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马血清致敏条件下鸡乙醇性股骨头坏死模型的制作

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中华实验外科杂志 2009年第8期26卷 1077-1079,I0002,F0003页

作者：王义生窦浚峰铁伟宾郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052

目的制作马血清致敏条件下鸡乙醇性股骨头坏死的动物模型。方法取64只健康成年雄性三黄鸡随机分为4组。A组：马血清＋乙醇组；B组：单纯乙醇组；C组：单纯马血清组；D组：空白对照组。于灌胃第4、8周末分批处死，取股骨头制作苏木素-伊... 详细信息

目的制作马血清致敏条件下鸡乙醇性股骨头坏死的动物模型。方法取64只健康成年雄性三黄鸡随机分为4组。A组：马血清＋乙醇组；B组：单纯乙醇组；C组：单纯马血清组；D组：空白对照组。于灌胃第4、8周末分批处死，取股骨头制作苏木素-伊红（HE）和冰冻切片，光镜观察组织学变化并测算骨小梁面积分数、空骨陷窝计数、最大脂肪细胞平均直径、股骨头坏死发生率等指标。于灌胃第8周末取股骨头制作标本在扫描电镜下观察组织学变化。结果灌胃第4周末，各组股骨头组织未见明显病理改变。灌胃第8周末，A组股骨头软骨下骨髓内造血组织明显减少，脂肪细胞增殖肥大，骨小梁明显变细、稀疏，多处断裂，骨小梁面积分数降低，空骨陷窝显著增多，与其他3组比较，P〈0．01。A、B、C、D组股骨头坏死发生率分别为87．5％、25．0％、25．0％、0％。扫描电镜下观察可见A组股骨头表面凹陷，伴有多处裂痕，骨小梁失去原有形态，变细、稀疏，多处断裂，空骨陷窝增多，而B、C、D组未见到这些变化。结论鸡是制作乙醇性股骨头坏死动物模型的理想动物；马血清致敏条件下，可以缩短造模周期，提高造模成功率。

关键词：乙醇性股骨头坏死马血清致敏模型动物

不同剂量糖皮质激素联合马血清构建激素诱导型股骨头缺血性坏死兔模型

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中国组织工程研究 2017年第8期21卷 1229-1235页

作者：曹良权杜斌孙光权刘锌陈国庆顾磊刘兵南京中医药大学江苏省南京市210029 江苏省中医院江苏省南京市210029 淮安市中医院江苏省淮安市223001 宣城市中医院安徽省宣城市242000

背景:糖皮质激素的应用已成为中国股骨头坏死的主要因素,建立一个可信的、有效的、低死亡率的激素性股骨头坏死模型,可为更好的探索股骨头坏死的治疗创造条件。目的:通过联合静脉注射不同剂量的马血清和不同剂量的糖皮质激素以建立激素... 详细信息

背景:糖皮质激素的应用已成为中国股骨头坏死的主要因素,建立一个可信的、有效的、低死亡率的激素性股骨头坏死模型,可为更好的探索股骨头坏死的治疗创造条件。目的:通过联合静脉注射不同剂量的马血清和不同剂量的糖皮质激素以建立激素诱导型早期股骨头坏死兔模型。(10方法:将30只健康雄性新西兰白兔随机分为6组,其中4组分别耳缘静脉注射低、高剂量马血清,20 mg/kg)并联合肌肉注射低、高剂量地塞米松(5,10 mg/kg)进行造模,地塞米松组仅用高剂量地塞米松(10 mg/kg)造模,对照组静脉注射不同剂量生理盐水(20,2 mL/kg)。结果与讨论:(1)MRI骨坏死异常信号:高剂量地塞米松联合高剂量马血清组白兔的股骨头在干预后第2周于MRI上首先出现骨坏死异常信号,而除对照组外的其他4组则在干预后第4周出现骨坏死异常信号。干预后第6周,高剂量地塞米松联合高剂量马血清组中80%的兔表现出骨坏死信号,显著高于低剂量地塞米松联合高剂量马血清组(50%)、高剂量地塞米松联合低剂量马血清组(40%)、低剂量地塞米松联合高剂量马血清组(25%)、地塞米松组(20%)(P马血清组血清三酰甘油和总胆固醇水平在进行第1次地塞米松注射后的第3,7,14,30天明显高于对照组(P马血清组空骨陷窝程度有轻度增加(P马血清组能够成功建立早期激素性股骨头坏死模型,且更安全有效。

