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三维连通多孔钛修饰的人工股骨复合骨形态发生蛋白的实验研究

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中华外科杂志 2008年第2期46卷 129-131页

作者：李众利王岩张国强周密薛静解放军总医院骨科北京100853 百慕京航生物材料有限公司

目的将人工股骨柄表面贴敷复合了骨形态发生蛋白的三维连通多孔钛，观察早期骨长入情况。方法将表面贴敷三维连通多孔钛的犬人工股骨柄直接或通过纤维蛋白胶与骨形态发生蛋白复合，植入犬股骨，植入后2、5周荧光标记，3、6周取材病理观... 详细信息

目的将人工股骨柄表面贴敷复合了骨形态发生蛋白的三维连通多孔钛，观察早期骨长入情况。方法将表面贴敷三维连通多孔钛的犬人工股骨柄直接或通过纤维蛋白胶与骨形态发生蛋白复合，植入犬股骨，植入后2、5周荧光标记，3、6周取材病理观察。结果植入后3周，骨已长入多孔材料一半，植入后6周，宿主骨与假体成为一体，骨长入多孔材料全层；第6周时成骨量明显高于第3周。结论具有三维连通多孔钛表面的假体与骨形态发生蛋白复合后能使骨长入加快，骨整合的程度提高，达到机械锁定和骨整合的双重固定，减少假体松动。

关键词：骨形态发生蛋白类假体和植入物三维连通多孔钛

磷酸钙骨水泥复合骨形态发生蛋白对兔实验性股骨头缺血性坏死的修复作用

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吉林大学学报（医学版） 2005年第5期31卷 684-687,F0003页

作者：苏云张伟胡春明徐爽张贵雨吕涛武首先吉林大学第一医院骨科解放军第208医院麻醉科

目的:观察自制CPC/BMP复合人工骨对兔实验性股骨头缺血性坏死(ANFH)的修复作用,并探讨其临床应用的可行性。方法:24只健康成年兔分成CPC组12只和CPC/BMP组12只,在兔左侧股骨头建立ANFH骨缺损模型。将CPC作为BMP的载体制备成CPC/BMP复合... 详细信息

目的:观察自制CPC/BMP复合人工骨对兔实验性股骨头缺血性坏死(ANFH)的修复作用,并探讨其临床应用的可行性。方法:24只健康成年兔分成CPC组12只和CPC/BMP组12只,在兔左侧股骨头建立ANFH骨缺损模型。将CPC作为BMP的载体制备成CPC/BMP复合材料后,植入骨缺损处,同时设立单纯CPC填充对照组。术后3及12周分批处死动物,每组每次处死6只。通过大体观察、X线摄片、HE染色、透射电镜等手段观察新骨形成和材料降解情况。综合评价CPC/BMP复合材料对ANFH骨缺损的修复能力。结果:CPC/BMP组3及12周时成骨情况明显优于单纯CPC组。CPC/BMP组3周时,CPC表面及内部可见较多新骨及幼稚骨细胞,CPC已被分解成多个区域(岛状分布),有板层骨形成;透射电镜观察可见成骨细胞侵入CPC内部,细胞浆内粗面内质网及线粒体增多扩张。CPC/BMP组12周时,光镜下见CPC降解,新生骨长入材料并与之相互分割包裹,骨小梁增粗;X线片显示新骨显影较清,材料密度减低,吸收降解现象明显;透射电镜观察可见大量成骨细胞散在于CPC颗粒之间,细胞内粗面内质网及线粒体增多扩张,较多毛细血管侵入材料内部。在材料降解速度方面,CPC/BMP组明显快于CPC组。结论:CPC是BMP的理想载体,CPC/BMP复合材料具有较强的传导成骨和诱导成骨活性,对实验性ANFH具有修复作用。在降解速度上CPC/BMP组明显快于单纯CPC组。

关键词：骨形态发生蛋白类骨粘合剂磷酸钙类生物相容性材料股骨头坏死

慢病毒介导人骨形态发生蛋白2/骨髓间充质干细胞/脱钙骨基质修复股骨大段缺损

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中国组织工程研究 2018年第9期22卷 1338-1343页

