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中华神经医学杂志 2021年第11期20卷 1081-1091页

作者：雷秀英伊力亚斯·艾萨张瑜陈倩冯学召西仁阿依·西热甫米娜新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院药理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院生药学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830011

目的:探讨骆驼蓬总碱(TAH)能否诱导神经细胞自噬并促进神经毒性蛋白Tau蛋白和α-突触核蛋白(α-Syn)的降解。方法:(1)将体外培养的PC12细胞分为空白对照组及1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH组,分别加入0、1、2.5、5、10、20、50μg/mL ... 详细信息

目的:探讨骆驼蓬总碱(TAH)能否诱导神经细胞自噬并促进神经毒性蛋白Tau蛋白和α-突触核蛋白(α-Syn)的降解。方法:(1)将体外培养的PC12细胞分为空白对照组及1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH组,分别加入0、1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH作用24 h,观察细胞形态及数目的变化,采用MTT法检测细胞存活率;(2)将PC12细胞分为空白对照组、雷帕霉素组及1、2.5、5、10、20μg/mL TAH组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L自噬激活剂雷帕霉素及1、2.5、5、10、20μg/mL TAH作用4 h,采用免疫荧光染色检测细胞自噬体数;(3)将PC12细胞分为空白对照组、雷帕霉素组、10μg/mL TAH组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L雷帕霉素、10μg/mL TAH作用4 h,Western blotting检测细胞p62和微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ蛋白的表达;(4)将PC12细胞分为空白对照组、氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L自噬抑制剂氯喹、10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹作用4 h,Western blotting检测细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达;(5)将PC12细胞分为TAH组和空白对照组,分别加入10μg/mL TAH和等量溶剂处理4 h后,Western blotting检测细胞磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶(p-p70S6K)的表达;(6)将过表达Tau-绿色荧光蛋白(GFP)的Tet on HEK293细胞分为空白对照组、TAH组、强力霉素组、强力霉素+TAH组、强力霉素+TAH+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、强力霉素+TAH+氯喹组,后4组细胞加入200 ng/mL强力霉素处理24 h后,空白对照组加入等量溶剂,TAH组加入10μg/mL TAH,后3组细胞分别加入10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+5 mmol/L 3-MA、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹,作用24 h后在激光共聚焦显微镜下观察细胞绿色荧光强度的变化,Western blotting检测细胞Tau-GFP和LC3-Ⅱ蛋白的表达;(7)将稳定表达α-Syn的HEK293细胞分为空白对照组、氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L氯喹、10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹作用24 h,Western blotting检测细胞α-Syn和LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果:(1)与空白对照组比较,20、50μg/mL TAH组细胞存活率降低,且50μg/mL TAH组细胞存活率低于20μg/mL TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)与空白对照组比较,雷帕霉素组、10、20μg/mL TAH组细胞自噬体数增多,且10μg/mL TAH组细胞自噬体数多于20μg/mL TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05),因此,选择10μg/mL TAH用于后续实验;(3)与空白对照组比较,雷帕霉素组、TAH组细胞p62蛋白的表达均降低,LC3-Ⅱ蛋白的表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05);(4)与空白对照组比较,氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达均增加,且TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达高于氯喹组,差异均有统计学意义(P<0.05);(5)与空白对照组比较,TAH组细胞p-mTOR、p-p70S6K的表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);(6)强力霉素组细胞Tau-GFP蛋白的表达较空白对照组增加,强力霉素+TAH组细胞Tau-GFP蛋白的表达较强力霉素组降低,强力霉素+TAH+3-MA组、强力霉素+TAH+氯喹组细胞Tau-GFP蛋白的表达较强力霉素+TAH组增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。TAH组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较空白对照组增加,强力霉素+TAH组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素组增加,强力霉素+TAH+3-MA组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素+TAH组降低,强力霉素+TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素+TAH组增高,差异均有统计学意义(P<0.05);(7)与空白对照组比较,TAH组HEK293细胞α-Syn蛋白的表达降低,LC3-Ⅱ蛋白的表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达高于氯喹组,TAH+氯喹组细胞α-Syn蛋白的表达高于TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TAH可能通过抑制mTOR/p70S6K信号通路激活神经细胞

关键词：骆驼蓬总碱细胞自噬 Tau蛋白 α-突触核蛋白

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骆驼蓬总碱对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响