关键词：组织工程地塞米松模型,动物组织构建骨组织工程激素性股骨头坏死兔动物模型马血清糖皮质激素血脂谱核磁共振组织学泮托拉唑青霉素

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马血清致敏后乙醇灌胃对家兔股骨头的影响

郑州大学学报(医学版) 2009年第2期44卷 279-282页

作者：王义生铁伟宾窦浚峰郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室

目的:观察马血清致敏条件下乙醇灌胃对家兔股骨头的影响。方法:雄性家兔48只,随机分为4组,每组12只。A组:静脉注射马血清10mL/kg,间隔3周第2次注射同量马血清,2周后灌胃法给予生理盐水10mL/(kg·d)。B组:不给予马血清,与A组时间同步灌... 详细信息

目的:观察马血清致敏条件下乙醇灌胃对家兔股骨头的影响。方法:雄性家兔48只,随机分为4组,每组12只。A组:静脉注射马血清10mL/kg,间隔3周第2次注射同量马血清,2周后灌胃法给予生理盐水10mL/(kg·d)。B组:不给予马血清,与A组时间同步灌胃法给予烈性白酒(体积分数为46%的乙醇)10mL/(kg·d)。C组:静脉注射马血清10mL/kg,间隔3周第2次注射同量马血清,2周后灌胃法给予烈性白酒(体积分数为46%的乙醇)10mL/(kg·d)。D组:与A组时间同步灌胃法仅给予生理盐水10mL/(kg·d)。给予乙醇后于第4、8周分批处死各组动物,观察其股骨头病理学变化。结果:灌胃8周后,C组病理改变主要集中在家兔股骨头软骨下区,髓内造血组织减少,脂肪物质增多,脂肪细胞增殖肥大,骨小梁变细、稀疏、断裂,骨小梁面积分数降低。C组空骨陷窝4周时增多,与其他3组相比差异有统计学意义(P马血清致敏条件下给予乙醇可短期内导致家兔乙醇性股骨头坏死。

关键词：马血清乙醇股骨头坏死动物模型短期兔

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马血清在脂肪干细胞成肌诱导中的作用

中国组织工程研究与临床康复 2011年第14期15卷 2525-2529页

作者：刘杰傅强上海市第六人民医院上海市200233

背景:利用 5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌实验对培养技术以及细胞活性要求较高,诱导成肌时间较长。倘若某种添加剂可缩短诱导时间,将具有重要意义。目的:评估马血清在 5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌细胞实验中的作用。方法:将第1代长满1... 详细信息

背景:利用 5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌实验对培养技术以及细胞活性要求较高,诱导成肌时间较长。倘若某种添加剂可缩短诱导时间,将具有重要意义。目的:评估马血清在 5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌细胞实验中的作用。方法:将第1代长满100 mm培养皿的脂肪干细胞传代至3个6孔板,实验组培养基中加入体积分数为5%马血清+10 μmol/L 5-氮杂胞苷;对照组培养基中单纯添加 10 μmol/L 的 5-氮杂胞苷;空白组为单纯低糖 DMEM 培养基,余培养、传代及鉴定所需的条件相同。每日光镜观察记录形态,在培养的第 7,14,28,35 天行免疫荧光和流式细胞仪检测肌蛋白表达差异。结果与结论:免疫荧光检测成肌特异性胞质蛋白表达以及流式细胞检测相应蛋白表达率提示,加入马血清后的实验组脂肪干细胞的成肌速度和诱导成肌所需时间明显比单纯加入 5-氮杂胞苷的对照组更有优势。实验初步表明马血清在促进脂肪干细胞诱导成肌方面起着缩短诱导成肌所需时间的作用。

