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基于间充质干细胞的小鼠急性移植物抗宿主病骨髓微环境损伤体外细胞模型的建立与评价策略研究

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中国实验血液学杂志 2024年第2期32卷 617-624页

作者：田家仪李佩霖汤杰许润香尹博丰王飞燕李晓彤宁红梅朱恒丁丽河北北方学院研究生院河北张家口075000 空军特色医学中心血液科北京100142 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850 空军军医大学研究生院陕西西安710032 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230032 解放军总医院血液学部/解放军总医院第五医学中心南院区北京100071

目的:建立小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)骨髓微环境损伤的体外细胞模型并进行评价。方法:以6-8周龄雌性C57BL/6N小鼠作为骨髓和淋巴细胞的供体,6-8周龄雌性BALB/c小鼠作为aGVHD模型的受鼠。受鼠接受致死剂量(8.0 Gy,72.76 cGy/min)γ... 详细信息

目的:建立小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)骨髓微环境损伤的体外细胞模型并进行评价。方法:以6-8周龄雌性C57BL/6N小鼠作为骨髓和淋巴细胞的供体,6-8周龄雌性BALB/c小鼠作为aGVHD模型的受鼠。受鼠接受致死剂量(8.0 Gy,72.76 cGy/min)γ射线全身照射后6-8 h内,尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×10^(7)/只),建立骨髓移植(BMT)组小鼠模型(n=20);尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×10^(7)/只)及脾脏淋巴细胞(2×10^(6)/只),建立小鼠aGVHD模型(n=20)。造模后d 7麻醉小鼠,摘取眼球取血,静置离心后吸取血清。分离小鼠间充质干细胞(MSC),分别用添加了2%、5%和10%的BMT组血清和相同浓度的aGVHD组血清的培养基进行培养。通过成纤维细胞集落形成实验(CFU-F)评价两组血清对MSC集落形成能力的影响;通过CD29和CD105免疫荧光染色评价两组MSC表面分子表达的差异;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MSC自我更新相关基因Oct-4、Sox-2和Nanog的表达情况。结果:成功建立起可以模拟小鼠aGVHD骨髓微环境损伤的体外细胞模型。CFU-F实验表明,在培养后d 7,与BMT组相比,aGVHD血清浓度为2%和5%时,MSC集落形成能力显著降低(P骨髓微环境损伤领域研究提供了新的工具。

关键词：辐射造血干细胞移植急性移植物抗宿主病骨髓微环境间充质干细胞自我更新

骨髓微环境中巨噬细胞调控造血机制的研究进展

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中国实验血液学杂志 2023年第4期31卷 1242-1246页

作者：王玉寒李曰丁爽徐州医科大学医学技术学院江苏徐州221000 徐州医科大学附属医院检验科江苏徐州221000

骨髓巨噬细胞是造血微环境的重要组成部分,与造血调控和造血干细胞移植(HSCT)关系密切。最近的研究表明,骨髓巨噬细胞是造血干细胞龛的重要组成部分,有助于调控造血干/祖细胞的动员和功能;造血干细胞移植后,骨髓微环境受损,大量巨噬细... 详细信息

骨髓巨噬细胞是造血微环境的重要组成部分,与造血调控和造血干细胞移植(HSCT)关系密切。最近的研究表明,骨髓巨噬细胞是造血干细胞龛的重要组成部分,有助于调控造血干/祖细胞的动员和功能;造血干细胞移植后,骨髓微环境受损,大量巨噬细胞浸润,调控巨噬细胞的相关信号通路能够促进造血的恢复及造血功能重建。体外巨噬细胞与造血干细胞共同培养后,明显增加了造血干细胞数量及克隆形成的能力,证明巨噬细胞在骨髓造血微环境中对造血调控具有重要作用。本文就骨髓造血微环境中巨噬细胞对造血作用的研究进展作一综述。

关键词：巨噬细胞骨髓微环境造血干细胞移植造血调控

低氧诱导因子1α在G-CSF诱导小鼠造血干细胞动员中的表达变化

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中国实验血液学杂志 2023年第1期31卷 221-226页

作者：杨慧璇李桥川韦莉莉赖永榕广西医科大学第一附属医院血液内科广西南宁530021 广西医科大学第一附属医院老年病学综合病区广西南宁530021

目的:探究小鼠骨髓微环境低氧诱导因子1α(HIF-1α)在G-CSF动员造血干细胞(HSC)过程中的表达变化及相关机制。方法:采用流式细胞术检测注射G-CSF前后小鼠外周血Lin-Sca-1+c-kit+(LSK)细胞比例,并采用RQ-PCR、免疫组化等方法检测G-CSF动... 详细信息