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中药材 2015年第11期38卷 2353-2357页

作者：张晓双孙建宁于慧灵陕西中医药大学药理教研室陕西咸阳712046 北京中医药大学中药学院北京100102

目的:观察骆驼蓬总碱(total alkaloid of Harmaline,TAH)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆的影响及作用机制。方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎复制大鼠VD模型,在造模后第30天将大鼠随机分为假手术组、模型组、尼麦角林... 详细信息

目的:观察骆驼蓬总碱(total alkaloid of Harmaline,TAH)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆的影响及作用机制。方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎复制大鼠VD模型,在造模后第30天将大鼠随机分为假手术组、模型组、尼麦角林片(7 mg/kg)组及骆驼蓬总碱25、12.5、6.25 mg/kg组,灌胃给药30 d。Morris水迷宫检测学习记忆能力,HE染色观察海马CA1区组织病理学改变,免疫组织化学法检测海马CA1区BAX及BCL-2蛋白表达。结果:与模型组比较,骆驼蓬总碱25 mg/kg组第3、4天逃避潜伏期显著缩短,12.5 mg/kg组第4天逃避潜伏期显著缩短。骆驼蓬总碱25、12.5 mg/kg组穿台次数显著增加。骆驼蓬总碱能改善大鼠海马CA1区神经元组织病理学改变,骆驼蓬总碱25、12.5 mg/kg能下调促凋亡蛋白BAX的表达,上调抑凋亡蛋白BCL-2的表达。结论:骆驼蓬总碱能改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马神经细胞凋亡有关。

关键词：骆驼蓬总碱血管性痴呆 Morris水迷宫 BAX BCL-2

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骆驼蓬总碱对小鼠肝癌细胞周期动力学的影响

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癌症 1993年第6期12卷 489-491页

作者：胡海棠潘启超中山医科大学肿瘤研究所药物室

采用显微荧光光度术和细胞分裂完全阻断法研究了骆驼蓬总碱对小鼠腹水型肝癌细胞动力学的影响。结果表明:骆驼蓬总碱(60mg/kg)对对数生长期细胞有显著生长抑制作用,抑制率53.4％;阻滞细胞从G2期向M期转化,细胞积聚于G2期。这为临床联合... 详细信息

采用显微荧光光度术和细胞分裂完全阻断法研究了骆驼蓬总碱对小鼠腹水型肝癌细胞动力学的影响。结果表明:骆驼蓬总碱(60mg/kg)对对数生长期细胞有显著生长抑制作用,抑制率53.4％;阻滞细胞从G2期向M期转化,细胞积聚于G2期。这为临床联合用药提供了依据。

关键词：骆驼蓬总碱细胞动力学肿瘤

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骆驼蓬总碱体内、外对人体肝癌和胃癌瘤株的抑制作用

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癌症 1991年第6期 463-465页

作者：杨小平,潘启超,李春杰,刘得(尔土) 中山医科大学肿瘤研究所中山医科大学肿瘤研究所新疆医学院附属第二医院新疆医学院附属第二医院广州 510060 广州 510060

用MTT法检测骆驼蓬总碱对人肝癌BEL—7402,胃癌MGC—803和鼻咽癌CNE—2细胞株均有杀伤作用,IC50分别为4.0,17.3及24.3μg/ml,尤其肝癌细胞株最敏感。在可耐受剂量下,骆驼蓬总碱（60mg/kg）对裸鼠移植人肝癌BEL—7402和胃癌MGC—803的生... 详细信息

用MTT法检测骆驼蓬总碱对人肝癌BEL—7402,胃癌MGC—803和鼻咽癌CNE—2细胞株均有杀伤作用,IC50分别为4.0,17.3及24.3μg/ml,尤其肝癌细胞株最敏感。在可耐受剂量下,骆驼蓬总碱（60mg/kg）对裸鼠移植人肝癌BEL—7402和胃癌MGC—803的生长有明显的抑制作用,抑制率分别为60％和48.4％;与DDP合并用药对裸鼠异体移植肝癌BEL—7402有增效作用。

关键词：骆驼蓬总碱裸鼠肿瘤抑制作用

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骆驼蓬总碱对血管性痴呆大鼠学习记忆的研究

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中药药理与临床 2015年第4期31卷 75-78页

作者：张晓双孙建宁郭洁程玥刘继平崔小虎白扇扇陕西中医药大学咸阳712046 北京中医药大学中药学院北京100102

目的:考察骆驼蓬总碱对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆的影响及作用机制。方法:采用双侧颈总动脉结扎制作血管性痴呆模型,造模后第30d将大鼠分成模型组、骆驼蓬总碱25mg/kg、12.5mg/kg、6.25mg/kg组,尼麦角林片7mg/kg组和假手术组,连续给药... 详细信息