关键词：马血清脂肪干细胞成肌诱导 5-氮杂胞苷成肌特异性胞质蛋白

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马血清致敏后乙醇灌胃对鸡股骨头的影响

郑州大学学报(医学版) 2009年第2期44卷 282-285页

作者：王义生窦浚峰铁伟宾郑州大学第一附属医院骨科河南省高等临床医学重点学科开放实验室

目的:观察马血清致敏后乙醇灌胃对鸡股骨头的影响。方法:取64只9月龄健康雄性三黄鸡随机分为4组,每组16只。A组:马血清+乙醇组;B组:单纯乙醇组;C组:单纯马血清组;D组:空白对照组。于灌胃第4、8周末分批处死,取肝脏及股骨头制作病理切片... 详细信息

目的:观察马血清致敏后乙醇灌胃对鸡股骨头的影响。方法:取64只9月龄健康雄性三黄鸡随机分为4组,每组16只。A组:马血清+乙醇组;B组:单纯乙醇组;C组:单纯马血清组;D组:空白对照组。于灌胃第4、8周末分批处死,取肝脏及股骨头制作病理切片,观察组织学变化。结果:灌胃8周时,A组肝细胞内出现脂肪空泡,小叶中央区受累明显。4组大体形态无明显变化。光镜下,A组病理改变主要集中在股骨头软骨下区,髓内造血组织减少。4周时,脂肪细胞增多,骨小梁面积分数稍降低,与其他3组相比差异无统计学意义(P>0.05);空骨陷窝计数增多,与其他3组相比差异有统计学意义(P马血清致敏条件下可缩短实验周期。

关键词：鸡乙醇股骨头坏死动物模型马血清

马血清致敏条件下鸡酒精性股骨头坏死动物模型的制作与观察

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马血清致敏条件下鸡酒精性股骨头坏死动物模型的制作与观察

作者：窦浚峰郑州大学

学位级别：硕士

背景和目的:长期大量饮酒可以引起股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH),已经证实酒精中毒是ONFH的一个确定病因。制作理想的动物模型,可以为深入研究酒精性ONFH的发病机制和防治措施提供良好的载体。1998年王义生等首... 详细信息

