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髓样细胞表达激发受体-1在大鼠急性胰腺炎继发感染早期肺损伤时的表达

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实用医学杂志 2013年第12期29卷 1921-1924页

作者：徐岷袁伟红张尤历路筝曹亮李兆申江苏省镇江市江苏大学附属医院消化科 212001 江苏省宜兴市人民医院消化科 214200 第二军医大学附属长海医院消化科 200433

目的:探讨重症急性胰腺炎继发感染(SISAP)早期肺损伤时髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)的表达变化。方法:24只大鼠随机分为对照组(C组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、重症急性胰腺炎继发感染组(SISAP)组。通过腹腔注射L-精氨酸、大肠杆菌... 详细信息

目的:探讨重症急性胰腺炎继发感染(SISAP)早期肺损伤时髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)的表达变化。方法:24只大鼠随机分为对照组(C组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、重症急性胰腺炎继发感染组(SISAP)组。通过腹腔注射L-精氨酸、大肠杆菌造模,24h后取血及腹水行细菌培养;测定血淀粉酶活性、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及TREM-1表达变化;胰腺及肺组织进行病理学评分;Real-timePCR和Western Blot分别检测肺组织中TREM-1mRNA和蛋白的表达。结果:血和腹水细菌培养阳性率:C组为0/8,SAP组为1/8,SISAP组为8/8;SAP组和SISAP组胰腺和肺组织病理评分及血淀粉酶活性均明显高于C组(P表达,结果与血清TREM-1ELISA检测相似。结论:SISAP引起的早期肺损伤中TREM-1表达明显增高。

关键词：急性胰腺炎继发感染髓样细胞表达激发受体-1 肺损伤

髓样细胞表达激发受体-1（TREM-1）在小鼠重症急性胰腺炎中的表达及分子治疗应用

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髓样细胞表达激发受体-1（TREM-1）在小鼠重症急性胰腺炎中的表达...

作者：许爱平第二军医大学

学位级别：硕士

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是一种病因复杂,发病机制不明,临床常见的急腹症,其病情凶险,预后不良,治疗棘手,并发症多,目前病死率仍高达20-30%,有关其治疗方法的探索一直是研究的热点。目前临床上已有通过检测C反... 详细信息

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是一种病因复杂,发病机制不明,临床常见的急腹症,其病情凶险,预后不良,治疗棘手,并发症多,目前病死率仍高达20-30%,有关其治疗方法的探索一直是研究的热点。目前临床上已有通过检测C反应蛋白和降钙素原等来判断SAP炎预后,但是应用价值非常有限。SAP的一个重要问题是尚没有一个特异的血清学或者其他指标来诊断和预测预后,进而指导治疗。髓样细胞表达的激发受体(triggering receptor expressed on myeloid cells,TREM)属免疫球蛋白超家族。TREM-1首次发现是在2001年,加深了人们对炎症反应启动和发展过程的认识。其主要表达于中性粒细胞、成熟单核细胞和巨噬细胞等天然免疫反应的效应细胞,选择性地表达于肺泡、肠液及其他体液的吞噬细胞上。TREM-1在众多炎症反应参与的疾病(包括感染性和非感染性炎症反应、肿瘤等)中均有表达。TREM-1能促进小鼠促炎因子分泌,诱导中性粒细胞和单核细胞分泌中性粒细胞趋化因子,如IL-8、单核细胞趋化蛋白(MCP-1、MCP-3)及巨噬细胞炎症反应蛋白-1α(MIP-1α)。TREM-1的激活能导致中性粒细胞迅速脱颗粒、呼吸爆发及吞噬作用。Toll样受体(TLR)-2或TLR-4与配体识别后可激活TREM-1,促进大量致炎细胞因子的释放,同时抑制IL-10的释放。TREM-1与这些下游细胞因子形成一个正反馈的自分泌调节回路,促使炎症反应增强放大。同时,通过磷脂酰肌醇-3激酶依赖途径,激活TLRs可促进TREM-1的表达。TLR可能通过激活NF-κB,来调节TREM-1的表达;而TREM-1同样可以激活多种转录复合物,协同NF-κB促进促炎因子基因的转录。这些研究结论显示,TREM-1和TLR共同介导炎症反应。TREM-1介导的信号转导通路在炎症反应的级联放大和脓毒症的发生中起着关键性的作用。Gibot等人分别构建了小鼠脓毒症模型和Wistar大鼠脓毒症模型,分别合成了类似小鼠和大鼠TREM-1胞外区部分合成肽段,在小鼠脓毒性休克模型里,小鼠胞外区合成肽可以保护内毒素血症小鼠免于死亡,而在大鼠模型中,利用合成大鼠胞外区肽段治疗,发现可以改善血流动力学状态,减轻乳酸酸中毒症状,调节TNF-α、IL-1β等促炎因子的释放,提高生存率。研究结果显示,胞外区肽段可能成为脓毒症治疗的有效靶标。本课题拟通过小鼠SAP模型,分析TREM-1 mRNA水平的表达以及使用免疫组化的方法检测TREM-1蛋白水平的表达,评估其在SAP病程中的作用;构建小鼠TREM-1-IgG融合蛋白的原核表达载体,在大肠杆菌中大量表达并纯化出小鼠TREM-1融合蛋白,对其进行优化,取得较高纯度蛋白,用于治疗小鼠SAP,验证TREM-1作为SAP分子治疗靶点的价值,从而为更深入了解TREM-1的信号转导机制,为明确TREM-1能否作为各种疾病的诊断标志和治疗靶点提供依据,为探索相关疾病新的治疗方法提供线索。一、TREM-1在小鼠SAP的表达目的：检测小鼠SAP胰腺组织TREM-1的表达方法：50只雄性昆明小鼠随机分为5组,用生理盐水配置20%L-精氨酸利用腹腔注射的方法,按照4g／kg的剂量,间隔一小时重复注射一次,制备SAP模型。对照组昆明小鼠,腹腔注射生理盐水,造模后24h,48h,72h,96h分批处死小鼠,心脏采血,同时留取胰腺,肝脏,肺脏组织。测定淀粉酶,肌酐和谷丙转氨酶,观察各组小鼠胰腺等组织病理学变化并评分;并以RT-PCR, real-timePCR的方法检测外周血白细胞及胰腺组织TREM-1 mRNA表达;免疫组化法检测小鼠胰腺组织中TREM-1蛋白表达。结果：血清淀粉酶检测和组织病理学结果,证实造模成功。各组小鼠按照时间点处置,无菌操作下留取胰腺组织,抽提总mRNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出小鼠TREM-1,扩增产物与预期目的基因一致,回收纯化产物送检测序,测序结果与GenBank公布的序列同源性100%。进行real-timePCR相对定量检测,统计结果显示TREM-1 mRNA表达量随着病程进展在各组小鼠胰腺组织中发生变化。免疫组化结果显示TREM-1蛋白在SAP小鼠的胰腺组织存在表达。结论：TREM-1的相对表达量在SAP小鼠病程中逐渐升高,48h升至顶峰,后逐渐下降,提示TREM-1在SAP的发生发展中有一定作用。二、TREM-1-IgG重组融合蛋白原核表达载体的构建、表达、纯化和鉴定目的：构建小鼠TREM-1-IgG重组融合蛋白的原核表达载体,大量表达融合蛋白,纯化后进行鉴定。方法：利用限制性内切酶位点EcoR I, BamH I和Xho I,双酶切表达载体pMD18-T;pMD18-T/小鼠TREM-1胞外区质粒经EcoRI/BamHI双酶切;pMD18

