

作者：莫晓彤张彤唐其柱武汉大学人民医院心血管内科湖北武汉430060 代谢与相关慢病湖北省重点实验室湖北武汉430060

目的:研究高丽槐素(MA)对转化生长因子β(TGFβ)诱导的心脏成纤维细胞增殖和活化的影响,并探讨高丽槐素对AMPK/SIRT3通路的作用。方法:将大鼠心脏成纤维细胞随机分为4组,即对照组、MA组、TGFβ组和TGFβ+MA组。培养24 h后,采用CCK-8法... 详细信息

目的:研究高丽槐素(MA)对转化生长因子β(TGFβ)诱导的心脏成纤维细胞增殖和活化的影响,并探讨高丽槐素对AMPK/SIRT3通路的作用。方法:将大鼠心脏成纤维细胞随机分为4组,即对照组、MA组、TGFβ组和TGFβ+MA组。培养24 h后,采用CCK-8法检测不同浓度的高丽槐素对成纤维细胞活性的作用;RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结缔组织生长因子(CTGF)的转录水平;采用细胞免疫荧光染色检测α-SMA和磷酸化组蛋白H3(pH3);采用Western Blot法检测α-SMA、CTGF、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK和沉默调节蛋白3(SIRT3)的表达。结果:CCK-8细胞活力实验和pH3染色结果显示高丽槐素能显著抑制成纤维细胞的增殖;TGFβ组纤维化因子α-SMA和CTGF的表达高于对照组,而MA处理后能抑制纤维化相关因子的表达。机制方面,Western Blot显示MA能激活AMPK/SIRT3信号通路,使用AMPK抑制剂Compound C(CC)能消除MA的抗纤维化和激活AMPK/SIRT3通路的作用。结论:MA作用于大鼠心脏成纤维细胞,通过激活AMPK/SIRT3通路而抑制TGFβ诱导的心脏成纤维细胞的增殖和活化。

关键词：高丽槐素心肌纤维化心脏成纤维细胞 AMPK/SIRT3信号通路

高丽槐素对鼻咽癌CNE1细胞生物学影响及其机制的实验研究

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高丽槐素对鼻咽癌CNE1细胞生物学影响及其机制的实验研究

作者：苏雯清广西医科大学

学位级别：硕士

目的:观察在体外高丽槐素对鼻咽癌CNE1细胞的增殖、迁移侵袭、凋亡和周期的影响及其潜在的作用机制,初步了解高丽槐素在动物体内的抗鼻咽癌活性,为高丽槐素应用于鼻咽癌的治疗提供实验依据。方法:本研究采用不同浓度的高丽槐素干预鼻咽... 详细信息

目的:观察在体外高丽槐素对鼻咽癌CNE1细胞的增殖、迁移侵袭、凋亡和周期的影响及其潜在的作用机制,初步了解高丽槐素在动物体内的抗鼻咽癌活性,为高丽槐素应用于鼻咽癌的治疗提供实验依据。方法:本研究采用不同浓度的高丽槐素干预鼻咽癌CNE1细胞。首先,通过CCK-8法检测CNE1细胞在24 h、48 h、72 h的增殖情况,计算其细胞抑制率以确定细胞活力;通过细胞平板克隆形成测定法观察CNE1细胞集落形成能力;通过细胞划痕实验观察CNE1细胞的迁移能力;通过Transwell小室实验观察CNE1细胞侵袭能力;利用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况;利用高通量测序技术,分析高丽槐素干预CNE1细胞后的转录组变化,筛选潜在的PI3K、AKT、STC2、FGF2、MAPK8、P53等6个基因靶点;采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)验证基因PI3K、AKT、STC2、FGF2、MAPK8、P53 m RNA表达情况;利用Western Blot对PI3K、AKT、P21蛋白的表达水平进行检测,研究高丽槐素对CNE1细胞PI3K/AKT/P21通路的影响;建立裸鼠皮下鼻咽癌CNE1移植瘤模型,考察不同剂量的高丽槐素在动物体内抗鼻咽癌的疗效情况。结果:实验结果显示,通过CCK-8法测定,MA以时间-浓度依赖的方式显著降低CNE1细胞的活力,MA干预CNE1细胞24 h、48 h、72 h的半数抑制浓度分别为133.31μmol/L、35.52μmol/L、13.84μmol/L;细胞平板克隆形成实验显示,MA能明显抑制CNE1细胞的克隆形成;划痕实验及Transwell小室实验显示,MA能够抑制CNE1细胞的迁移和侵袭能力;细胞流式细胞术检测发现,CNE1细胞凋亡率随着MA给药浓度的升高而增加,表明MA能诱导CNE1细胞凋亡;在周期实验中发现,CNE1细胞被MA阻滞在G/G期;采用高通量测序,筛选出PI3K、AKT、STC2、FGF2、MAPK8、P53等6个潜在的基因靶点;利用RT-q PCR验证发现,MA能下调PI3K、AKT、STC2、FGF2、MAPK8、P53的表达,与测序结果一致;Western Blot结果显示,MA作用于CNE1细胞后,PI3K、AKT蛋白表达水平显著降低,P21蛋白表达水平显著增加;裸鼠体内移植瘤结果显示,MA能显著抑制鼻咽癌CNE1细胞裸鼠移植瘤生长,且具有浓度依赖性,随着给药浓度的增加,MA的抑瘤作用也增强。结论:1、高丽槐素可以抑制鼻咽癌细胞株CNE1细胞的增殖与克隆形成能力,降低鼻咽癌细胞株CNE1细胞的迁移与侵袭能力,阻滞鼻咽癌CNE1细胞GG期,促进CNE1细胞的凋亡,其作用机制可能是失活PI3K/AKT/P21通路。2、高丽槐素能有效抑制裸鼠体内鼻咽癌细胞株CNE1的生长。

