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骨髓来源的肝干细胞研究进展

国外医学（流行病学．传染病学分册） 2005年第5期32卷 284-286页

作者：雷宇任红重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所 400010

骨髓干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,在体内外的多项实验中证明,部分骨髓干细胞能分化为成熟肝脏细胞,或分泌白蛋白,或具有胆管细胞标志,尤其在受损及遗传缺陷肝脏中分化效率较高。目前有骨髓源性肝干细胞的动员、归巢、转化机制... 详细信息

骨髓干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,在体内外的多项实验中证明,部分骨髓干细胞能分化为成熟肝脏细胞,或分泌白蛋白,或具有胆管细胞标志,尤其在受损及遗传缺陷肝脏中分化效率较高。目前有骨髓源性肝干细胞的动员、归巢、转化机制及调控已逐渐成为肝干细胞研究的热点,但仍有许多亟待解决的问题。鉴于骨髓干细胞的易于获得及体外培养技术相对成熟,有望用于肝细胞移植、生物型人工肝及基因载体,在治疗肝脏的感染性、遗传性和代谢性疾病以及肝肿瘤等有广阔的前景。

关键词：肝细胞干细胞骨髓骨髓干细胞肝脏细胞干细胞研究骨髓源性肝干细胞体外培养技术生物型人工肝多向分化肝细胞移植代谢性疾病

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肝干细胞的研究进展

实用肝脏病杂志 2008年第2期11卷 124-127页

作者：高强杜智高英堂天津医科大学 2005级研究生300170 天津市第三中心医院肝胆外科天津市人工细胞重点实验室

肝干细胞是成体干细胞的一种,由于其具有强大的增殖能力,并能分化为具有功能的成熟肝细胞,为肝病的细胞治疗和组织工程提供了重要的细胞来源。现就肝干细胞的来源、标志物、诱导与示踪、体外培养与扩增、分化及其与肝细胞癌的关系作一... 详细信息

肝干细胞是成体干细胞的一种,由于其具有强大的增殖能力,并能分化为具有功能的成熟肝细胞,为肝病的细胞治疗和组织工程提供了重要的细胞来源。现就肝干细胞的来源、标志物、诱导与示踪、体外培养与扩增、分化及其与肝细胞癌的关系作一综述。

关键词：肝干细胞肝卵圆细胞胚胎干细胞骨髓源性肝干细胞

自体骨髓干细胞移植治疗肝衰竭应用基础研究进展

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中西医结合肝病杂志 2005年第3期15卷 190-192页

作者：曾伟导王平樊群深圳市布吉人民医院广东深圳518112 深圳市东湖医院

骨髓源性肝干细胞(BDHSC)移植作为辅助治疗急性肝功能衰竭(ALF)的方法，可以免除异基因或异种细胞所致的免疫排斥、传染疾病等风险，规避异体原位肝移植所带来的其他问题。现将近几年来有关应用基础的研究综述如下。

关键词：应用基础研究细胞移植治疗自体骨髓肝衰竭骨髓源性肝干细胞急性肝功能衰竭原位肝移植辅助治疗免疫排斥异种细胞传染疾病研究综述异基因

小鼠骨髓CD90+、CD34+、CD117+和Sca-1+细胞的肝干细胞潜能比较

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肝胆外科杂志 2006年第6期14卷 458-460页

作者：廖彩仙唐浩周杰苏俊张春兴张守华南方医科大学南方医院广州510515

目的比较的小鼠CD90+Lin-、C34+Lin-、CD117+Lin-和Sca-1+Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能。方法供体为纯系BALB/C雄性小鼠,应用免疫磁珠分选法获取CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-和Sca-1+Lin-骨髓细胞。受体为35Gy全肝照射处理后的同龄同系BALB/C雌性小鼠,A、B、C、D组小鼠分别接受CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-骨髓细胞移植。移植后30天活杀小鼠,取肝进行Y染色体原位分子杂交与白蛋白免疫组织化学联合检测。结果各组小鼠肝组织中都可以检测到Y染色体和白蛋白均呈阳性的双阳性细胞,C组的双阳性细胞数量显著多于其它各组。结论CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-骨髓细胞都具有肝干细胞潜能,其中CD117+Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能最大、形成肝细胞的能力量强。

关键词：小鼠骨髓细胞骨髓源性肝干细胞肝干细胞潜能

趋化因子CCL2、CCL5、CCL7、CCL21和CCL25在肝纤维化和肝硬化病人肝组织中的表达变化

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趋化因子CCL2、CCL5、CCL7、CCL21和CCL25在肝纤维化和肝硬化病人...

