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中华眼底病杂志 2018年第5期34卷 471-474页

作者：孟凡超孙世龙苏建石佩玉周伟民王书香楚金亭郑州市第二人民医院神经内科 450006

目的观察缺血性视神经病变视神经组织中髓样细胞表达触发受体（TREM）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3、白细胞介素（IL）-6的表达。方法 Sprague Dawley大鼠20只随机分为对照组、模型组，每组均为10只大鼠。模型组大鼠行双侧颈内动脉... 详细信息

目的观察缺血性视神经病变视神经组织中髓样细胞表达触发受体（TREM）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3、白细胞介素（IL）-6的表达。方法 Sprague Dawley大鼠20只随机分为对照组、模型组，每组均为10只大鼠。模型组大鼠行双侧颈内动脉结扎建立亚急性缺血性视神经病变动物模型；对照组大鼠游离双侧颈总动脉，但不结扎。建模后14 d，实时定量聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测大鼠视神经组织中TREM-1、TREM-2、Caspase-3、IL-6基因及蛋白表达。结果与对照组比较，模型组大鼠视神经组织中TREM-1（tmRNA=6.058，t蛋白=9.671）、Caspase-3（tmRNA=7.86，t蛋白=9.524）、IL-6（tmRNA=6.055，t蛋白=14.501） mRNA和蛋白表达升高，TREM-2（tmRNA=6.992，t蛋白=9.283）mRNA和蛋白表达降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 TREM-1基因和蛋白在缺血性视神经组织中显著表达；TREM-2基因和蛋白显著下降。

关键词：视神经病变,缺血性髓样细胞表达触发受体半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 白细胞介素6 动物实验

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原发性肝癌患者TREM-1/肿瘤相关巨噬细胞的表达及相关性

原发性肝癌患者TREM-1/肿瘤相关巨噬细胞的表达及相关性

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作者：吴慧贞福建医科大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:肝细胞癌是一种典型的炎症相关性肿瘤,有研究发现,髓样细胞表达触发受体(TREM)参与免疫调控炎症反应,在炎症相关性肿瘤的发生机制中起作用。作为肿瘤微环境中主要的免疫细胞,肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在肿瘤的血管形成、... 详细信息

研究背景和目的:肝细胞癌是一种典型的炎症相关性肿瘤,有研究发现,髓样细胞表达触发受体(TREM)参与免疫调控炎症反应,在炎症相关性肿瘤的发生机制中起作用。作为肿瘤微环境中主要的免疫细胞,肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在肿瘤的血管形成、侵袭及转移等发面发挥了重要作用。本研究旨在通过检测肝癌组织TAMs及TREM的表达类型,测定TAMs表面TREM-1的表达,肝癌患者外周血中s TREM-1、sCD163及TNF-α等炎性因子的表达,阐明TREM-1对TAMs的调控及对肝癌的发生、发展的影响。同时,体外建立M2型巨噬细胞模型,为后续进一步验证TREM-1对巨噬细胞分化表型的影响奠定实验基础。研究方法:选取20例在本院确诊的需进行手术切除的未进行其他治疗的原发性肝癌患者为研究对象,ELISA法测定外周血中s TREM-1、sCD163、TNF-α、CRP及IL-6炎性因子的含量;分别取肝癌组织、癌旁组织,qRT-PCR检测TREM-1/TREM-2 mRNA表达水平;免疫组化染色技术检测TREM-1/TREM-2蛋白表达;免疫组化双染技术检测M1/M2型巨噬细胞的浸润水平及M2型巨噬细胞表面TREM-1的表达。体外分离培养人外周血单核细胞,流式细胞术测定细胞纯度;用M-CSF、IL-4和GM-CSF两种方法诱导培养M2型巨噬细胞;流式细胞术测M2细胞表型。分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,用M-CSF诱导形成巨噬细胞,流式细胞术测定表型。结果:ELISA结果显示,sTREM-1、sCD163水平较肝硬化患者均明显增高(3.722±0.02419 vs 2.606±0.04036 ng/ml、2.093±0.2835 vs 0.9379±0.1326μg/ml,P0.05);肝癌组织中TREM-1的mRNA水平(0.2696±0.03860)明显高于癌旁组织(0.1278±0.01994,P0.05);免疫组化染色显示癌组织中的TREM-1阳性表达率(11.23±0.8840%)明显高于癌旁组织(2.253±0.8662%,P细胞阳性率(3.500±0.5000个/HP)显著高于癌旁组织(0.5100±0.1813个/HP,P细胞未见表达;免疫组化双染结果显示,相对于癌旁组织,肝癌组织中的M2型巨噬细胞表面高表达TREM-1(16.51±0.9327%vs 6.644±1.221%,P细胞CD14阳性率达83.3%,与未诱导的单核细胞相比,M-CSF及IL-4诱导组巨噬细胞CD206表达阳性率显著增高(63.57±0.1202%vs0.7000±0.05774%,P细胞CD206表达阳性率显著增高(92.87±0.2906%vs0.7000±0.05774%,P细胞相比,M-CSF诱导的小鼠骨髓间充质干细胞F4/80及CD11b的表达阳性率明显升高(70.07±0.1764%vs 1.533±0.1202%,P表达以TREM-1为主,且肝癌组织中M2型巨噬细胞表面高表达TREM-1。2)体外成功诱导并建立了M2型巨噬细胞模型。

关键词：肝细胞癌髓样细胞表达触发受体肿瘤相关巨噬细胞表型

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