关键词：高丽槐素 CNE1细胞细胞增殖高通量测序 PI3K/AKT/P21通路

HPLC法测定多叶越南槐中红车轴草苷及高丽槐素的含量

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药物分析杂志 2015年第1期35卷 121-124页

作者：刘吉成卢森华谢巍卢文杰广西玉林食品药品检验所玉林537000 广西中医药大学南宁530001 广西中医药研究院南宁530022

目的：建立测定多叶越南槐药材中红车轴草苷及高丽槐素2个黄酮类成分含量的高效液相色谱法。方法：采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,柱温25℃,以乙腈-0.1%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,... 详细信息

目的：建立测定多叶越南槐药材中红车轴草苷及高丽槐素2个黄酮类成分含量的高效液相色谱法。方法：采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,柱温25℃,以乙腈-0.1%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,检测波长310 nm,进样量10μL,外标法定量。结果：红车轴草苷进样量在0.025 1-2.51μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 0）,平均回收率为97.0%（RSD=1.5%）;高丽槐素进样量在0.025 2-2.52μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 0）,平均回收率为101.3%（RSD=2.2%）。结论：建立的含量测定方法符合方法验证要求。

关键词：多叶越南槐红车轴草苷高丽槐素高效液相色谱黄酮成分测定方法验证

RP-HPLC法测定牛大力药材中高丽槐素的含量

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药物分析杂志 2010年第9期30卷 1735-1737页

作者：王春华王勇王英叶文才中国药科大学天然药物化学教研室南京210009 暨南大学中药及天然药物研究所广州510632 江苏省食品药品检验所南京210008 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室广州510632

目的:建立牛大力药材中高丽槐素的RP-HPLC含量测定方法。方法:采用Cosmosil5 C18-ms-Ⅱ色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(43∶57),流速***-1;检测波长为312nm;进样体积为20μL。结果:高丽槐素进样量与... 详细信息

目的:建立牛大力药材中高丽槐素的RP-HPLC含量测定方法。方法:采用Cosmosil5 C18-ms-Ⅱ色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(43∶57),流速***-1;检测波长为312nm;进样体积为20μL。结果:高丽槐素进样量与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9999),线性范围为0.13～2.0μg;平均加样回收率(n=6)为99.3%,RSD=1.5%。结论:该方法准确、快速、简便,重复性好,可用于牛大力药材的质量控制。

关键词：牛大力高丽槐素反相高效液相色谱法含量测定

超高效液相色谱-串联质谱法测定药材牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素

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分析科学学报 2022年第2期38卷 203-208页

作者：马博凯钱冲王茂媛刘珊珊黄雯雯王尉勾新磊王祝年张梅北京市科学技术研究院分析测试研究所(北京市理化分析测试中心)有机材料检测技术与质量评价北京市重点实验室北京100094 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101 农业农村部热带农业野生植物基因资源鉴定评价中心/海南省热带药用植物工程研究中心海南僑州571737

采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术,建立了同时测定中药材牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的分析方法。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;质谱采用电... 详细信息

采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术,建立了同时测定中药材牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的分析方法。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;质谱采用电喷雾电离,负离子源,以多反应监测模式检测,外标法定量。这3种分析物在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))均大于0.9985,刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的检出限分别为2μg/g、0.02μg/g和30μg/g。在3个添加水平下,考察了该方法的准确度和重复性(n=6),且3种分析物的加标回收率在86.0%~104%之间,相对标准偏差为2.12%~5.57%。采用该方法分别对生长周期为3年、7年、10年和15年的牛大力中3种指标成分进行了检测,比较了3种指标成分含量的差异,并据此确定了7年是最佳栽培年限。该方法具有简单、快速、分离效果好的优点,可用于不同生长周期中药材牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的同时分析检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱法牛大力刺桐碱芒柄花素高丽槐素

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HPLC测定广西牛大力药材中芒柄花素和高丽槐素的含量

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世界科学技术-中医药现代化 2013年第2期15卷 260-263页