背景和目的:长期大量饮酒可以引起股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH),已经证实酒精中毒是ONFH的一个确定病因。制作理想的动物模型,可以为深入研究酒精性ONFH的发病机制和防治措施提供良好的载体。1998年王义生等首次报道采用灌胃法成功制成兔酒精性ONFH的动物模型,此后多位学者进行了相关的实验研究,证明灌胃法模拟人类饮酒,制成的动物模型组织学变化符合人类ONFH早期病理特征,是酒精性ONFH动物模型较好的造模方法。但是兔、鼠等四肢动物的负重特点与人类不同,且造模周期较长。为了解决这些问题,我们在马血清致敏条件下,采用灌胃法成功制作出鸡酒精性ONFH动物模型,具有类似人类双下肢负重、造模周期短、成功率高等特点。材料和方法:取64只健康成年雄性三黄鸡(河南省实验动物中心提供)随机分为4组,每组16只。A组(马血清+酒精组):给予马血清(美国GIBICO公司)10ml/kg静脉注射2次,间隔2周,从第2次给予马血清2周后次日开始采用灌胃法给予烈性白酒(含乙醇46%)10ml/kg·d;B组(单纯酒精组):与A组同步同法给予等量白酒;C组(单纯马血清组):与A组同步同法给予等量马血清;D组(空白对照组):不给予马血清或酒精。C、D组与A组同步同法给予生理盐水(N·S)10ml/kg·d灌胃。于灌胃第4、8周末分批处死,取股骨头制作常规和冰冻切片,分别行HE和苏丹Ⅲ染色,光镜观察组织学变化并测算最大脂肪细胞平均直径、骨小梁面积分数、空骨陷窝计数、股骨头坏死发生率等指标。于灌胃第8周末,各组分别取2只动物股骨头制作标本,扫描电镜观察组织学变化。结果:1.一般状况:实验动物无1例死亡。注射马血清后,动物一般状况无明显变化。灌洒4周,A、B组动物食欲差,体重下降,毛发光泽差,精神状态稍差,灌酒8周,A、B组动物食欲差,体重明显下降,毛发无光泽,精神状态差,C、D组一般状况好,与实验前无明显变化。2.肝脏:灌胃第4周术,各组肝脏大体和光镜下均无明显变化。灌胃第8周末,A组肝脏增大,质脆,呈淡黄色,切面有滑腻感,光镜检查,肝细胞内出现脂肪空泡,以小叶中央区受累最为明显,脂肪染色可见小叶中央区遍布桔红色脂肪颗粒;B组动物肝脏有类似改变,但变化程度较之A组轻微;C、D组动物肝脏为暗红色,质软,光镜检查无变化。3.股骨头:大体观察:灌胃第4周末,各组动物股骨头大体形态、质地无明显变化。灌胃第8周末,各组动物股骨头大体形态无明显变化,A组股骨头较其它各组松脆,易于凿切。光镜检查:灌胃第4周末:各组股骨头组织未见明显病理改变,仅A组中少部分动物出现软骨下骨髓内造血组织减少。灌胃第8周末:病理改变明显,主要集中在股骨头软骨下区。A组HE染色可见骨髓内造血组织明显减少,骨小梁明显变细、稀疏,多处断裂,结构紊乱,空骨陷窝明显增多,脂肪染色见软骨下骨的骨细胞内充满桔红色的脂质,脂肪细胞增殖肥大,脂肪堆积明显。B组中有2只动物见到股骨头软骨下骨髓内造血组织减少,脂肪组织增多,其中1只可见少部分骨小梁骨小梁变细、稀疏、断裂,空骨陷窝增多。C组中有2只动物股骨头内可见骨髓内造血组织减少,脂肪组织增多。D组未见到这些异常变化。A组骨小梁面积分数(32.2±2.58)%减少、空骨陷窝计数(21.60±2.12)%增加、最大脂肪细胞平均直径(47.22±2.79)μm增大,与其它3组比较,差异有统计学意义(P＜0.01)。4.骨坏死发生率:灌胃第4周末,各组骨坏死率均为0。灌胃第8周末,A组有7只发生骨坏死(7/8,其中双侧的5只,一侧的2只,1级、2级比例为3/9),占87.5%;B组有2只发生骨坏死(2/8,均为单侧,1、2级各一),占25%;C组有2只发生骨坏死(2/8,均为单侧1级),占25%;D组无发生骨坏死者。A组与其它3组比较,差异有统计学意义(P＜0.01)。5.扫描电镜检查:灌胃第8周末,A组股骨头表面可见凹陷,伴有多处裂痕,剖面可见骨小梁失去原有形态,变细、稀疏,多处断裂,空骨陷窝增多,而B、C、D组未见到这些变化。小结:1.马血清致敏条件下,采用灌胃法成功制作出鸡酒精性ONFH动物模型,具有造模周期短、成功率高等特点。2.鸡可以作为酒精性ONFH的研究对象,具有类似人类双下肢负重的特点。

关键词：马血清致敏动物模型鸡酒精性骨坏死

用去HGH混合正常马血清制备HGH RIA质控样品的初步探讨

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华西医科大学学报 1987年第4期18卷 302-305页

作者：李幼平邓尚平赵桂芝李双庆华西医科大学临床免疫中心华西医科大学临床免疫中心华西医科大学临床免疫中心研究生

作者采用亲和层析法处理混合正常马血清,制得去生长激素的血清,并用以配制人生长激素放射免疫测定的质控样品。经国内22个单位临床试用半年,结果证明达到质控要求。对比试验表明:单一正常人血清经同样处理,人生长激素(HGH)不能除尽;混... 详细信息

