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大负荷运动及恢复期间大鼠骨骼肌骨架蛋白Nebulin和Vimentin及超微结构的变化

大负荷运动及恢复期间大鼠骨骼肌骨架蛋白Nebulin和Vimentin及超...

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作者：李立荣扬州大学

学位级别：硕士

目的:研究大负荷运动及恢复期大鼠骨骼肌骨架蛋白Nebulin及Vimentin及超微结构的变化。方法:以36只6周龄健康雄性SD大鼠为研究对象。将其随机分为6组,每组6只:A,安静对照组(Control);B,力竭运动即刻组(E0);C,力竭运动后12h组(E12);D,力... 详细信息

目的:研究大负荷运动及恢复期大鼠骨骼肌骨架蛋白Nebulin及Vimentin及超微结构的变化。方法:以36只6周龄健康雄性SD大鼠为研究对象。将其随机分为6组,每组6只:A,安静对照组(Control);B,力竭运动即刻组(E0);C,力竭运动后12h组(E12);D,力竭运动后24h组(E24);E,力竭运动后48h组(E48);F,力竭运动后72h组(E72)。各力竭运动组进行为期一周的负重力竭性游泳运动,并于末次力竭运动后的不同时间点宰杀取样。所有大鼠用乌拉坦腹腔麻醉、宰杀后迅速取腓肠肌、比目鱼肌、股外侧肌、股直肌,部分液氮冷冻保存待用,另一部分分别用4%多聚甲醛或2.5%戊二醛固定。采用SABC-DAB免疫组化方法检测大鼠比目鱼肌和股外侧肌中骨架蛋白Nebulin和Vimentin蛋白表达,并用图像分析仪对免疫染色切片进行定量分析。取股直肌样本制作电镜超薄切片,透射电子显微镜下观察骨骼肌的超微结构变化。结果:(1)免疫组化结果显示,大负荷运动后,E0组股外侧肌vimentin和nebulin染色程度明显加深,而且阳性范围明显增大,不仅分布于胞浆中,还分布于细胞周围的结缔组织,以及小血管的周围及内部;运动后E12组,vimentin和nebulin表达强度明显低于运动后即刻组(P骨架蛋白nebulin和vimentin是骨骼肌运动性微损伤的敏感形态学指标.(2) vimentin和nebulin免疫组化图像分析系统统计结果,二者基本相似。与对照组相比,力竭运动后Nebulin和Vimentin平均光密度及阳性面积百分比均显著升高,平均光密度在力竭后即刻较高,但阳性面积百分比最高点出现在运动后24小时。表明运动后不同时间点vimentin和nebulin的表达都有不同程度的增加。(3)大鼠股直肌电镜下观察结果显示,一周大负荷游泳运动能够引起骨骼肌超微结构较为显著的变化,如:肌纤维A带拉长,肌原纤维排列紊乱,Z线大范围内不规则,相邻间断裂,可见Z线流等。表明大负荷向心运动可作为观察骨骼肌超微结构的重要模型之一。

关键词：大负荷运动大鼠骨骼肌骨架蛋白波形蛋白及伴肌动蛋白免疫组织化学超微结构

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