作者：黄勇平南方医科大学

学位级别：硕士

骨髓源性肝干细胞(Bone marrow derived liver stem cells, BMDLSC)是指骨髓干细胞中可以分化形成肝细胞的特定干细胞群。这类干细胞的发现,为肝脏疾病治疗提供了新思路和新手段。小鼠BMDLSC移植实验证实,BMDLSC对CCL4及酒精所致小鼠肝... 详细信息

骨髓源性肝干细胞(Bone marrow derived liver stem cells, BMDLSC)是指骨髓干细胞中可以分化形成肝细胞的特定干细胞群。这类干细胞的发现,为肝脏疾病治疗提供了新思路和新手段。小鼠BMDLSC移植实验证实,BMDLSC对CCL4及酒精所致小鼠肝纤维化具有逆转作用。但是在生理状态下定居在骨髓内的BMDLSC,为什么在移植后会向肝脏迁移并发挥修复作用,调控移植后BMDLSC向肝脏迁移的因素又有哪些,它们又是如何调控BMDLSC向肝脏迁移的,这些问题目前都未明了。近些年来,学者们发现趋化因子有可能是驱使BMDLSC向肝脏迁移的一个重要因素,其中基质细胞衍生因子-la (SDF-1a)已在动物实验中证实可以驱使CXCR4阳性的骨髓源性肝干细胞向肝内聚集并诱导其向肝细胞和胆管细胞分化，我们此前的临床研究也观察到SDF-1a在肝脏发生纤维性增生时表达增多,并且表达数量与肝纤维化程度相关,提示SDF-1a在人体内同样有可能是趋势BMDLSC向肝脏迁移的一个重要因素。在体外试验中,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1,系统命名为CCL2)、调节活化正常T细胞表达和分泌因子(Rantes,系统命名为CCL5)、人单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3,系统命名为CCL7)、人二级淋巴组织趋化因子(SLC,系统命名为CCL21)和人胸腺表达趋化因子(TECK,系统命名为CCL25)等趋化因子可以驱使骨髓间充质干细胞向其浓度递增方向迁移,且趋化能力大小与上述趋化因子的浓度成正相关。提示这些趋化因子在体内也有可能是调控BMDLSC向肝脏迁移的的因素。但是,趋化因子CCL2、CCL5、CCL7、CCL21和CCL25在肝脏的表达情况至今仍未见报道。本实验采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)对正常肝组织和肝纤维化与肝硬化肝组织中趋化因子CCL2、CCL5. CCL7、CCL21和CCL25的表达水平进行了检测。方法参照人ELISA试剂盒内所附的操作说明。结果显示,肝脏发生肝纤维性增生损伤时,肝组织中趋化因子CCL2、CCL5、CCL7、CCL21和CCL25的含量显著增加,随着病变由肝纤维化向肝硬化发展,肝组织中CCL2、CCL5、CCL21和CCL25水平也进一步升高,但CCL7水平呈下降趋势。[材料和方法]1.肝组织取自30例病人,均来自2008年5月-2009年5月在南方医科大学南方医院肝胆外科接受手术(包括肝移植)的病人。其中男性17例,女性13例。年龄19-77岁,平均50岁。30例标本共分为3组：①正常对照组(n=9)：乙肝表面抗原阴性,丙肝抗体阴性,肝脏生化功能正常(转氨酶、胆红素、血清白蛋白、凝血酶原时间),Child-Pugh肝功能分级评估为A级,肝组织病理学检查显示肝组织结构正常。②肝纤维化组(n=10)：乙肝表面抗原阳性,有或无乙型肝炎病史,丙肝抗体阴性,肝脏生化功能正常或异常,Child-Pugh肝功能分级评估为A级,组织病理学检查显示肝内纤维化组织增生,但无假小叶形成。③肝硬化组(n=11)：乙肝表面抗原阳性,有或无乙型肝炎病史,丙肝抗体阴性,肝脏生化功能检查轻度至重度异常,Child-Pugh肝功能分级评估为A-C级,病理学检查显示肝内广泛纤维组织增生,肝小叶结构被破坏,假小叶及再生结节形成。2.观察指标与方法2.1临床症状与体征体查确认患者有无黄疸,有无肝掌与痴蛛痣,有无腹腔积液,有无肝性脑病,以及这些症状体征的程度。2.2影像学检查肝脏CT扫描和肝脏B型超声检查。2.3实验室检查乙肝两对半、丙肝抗体试验,手术当天抽血查肝脏生化功能指标：丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、血清总胆红素(TBIL)、凝血酶原时间(PT)。2.4组织病理学检查肝组织经固定、石蜡包埋、脱蜡至水及HE染色后,光学显微镜下观察。2.5肝组织中趋化因子CCL2、CCL5、CCL7、CCL21和CCL25含量的测定2.5.1肝组织的匀浆、离心精确称重肝组织后移入微量手动玻璃匀浆器中于低温环境中彻底匀浆,按比加入1×PBS缓冲液将匀浆组织洗下并转移至1.5ml EP管中,在低温高速离心机中以4℃、1000×g离心力离心10min,提取上清液移至另一1.5ml EP管中,再次于4℃下25000×rpm离心20min,取上清液待测。2.5.2 ELISA法测定以上五种趋化因子的含量采用双抗体夹心ELISA法,即将上述五种趋化因子与包被于酶标板上的单抗结合

关键词：趋化因子骨髓源性肝干细胞肝纤维化肝硬化