作者：陶旋李强李诗鹏石正松周桢杰桂林医学院附属医院急诊创伤外科广西壮族自治区桂林市541001

背景:课题组前期研究已证实,慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2基因转染兔骨髓间充质干细胞在表达持续时间上具有一定的优势。但慢病毒介导人骨形态发生蛋白基因转染兔骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质能否在体内促进骨缺损修复的问题... 详细信息

背景:课题组前期研究已证实,慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2基因转染兔骨髓间充质干细胞在表达持续时间上具有一定的优势。但慢病毒介导人骨形态发生蛋白基因转染兔骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质能否在体内促进骨缺损修复的问题有待探究。目的:观察兔股骨大段缺损中植入慢病毒介导人骨形态发生蛋白2转染骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质后的修复效果,探寻治疗股骨大段缺损的新途径。方法:选取48只新西兰大白兔,股骨中段截骨钢板内固定法制备兔左侧股骨大段缺损模型。造模成功后,随机分成A,B,C,D组,每组12只。A组无修复材料植入,B,C,D组分别植入脱钙骨基质、脱钙骨基质/骨髓间充质干细胞、慢病毒载体介导人骨形态发生蛋白2/骨髓间充质干细胞/脱钙骨基质。造模后2,4,8及12周分别处死每组3只兔子,通过苏木精-伊红染色、生物力学分析,X射线检查评价股骨大段缺损修复的情况。结果与结论:(1)X射线示A,B,C,D组均有不同的骨痂修复形成,且Lane-Sandhu X射线评分A骨形态发生蛋白2/骨髓间充质干细胞/脱钙骨基质后有大量的骨痂形成,良好的生物力学性能,完整的骨皮质,说明支架促进了骨传导、骨诱导和骨生成,对兔股骨大段缺损有较好的修复效果。

关键词：慢病毒属骨形态发生蛋白类间质干细胞组织工程

注射型纳米壳聚糖骨形态发生蛋白2复合体诱导牙周组织的再生

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中国组织工程研究 2015年第38期19卷 6184-6189页

作者：巴格那陈华荣李婷谢富强鱼灵会兰州大学第二医院甘肃省兰州市730000 兰州大学口腔医学院甘肃省兰州市730000 兰州大学第一医院东岗院区口腔科甘肃省兰州市730000

背景:壳聚糖水凝胶具有良好的生物兼容性、生物可降解性及抗菌性等特点,具有促进组织愈合和成骨诱导的作用,作为支架材料载负生长因子可保证外源生长因子的缓慢高效释放。目的:观察可注射性纳米壳聚糖骨形态发生蛋白2复合体促进大鼠牙... 详细信息

背景:壳聚糖水凝胶具有良好的生物兼容性、生物可降解性及抗菌性等特点,具有促进组织愈合和成骨诱导的作用,作为支架材料载负生长因子可保证外源生长因子的缓慢高效释放。目的:观察可注射性纳米壳聚糖骨形态发生蛋白2复合体促进大鼠牙周组织再生的效果。方法:将54只Wistar大鼠随机均分为3组,建立第二磨牙慢性牙周炎模型,建模成功后,实验组于第二磨牙牙周内植入可注射性纳米壳聚糖骨形态发生蛋白2复合体,对照组于第二磨牙牙周内植入可注射性纳米壳聚糖凝胶,空白组牙周内不植入任何药物。术后3,6,9周,进行牙龈出血指数、探诊深度、松动度、X射线片及组织病理学切片观察。结果与结论:实验组术后9周的探诊深度、松动度均低于对照组及空白组(P骨形态发生蛋白2复合体具有抗炎和引导牙周组织再生的作用。

关键词：壳聚糖凝胶类骨形态发生蛋白类生物材料纳米材料可注射性纳米壳聚糖凝胶骨形态发生蛋白2 牙周组织再生

人骨肉瘤细胞株中骨形态发生蛋白-1的检测、克隆和表达

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中国病理生理杂志 2003年第6期19卷 751-756页

作者：陈冬瑛朱全胜刘超丘钜世中山大学中山医学院病理学教研室广东广州510089 广州市公安局DNA鉴定中心广东广州510000

目的 :利用基因工程技术生产人骨形态发生蛋白 - 1的高保守区多肽 ,为进一步产生广谱型BMP - 1抗体提供有效的抗原蛋白。方法 :通过分析BMP - 1类各种分子的基因序列及蛋白结构 ,选择其中的一个片段作为目的基因。从人骨肉瘤细胞株Saos ... 详细信息