目的:探究小鼠骨髓微环境低氧诱导因子1α(HIF-1α)在G-CSF动员造血干细胞(HSC)过程中的表达变化及相关机制。方法:采用流式细胞术检测注射G-CSF前后小鼠外周血Lin-Sca-1+c-kit+(LSK)细胞比例,并采用RQ-PCR、免疫组化等方法检测G-CSF动员不同时间点小鼠骨髓及骨内膜HIF-1α、骨钙素(OCN)mRNA和蛋白的表达水平,光学显微镜下观察小鼠股骨标本成骨细胞数。结果:G-CSF动员4 d小鼠外周血LSK细胞比例开始升高,动员5 d达到高峰,均较对照组显著升高(P骨髓有核细胞和骨内膜成骨细胞中表达差异无显著统计学意义(P=0.073),OCN mRNA主要表达于骨内膜细胞,显著高于骨髓有核细胞(P=0.034);动员过程中HIF-1α基因、蛋白表达水平升高,OCN基因、蛋白表达水平下降,骨内膜成骨细胞数量减少(P骨髓HIF-1α表达增加,成骨细胞受抑引起HSC向外周迁移是导致其变化的原因之一。

关键词：低氧诱导因子1α 成骨细胞造血干细胞动员骨髓微环境

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急性髓系白血病免疫评分的建立及验证

中国实验血液学杂志 2022年第2期30卷 327-333页

作者：胡芳王韵张钰曾云王顺清潘学谊杨同华刘启发梁洋中山大学肿瘤防治中心血液肿瘤科广东广州510060 中山大学华南肿瘤国家重点实验室广东广州510060 中山大学肿瘤医学协同创新中心广东广州510060 南方医科大学南方医院血液科广东广州510515 昆明医科大学第一附属医院血液科云南昆明650504 华南理工大学附属广州市第一人民医院血液科广东广州510030 广东药科大学附属第一医院血液科广东广州510060 昆明理工大学附属云南省第一人民医院血液科云南昆明650000

目的:建立急性髓系白血病(AML)免疫基因预后模型并探索其与骨髓免疫微环境之间的关系。方法:从TCGA数据库下载TCGA-AML基因表达谱以及临床资料数据。通过LASSO分析筛选构建预测模型的免疫基因,模型预测精度通过受试者工作特征曲线和曲... 详细信息

目的:建立急性髓系白血病(AML)免疫基因预后模型并探索其与骨髓免疫微环境之间的关系。方法:从TCGA数据库下载TCGA-AML基因表达谱以及临床资料数据。通过LASSO分析筛选构建预测模型的免疫基因,模型预测精度通过受试者工作特征曲线和曲线下面积来量化,生存分析采用Log-rank检验。通过基因集富集分析评估不同免疫风险状态下的通路以及功能富集状态,并在真实世界中通过流式分析验证免疫预测模型与骨髓免疫微环境之间的相关性。结果:免疫基因模型风险低的患者预后优于风险高的患者,多因素分析显示,该免疫基因风险模型为独立预后因素。训练集中AML患者的危险比为HR=24.594(95%CI:6.180-97.878),1、3和5年总生存率的AUC分别为0.811、0.815和0.837。此外,差异基因集富集分析提示,细胞因子以及趋化因子等免疫相关通路激活以及自身免疫疾病相关通路激活。同时,真实世界数据显示,免疫风险高的患者CD8+T细胞以及B淋巴细胞数量较低风险患者更低。结论:本研究构建了一个稳定的AML预后评估模型,它不仅可以用来预测AML的预后,还能进一步揭示了免疫微环境的失调。

关键词：急性髓系白血病免疫风险模型骨髓微环境通路富集

骨髓微环境影响调节性T细胞促进血液恶性肿瘤发展的研究进展

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中国免疫学杂志 2021年第5期37卷 635-640,F0003,F0004页

作者：安田丽李亮亮赵丽(指导) 兰州大学第一医院血液科兰州730000 兰州大学第二医院血液科 730030

骨髓微环境对血液恶性肿瘤发生和发展具有保护作用,存在多种免疫抑制细胞,如调节性T细胞(Tregs)。Tregs具有独特的免疫抑制作用,因其参与肿瘤免疫逃逸成为抗肿瘤免疫治疗的重要靶点。白血病、多发性骨髓瘤等血液恶性肿瘤患者骨髓中Treg... 详细信息

骨髓微环境对血液恶性肿瘤发生和发展具有保护作用,存在多种免疫抑制细胞,如调节性T细胞(Tregs)。Tregs具有独特的免疫抑制作用,因其参与肿瘤免疫逃逸成为抗肿瘤免疫治疗的重要靶点。白血病、多发性骨髓瘤等血液恶性肿瘤患者骨髓中Tregs水平升高,并与疾病进展及预后呈负相关。骨髓微环境中存在多种促进Tregs免疫功能抑制的因素,通过诱导Tregs扩增、存活及趋化等增强Tregs免疫抑制功能,促进肿瘤发生发展。通过抑制或阻断对Tregs具有促进作用的因素可逆转Tregs的免疫抑制功能。本文将对血液恶性肿瘤骨髓微环境中相关基因、细胞因子、免疫细胞和趋化因子对Tregs的影响进行综述,为今后以Tregs为靶点的免疫治疗提供新途径。

关键词：调节性T细胞骨髓微环境免疫治疗

多发性骨髓瘤细胞与骨髓微环境互作机制研究进展

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四川大学学报（医学版） 2023年第3期54卷 475-481页