关键词：髓样细胞表达激发受体-1 重症急性胰腺炎分子治疗

髓样细胞表达激发受体-1对急性坏死性胰腺炎大鼠继发感染的判断价值

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中华胰腺病杂志 2011年第3期11卷 197-199页

作者：袁伟红徐岷张尤历路筝曹亮李兆申江苏镇江江苏大学附属医院消化科镇江212001 第二军医大学长海医院消化科

目的探讨髓样细胞表达激发受体-l（TREM-1）在急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠继发感染早期的表达变化及其判断价值。方法24只雄性SD大鼠按数字表法随机分为对照组、ANP组、ANP继发感染（sI）组。通过腹腔注射L一精氨酸、大肠杆菌建模。制... 详细信息

目的探讨髓样细胞表达激发受体-l（TREM-1）在急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠继发感染早期的表达变化及其判断价值。方法24只雄性SD大鼠按数字表法随机分为对照组、ANP组、ANP继发感染（sI）组。通过腹腔注射L一精氨酸、大肠杆菌建模。制模后24h取血和腹水行细菌培养，测血清淀粉酶、C一反应蛋白（CRP）、TNF-α及TREM-1水平，胰腺组织常规病理检查，实时PCR和蛋白质印迹法检测胰腺组织TREM-1mRNA和蛋白的表达。结果ANP组和sI组的胰腺病理评分、血清淀粉酶水平均明显高于对照组，且SI组血和腹水细菌培养阳性率达100％，表明制模成功。sI组血CRP、TNF-α水平分别为（18．7±3．1）mg／L和（185．7±10．9）mg／L，与ANP组的（16．5±3．6）、（176．0±18．6）mg／L无显著差异。sI组的血清TREM-1水平、胰腺组织TREM-1mRNA及蛋白表达量分别为（9．3±0．9）ng／ml、14．84±3．45、316．2±59．2，均显著高于ANP组的（5．5±0．3）ng／ml、4．51±1．44、188．6±42．4（P值均〈0．05）。结论血清TREM-1水平对急性胰腺炎继发感染早期具有一定的判断价值。

关键词：胰腺炎急性坏死性髓样细胞表达激发受体-1 继发感染

TREM-1基因多态性与重症急性胰腺炎合并腹腔感染及其预后的关联

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中华医院感染学杂志 2024年第6期34卷 866-870页