目的 :利用基因工程技术生产人骨形态发生蛋白 - 1的高保守区多肽 ,为进一步产生广谱型BMP - 1抗体提供有效的抗原蛋白。方法 :通过分析BMP - 1类各种分子的基因序列及蛋白结构 ,选择其中的一个片段作为目的基因。从人骨肉瘤细胞株Saos - 2中提取总RNA ,用RT -PCR扩增目的基因片段并克隆到原核表达载体pMALc2中 ,构建成重组质粒BMP - 1(32 2 - 5 88aa) -pMALc2。将该重组质粒转化大肠杆菌DH5 -α ,经过筛选鉴定获得数个阳性克隆 ,再进行DNA序列测定。最后用IPTG诱导宿主菌表达融合蛋白。结果 :BMP - 1基因片段被成功地克隆到pMALc2载体中 ,在IPTG的诱导下能高效表达 ,融合蛋白的表达量占细菌蛋白总量的 (6 6 - 72 ) %。结论 :所获得的重组蛋白包含BMP - 1的几个完整的重要结构域 (2个CUB区和 1个EGF区 ) ,为BMP - 1类分子所共有的高度保守区。该重组蛋白作为抗原 ,可进一步用于产生能有效、特异地识别人类BMP - 1类分子的广谱型BMP - 1抗体。

关键词：骨形态发生蛋白类基因融合蛋白

骨髓间质干细胞复合脱钙骨基质和骨形态发生蛋白行兔腰椎横突间融合

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中华骨科杂志 2011年第7期31卷 800-805页

作者：胡炜张学利高欣凤崔子健孙天威南开大学人民医院脊柱外科天津300121 天津市儿童医院急创外科

目的探讨骨髓间质干细胞复合脱钙骨基质和骨形态发生蛋白进行兔腰椎横突问融合的效果。方法体外分离、培养骨髓问质于细胞，复合于脱钙骨基质材料，以骨形态发生蛋白进行成骨化诱导。日本大耳白兔60只，随机分为三组，A组以骨髓间质干... 详细信息

目的探讨骨髓间质干细胞复合脱钙骨基质和骨形态发生蛋白进行兔腰椎横突问融合的效果。方法体外分离、培养骨髓问质于细胞，复合于脱钙骨基质材料，以骨形态发生蛋白进行成骨化诱导。日本大耳白兔60只，随机分为三组，A组以骨髓间质干细胞＋脱钙骨基质＋骨形态发生蛋白、B组以脱钙骨基质、C组以自体髂骨行L5．e横突间融合。术后8周取腰椎标本，评估植入材料融合情况；行DR片灰度分析，计算成骨密度及成骨面积；行CT扫描三维重建观察横突间融合形态。HE染色分析横突间融合组织结构。结果大体可见A组及C组植人材料与宿主横突融合，融合组织质地硬，形态不规整；B组横突间植入材料大部分被吸收。DR片示A组与C组横突间呈高密度影，成骨密度不均；B组未达到骨性融合。CT示A组与C组融合标本有明显的连续骨痂通过横突问区；B组未见连续骨痂。A组成骨密度和成骨面积均高于B组，与C组无差异。组织学观察示A组与C组大量软骨形成，靠近横突处新生骨小梁形成；B组横突间连接主要为纤维组织。结论骨髓问质干细胞复合脱钙骨基质和骨形态发生蛋白行兔腰椎横突间融合，其成骨能力接近自体髂骨，优于单纯应用脱钙骨基质。

关键词：间质干细胞骨基质骨形态发生蛋白类组织工程

自体髂骨复合骨形态发生蛋白与自体髂骨移植治疗骨折不连接的比较

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第33期13卷 6465-6468页

作者：孙彦平乔国勇王玉冰刘月坤任宏伟庞凌峰唐志前河北省第七人民医院骨科河北省定州市073000 河北工程学院附属医院骨二科河北省邯郸市056029

目的:对比观察自体髂骨复合骨形态发生蛋白移植及单纯自体髂骨移植两种方法治疗骨不连接的临床效果。方法:骨不连接患者40例,男24例,女16例,年龄19～56岁,随机分为两组,实验组20例,对照组20例。实验组行自体髂骨复合骨形态发生蛋白后移... 详细信息