作者采用亲和层析法处理混合正常马血清,制得去生长激素的血清,并用以配制人生长激素放射免疫测定的质控样品。经国内22个单位临床试用半年,结果证明达到质控要求。对比试验表明:单一正常人血清经同样处理,人生长激素(HGH)不能除尽;混合人血清者反而略升高,其原因尚待探讨。

关键词：马血清去人生长激素血清放射免疫质控样品

LC-MS/MS检测马血清中保泰松含量的方法研究

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LC-MS/MS检测马血清中保泰松含量的方法研究

作者：范佺荣内蒙古农业大学

学位级别：硕士

保泰松(phenylbutazone,PBZ)是非甾体抗炎药(Non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)的代表药物之一,具有较好的镇痛和抗炎作用。在兽医临床具有广泛的应用价值,常用于治疗运动马的跛行、风湿性关节炎及运动造成的肌肉损伤等症... 详细信息

保泰松(phenylbutazone,PBZ)是非甾体抗炎药(Non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)的代表药物之一,具有较好的镇痛和抗炎作用。在兽医临床具有广泛的应用价值,常用于治疗运动马的跛行、风湿性关节炎及运动造成的肌肉损伤等症状。PBZ在兽医临床使用过程中主要的不良反应是通过对COX-1的非选择性抑制作用进而引发胃肠系统的不适,同时PBZ也是国际马联认定的控制使用药物。为此,本研究开展了液相色谱串联质谱(liquid chromagraphy-mass spectrometry,LC-MS/MS)法测定马匹血清中保泰松含量方法的研究,为进一步完善马匹血清中保泰松含量的检测技术提供一定的理论依据。本研究选择d-保泰松为内标,以液相萃取法为样本前处理方法,应用LC-MS/MS法检测马血清中保泰松的含量,确定了样本前处理和色谱方法的条件,对该检测方法进行了方法学考察。样本前处理方法研究结果显示,样本用2倍体积的乙酸乙酯萃取,最佳萃取时间为30 min,最佳萃取次数为2次。色谱条件研究结果显示,ZORBAX Eclipse Plus C182.1×100 mm作色谱柱,甲醇-1%乙酸水溶液作流动相为最佳色谱条件。方法学考察结果显示,保泰松在25.00 ng/m L～2500.00 ng/m L范围内线性关系良好,R大于0.999。该方法检测限为10.00 ng/m L,定量限为25.00 ng/m L,提取回收率大于90%,绝对回收率大于60%,批内精密度和批间精密度均小于15%。由此可知,本研究所建立的检测方法准确度高、特异性强、操作简便适用于马匹血清中保泰松含量的检测。

关键词：保泰松马血清液液萃取 LC-MS/MS 方法建立

蔬菜中有机磷农药残留快速检测技术的研究——马血清的乙酰胆碱酯酶酶促反应条件及保存条件的确定

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食品研究与开发 2005年第2期26卷 130-132页

作者：宋茹纪淑娟浙江海洋学院食品科学系 316004 沈阳农业大学食品学院 110161

乙酰胆碱酯酶与底物氯化乙酰胆碱进行反应的产物之一是醋酸,反应进行程度可用醋酸生成量多少来衡量。本试验用ΔpH大小来衡量反应进行的快慢程度,确定马血清中乙酰胆碱酯酶适宜的酶促反应条件。在90d保存期内,温度为-20～-25℃,防腐剂(... 详细信息

乙酰胆碱酯酶与底物氯化乙酰胆碱进行反应的产物之一是醋酸,反应进行程度可用醋酸生成量多少来衡量。本试验用ΔpH大小来衡量反应进行的快慢程度,确定马血清中乙酰胆碱酯酶适宜的酶促反应条件。在90d保存期内,温度为-20～-25℃,防腐剂(硫柳泵)浓度为0.1%酶活性保存最好。

关键词：乙酰胆碱酯酶酶促反应条件有机磷农药残留快速检测技术马血清保存条件蔬菜生成量保存期防腐剂醋酸衡量