作者：陈勇谢臻巫繁菁韦玉燕卢森华曾海生广西中医药大学药学院南宁530001

目的：建立牛大力药材中芒柄花素和高丽槐素的含量测定方法。方法：采用HPLC测定药材中芒柄花素和高丽槐素含量，色谱柱C18。（4．6mm×250mm，5μm），流动相乙腈-0．1％冰醋酸溶液（38：62），检测波长248，310nm，流速1．0mL·min^-... 详细信息

目的：建立牛大力药材中芒柄花素和高丽槐素的含量测定方法。方法：采用HPLC测定药材中芒柄花素和高丽槐素含量，色谱柱C18。（4．6mm×250mm，5μm），流动相乙腈-0．1％冰醋酸溶液（38：62），检测波长248，310nm，流速1．0mL·min^-1，柱温35℃。结果：芒柄花素进样量在0．0023。0．0600μg与峰面积值呈现良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率100．0％，RSD为2．0％（n=6）；高丽槐素进样量在0．0391～1．0156μg与峰面积值呈现良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率为100．6％，RSD为0．7％（n=6）。结论：该方法可用于牛大力药材中芒柄花素和高丽槐素的含量测定。

关键词：牛大力芒柄花素高丽槐素 HPLC

反相高效液相色谱法测定金雀根中高丽槐素的含量

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天然产物研究与开发 2008年第3期20卷 472-473,476页

作者：陈超亓建斌马大友舒娜胡昌奇复旦大学药学院天然药物化学教研室上海200032

建立金雀根中高丽槐素含量测定的反相高效液相色谱分析方法，对6个不同产地的金雀根中高丽槐素的含量进行测定，同时给出金雀根中9种异黄酮类化合物在相同色谱条件下的分析图谱。结果表明在此色谱条件下，10 ～250 μg/mL浓度范围内，... 详细信息

建立金雀根中高丽槐素含量测定的反相高效液相色谱分析方法，对6个不同产地的金雀根中高丽槐素的含量进行测定，同时给出金雀根中9种异黄酮类化合物在相同色谱条件下的分析图谱。结果表明在此色谱条件下，10 ～250 μg/mL浓度范围内，高丽槐素的峰面积与浓度具有良好的线性相关性（r^2=0.9999），该方法精密度较高，重现性和稳定性良好，平均回收率为97.31%。

关键词：金雀根高丽槐素异黄酮反相高效液相色谱法

高丽槐素对鼻咽癌CNE1细胞增殖、迁移、凋亡的影响及机制

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广西医科大学学报 2021年第2期38卷 258-264页

作者：苏雯清杨晓男何文栋韦坤华王硕龚小妹奎玲缪剑华广西医科大学药学院南宁530021 广西中医药大学南宁530200 广西药用资源保护与遗传改良重点实验室南宁530023 广西壮族自治区中药资源智慧创制工程研究中心南宁530023 西南濒危药材资源开发国家工程实验室南宁530023 江苏大学药学院镇江2120136

目的:探讨高丽槐素对鼻咽癌(NPC)细胞CNE1增殖、单克隆、迁移和凋亡的影响及潜在的作用靶点。方法:将培养的CNE1细胞随机分为空白对照组和高丽槐素给药组。采用CCK8法检测不同浓度的高丽槐素作用24 h、48 h、72 h后的增殖抑制率,单克隆... 详细信息

目的:探讨高丽槐素对鼻咽癌(NPC)细胞CNE1增殖、单克隆、迁移和凋亡的影响及潜在的作用靶点。方法:将培养的CNE1细胞随机分为空白对照组和高丽槐素给药组。采用CCK8法检测不同浓度的高丽槐素作用24 h、48 h、72 h后的增殖抑制率,单克隆试验检测各组细胞的克隆形成能力,细胞划痕试验检测各组细胞迁移能力,流式细胞术试验检测细胞的凋亡情况,利用高通量测序技术,分析CNE1细胞转录组的变化,得到差异表达基因,筛选潜在基因靶点,采用反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行验证。结果:CCK8结果显示,高丽槐素能显著抑制CNE1细胞的增殖,且具有时间和浓度依赖性(P高丽槐素能抑制CNE1细胞的克隆能力和迁移能力(P高丽槐素浓度的增加而减弱;Annexin V-FITC/PI染色结果显示,高丽槐素可使CNE1细胞凋亡率升高(P高丽槐素可使抑癌基因(P53)、细胞周期依赖激酶抑制剂(P21)、成纤维细胞生长因子(Fgf2)、磷脂酰肌醇3-激酶(Pi3k)、丝裂原活化蛋白激酶8(Mapk8)等基因下调(P高丽槐素能下调P53、P21、Fgf2、Pi3k、Mapk8 mRNA表达水平(P高丽槐素可抑制CNE1细胞的增殖、克隆与迁移能力并促进细胞凋亡,其作用机制可能与P53、P21、Fgf2、pi3k、Mapk8等多组基因的转录变化有关。

关键词：高丽槐素鼻咽癌 CNE1细胞高通量测序