作者：宋玮玮王恺张汝敏朱红昌淄博市中心医院重症医学科山东淄博255036

目的探讨髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)基因多态性与重症急性胰腺炎(SAP)合并腹腔感染及其预后的关联。方法选择2019年3月—2022年12月在淄博市中心医院重症医学科收治的SAP患者158例为研究对象,其中有78例合并腹腔感染为感染组,80... 详细信息

目的探讨髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)基因多态性与重症急性胰腺炎(SAP)合并腹腔感染及其预后的关联。方法选择2019年3月—2022年12月在淄博市中心医院重症医学科收治的SAP患者158例为研究对象,其中有78例合并腹腔感染为感染组,80例未感染患者为未感染组。感染组患者根据28 d预后情况分成生存组60例和死亡组18例。抽取血清检测TREM-1表达,分析不同组别TREM-1基因多态性的表达频率,通过多因素分析SAP合并腹腔感染的危险因素。结果 78例SAP合并腹腔感染患者共检测出115株病原菌,其中革兰阴性菌70株(60.87%);感染组基因型rs2234246中的AA型、A频率高于未感染组(P细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均高于未感染组(P<0.05);感染组与未感染组TREM-1基因型位点AA型IL-6、TNF-α水平高于GA型、GG型(P<0.05);生存组与死亡组TREM-1基因多态性基因型和基因频率均无统计学差异。结论腹腔积液、多器官功能障碍综合征、TREM-1-rs2234246 AA基因型是SAP合并腹腔感染的危险因素,感染后基因型rs2234246、rs2234237中炎性水平均高于未感染患者,且感染后TREM-1基因型位点AA型炎性水平较高,TREM-1基因位点与SAP合并腹腔感染预后无相关性。

关键词：重症急性胰腺炎腹腔感染髓样细胞表达激发受体-1 预后危险因素

TREM-1基因多态性与重症急性胰腺炎腹腔感染及其预后的关联

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中华医院感染学杂志 2023年第4期33卷 567-572页

作者：尧娟朱俊臣彭丽媛刘怡林李卉成都大学附属医院重症医学科四川成都610081

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)患者髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)基因多态性与腹腔感染及预后的关系.方法选取2016年1月-2020年12月成都大学附属医院收治的130例SAP患者,其中合并腹腔感染者70例纳入感染组,未合并腹腔感染者60例纳入... 详细信息

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)患者髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)基因多态性与腹腔感染及预后的关系.方法选取2016年1月-2020年12月成都大学附属医院收治的130例SAP患者,其中合并腹腔感染者70例纳入感染组,未合并腹腔感染者60例纳入未感染组,并依据患者预后情况将感染组患者分为生存组(n=56)和死亡组(n=14)两个亚组,所有患者均对TREM-1基因位点基因分型进行检测,比较不同组别基因型频率,通过Logistic回归分析SAP患者腹腔感染的危险因素,比较不同基因型患者外周血白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果腹腔感染SAP患者共培养分离病原菌129株,其中革兰阴性菌91株占70.54%,革兰阳性菌34株占26.36%、真菌4株占3.10%;感染组rs2234246基因位点中AA基因型比例高于未感染组(P表达水平高于其他基因型,rs2234246、rs2234237位点多态性与SAP并发腹部感染患者预后无关.

关键词：重症急性胰腺炎腹腔感染危险因素髓样细胞表达激发受体-1 基因预后关联

TREM-1和HMG B1在老年直肠癌患者肿瘤组织中的表达及其与预后的关系

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中国现代普通外科进展 2019年第5期22卷 378-380,385页

作者：潘薇陈瑞张忠涛北京市隆福医院肛肠科北京100010 首都医科大学北京友谊医院普外科北京100010

目的:探究髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在老年直肠癌患者肿瘤组织中的表达及其与预后的关系。方法:收集2017年6月-2018年5月收治的老年直肠癌患者99例,所有患者均由同一组高年资主任医师施行直肠癌根治术,... 详细信息

目的:探究髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在老年直肠癌患者肿瘤组织中的表达及其与预后的关系。方法:收集2017年6月-2018年5月收治的老年直肠癌患者99例,所有患者均由同一组高年资主任医师施行直肠癌根治术,术后肿瘤组织均用蜡块包埋以备用,利用免疫组织化学染色检测HMGB1和TREM-1在直肠癌组织中的表达,并且通过生存曲线比较HMGB1和TREM-1与直肠癌术后生存的相关性。结果:99例老年直肠癌患者均获得随访,随访率为100%,不同TNM分期、淋巴转移和远处转移直肠癌组织HMGB1和TREM-1的表达差异均有统计学意义(P表达具有相关性(r=0.532,P表达阳性的直肠癌患者的生存率要明显低于HMGB1和TREM-1的表达阴性的直肠癌患者(P表达与直肠癌的发生和进展具有相关性,并且TREM-1是HMGB1的下游因子,与直肠癌根治术后患者的生存率具有相关性。

关键词：高迁移率族蛋白B1 髓样细胞表达激发受体-1 直肠肿瘤预后