作者：何旎涵周文中南大学基础医学院肿瘤研究所长沙412000

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是浆细胞来源的血液系统恶性肿瘤,其发生发展机制主要包括肿瘤细胞遗传学异常和细胞与骨髓微环境(bone marrow microenvironment,BMME)互作。MM细胞在BMME内恶性增殖,通过细胞与细胞外基质的直接或间... 详细信息

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是浆细胞来源的血液系统恶性肿瘤,其发生发展机制主要包括肿瘤细胞遗传学异常和细胞与骨髓微环境(bone marrow microenvironment,BMME)互作。MM细胞在BMME内恶性增殖,通过细胞与细胞外基质的直接或间接互作,促进MM的发生发展。探讨MM细胞与微环境的互作机制,对阐明MM发生发展机制及早诊和治疗有着重要意义。肿瘤的代谢重编程是肿瘤学研究的重点之一。本文总结出微环境中MM的代谢重编程改变和MM代谢与微生物互作的特征,以便于深入了解MM的发生发展及耐药性机制,最终达到挖掘MM治疗的新策略之目的。

关键词：多发性骨髓瘤克隆演变骨髓微环境代谢微环境

骨髓增生异常肿瘤的骨髓微环境促进疾病发生发展的机制

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中华血液学杂志 2023年第4期44卷 350-352页

作者：洪明华常春康上海交通大学附属第六人民医院血液科上海200233

骨髓增生异常肿瘤(myelodysplastic neoplasms,MDS)是一种以造血干细胞克隆增殖、骨髓增生异常、无效造血、外周血细胞减少,高风险发展为急性髓系白血病(AML)为特征的恶性疾病[1]。基因和表观遗传学变化及异常的骨髓微环境以多步骤和克... 详细信息

骨髓增生异常肿瘤(myelodysplastic neoplasms,MDS)是一种以造血干细胞克隆增殖、骨髓增生异常、无效造血、外周血细胞减少,高风险发展为急性髓系白血病(AML)为特征的恶性疾病[1]。基因和表观遗传学变化及异常的骨髓微环境以多步骤和克隆进化的方式促成MDS或AML的转化[2]。但是,携带MDS常见基因突变的造血干祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cells,HSPC)无独立的细胞自主增殖能力,并不能单独为恶性克隆提供增殖优势[3]。因此骨髓微环境的变化及其与HSPC的双向交流被认为在启动MDS的发生和支持肿瘤克隆的发展中起到关键作用。

关键词：骨髓微环境骨髓增生异常克隆增殖 neoplasms 造血干细胞无效造血表观遗传学基因突变

BCMA CAR-T细胞治疗的耐药机制及优化策略研究

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中国肿瘤临床 2023年第21期50卷 1115-1118页

作者：李运佳刘卓刚(综述) 胡荣(审校) 中国医科大学附属盛京医院第一血液内科沈阳市110000

嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法在血液系统肿瘤治疗中已展示出卓越成效。BCMA抗原在骨髓瘤细胞表面普遍表达,是合适高效的CAR-T治疗靶抗原。尤其是对于复发/难治性多发性骨髓瘤患者,BCMA CAR-T细胞治... 详细信息

嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法在血液系统肿瘤治疗中已展示出卓越成效。BCMA抗原在骨髓瘤细胞表面普遍表达,是合适高效的CAR-T治疗靶抗原。尤其是对于复发/难治性多发性骨髓瘤患者,BCMA CAR-T细胞治疗缓解率高,多数患者在输注1年后仍可在体内检测到CAR-T细胞。但是耐药与疾病复发仍是目前临床管理中面对的关键问题。本文将从多发性骨髓瘤细胞免疫逃逸、CAR-T产品因素、既往治疗方案及肿瘤免疫微环境的抑制等几个方面来探讨BCMA CAR-T细胞疗法的应答响应因素及耐药诱导机制,并提出可能的优化策略,以期为未来探索提供参考意义。

关键词：多发性骨髓瘤嵌合抗原受体T细胞耐药性免疫逃逸骨髓微环境

急性髓系白血病细胞与骨髓基质细胞相互作用的研究进展

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中国肿瘤临床 2023年第2期50卷 88-91页

作者：司君齐(综述) 田晨(审校) 天津医科大学肿瘤医院血液科国家肿瘤临床医学研究中心天津市“肿瘤防治”重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津市300060 新疆和田地区人民医院肿瘤内科

骨髓微环境(bone marrow microenvironment,BMM)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的发生发展中发挥重要作用,骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)是骨髓微环境中一类非造血细胞群,在正常造血与恶性血液肿瘤的... 详细信息

骨髓微环境(bone marrow microenvironment,BMM)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的发生发展中发挥重要作用,骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)是骨髓微环境中一类非造血细胞群,在正常造血与恶性血液肿瘤的发生发展中发挥关键作用。一方面,BMSCs调控AML细胞的增殖、凋亡及耐药,影响白血病进程;另一方面,AML细胞通过影响BMSCs的功能,反过来支持自身发生发展。二者相互作用,共同促进AML的进展。本文对近年来AML细胞与BMSCs相互作用的研究进展进行综述。

关键词：急性髓系白血病骨髓基质细胞骨髓微环境耐药