目的:对比观察自体髂骨复合骨形态发生蛋白移植及单纯自体髂骨移植两种方法治疗骨不连接的临床效果。方法:骨不连接患者40例,男24例,女16例,年龄19～56岁,随机分为两组,实验组20例,对照组20例。实验组行自体髂骨复合骨形态发生蛋白后移植于骨折端;对照组单纯行自体髂骨移植于骨折端。术后随访11～20个月。结果:40例骨不连接患者均进入结果分析。术后X射线片显示所有骨折均获得愈合,实验组骨折临床愈合时间(10.0±3.0)周(8～16周),对照组骨折临床愈合时间(13.0±3.8)周(8～20周),两组比较差异有显著性意义(t=2.26,P骨形态发生蛋白治疗骨不连接临床效果优于单纯自体髂骨移植,具有良好的成骨诱导活性,可缩短骨折愈合期,疗效安全、可靠,是治疗骨不连接较好的方法。

关键词：髂骨移植自体骨形态发生蛋白类红骨髓骨诱导

人骨形态发生蛋白4成熟肽在大肠杆菌中的表达及其活性测定

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中华实验外科杂志 2001年第2期18卷 133-135页

作者：王欣璐刘淼李华杨广夫王全颍杨广笑西安交通大学第一医院骨科 710061 西安交通大学第一医院肿瘤外科 710061 西安交通大学第一医院影像中心 710061 西安交通大学医学院解剖教研室

目的　利用基因工程技术表达人骨形态发生蛋白 4(hBMP4) ,为深入研究其结构、诱骨机理及临床应用将起积极作用。方法　应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR )技术 ,扩增出hBMP4成熟区基因 ,将其克隆于表达载体pBV 2 2 0的PRPL 启动子下游... 详细信息

目的　利用基因工程技术表达人骨形态发生蛋白 4(hBMP4) ,为深入研究其结构、诱骨机理及临床应用将起积极作用。方法　应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR )技术 ,扩增出hBMP4成熟区基因 ,将其克隆于表达载体pBV 2 2 0的PRPL 启动子下游。分别经随机挑选、限制性内切酶酶切鉴定及十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)筛选证实得到 5株重组质粒pBV/BMP4的转化菌株 ,以非融合蛋白形式表达了hBMP4。结果　SDS PAGE显示 ,此蛋白相对分子量为 14 ,表达量占菌体蛋白的 15 .6% ;细胞培养碱性磷酸酶 (ALP)活性测定证明 ,细胞分泌ALP的活性与rhBMP4浓度呈剂量依赖关系。结论　hBMP4在大肠杆菌中的表达产物复性后具有生物学活性。

关键词：骨形态发生蛋白类基因表达逆转录聚合酶链反应大肠杆菌 hBMP4

重组骨形态发生蛋白7基因转染骨髓间充质干细胞及其在该细胞中的表达

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中国地方病学杂志 2007年第1期26卷 39-42页

作者：高玉艳朱秀英李世胜王秀玲曲福军哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科 150081 哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所 150081

目的将重组骨形态发生蛋白7质粒（pcDNA3．1-BMP7）转染至体外培养的兔骨髓间充质干细胞中．测定骨形态发生蛋白7基因在该细胞中的表达。方法骨形态发生蛋白7基因序列测定、拼接后与报道的骨形态发生蛋白7基因序列对照：脂质体介导pcDNA... 详细信息

目的将重组骨形态发生蛋白7质粒（pcDNA3．1-BMP7）转染至体外培养的兔骨髓间充质干细胞中．测定骨形态发生蛋白7基因在该细胞中的表达。方法骨形态发生蛋白7基因序列测定、拼接后与报道的骨形态发生蛋白7基因序列对照：脂质体介导pcDNA3．1-BMP7转染骨髓间充质干细胞，G418筛选14d，Western blot、PCR、原位杂交检测骨形态发生蛋白7基因的表达。结果序列测定证实与GenBank报道的骨形态发生蛋白7全长基因序列一致：转染pcDNA3．1-BMP7质粒的骨髓间充质干细胞有大量骨形态发生蛋白7蛋白及骨态发生蛋白7 mRNA表达。结论脂质体介导下，重组真核表达载体pcDNA3．1-BMP7能被转入骨髓间充质干细胞．且表达了骨形态发生蛋白7及骨形态发生蛋白7 mRNA。

关键词：骨形态发生蛋白类软骨,关节干细胞基因表达