目的:考察骆驼蓬总碱对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆的影响及作用机制。方法:采用双侧颈总动脉结扎制作血管性痴呆模型,造模后第30d将大鼠分成模型组、骆驼蓬总碱25mg/kg、12.5mg/kg、6.25mg/kg组,尼麦角林片7mg/kg组和假手术组,连续给药30d。Morris水迷宫检测学习记忆,免疫组织化学法检测海马CA1区突触素(synaptophysin,syn)微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP-2)蛋白表达,硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量,化学比色法测定一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:与模型组相比,骆驼蓬总碱25mg/kg第3、4d潜伏期明显缩短,12.5mg/kg组第4d潜伏期明显缩短。骆驼蓬总碱25mg/kg、12.5mg/kg剂量组站台穿越次数明显增加。骆驼蓬总碱25mg/kg、12.5mg/kg剂量组海马区syn、MAP-2的积分光密度值增加。骆驼蓬总碱25mg/kg海马NO含量、NOS活性降低。结论:骆驼蓬总碱能够改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与上调海马syn、MAP-2蛋白表达,提高突触可塑性,降低NO含量,抑制NOS活性有关。

关键词：骆驼蓬总碱血管性痴呆突触一氧化氮

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骆驼蓬总碱诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

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肿瘤 1998年第3期18卷 131-133页

作者：谢燕罗天锡广州铁路中心医院病理科中山医科大学肿瘤研究所

目的从细胞凋亡的角度研究骆驼蓬总碱（ＴＡＨ）抗肿瘤机制。方法将ＴＡＨ以不同剂量和作用时间处理体外培养的人宫颈癌ＨｅＬａ细胞，用流式细胞仪、电子显微镜、ＤＮＡ琼脂糖电泳检测ＴＡＨ诱发ＨｅＬａ细胞凋亡情况。结果一定剂量Ｔ... 详细信息

目的从细胞凋亡的角度研究骆驼蓬总碱（ＴＡＨ）抗肿瘤机制。方法将ＴＡＨ以不同剂量和作用时间处理体外培养的人宫颈癌ＨｅＬａ细胞，用流式细胞仪、电子显微镜、ＤＮＡ琼脂糖电泳检测ＴＡＨ诱发ＨｅＬａ细胞凋亡情况。结果一定剂量ＴＡＨ作用一定时间后，ＨｅＬａ细胞的流式细胞仪直方图出现亚二倍体峰（Ａｏ峰）；电子显微镜检测到染色质边集、浓缩，在核膜下形成小团块以及胞浆起泡，凋亡小体形成等一系列凋亡的特征性变化；ＤＮＡ琼脂糖电泳图上出现ＤＮＡ梯形电泳（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ）。结论在一定剂量和时间范围内，ＴＡＨ能诱导ＨｅＬａ细胞凋亡，诱导细胞凋亡可作为ＴＡＨ抗肿瘤的机制之一。

关键词：宫项肿瘤细胞凋亡骆驼蓬总碱 HeLa细胞

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骆驼蓬总碱提取纯化工艺及其对铝致痴呆小鼠作用的研究

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中成药 2011年第6期33卷 975-979页

作者：付计瑞滕亮戴秀勇于富生新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830054 新疆华圣元医药科技有限公司新疆乌鲁木齐830011

目的优选出新疆骆驼蓬种子中骆驼蓬总碱的提取工艺并且研究其对铝致老年痴呆小鼠的预防和治疗作用。方法以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱总含量为工艺优选指标,采用均匀试验设计优选新疆骆驼蓬种子中骆驼蓬总碱的提取工艺与纯化工艺。小鼠腹... 详细信息

目的优选出新疆骆驼蓬种子中骆驼蓬总碱的提取工艺并且研究其对铝致老年痴呆小鼠的预防和治疗作用。方法以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱总含量为工艺优选指标,采用均匀试验设计优选新疆骆驼蓬种子中骆驼蓬总碱的提取工艺与纯化工艺。小鼠腹腔注射AlCl3溶液100 mg/kg,通过Y型迷宫进行测试,检测小鼠记忆能力,评价去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱对三氯化铝造成的老年痴呆小鼠的预防和治疗作用。结果骆驼蓬总碱提取工艺的优化结果为加入种子用量4倍的30%乙醇量为提取溶剂,连续提取7 h,浓缩干燥得干浸膏,加干浸膏4倍量0.5%盐酸为纯化溶剂,氨水调pH值为9,超声10 min,得骆驼蓬总碱。去氢骆驼蓬碱、驼蓬总碱组与模型组比较有明显差别(P骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱对铝制老年痴呆小鼠有治疗作用。从死亡率分析来看,骆驼蓬总碱对小鼠有较好的保护作用。结论验证试验表明优化提取工艺稳定、合理、可行。动物实验表明,骆驼蓬总碱对铝制老年痴呆有治疗作用。

关键词：骆驼蓬总碱老年性痴呆提取纯化工艺均匀设计

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骆驼蓬总碱抗肿瘤及其协同抗瘤作用

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中草药 1998年第9期29卷 609-611页

作者：杨小平潘启超谢冰芬李春杰中山医科大学肿瘤研究所广州510060

用小鼠移植性肿瘤和裸鼠异体移植人肿瘤模型研究骆驼蓬总碱（TAH）抗肿瘤作用及其协同抗瘤作用。结果表明：TAH对小鼠S-180、LⅡ、肝癌以及裸鼠移植人鼻咽癌（CNE2）和人（BEL-7402）肝癌均有抗肿瘤作用，并发现TAH与顺铂（DDP）或阿霉... 详细信息

用小鼠移植性肿瘤和裸鼠异体移植人肿瘤模型研究骆驼蓬总碱（TAH）抗肿瘤作用及其协同抗瘤作用。结果表明：TAH对小鼠S-180、LⅡ、肝癌以及裸鼠移植人鼻咽癌（CNE2）和人（BEL-7402）肝癌均有抗肿瘤作用，并发现TAH与顺铂（DDP）或阿霉素（ADM）合用，具有协同抗肿瘤作用。

关键词：骆驼蓬总碱抗肿瘤作用增效作用

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骆驼蓬总碱治疗寻常型银屑病的疗效及电镜观察

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中国皮肤性病学杂志 1991年第3期5卷 141-143页

作者：刘锦莲郭学芝刘得玺朱文元石得仁新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科新疆医学院二附院皮肤科新疆医学院二附院药剂科南京医学院一附院皮肤科

内服骆驼蓬总碱治疗127例寻常型银屑病,并与应用郁金银屑片治疗的53例进行对比。结果表明,骆驼蓬总碱是一种疗效可靠,对人体各系统无不良影响,价格低廉的药物,为银屑病提供了一个新的治疗手段。

关键词：银屑病骆驼蓬总碱

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骆驼蓬总碱对人工感染牛双芽巴贝氏焦虫病的治疗试验

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中兽医医药杂志 1990年第1期9卷 2-5页

作者：樊斌堂孟聚诚党萍高芳梁纪兰李广林张玲姬良天赵四喜李玉庄中国农业科学院中兽医研究所河南省陕县兽医院

骆驼蓬总生物碱(Total Alkaloids of peganum harmala L.)的盐酸盐注射液按5mg/kg体重肌肉注射;总生物碱纯粉按2～3mg/kg体重溶于定量70％乙醇中静脉注射,对人工感染牛双芽巴贝氏焦虫的8头1～5岁土种黄牛进行治疗试验。结果:对照组4头... 详细信息

骆驼蓬总生物碱(Total Alkaloids of peganum harmala L.)的盐酸盐注射液按5mg/kg体重肌肉注射;总生物碱纯粉按2～3mg/kg体重溶于定量70％乙醇中静脉注射,对人工感染牛双芽巴贝氏焦虫的8头1～5岁土种黄牛进行治疗试验。结果:对照组4头牛存活3头,死亡1头,其配对分组时平均染虫率为0.23％,病期平均最高杂虫率为8.07％,血液中虫体间歇、反复出现,在20天的观察期内持续存在;试验组4头牛经用骆驼蓬总碱治疗全部治愈,其配对分组时(药前)平均染虫率为0.36％,经肌肉注射药物2次或静脉给药1次后,血液中虫体消失,连续10天涂血片镜检,均未发现虫体。试验表明该总生物碱杀灭牛双芽巴贝氏焦虫的效果显著。

关键词：骆驼蓬总碱牛人工感染双芽巴贝氏焦虫病疗效试验症状病理变化

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